... nghiên cứu tác nhân gâybệnhđốm trắng, nâng cao mức độ tin cậy phản ứng PCR, mức độ tin cậy quitrình nested-PCR phátWSSVQuitrình PCR phátWSSV gen nộichuẩn (ADN giápxácmườichân decapods) ... Kimura et al., 1996 thiết kế), quitrình tiếp tục phát triển với mồi đặc hiệu giápxácmườichân (CSIRO, 2008) để phát đồng thời WSSV ADN giápxácmườichân (gen nội chuẩn) nhằm kiểm soát trường ... đủ trình khuếch đại (10pg – 200ng/phản ứng) Qua kết cho thấy, quitrình PCR phátWSSVnộichuẩn (phát ADN giápxácmườichân - decapods) cho kết tốt mẫu khảo sát 3.3 Xác định khả ứng dụng qui trình...
... vector biến nạp vào vi khuẩn Escherichia coli Điều cho phép nghiên cứu sâu quitrình sinh học vi-rút gâybệnhđốmtrắng mở hướng việc phát triển phương pháp chẩn đoán KẾT LUẬN Quitrìnhtái tổ hợp ... 516bp KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 PhátWSSV khuếch đại gen VP28 WSSV Các mẫu tôm thu có biểu bệnh tiến hành ly trích acid nucleic kiểm tra bệnhđốmtrắng phương pháp PCR theo tiêu chuẩn OIE Từ kết ... cất,… Mẫu vật Mẫu tôm sú nhiễmWSSV xét nghiệm phương pháp PCR theo OIE (2006) 2.2 PhátWSSV phương pháp PCR Ly trích ADN: Cho chân bơi tôm sú có biểu bệnhđốmtrắng vào ống eppendoft 1,5ml Nghiền...
... 8) Độ nhạy quitrình thấp so thí nghiệm xác định độ nhạy quitrình PCR phát F columnare Welker (2005) (phát mức CFU/ml) quitrình tác giả sử dụng DNA trực tiếp từ vi khuẩn Vì quitrình chiết ... sinh sản cá giống bệnh để phòng ngừa khả bộc phát lây lan bệnhHiện PCR phương pháp chủ yếu sử dụng để phát nhanh xác mầm bệnh vi khuẩn thủy sản Gần phương pháp PCR ứng dụng để phát vi khuẩn từ ... đặc hiệu F columnare (Hình 7) không phát sản phẩm không đặc hiệu Kết điện di sản phẩm PCR xác định độ nhạy quitrình PCR phát F columnare cho thấy quitrìnhphát vi khuẩn F columnare với mật độ...
... Kết cho thấy quy trình có khả phát pg ARN YHV diện mẫu Kết phát YHV 20 mẫu tôm nghi nhiễmbệnh đầu vàng Quy trình thiết lập ARN YHV áp dụng để phát YHV 20 mẫu tôm nghi nhiễm, kết trình bày hình ... RT-PCR ARN YHV đồng thời xác định tính đặc hiệu độ nhạy quy trình Quy trình sau áp dụng để phát YHV 20 mẫu tôm sú nghi nhiễm VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP Mẫu tôm: Các mẫu tôm nghi nhiễm YHV ARN YHV Viện ... cho phép phát sớm đặc hiệu tác nhân gâybệnhNhiều phương pháp phân tử lai chỗ, Western blot, RT-PCR phát triển nhằm khắc phục nhược điểm vừa kể việc phát YHV tôm sú Chúng thiết lập quy trình RT-PCR...
... GAATTTGACTGACATTAGCCTCGCTAGATACGCTTTCG ATA 641 NNNNN - 639 71 Phụ lục Kết giải trình tự với mồi P14 mẫu Định Quán 72 Kết giải trình từ với mồi M30 Định Quán 73 Sự tƣơng đồng hai mồi P7 M30 mẫu Định ... ABI3100_DQ17-P7_015_2005-08ABI3100_DQ17-M30_002_2005-08 447 A - CCACT 396 391-P7 74 Phụ lục 10 Kết giải trình tự với mồi P7 mẫu Mỹ Hiệp 75 Kết giải trình tự với mồi M30 mẫu Mỹ Hiệp 76 Sự tƣơng đồng hai mồi P7 M30 mẫu Mỹ Hiệp...
... truyền bệnh hay không? Mùa vụ Bệnh có thƣờng xảy không? Triệu chứng 65 Phụ lục 7: BẢNG PHÂN PHỐI MẪU VÀ KẾT QUẢ THU ĐƢỢC TRÊN ... BẢNG PHÂN PHỐI MẪU VÀ KẾT QUẢ THU ĐƢỢC TRÊN MỖI DĨA ELISA Đối tƣợng: Mẫu ly trích từ đu đủ Thời gian thực hiện: 25-5-2005 Các bƣớc thực hiện: Bƣớc 1: Coating antibodies Bƣớc 2: Coating sample Bƣớc ... Bƣớc 4: Substrate Thể tích phân phối: Coating antibody solution: 100 μl/giếng Mẫu ly trích mẫu đối chứng: 100 μl/giếng Enzyme conjugate solution: 100 μl/giếng PNP substrate (S): 100 μl/giếng...
... 34,92 % - Tỉ lệ nhiễmbệnh theo tuổi cây: – tháng: 70 % – tháng: 85,71 % – 11 tháng: 12,5 % Trên năm: 36,11 % Kết với thí nghiệm RT-PCR - Cặp mồi 1: cặp mồi không đặc hiệu, nhân nhiềutrình tự cDNA ... - Quy trình phản ứng Nested-PCR chƣa thật hoàn chỉnh, kết thu nhận qua điện di nhiều khuyết điểm (band điện di bị smear nhiều) Do đề nghị cần có thêm thời gian hóa chất để cải thiện quy trình ... lƣợng khuôn mẫu….) - Tăng số lƣợng mẫu đƣợc giải trình tự để so sánh đƣợc mối quan hệ dòng, giống mẫu thu thập địa bàn khác 58 TÀILIỆU THAM KHẢO TÀILIỆU TIẾNG VIỆT Bùi Chí Bửu Nguyễn Thị Lang,...
... lệ nhiễmbệnhđốm vòng cao, hầu nhƣ tất vƣờn nhiễmbệnh với dấu hiệu nhƣ có sọc dầu thân, cuống; biến dạng nhiều mức độ; trái có đốm hình vòng nhẫn Mức độ thiệt hại tùy thuộc vào thời điểm bị nhiễm ... hình nhiễmbệnh hai giống Da Mã Lai thu thập tỉnh Đồng Tháp Theo đồ thị trên, nhận thấy giống Da có tỉ lệ nhiễmbệnhđốm vòng cao giống Mã Lai 4.2.3 Tỉ lệ nhiễmbệnh theo tuổi Bảng 4.3 Tỉ lệ nhiễm ... 34,92 Tổng Địa phƣơng (Đp) (+)/Σ: Số nhiễmbệnh tổng số % (+): Tỉ lệ nhiễmbệnh “-“ : lấy mẫu TỈ LỆ NHIỄMBỆNH 100.00 86.54 80 75.00 50.00 34.92 Tỉ lệ nhiễmbệnh (%) 25.00 0.00 Da (Db) Mã Lai (Ml)...
... (với ngƣỡng = hai lần giá trị OD trung bình đối chứng âm) Kết quả: POS- đƣợc đánh giá nhiễmbệnh OD mẫu vƣợt xa ngƣỡng NEG- đƣợc đánh giá không nhiễmbệnh giá trị OD mẫu dƣới ngƣỡng Ngoài ra, đọc ... phủ chất nào) - Bƣớc 2: Phân phối dịch trích mẫu vào giếng với thể tích 100 μl/giếng Đồng thời giai đoạn ta phân phối đối chứng âm dƣơng vào giếng đối chứng Sự phân phối tiến hành theo cặp nhƣ sơ ... gel nồng độ 1,5 % (đối với ladder có kích thƣớc 1000 bp) - Sử dụng gel nồng độ % (đối với ladder kích thƣớc 1500 bp) Bơm mẫu vào giếng với tỉ lệ mẫu/ loading dye 4:2 Trƣớc bơm vào giếng, mẫu phải...
... có triệu chứng bệnh điển hình biểu bệnh nhanh Đây phƣơng pháp xác nghiên cứu bệnh virus thực vật Cây thị đƣợc chia làm hai nhóm: Cây nhiễmbệnh cục (tạo vết chết lá, thân…) nhiễmbệnh hệ thống ... tả sẵn có dạng bệnh virus để phân biệt bệnh virus thực vật với triệu chứng viroid, mycoplasma, tuyến trùng, bệnh không truyền nhiễm (do môi trƣờng không thuận lợi) gây Triệu chứng bệnh virus bao ... công nhận có độ xác cao phƣơng pháp huyết thông thƣờng đƣợc ứng dụng nhiềuchẩn đoán nhanh bệnh virus thực vật, phátbệnh ẩn (Phạm Văn Ty, 2001) Kĩ thuật nhạy đơn giản, cho phép ta xác định kháng...
... aphanidermatum gây Nấm bệnh tồn lƣu xác bã bệnh có đất sinh sản nhiều noãn bào tử để lây lan Bệnhphát triển mạnh trời nóng ẩm Ẩm độ quanh gốc cao, bệnhphát triển mạnh b) Bệnhđốm (do nấm Phyllosticta ... sulata) Trên lá, đốmbệnh có hình tròn, hình trứng, thon dài hay có hình dạng Vùng vết bệnh có màu bạc trắng, viền có màu vàng hay nâu Vùng bệnh khô mỏng dần rách 11 Mầm bệnh tồn lƣu lâu xácbệnhphát ... hồ tiêu, ớt Biến vàng Nhƣ vàng lúa, vàng cam, đậu Hiện tƣợng tàn lụi Cây còi cọc, lùn, mọc búi nhƣ bệnh lùn bụi lạc, bệnh triteza cam, chanh Gây vết chết thân Bệnh vàng camgây vết lõm thân cam,...
... giá tình hình nhiễmbệnh kit ELISA - Xây dựng quy trình RT-PCR để nhận biết virus gâybệnhđốm vòng đu đủ - Phân tích trình tự gene số mẫu bệnh nhằm tìm hiểu mối quan hệ chủng gâybệnh Việt Nam ... việc phát triển sản xuất đu đủ Cùng với phát triển vƣợt bậc công nghệ sinh học, kỹ thuật phân tử chẩn đoán bệnh ngày giúp ta chẩn đoán nhanh, sớm cách xácnhiềubệnh virus Xuất phát từ vấn đề trên, ... CÁC ĐỒ THỊ ĐỒ THỊ TRANG Đồ thị 4.1 Tỉ lệ nhiễmbệnh địa bàn điều tra 41 Đồ thị 4.2 Tỉ lệ nhiễmbệnh theo giống 42 Đồ thị 4.3 Tỉ lệ nhiễmbệnh theo tuổi .43 xii PHẦN I GIỚI...
... THUẬT DAS-ELISA VÀ RT-PCR ĐỂ PHÁTHIỆN VIRUS GÂYBỆNHĐỐM VÒNG TRÊN CÂY ĐU ĐỦ (Papaya ringspot virus) TẠI HAI TỈNH ĐỒNG NAI VÀ ĐỒNG THÁP” Giáo viên hƣớng dẫn: PGS.TS Bùi Cách Tuyến Đề tài đƣợc tiến ... GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ***000*** KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP SỬ DỤNG KỸ THUẬT DAS-ELISA VÀ RT-PCR ĐỂ PHÁTHIỆN VIRUS GÂYBỆNHĐỐM VÕNG TRÊN CÂY ... 8/2005 Nội dung thực hiện: - Tiến hành lấy mẫu bệnhđốm vòng đu đủ hai tỉnh điều tra - Sử dụng kĩ thuật DAS ELISA để chẩn đoán đánh giá mức độ nhiễmbệnhđốm vòng hai tỉnh - Thiết lập quy trình...
... huyết tương tôm sú nhiễmbệnh WSSV, số thể virus có đuôi .8 Hình 2.4 Hai vòng lây nhiễm virus gâybệnhđốmtrắngWSSV ao nuôi 10 Hình 2.5 Tôm sú bị bệnhđốmtrắng dạt vào bờ chết 11 ... PCR phát định lượng WSSV tôm sú giai đoạn nuôi nhằm phát nhanh, xác; định lượng WSSV mẫu tôm sú; góp phần phòng ngừa lây lan bùng phát dịch bệnhđốmtrắng Những kết đạt được: • Xác định quy trình ... “PHÁT HIỆNVÀ ĐỊNH LƯỢNG VIRUS GÂYBỆNHĐỐMTRẮNG (WSSV) TRÊN TÔM SÚ (Penaeus monodon) BẰNG KỸ THUẬT REAL – TIME PCR” Hội đồng hướng dẫn: ThS PHAN THỊ NGỌC THỦY ThS NGUYỄN THÁI THỦY Đề tài “Phát...
... Real – time PCR để kiểm tra phát virus gâybệnhđốmtrắng (WSSV) tôm sú thay cho phương pháp khác Không thả nuôi tôm giống bị nhiễmWSSV Không sử dụng tôm bố mẹ bị nhiễmWSSV để sản xuất tôm giống ... bị nhiễmWSSV cho kết thu hoạch tốt bị thu hoạch sớm Điều trình quản lý ao nuôi dẫn đến tượng lây nhiễmWSSV từ bên vào ao yếu tố khác Do vậy, quy trình quản lý ao nuôi tốt góp phần đáng kể vào ... Loại bỏ + Thu hoạch sớm +: nhiễmWSSV nhẹ ++: nhiễmWSSV nhẹ ++++: nhiễmWSSV nặng -: không nhiễmWSSV Bảng 4.11 cho thấy tất mẫu tôm giống qua kiểm tra Real - time PCR WSSV với kết dương tính phải...