... http://www.lrc-tnu.edu.vn/ 27 1.3 VECTOR BIỂUHIỆN 1.3.1 Khái niệm Vector biểugen vector táchdòng mang promoter mạnh, cho phép biểuđồng thời gen thị gentáchdòng tạo nên protein lai Một vector biểugen gồm thành phần ... vector táchdònggen RoTAT 1.2 Tạo chủng tái tổ hợp chứa gen RoTAT 1.2 Xác định trình tự gen RoTAT 1.2 Táchdònggen RoTAT 1.2 Tạo vector tái tổ hợp biểu vector táchdònggen RoTAT 1.2 Tạo chủng biểu ... .38 2.4.6 Tạo dòng gene mãhóa kháng nguyên RoTAT 1.2 39 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 47 3.1 Táchdòng xác định trình tự genmãhóa kháng nguyên RoTAT 1.2 47 3.2 Biểugenmãhóa kháng...
... Táchdònggen Lox Táchdònggen trình tách đoạn gen cần quan tâm khỏi DNA nhiễm sắc thể sinh vật nhân đoạn gen lên thành dòng với số lượng lớn Các vi sinh vật dùng làm chủng chủ để táchdònggen ... VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGHUYÊN SINH VẬT -oOo LẠI THỊ HỒNG NHUNG TÁCHDÒNGVÀBIỂUHIỆNGENMÃHÓA CHO L-LACTATE OXIDASE CỦA ... nhiều đến trình biểugen Vì lựa chọn glucose làm yếu tố điều hòa trình tổng hợp biểugen Hơn nữa, E coli B subtilis có yếu tố điều khiển trình biểugengen Lox tái tổ hợp hoàn toàn biểu E coli Do...
... di, dựa vào kích thước gene cần táchdòng để lựa chọn đoạn ADN chứa gene cần táchdòng - Chọn vectơ táchdòng Dựa vào kích thước gene cần táchdòng mục đích táchdòng để chọn vectơ táchdòng plasmid, ... polypeptid… - Táchdòng gene từ ADN: Táchdòng từ ADN gồm bước sau: Bước 1: Chuẩn bị gene cần táchdòng (gen cần thiết, gene đích - target gene) chọn vectơ táchdòng 22 - Chuẩn bị gene cần tách dòng: ... phương pháp táchdòng gene chủ yếu sử dụng nhiều công nghệ sinh học phân tử táchdòng thực nghiệm táchdòng ảo * Táchdòng in vitro Táchdòng in vitro hay táchdòng thực nghiệm táchdòng gene thực...
... hóa chất vào gỗ, tăng hiệu khử lignin Trong công nghiệp tái chế glucanase sử dụng để tẩy vết mực giấy 1.2.BIỂU HIỆNGEN ENDOGLUCANASE TRONG E COLI 1.2.1Hệ biểu hiệnE coli Hiện có hệ biểu thường ... – S) khó biểu tế bào E coli ,biểu loại protein không biến đổi cấu trúc phân tử sau dịch mã số chủng E coli gây bệnh tạo độc tố biểu gen2 6 1.2.2 Chủng biểu E.coli BL21 Trong trình biểu hiện, protein ... thực phiên mã tạo dòng dịch mã mARN chúng hệ biểu hiện, từ tổng hợp protein mong muốn từ gen ngoại lai Vector ADN plasmid, phage cosmid Đây phân tử có khả phân đôi , phiên mã, dịch mã độc lập...
... 126 27 1.3 VECTOR BIỂUHIỆN 1.3.1 Khái niệm Vector biểugen vector táchdòng mang promoter mạnh, cho phép biểuđồng thời gen thị gentáchdòng tạo nên protein lai Một vector biểugen gồm thành phần ... .38 2.4.6 Tạo dòng gene mãhóa kháng nguyên RoTAT 1.2 39 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 47 3.1 Táchdòng xác định trình tự genmãhóa kháng nguyên RoTAT 1.2 47 3.2 Biểugenmãhóa kháng ... kiện táchdònggenmãhóa kháng nguyên bề mặt Trypanosoma evansi - Tách ADN từ tiên mao trùng Trypanosoma evansi - Thiết kế vector táchdònggenmãhóa kháng nguyên bề mặt Trypanosoma evansi - Tách...
... chuyển gen Ngoài E coli nấm men sử dụng nhiều để biểu gene 1.5.1 Hệ thống vật chủ sử dụng táchdòngbiểu gene mãhóaxylanase từ nấm mốc 1.5.1.1 Táchdòng E coli E coli sử dụng rộng rãi táchdòng gene ... đến 5,3 Đây công bố việc táchdònggenxylanase từ A usamii [47] 1.5.1.2 Táchdòng nấm men - Táchdòng Saccharomyces cerevisiae Một số gene xylanase từ nấm mốc táchdòngbiểu Saccharomyces cerevisiae ... niger B7 Tách chiết DNA tổng số PCR khuếch đại gene mãhóaxylanase Giải trình tự PCR khuếch đại cds gene xylanase Gắn cds xylanase vào pSET A Táchdòng E coli TOP10 Tách thu vector pSET A-xylanase...
... vị trí 218 so với trình tự AF369029 Biểugenmãhóa protein VP19 E coli HB101 Biến nạp plasmid pZ-VP19 chiết tách từ E coli DH5 vào E coli HB101 Sự biểugen VP19 plasmid kiểm soát promoter lacUV5 ... để dùng cho phản ứng nối nhằm tạo plasmid pZ-VP19 Tạo dònggen VP19 vào vector biểu pEZZ 18 Sản phẩm nối gen VP19 plasmid pEZZ 18 biến nạp vào E coli DH5 nhằm nhân với số lượng lớn đồng thời ... protein VP19 Đoạn gen VP19 plasmid pZ-VP19 giải trình tự, kiểm tra đồng khuôn với genmãhoá protein A có sẵn plasmid pEZZ18 Trình tự gen VP19 WSSV mẫu tôm bệnh Việt Nam tạo dòng giải trình tự...
... đại gen chi Sản phẩm PCR đƣợc tinh sử dụng thí nghiệm tách dòng, giải giải trình gen chi 3.2.3 Táchdònggen chi vector pJET1.2/blunt Sản phẩm PCR khuếch đại gen chi tinh đƣợc gắn vào vector tách ... 3.2 TÁCHDÒNGGEN chi MÃHÓA CHITINASE CỦA CHỦNG B licheniformis KNUC213 40 3.2.1 Tách DNA tổng số 40 3.2.2 Khuếch đại gen chi kỹ thuật PCR 40 3.2.3 Táchdònggen chi ... có hoạt tính chitinase nhằm khai thác nguồn gen - Táchdòng phân tích trình tự gen chi mãhóa chitinase chủng B licheniformis KNUC213 - Biểugen chi mãhóa chitinase chủng B licheniformis KNUC213...
... 3.2 TÁCHDÒNGGEN chi MÃHÓA CHITINASE CỦA CHỦNG B licheniformis KNUC213 40 3.2.1 Tách DNA tổng số 40 3.2.2 Khuếch đại gen chi kỹ thuật PCR 40 3.2.3 Táchdònggen chi ... có hoạt tính chitinase nhằm khai thác nguồn gen - Táchdòng phân tích trình tự gen chi mãhóa chitinase chủng B licheniformis KNUC213 - Biểugen chi mãhóa chitinase chủng B licheniformis KNUC213 ... nhờ trình cảm ứng Xuất phát từ tiềm ứng dụng chitinase ƣu điểm hệ thống biểu P pastoris, thực đề tài: Táchdòngbiểu gene mãhóa chitinase B licheniformis KNUC213 Pichia pastoris‖ nhằm nâng cao...
... 1.4.2 BiểugenBiểugen trình phiên mã dịch mãgen tạo sản phẩm protein Muốn gen tạo dòng có biểu tổng hợp protein cần cấu tạo vector có đủ yếu tố phiên mã dịch mã Các vector gọi vector biểu Nếu gen ... vector biểu tái tổ hợp sinh tổng hợp protein tái tổ hợp sản phẩm gen mục tiêu Protein mãhóagen mục tiêu chèn vào vector biểu hiện, cảm ứng biểu chất cảm ứng biểu IPTG chọn làm chất cảm ứng biểugen ... vector táchdòng - Vector táchdòng phải thích hợp với tế bào vật chủ có khả tái tế bòa vật chủ không gây ảnh hưởng đến tế bào vật chủ - Gen thị vector táchdòng dễ nhận biết tốt - Vector tách dòng...
... DH5α hãng Invitrogen sử dụng để chọn dòng nhân dònggen Chủng E coli BL21(DE3) hãng Bio-Rad sử dụng để biểugenmãhóa yếu tố đông máu IX người Các vector Vector tách dòng: pJET1.2/blunt ... lập genmãhóa yếu tố đông máu IX từ mô gan sinh thiết người b Thiết kế vector biểu mang cDNA mãhóa FIXnoSP biểu tế bào vi khuẩn E coli BL21(DE3) Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Phân lập genmã ... có độ dài tương ứng khoảng 1,4 kb mãhóa 461 amino acid táchdòng giải trình tự Đã thiết kế vector biểu pET32a/FIXnoSP mang đoạn cDNA mãhóa FIXnoSP biểugenmãhóa cho yếu tố đông máu IX E coli...
... chủ hữu hiệu kĩ thuật táchdòng kỹ thuật biểugen [ 7], [10] Chủng biểu E coli BL21(DE3) cải biến từ E coli BL21, chúng có genmãhóa cho T7 RNA polymerase (1 gen T7), gen điều khiển promoter ... Invitrogen sử dụng để chọn dòng nhân dònggen Chủng E coli BL21(DE3) [F-, ompT, hsdS (rB- mB), gal] hãng Bio-Rad sử dụng để biểugenmãhóa yếu tố đông máu IX người Các vector Vector tách dòng: ... (GeneAmp PCR System 9700); Máy xác định trình tự ABI PRISM 3100-Avant Genetic Analyzer; Box nuôi cấy vi khuẩn… Bảng Các vector táchdòngbiểu A Vector táchdòng pJET1.2/blunt hãng B Vector biểu...
... sử dụng cho mục đích táchdòngbiểu protein SEB, vector táchdòng GS45350 mang đoạn genmãhóa cho protein SEB gây đột biến vector pET21a+ (Novagen) sử dụng làm vector biểu protein tái tổ hợp Phòng ... pET21a+ - Chuẩn bị vector biểu pET21a+ Muốn gen đích biểu thành protein cần thiết kế gen vào vector mang cấu trúc cần thiết cho trình phiên mã dịch mã Các vector gọi vector biểu Các trình tự quan ... giải trình tự gen dài 2809422 bp chủng S aureus COL Kết giải trình tự ghi nhận Genbank với mã số: CP000046.1 cho hệ gen nhân CP000045 cho hệ gen plasmid Theo đó, trình tự gen tụ cầu vàng có chứa...
... Hơn nữa, theo đánh giá nhà kinh tế thị trường HCV tăng từ 2.2 USD năm 2005 lên 4.4 USD vào năm 2010 8.8 USD vào năm 2015 Từ thấy nhu cầu Interferon, vốn xem loại thuốc sử dụng rộng rãi điều trị ... so với giá nhập dựa quyền loại thuốc hết hạn hết hạn, Trung tâm bước đầu nghiên cứu việc tạo dòngbiểu Interferon alpha 2b người hệ thống nấm men Pichia pastoris ... ứng dụng bật IFN dùng IFN α 2b điều trị viêm gan siêu vi C viêm gan siêu vi B Hiện nay, 3% dân số giới bị nhiễm virus gây viêm gan siêu vi C tỷ người bị nhiễm virus gây viêm...
... tạo giống khởi động tái tổ hợp chứa gen miễn dịch gen tạo bacteriocin Các gen nằm đoạn ADN cụ thể, cài vào vector nhân dòng chuyển vào giống khởi động Chúng đưa vào giống khởi động sữa sản xuất ... chuẩn tạo vector táchdòng thực phẩm Các gen kháng kháng sinh (kanamycin, erythromycin, tetracyclin,…) sử dụng phổ biến nh- dấu chuẩn chọn lọc vector táchdòng Với mục đích khoa học, gen kháng kháng ... dụng làm tế bào biểu Plasmid - Plasmid pJET1 hãng Fermentas cung cấp sử dụng làm vector táchdòng - Hệ vector pTWIN1, pTWIN2 (hãng BioLabs) sử dụng làm vector biểu - Trình tự genmãhóa cho enterocin...
... 4.1 THU NHẬN GENMÃHÓA CELLULASE BẰNG PHƯƠNG PHÁP METAGENOMICS 67 4.1.1 Thu nhận metagenome DNA 67 4.1.2 Nhân genmãhóa cellulase phản ứng PCR dựa vào cặp mồi thoái hóa thiết ... thủy phân CMC 79 4.2.2 Thu nhận đoạn genmãhóa cellulase từ xạ khuẩn có hoạt tính thủy phân CMC phản ứng PCR 80 4.3 TẠO DÒNGVÀBIỂUHIỆN CÁC GENMÃHÓA CELLULASE TỪ VI KHUẨN CLOSTRIDIUM ... nhận metagenome DNA từ đất 42 3.2.2 Nhân đoạn genmãhóa cellulase từ metagenome DNA phản ứng PCR 43 3.2.3 Xây dựng thư viện metagenome DNA 50 3.2.4 Sàng lọc dòng có hoạt...