... tiến hành kỹthuậtchuyển gen: a TạoADNtáitổ hợp: SƠĐỒSAUĐÂYLÀKỸTHUẬTCHUYỂNGENDÙNGPLASMITLÀMTHỂ TRÙN ĐỂTẠOADNTÁITỔHỢP Enzim cắt Restrictaza Enzim cắt Gen cần chuyển Gắn ... ADNtáitổhợp phân tử ADN có kết hợpgen cần chuyển thể truyền Vậy ADNtáitổhợp gì? I Cơng nghệ gen: Khái niệm cơng nghệ gen: Các bước cần tiến hành kỹthuậtchuyển gen: b Đưa ADNtáitổhợp ... gen plasmit: A ChuyểnADNtáitổhợp vào tế bào nhận B Tách ADN nhiễm sắc thể tế bào cho tách plasmit khỏi tế bào C Nối ADN tế bào cho vào plasmit D TạoADNtáitổhợp Câu 2: ADNtáitổhợp tạo...
... SINH TỔNG HỢP CPC III. NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP Tạo chủng Acremonium chrysogenum mang ADNtáitổhợp Quy trình sản xuất CPC Tối ưu hóa điều kiện lên men chủng A.chrysogenum mang gentáitổhợpTẠO ... cho phép tạo chủng nấm Acremonium chrysogenum mang ADNtáitổhợp cho sản lượng kháng sinh cao quy trình sản xuất Các genhợp chủng Acremonium chrysogenum gen quan trọng đường sinh tổng hợp CPC: ... ACREMONIUM CHRYSOGENUM MANG ADNTÁITỔHỢP Bước 1: Tách ADN tổng số từ khuẩn ty nấm Acremonium chrysogenum phương pháp tách chiết ADN Bước 2: Nhân dòng cefEF, cefG kĩ thuật PCR Bước 3: Tạo chủng...
... chung ADNtáitổhợp đợc thực nh nào? Tách chiết tinh axit nucleic Tạo véctơ táitổhợp Các loại enzym sử dụng ADNtáitổhợp Nhân dòng gen xây dựng ngân hàng gen Sàng lọc dòng gen ngân hàng gen ... ADNtáitổhợp thực nh nào? Các bớc thực ADntáitổhợp Chọn nguồn gen cần tách dòng chứa trình tự quan tâm Chuẩn bị ADN ngoại lai có đầu 3, phù hợp Chọn lọc véctơ (thể truyền) phù hợp Cải ... v 5của véctơ v phân tử ADN ngoại lai Nối phân tử ADN véctơ v ADN ngoại lai Đa véctơ táitổhợp v o tế b o chủ v nhân lên S ng lọc để chọn dòng tế b o mang véctơ táitổhợp Xác định đặc tính dòng,...
... hợp plasmid táitổhợp mang genchuyển chép tế bào vi khuẩn phân chia Sau đó, hàng triệu plasmid táitổhợp mang genchuyển tách chiết từ tế bào vi khuẩn đoạn genchuyển tách từ plasmid táitổ ... DNA táitổhợp dùng để thiết lập ngân hàng gen, cDNA tổng hợp protein, enzyme, hormone, Nh ững yêu cầu DNA táitổ h ợp - DNA táitổhợp phải đạt yêu cầu cần thiết vector chuyểngen - DNA táitổ ... thu động vật chuyểngen đồng hợp tử genchuyển có mặt tất tế bào Ở giai đoạn này, phôi mang genchuyển đông lạnh bảo quản cho trình cấy chuyểnsauChuyểngen nhờ vector virus Chuyểngen b ằng cách...
... dụng kỹthuật di truyền 2.1 DNA táitổhợp gì? DNA táitổhợp (recombinant DNA) phân tử DNA tạo ống nghiệm cách kết hợp DNA từ nguồn (loài) khác nhau, theo quy trình kỹthuật định, gọi kỹthuậttái ... kiện đặt móng mở triển vọng to lớn cho kỹthuật DNA táitổhợpsau DNA xen vào DNA cắt với EcoRI Các đầu dính Táitổhợp DNA + DNA ligase Nối sai DNA táitổhợp Nối sai Hình 10.3 Hai phân tử DNA ... mang plasmid táitổ hợp, tế bào mang plasmid pUC19 không táitổ hợp, tế bào không biến nạp (hình 10.6a) Qua đêm sinh trưởng, tế bào có mang plasmid táitổhợp plasmid không táitổhợp mọc thành...
... dụng ADNtáitổhợp Nhân dòng gen xây dựng ngân hàng gen Sàng lọc dòng gen ngân hàng gen 46 ADN đợc nhân dòng nh nào? 47 Tách dòng gen xây dựng ngân hàng hệ gen Nhân dòng gen l trình phân lập gen ... trình tự CCNGG; sau xử lý M HpaII, ScrFI nhận v cắt trình tự CCAGG v CCTGG 45 Nội dung Khái niệm chung ADNtáitổhợp đợc thực nh nào? Tách chiết tinh axit nucleic Tạo véctơ táitổhợp Các loại ... ligase) gắn véctơ với gen phân lập Chuyển v o tế b o chủ để nhân lên Chọn lọc dòng tế b o mang véctơ táitổ hợp: phơng pháp nuôi cấy môi trờng chọn lọc, sử dụng gen thị / gen đánh dấu 48 ...
... trình tự đặc hiệu cách tạo đoạn lai ARN /ADN, (2) loại đầu poly(A) phân tử mARN điện di để l m giảm tợng nhiễu phân tích ARN, (3) loại bỏ phân tử mARN tổng hợp cADN 40 Các Enzym làm đứt gãy liên kết ... Cắt bỏ cấu trúc kẹp tóc tổng hợp cADN (2) Tạo phân tử lai ADN/ ARN không đầu thừa để xác định chiều d i v trình tự mã hóa, (3) xác định intron, 41 Các Enzym nối khung ADN ARN E coli DNA ligase ... tự ứng dụng: tạo phân đoạn ADN véctơ đầu tù, Mungbean nuclease Tách từ đậu đỗ, phân hủy mối liên kết phosphodieste bên phân tử ADN v ARN Với ADN mạch đơn, có xu hớng cắt sau A v T, tạo th nh đoạn...
... axit nucleic Tạo véctơ táitổhợp Các loại enzym sử dụng ADNtáitổhợp Nhân dòng gen xây dựng ngân hàng gen Sàng lọc dòng gen ngân hàng gen 33 Các loại enzym sử dụng ADNtáitổhợp Có thể chia ... pyrophosphatase, 34 Các loại enzym sử dụng ADNtáitổhợp nhóm enzym công nghệ ADNtáitổhợp Các enzym tổng hợp mối liên kết phosphodieste phân tử axit nucleic Ví dụ: enzym ADN polymerase (T4 DNA polymerase, ... thực vật Sự kết hợpgen biến nạp với gen nhân thực vật Ngo i ra, có véctơ phagemid, véctơ virut tách dòng v biểu gen động vật, thực vật, 32 Nội dung Khái niệm chung ADNtáitổhợp đợc thực nh...
... hiệu nghiên cứu đặc tính gen đồng thời prokaryote (vd E coli) v eukaryote (vd Saccharomyces cerevisiae) 29 Nhiễm sắc thể nhân tạo nấm men (YAC) Để tách dòng phân đoạn gen kích thớc lớn sinh vật ... 35-45 kb (vd gen dystrophin ngời có kích thớc đến 2000kb), nh nghiên cứu phát triển đợc véctơ nhiễm sắc thể nhân tạo nấm men mang đoạn c i ADN d i từ 200 đến 500 kb Véctơ n y đợc tạo từ nhiễm ... plasmid v phage , mang u điểm hai véctơ n y: (1) khả tự táisố lợng lớn plasmid, (2) có khả đóng gói in-vitro nh phage Có khả mang đoạn ADN c i có kích thớc đến 35 45 kb 26 véctơ cosmid 27 véctơ...
... tích đoạn táitổhợp Có thể nhân lên với số lợng lớn, tốc độ nhanh Nhợc điểm Đôi khi, hiệu suất biến nạp v o tế b o chủ thấp Không hiệu biến nạp eukaryote Không tách dòng đợc phân đoạn ADN kích ... helper (vd M13), plasmid pUC chép theo kiểu vòng lăn, tạo mạch đơn v giải phóng ngo i nhờ protein vỏ virut 21 Plasmid pM13 Bản chất l phân tử ADN mạch đơn Không l m phân giải tế b o chủ giải phóng ... véctơ Phage Phần lớn xuất phát từ phage Kích thớc khoảng 48,5 kb Có thể mang đoạn ADN c i đến ~20 kb (virut đóng gói ADN đến 40-50 kb) Khả xâm nhập tế b o chủ nhanh Có thể tách dòng prokaryote v...
... chung ADNtáitổhợp đợc thực nh nào? Tách chiết tinh axit nucleic Tạo véctơ táitổhợp Các loại enzym sử dụng ADNtáitổhợp Nhân dòng gen xây dựng ngân hàng gen Sàng lọc dòng gen ngân hàng gen ... tự nucleotit đợc biết đầy đủ Có trình tự khởi đầu chép phù hợp tế b o chủ Nhận biết nhờ gen thị gen đánh dấu Có vị trí gắn phân tử ADN ngoại lai (vị trí đa tách dòng polycloning site / MCS) ... plasmid Kích thớc 200 kb, sợi kép, vòng pBR332 Bolivar v Rodiguez (1977) thiết kế cho phép mang đoạn ADN c i đến kb pBR332 4363 bp 18 ...
... chung ADNtáitổhợp đợc thực nh nào? Tách chiết tinh axit nucleic Tạo véctơ táitổhợp Các loại enzym sử dụng ADNtáitổhợp Nhân dòng gen xây dựng ngân hàng gen Sàng lọc dòng gen ngân hàng gen ... chung ADNtáitổhợp đợc thực nh nào? Tách chiết tinh axit nucleic Tạo véctơ táitổhợp Các loại enzym sử dụng ADNtáitổhợp Nhân dòng gen xây dựng ngân hàng gen Sàng lọc dòng gen ngân hàng gen ... chung ADNtáitổhợp (recombinant DNA) đợc dùng để phân tử ADN đợc tạo từ hai hay nhiều phân đoạn ADN xuất xứ từ nguồn gốc khác Trong thực tế, công nghệ ADNtáitổhợp đợc dùng đồng nghĩa với thuật...
... cặp đồng đẳng cho thích hợptáitổhợpADN chúng xác hình thành phức hợp synaptonemal Bất thất bại phát điểm dừng trình thường gây tế bào tự hủy apoptosis Tuy nhiên, điểm kiểm tra, lỗi làm ... nondisjunction , thất bại nhiễm sắc thể để xác riêng biệt: o đồng đẳng giảm phân I o em gái nhiễm sắc trình giảm phân II Hợp tử thiếu nhiễm sắc thể ("đơn nhiễm") phát triển để khai sinh (ngoại trừ cho ... ngưng tụ để chuẩn bị cho metaphase I Các điểm kiểm tra: Kiểm soát chất lượng giảm phân Nó không nên ngạc nhiên thứ sai trình phức tạp Tuy nhiên, tế bào trải qua giảm phân có điểm kiểm tra để kiểm...
... tử ADN nhỏ có khả nhân đôi cách độc lập hệ gen tế bào gắn vào hệ gen tế bào Công nghệ di truyền gọi công nghệ gen hay kỹthuậttáitổhợpADN thực việc chuyểngenđểtạo tế bào mang gen nhằm tạo ... Tóm lại CNSH mà đỉnh cao kỹthuậttáitổhợpADN ngày có ý nghĩa to lớn đời sống người, tạo điều mà trước tưởng chừng không làm Thực vậy, nhờ kỹthuậttáitổhợpADN người làm nhiều sản phẩm ưu ... 5.5) 2.4 Biểu gentạo dòng Về mặt lý thuyết, kỹthuậtADNtáitổhợp cho phép đưa đoạn gen từ sinh vật vào sinh vật khác Vấn đề quan trọng genlạ có biểu Muốn gentạo dòng có biểu tổng hợp protein...
... đoạn gen - Cắt ADN vòng vi khuẩn (plasmid) - Nối đoạn gen cần thiết với ADN vi khuẩn thu đợc ADNtáitổhợp Sơ đồ công nghệ cấy truyền gen hay kỹthuậttáitổhợpgen - ADNtáitổhợp đợc cấy ... Vi khuẩn sử dụng để ghép nối gen th ờng dùng E.Coli E.Coli mang số đặc điểm thuận lợi cho việc cấy truyền gen: E.Coli mang ADN dạng vòng E.Coli sinh sản nhanh nhờ gentáitổhợp đợc nhân nhanh ... thích hợpđể nhân lên nhanh chóng - Sử dụng kỹthuật tách chiết tinh chế để thu lấy chế phẩm cần thiết ct cỏc on mch ADN ng i ta s dng cỏc loi enzim hn ch Mi enzim hn ch nhn bit v ct trỡnh t ADN...
... học kỹthuật gen( kỹthuật di truyền) mà khởi đầu kỹthuật AND táitổhợp - Kỹthuật AND táitổhợp gồm bước sau: • Tách chiết tạo AND, ARN theo mong muốn ( phân lập gen) • Tạo vector táitổhợp ... Insulin: 2.2.1 Khái quát công nghệ AND táitổ hợp: - Kỹthuật AND táitổhợp tập hợp nhiều kỹthuậtđểtạogen hệ gen ; cải biến cấu trúc gen, nhằm tạogenchuyển chúng vào tế bào, thể chủ nhằm ... táitổhợp 2.2.1.3 Biến nạp AND táitổhợp vào tế bào chủ nhân dòng gen: - Đưa AND táitổhợp vào tế bào chủ theo kỹthuật biến nạp( chuyển trực tiếp AND táitổhợp vào tế bào chủ) – tế bào chủ...
... nucleic Tạo véctơ táitổhợp Các loại enzym sử dụng ADNtáitổhợp Nhân dòng gen xây dựng ngân hàng gen Sàng lọc dòng gen ngân hàng genADNtáitổhợp thực nh nào? Các bớc thực ADntáitổhợp Chọn ... chung ADNtáitổhợp đợc thực nh nào? Tách chiết tinh axit nucleic Tạo véctơ táitổhợp Các loại enzym sử dụng ADNtáitổhợp Nhân dòng gen xây dựng ngân hàng gen Sàng lọc dòng gen ngân hàng gen ... chung ADNtáitổhợp đợc thực nh nào? Tách chiết tinh axit nucleic Tạo véctơ táitổhợp Các loại enzym sử dụng ADNtáitổhợp Nhân dòng gen xây dựng ngân hàng gen Sàng lọc dòng gen ngân hàng gen...