... v.v… KỹthuậtADNtáitổhợp số ứng dụng 2.1 KỹthuậtADNtáitổhợpADNtáitổhợp (recombinant DNA) ADN tạo từ hai hay nhiều nguồn vật liệu di truyền khác Phân tử ADNtáitổhợp tạo nhờ kỹthuật ... được… ADNtáitổhợpkỹthuật hàng loại kỹthuật Công nghệ sinh học đại khác, tập hợp lại gọi Công nghệ di truyền (Genetic technology) … NỘI DUNG TIỂU LUẬN Lược sử đời kỹthuậtADNtáitổhợp Năm ... khởi đầu dịch mã ADNtáitổhợp có ổn định lâu dài E.coli Không có phân giải protein enzym tế bào chủ 2.2 Ứng dụng kỹthuậtADNtáitổhợp 2.2.1 Ứng dụng kỹthuậtADNtáitổhợp người 2.2.1.1...
... hợp plasmid táitổhợp mang gen chuyển chép tế bào vi khuẩn phân chia Sau đó, hàng triệu plasmid táitổhợp mang gen chuyển tách chiết từ tế bào vi khuẩn đoạn gen chuyển tách từ plasmid táitổ ... gọi táchdòngTáchdòngtách lập thu nhận nhiều đồnggen hay mảnh đoạn DNA Táchdòng kèm không kèm với biểu protein Những áp dụng DNA táitổhợp dùng để thiết lập ngân hàng gen, cDNA tổng hợp protein, ... hormone, Nh ững yêu cầu DNA táitổ h ợp - DNA táitổhợp phải đạt yêu cầu cần thiết vector chuyển gen - DNA táitổhợp phải có hoạt tính đưa vào tế bào chủ - DNA táitổhợp phải có dấu hiệu dễ phát...
... niệm chuyển gen thực vật: Kỹthuật chuyển gen thực vật kỹthuật đưa hay nhiều gen lạ thiết kế dạng plasmid táitổ hợp, gắn vào hệ gen tế bào chủ Trong tế bào chủ, gen lạ hoạt động tổng hợp nên protein ... thích hợp plasmid táitổhợp mang gen chuyển sẽđược chép tế bào vi khuẩn phân chia Sau đó, hàng triệubản plasmid táitổhợp mang gen chuyển tách chiết từcác tế bào vi khuẩn đoạn gen chuyển tách ... thể, protein tổng hợp từ gen thay gen sai hỏng đa điều trị rối loạn di truyền (Hình 9)(Inovio, 2002) II.2.3 Chuyển gen nhờ kỹthuật siêu âm [1,5] Kỹthuật siêu âm dùng để chuyển gen vào tế bào...
... CHỦNG ACREMONIUM CHRYSOGENUM MANG ADNTÁITỔHỢP Bước 1: TáchADN tổng số từ khuẩn ty nấm Acremonium chrysogenum phương pháp tách chiết ADN Bước 2: Nhân dòng cefEF, cefG kĩ thuật PCR Bước 3: ... SINH TỔNG HỢP CPC III. NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP Tạo chủng Acremonium chrysogenum mang ADNtáitổhợp Quy trình sản xuất CPC Tối ưu hóa điều kiện lên men chủng A.chrysogenum mang gentáitổhợp ... Acremonium chrysogenum mang ADNtáitổhợp cho sản lượng kháng sinh cao quy trình sản xuất Các genhợp chủng Acremonium chrysogenum gen quan trọng đường sinh tổng hợp CPC: cefEF, cefG ,vgb II TỔNG QUAN...
... dụng kỹthuật di truyền 2.1 DNA táitổhợp gì? DNA táitổhợp (recombinant DNA) phân tử DNA tạo ống nghiệm cách kết hợp DNA từ nguồn (loài) khác nhau, theo quy trình kỹthuật định, gọi kỹthuậttái ... insulin trì tái sử dụng với hiệu kinh tế cao IV Ứng dụng công nghệ DNA táitổhợp Công nghệ DNA táitổhợp với việc nghiên cứu gene Việc táchdòngtáitổhợp cho phép nhận số lượng lớn gene vùng ... định vị 267 gene quan tâm từ dòngtáitổhợp (hình 10.6c) Tổng hợp tạo dòng cDNA Đối với trường hợp cần cho biểu gene lạ (sản xuất protein) mong muốn vi khuẩn, người ta tổng hợp gene dựa khuôn...
... kiện áp dụng tổhợp KDT1 Mục đích nhiệm vụ chế tạo thiết bị tổhợp KDT-1 Cấu tạo nguyên lý làm việc tổhợp KDT1 Các yêu cầu kỹthuậttổhợp KDT1 12 Các bớc xây dựng, chế tạo tổhợp KDT1 38 Các ... tạo, sản xuất tổhợp cao thời gian sử dụng lâu dài 3.4 Trong trình thành lập tổhợp áp dụng cho điều kiện kỹthuật mỏ cho, nhiệm vụ kỹthuật bao gồm: 3.4.1 Bản thiết kế kỹthuậttổhợp KDT1 kèm ... Xây dựng nhiệm vụ kỹthuật 1.2 1.3 Xây dựng thiết kế kỹthuật Xây dựng tài liệu hoạt động khai thác tổhợp thiết bị tổhợp 1.4 Hiệu chỉnh tài liệu tổhợp thiết bị thuộc tổhợp theo kết đánh giá...
... chung ADNtáitổhợp đợc thực nh nào? Tách chiết tinh axit nucleic Tạo véctơ táitổhợp Các loại enzym sử dụng ADNtáitổhợp Nhân dònggen xây dựng ngân hàng gen Sàng lọc dònggen ngân hàng gen ... hàng gen 46 ADN đợc nhân dòng nh nào? 47 Táchdònggen xây dựng ngân hàng hệ gen Nhân dònggen l trình phân lập gen véctơ táchdòng tế b o chủ để nhân lên th nh nhiều Nhân dònggen biết trình ... véctơ tách dòng: tùy kích thớc đoạn gen v tế b o chủ m chọn véctơ plasmid, phage, cosmid, YAC Tạo véctơ táitổhợp v nhân dòng: sử dụng DNA/RNA ligase (vd T4 DNA ligase) gắn véctơ với gen phân...
... Nuclease S1 Tách từ Aspergillus oryzae Cắt ARN v ADN trạng thái mạch đơn Cắt bên (endo) lẫn bên ngo i (exo) Không cắt trạng thái kép ADN/ ARN ứng dụng: (1) Cắt bỏ cấu trúc kẹp tóc tổng hợp cADN (2) ... đoạn ADN mạch đơn v ADN v ARN Hoạt tính nối mạnh E coli DNA ligase, không cần trình tự đối diện vị trí nick ứng dụng: Nối đoạn ADN sợi kép đầu dính tù T4 ARN ligase Có khả nối ADN- ADN, ADN- ARN ... phân đoạn ADN nằm kề, có 5-P, có 3-OH Cần có trình tự đối diện vị trí nick translation ứng dụng: Nối đoạn polynucleotit tổng hợp gián đoạn T4 DNA ligase Mã hóa hệ gen phage T4 Nối đoạn ADN sợi...
... chung ADNtáitổhợp đợc thực nh nào? Tách chiết tinh axit nucleic Tạo véctơ táitổhợp Các loại enzym sử dụng ADNtáitổhợp Nhân dònggen xây dựng ngân hàng gen Sàng lọc dònggen ngân hàng gen ... pyrophosphatase, 34 Các loại enzym sử dụng ADNtáitổhợp nhóm enzym công nghệ ADNtáitổhợp Các enzym tổng hợp mối liên kết phosphodieste phân tử axit nucleic Ví dụ: enzym ADN polymerase (T4 DNA polymerase, ... ngân hàng gen Sàng lọc dònggen ngân hàng gen 33 Các loại enzym sử dụng ADNtáitổhợp Có thể chia enzym công nghệ ADNtáitổhợp thành nhóm Các enzym l m đứt gãy liên kết phosphodieste Ví dụ: enzym...
... hiệu nghiên cứu đặc tính genđồng thời prokaryote (vd E coli) v eukaryote (vd Saccharomyces cerevisiae) 29 Nhiễm sắc thể nhân tạo nấm men (YAC) Để táchdòng phân đoạn gen kích thớc lớn sinh vật ... plasmid v phage , mang u điểm hai véctơ n y: (1) khả tự tái số lợng lớn plasmid, (2) có khả đóng gói in-vitro nh phage Có khả mang đoạn ADN c i có kích thớc đến 35 45 kb 26 véctơ cosmid 27 véctơ ... chuẩn có kích thớc > 35-45 kb (vd gen dystrophin ngời có kích thớc đến 2000kb), nh nghiên cứu phát triển đợc véctơ nhiễm sắc thể nhân tạo nấm men mang đoạn c i ADN d i từ 200 đến 500 kb Véctơ n...
... tử ADN mạch đơn Không l m phân giải tế b o chủ giải phóng khỏi tế b o nên táchdòng thuận tiện 22 véctơ plasmid u điểm Cấu trúc đơn giản, kích thớc nhỏ Dễ tinh sạch, dễ phân tích đoạn táitổhợp ... eukaryote Không táchdòng đợc phân đoạn ADN kích thớc lớn (> 10 kb) 23 véctơ Phage Phần lớn xuất phát từ phage Kích thớc khoảng 48,5 kb Có thể mang đoạn ADN c i đến ~20 kb (virut đóng gói ADN đến 40-50 ... đoạn ADN c i đến ~20 kb (virut đóng gói ADN đến 40-50 kb) Khả xâm nhập tế b o chủ nhanh Có thể táchdòng prokaryote v eukaryote 24 ...
... chung ADNtáitổhợp đợc thực nh nào? Tách chiết tinh axit nucleic Tạo véctơ táitổhợp Các loại enzym sử dụng ADNtáitổhợp Nhân dònggen xây dựng ngân hàng gen Sàng lọc dònggen ngân hàng gen ... khởi đầu chép phù hợp tế b o chủ Nhận biết nhờ gen thị gen đánh dấu Có vị trí gắn phân tử ADN ngoại lai (vị trí đa táchdòng polycloning site / MCS) 16 Các đặc điểm véctơ táchdòng 17 véctơ plasmid ... truyền Vectơ nhân dòng Vectơ biểu Kích thớc c ng nhỏ, kích thớc đoạn xen c ng lớn Trình tự nucleotit đợc biết đầy đủ Có khả tự chép tế b o chủ 15 Các đặc tính chung véctơ Vectơ nhân dòng v Vectơ biểu...
... chung ADNtáitổhợp đợc thực nh nào? Tách chiết tinh axit nucleic Tạo véctơ táitổhợp Các loại enzym sử dụng ADNtáitổhợp Nhân dònggen xây dựng ngân hàng gen Sàng lọc dònggen ngân hàng genTách ... ADNtáitổhợp thực nh nào? Các bớc thực ADntáitổhợp Chọn nguồn gen cần táchdòng chứa trình tự quan tâm Chuẩn bị ADN ngoại lai có đầu 3, phù hợp Chọn lọc véctơ (thể truyền) phù hợp Cải ... phân tử ADN ngoại lai Nối phân tử ADN véctơ v ADN ngoại lai Đa véctơ táitổhợp v o tế b o chủ v nhân lên S ng lọc để chọn dòng tế b o mang véctơ táitổhợp Xác định đặc tính dòng, v sử dụng dòng...
... chung ADNtáitổhợp đợc thực nh nào? Tách chiết tinh axit nucleic Tạo véctơ táitổhợp Các loại enzym sử dụng ADNtáitổhợp Nhân dònggen xây dựng ngân hàng gen Sàng lọc dònggen ngân hàng gen ... chung ADNtáitổhợp đợc thực nh nào? Tách chiết tinh axit nucleic Tạo véctơ táitổhợp Các loại enzym sử dụng ADNtáitổhợp Nhân dònggen xây dựng ngân hàng gen Sàng lọc dònggen ngân hàng gen ... tích v nghiên cứu gen riêng lẻ Nhân dònggen đợc phân lập lên số lợng lớn, để đáp ứng đủ cho nhu cầu nghiên cứu Khả tạo gen/ tổhợpgen Vật liệu táchdònggenADN mARN (sử dụng kỹthuật RT-PCR) ...
... làm được… Trong ADNtáitổhợpkỹthuật hàng loại kỹthuật Công nghệ sinh học đại khác, tập hợp lại gọi Công nghệ di truyền PHẦN II: NỘI DUNG Khái niệm ADNtáitổ hợp: ADNtáitổ hợp: Là phân tử ... nghệ gen hay kỹthuậttáitổhợpADN thực việc chuyển gen để tạo tế bào mang gen nhằm tạo vật chất cần thiết Các bước tiến hành kỹthuậtADNtáitổ hợp: 2.1 Phân lập đoạn ADN /gen PCR Có nhiều ... Chọn dòng mang ADNtáitổhợp Trong thí nghiệm tạo vector táitổ hợp, hỗn hợp vector lượng lớn phân tử ADN cắt enzyme hạn chế gắn lại với enzyme ADN ligase Kết quả, hỗn hợp có plasmid táitổ hợp...
... đoạn gen - Cắt ADN vòng vi khuẩn (plasmid) - Nối đoạn gen cần thiết với ADN vi khuẩn thu đợc ADNtáitổhợp Sơ đồ công nghệ cấy truyền gen hay kỹthuậttáitổhợpgen - ADNtáitổhợp đợc cấy ... khuẩn sử dụng để ghép nối gen th ờng dùng E.Coli E.Coli mang số đặc điểm thuận lợi cho việc cấy truyền gen: E.Coli mang ADN dạng vòng E.Coli sinh sản nhanh nhờ gentáitổhợp đợc nhân nhanh chóng ... thích hợp để nhân lên nhanh chóng - Sử dụng kỹthuậttách chiết tinh chế để thu lấy chế phẩm cần thiết ct cỏc on mch ADN ng i ta s dng cỏc loi enzim hn ch Mi enzim hn ch nhn bit v ct trỡnh t ADN...