... 19 gen mã hoá cho yếu tố VIII, bệnh Hemophilia A kỹthuậtPCR - RFLP với Vent ADN polymerase 16/29 (55%) số bệnh nhân Hemophilia A nghiên cứu có mang đột biến intron 18 gen mã hoá cho yếu tố VIII ... Kogan cộng Tiếp theo để sử dụng Vent ADN polymerase kỹthuậtPCR - RFLP phát đột biến bệnh Hemophilia A, tiến hành tối ưu hoá điều kiện choPCR với enzyme Sử dụng số liệu hãng New England Biolabs ... Biolabs IV BÀN LUẬN PCR - RFLP với intron 18 gen yếu tố đông máu số VIII Việc khuyếch đại intron 18 kỹthuậtPCR với Taq ADN polymerase cặp mồi 18F 18R tiến hành theo điều kiện PCR Kogan cộng (30...
... phẩm metformin nghiên cứu Các thuốc sử dụng nghiên cứu chế phẩm mới, thuốc sử dụng điều trị chobệnh nhân Các lô thuốc hai chế phẩm đa vào nghiên cứu có phiếu kiểm nghiệm cho thấy hai chế phẩm đạt ... trình độ kỹthuật bào chế cha đồng sở sản xuất dợc phẩm nớc, việc thử TĐSH trớc cho phép lu hành chế phẩm metformin cần thiết Qui trình nghiên cứu hoàn toàn phù hợp để áp dụng nghiên cứu TĐSH cho ... vào nồng độ glucose huyết trớc điều trị bệnh nhân [27] Metformin có tác dụng lên chuyển hoá lipid ngời bệnh ĐTĐ typ Thuốc làm tăng HDL, giảm triglycerid LDL-cholesterol Liều khởi đầu metformin viên...
... C Malaysia [12] sử dụng kỹthuậtPCR lồng (nested - PCR) thay PCR đơn Độ nhạy PCR lồng cao sản phẩm PCR tiếp tục khuếch đại lại lần nữa, kết đạt mức cao 96,5% 100% Bảngcho thấy tổng số 32 mẫu ... giới [1], [4] Hơn bệnh có đặc điểm biểu lâm sàng thường “mượn”, dễ chẩnđoán nhầm, 95% bệnh nhân phát giai đoạn III IV [2],[4] Nhiều nghiên cứu UTVMH cho thấy bệnh phối hợp yếu tố di truyền ... trình Choon Kook Sam 1995, có bổ sung + Hoá chất Amersham Pharmacia Biotech 51 - Tiến hành PCRcho DNA thu sau chiết tách PCR tiến hành theo nguyên lý KaryMullis (1986) với cặp mồi đặc hiệu cho...
... polymerase để sử dụng kỹthuật PCR- RFLP phát đột biến intron 18 19 gen mã hoá cho yếu tố đông máu số VIII Kỹthuật ứng dụng để phát phụ nữ mang gen bệnh chuẩn đoán sớm trước sinh bệnh Haemophilia, ... gen mã hoá cho yếu tố VIII, bệnh Haemophilia A kỹthuật PCR- RFLP với Deep Vent ADN polymerase • 8/19 (42%) số bệnh nhân Haemophilia A nghiên cứu có mang đột biến intron 18 gen mã hoá cho yếu tố ... sắc thể vị trí Xq28 Gen mã hoá cho yếu tố VIII lớn (khoảng 180 kb) bao gồm 26 exon (1) KỹthuậtPCR dùng Taq ADN polymerase, sau phát điểm đột biến enzyme giới hạn (PCR- RFLP) nghiên cứu trước sử...
... (interphase) chobệnh nhân, tiêu NST kỳchobệnh nhân khác 2.2.2 Phơng pháp nghiên cứu: 2.2.2.1 Phân tích xác định bất thờng gen BCR/ABL theo kỹthuậtPCR (Kỹ thuật RT PCR Nested PCR ) Thực cho mẫu ... khai đợc kỹthuậtPCR FISH Viện Huyết học Truyền máu Trung ơng - Đa kỹthuật đại vào áp dụng đào tạo đợc đội ngũ cán kỹthuật thực đợc qui trình kỹthuật xét nghiệm PCR, FISH làm sở cho việc ... loại bệnh có liên quan đến hoạt động gen - protein Cáckỹthuật sinh học đặc biệt kỹthuật sinh học phân tử phát triển có đóng góp việc chẩnđoán nhiều bệnh phát nhiều tác nhân gây bệnh Những bệnh...
... nhiễm [40] 2.37 Phương pháp chẩnđoánsử dụng kỹthuậtPCR dựa kết nghiên cứu hệ gen nấm Aspergillus sinh độc to Aflatoxin đường sinh tổng hợp Aflatoxin Các nghiên cứu cho thấy, có 20 gen tham gia ... phương pháp dựa vào kỹthuậtPCRkỹthuật kháng thể đơn dòng nghiên cứu áp dụng rộng rãi có ưu điểm phát nhanh, nhậy, xác nấm Aspergillus sinh độc to Aflatoxin Ngoài ra, phương pháp PCR phát chủng ... thiểu tác hại nấm Phương pháp phát mầm bệnh nấm Aspergillus sinh độc tố Aflatoxin kỹthuậtPCR chưa nghiên cứu Việt nam Với mục tiêu xây dựng phương pháp chẩnđoán sớm, nhanh nhạy góp phần làm giảm...
... sinh học phân tử 15 1.5.2 Xác định nấm bệnhkỹthuậtPCR 16 1.5.3 Một số công trình định danh nấm Colletotrichum kỹthuậtPCR … ……………………………………………………… ………… 17 v CHƯƠNG PHƯƠNG ... mặt Bệnh công cuống cành non Các vết bệnh gần liền lại phá hủy diện tích lớn Trên trái: Ban đầu vết bệnh thường xuất từ khí khổng bất kỳ, đẫm nước tạo đốm xâm nhiễm giọt vi khuẩn Các vết bệnh ... rộng) vết bệnh trái, ghi nhận phát triển vết bệnh theo ngày vết bệnh phát triển giáp diện tích mặt trái (mặt chủng bệnh) Các tiêu đường kính vết bệnh kết hợp với quan sát đánh giá bề mặt vết bệnh...
... đoạn Itron kỹthuật multiplex PCRKỹthuật multiplex PCR: Thiết kế hai phản ứng multiplex PCR phát bệnh nhân bị đột biến: phản ứng có chứa cặp mồi đặc hiệu cho int1h1cộng với mồi đặc hiệu cho chuỗi ... đảo đoạn Itron 22 kỹthuật Inversion PCRKỹthuật Inversion PCR (I -PCR) gồm bước: (1) Cắt DNA enzyme BclI, (2) Nối T4 ligate, (3) Khuyếch đại phản ứng multiplex PCR Phương pháp I -PCR có ưu điểm ... lệ 5.55% số bệnh nhân phát đột biến 4.2.2 Các dạng đột biến gây bệnh hemophillia A Việt Nam Chúng xác định đột biến đảo đoạn intron 22 kỹthuật I -PCR, có 19 bệnh nhân thể nặng chẩnđoán đảo đoạn...
... nucleotid + Một số kỹthuậtPCR khác: Một số kỹthuật phát triển sở kỹthuậtPCR có ý nghĩa quan trọng cho định danh định typ vi sinh vật nested PCR (PCR lồng), revert transtriptase PCR (sao chép ... Dùng kỹthuậtPCRcho ribotyping: KỹthuậtPCR ribotyping ứng dụng cặp mồi đặc hiệu để nhân vùng gene ARN (thuộc ribosom hay ARN vận chuyển) Tuy nhiên, thực tế kỹthuật yêu cầu kinh nghiệm, kỹthuật ... tác dụng phát ARN thời điểm định mẫu KỹthuậtPCR chiều ứng dụng phương pháp giải trình tự ADN trực tiếp từ sản phẩm PCR. phẩm PCR + Sử dụng kỹthuậtPCRcho xác định typ vi sinh vật: Như trình...
... nucleotid + Một số kỹthuậtPCR khác: Một số kỹthuật phát triển sở kỹthuậtPCR có ý nghĩa quan trọng cho định danh định typ vi sinh vật nested PCR (PCR lồng), revert transtriptase PCR (sao chép ... Dùng kỹthuậtPCRcho ribotyping: KỹthuậtPCR ribotyping ứng dụng cặp mồi đặc hiệu để nhân vùng gene ARN (thuộc ribosom hay ARN vận chuyển) Tuy nhiên, thực tế kỹthuật yêu cầu kinh nghiệm, kỹthuật ... tác dụng phát ARN thời điểm định mẫu KỹthuậtPCR chiều ứng dụng phương pháp giải trình tự ADN trực tiếp từ sản phẩm PCR. phẩm PCR + Sử dụng kỹthuậtPCRcho xác định typ vi sinh vật: Như trình...
... thích hợp việc phân tích đa hình DNA kỹthuật RFLP ngƣời ta đƣa kỹthuậtPCR – RFLP PCR – RFLP kỹthuật dựa sở khuyếch đại có chọn lọc đoạn DNA kỹthuậtPCR trƣớc Sau tiến hành phân cắt đoạn ... .16 2.3.2.6 Các vấn đề thƣờng gặp PCR phƣơng pháp khắc phục .16 2.3.2.7 Ứng dụng PCR 18 2.4 Giới thiệu kỹthuật RFLP kỹthuậtPCR – RFLP .18 2.4.1 Kỹthuật RFLP ( restricton ... định tác nhân gây bệnh vi khuẩn vius có mẫu thực phẩm Dùng chứng nhận sản phẩm có nguồn gốc tự nhiên sản phẩm chuyển gen… 2.5 Giới thiệu kỹthuật RFLP kỹthuậtPCR – RFLP 2.5.1 Kỹthuật RFLP ( restriction...
... phản ứng PCR Tuy nhiên, thành phần nên hiệu chỉnh 1) sản phẩm PCR lớn 5kb; 2) có khả hoạt tính enzyme bị giảm sút thiếu sót khâu bảo quản; 3) tiến hành hiệu chỉnh nhiều cách sản phẩm PCR thấp ... lớn, phức tạp tốc độ thường 30s-1min/kb V Ứng dụng kỹthuậtPCR - Giúp tách nhanh xác gen đoạn AND riêng biệt - Chuẩn đoán nhanh, nhạy tất bệnh di truyền nhiễm trùng( ung thư, virut, vi khuẩn, ... thành phần PCR Tuy nhiên, phải kiểm tra độ tương thích enzyme DNA polymerase _ Tăng lượng DMSO PCR cần giảm nhiệt bắt mồi xuống Một số buffer có chứa sẵn loading buffer để điện di sau PCR Tuy nhiên,...
... biệt 21 - Real – Time PCR đánh giá tích lũy sản phẩm định lượng qPCR (quantitative PCR – PCR định lượng) Ngoài số kỹthuậtPCR khác nữa… VIII RT – PCR Như biết, PCRkỹthuật nhân bội ADN mạch ... tiến hành PCR nên vị trí đột biến phải biết trước Ưu trội PCR cần lượng nhỏ ADN để chẩnđoánCác tế bào máu, niêm mạc vật liệu thích hợp để chẩnđoán người lớn ; bào thai (gọi chẩnđoán in utero), ... Ultma ADN polymerase VII Ứng dụng kỹthuậtPCRPCR việc chẩnđoánbệnh di truyền Khả nhân bội trình tự ADN đặc hiệu giúp trở thành công cụ có giá trị việc chẩnđoán dị tật di truyền đột biến Vì...
... xong, cho 100µl TE 1X vào để làm hòa tan DNA Sau giữ lạnh -20oC để sử dụng cho phản ứng PCR Phương pháp khuyếch đại DNA (Kỹ thuật PCR) Sản phẩm DNA sau ly trích trộn chung với hỗn hợp gồm có PCR ... Kết luận - Sử dụng kỹthuậtPCRcho phép chẩnđoán xuất gen Invertase gen CryIA(b) với thành phần hóa chất chu trình nhiệt cụ thể cặp primer tìm - Với primer Gic chuyên biệt cho gen Invertase, ... phần hóa chất tối ưu cho phản ứng PCR cần thiết, ảnh hưởng rõ đến sản phẩm PCR nói riêng đến thành công chẩnđoán nói chung Chúng tiến hành đem DNA ly trích pha với hỗn hợp gồm: PCR buffer, MgCl2,...
... xong, cho 100µl TE 1X vào để làm hòa tan DNA Sau giữ lạnh -20oC để sử dụng cho phản ứng PCR Phương pháp khuyếch đại DNA (Kỹ thuật PCR) Sản phẩm DNA sau ly trích trộn chung với hỗn hợp gồm có PCR ... gel) - Để nguội cho gel cứng hoàn toàn, cẩn thận rút lược khỏi gel, cho dung dòch TAE 0,5X vào bể điện di cho ngập gel khoảng đến 1,5cm - Trộn 5µl sản phẩm PCR với 2µl loading dye 6X cho hỗn hợp ... Với cặp primer Gic, sản phẩm PCR sau chụp hình cho thấy có hai mẫu có band kích thước 226bp (có chuyển gen Invertase) Với cặp primer Bt, sản phẩm PCR sau chụp hình cho thấy có mẫu có band kích...
... polymerase cho hai giai đoạnKỹthuật RT -PCR cho phép nghiên cứu mRNA tồn với hàm lƣợng thấp, RNA virus, phát phƣơng pháp khác nhƣ Northern blot Một kỹthuật phát triển - kỹthuật in situ RT -PCR cho ... số virus khoai tây (PVX, PVY, PLRV) Đà Lạt kỹthuật ELISA, RT -PCR giải trình tự” 1.2 Mục đích - Phát loại virus (PVX, PVY, PLRV) khoai tây thành phố Đà Lạt kỹthuật ELISA - Phát virus PLRV kỹthuật ... kháng với virus PLRV Hình 2.5 Hình thái virus PLRV Hình 2.6 Khoai tây bị bệnh 2.3 Các phƣơng pháp chẩnđoánbệnh Với đặc điểm phức tạp bệnhvirus nên việc chẩnđoán gặp nhiều khó khăn đòi hỏi dụng...
... Đánh giá khả kháng bệnh giống cách đo chiều dài vết bệnh sau 18 ngày lây nhiễm - Chiều dài vết bệnh < cm: kháng bệnh (R) - Chiều dài vết bệnh 8-12cm: nhiễm vừa (M) - Chiều dài vết bệnh > 12 cm: nhiễm ... luận không xác Chính vì vậy chúng em tiến hành đề tài “Ứng dụng kỹthuậtPCR lây nhiễm nhân tạo kiểm chứng gen kháng bệnh bạc dòng đẳng gen” Phan Thị Hương, Nguyễn Thị Vân Anh, Bùi Văn ... NGHIÊN CỨU KHOA HỌC NĂM 2010 1.Đặt vấn đề Các gen kháng bệnh bạc lá nhà khoa học định vị nhiễm sắc thể primer kèm Như cần dùng kỹthuậtPCR phát gen có mặt dòng đẳng gen Mặt khác theo...
... lớn cho tiến sinh học phân tử thực vật (Nguyễn Văn Uyển, 1995) Sử dụng PCR để phân tích trực tiếp gen cho phép xác định xác khác mặt di truyền các thể Ngoài ra, kỹthuậtPCR đơn giản kỹthuật ... 12 2.2 KỹthuậtPCR 13 2.2.1 Lịch sửPCR 13 2.2.2 Nguyên tắc PCR 14 2.2.3 Các thành phần phản ứng PCR 14 2.2.4 Ƣu điểm nhƣợc điểm PCR ... nƣớc ta, sâu bệnh, úng nƣớc điều kiện thời tiết không thuận lợi cho việc hoa, kết trái nên suất đu đủ trung bình khoảng 20 tấn/ha 2.2 KỹthuậtPCR 2.2.1 Lịch sửPCRSự phát triển PCR đƣợc so sánh...
... thích hợp việc phân tích đa hình DNA kỹthuật RFLP ngƣời ta đƣa kỹthuậtPCR – RFLP PCR – RFLP kỹthuật dựa sở khuyếch đại có chọn lọc đoạn DNA kỹthuậtPCR trƣớc Sau tiến hành phân cắt đoạn ... đầu dính cắt theo đầu bằng: Kiểu cắt đầu bằng: Kiểu cắt đầu dính: 16 2.6.2.9 Ứng dụng kỹthuậtPCRKỹthuậtPCR có nhiều ứng dụng ngành sinh học PCR với cặp primer đƣợc thiết kế riêng phân ... khoa: dùng chẩnđoánbệnh tác nhân vi khuẩn virus, xác định gen gây bệnh hay gen di truyền gây ảnh hƣởng tính cách, giới tính, sức khỏe,… Nông nghiệp: dùng chọn giống xác định yếu tố gây bệnh trồng...