... Cấp Mãn Δ HC03 # 0.2 × Δ PaC02 Δ HC03 # 0.45 × Δ PaC02 Cũngđánhgiáđápứngbùtrừcáchướclượngsau : Rối loạn tiên phát Đápứngbùtrừ Toan chuyển hóa PaC02 giảm 1,2 mmHg cho mmol/L HC03 ... chuyển hóa ↑ HC03↑ PaC02↑ b Mức độ bù trừ: Bùtrừ thận bắt đầu vài giờ, tối đa 3-5 ngày Bùtrừ hơ hấp xảy nhanh sau vài phút, hồn tất 12 giờ, rối loạn chuyển hóa khơng có khái niệm cấpmãn Lưu ý: thay ... ý: thay đổi pH, PaC02, HC03 phải tính tốn từ giá trị trung bình - Khả bùtrừ phổi thận rối loạn toan kiềm tiên phát (đơn thuần): Rối loạn Đápứngbùtrừ Toan chuyển hóa PaC02 # 1.5 × [HC03] + (±...
... nhim bnh lõm sng sau ú c gi 270C v c kim tra s hin din virus PRRS, kt qu, PRRSV cú th phỏt hin trờn rui khong thi gian t gi n gi sau tip xỳc Nhng nhng khong thi gian quan sỏt sau ú (12, 24, 48, ... thi gian t n ngy, n 11 ngy, n 13 ngy, v n 28 ngy sau nhim Khỏng th IgM c hiu i vi virus PRRS c phỏt hin t ngy th sau nhim v kộo di t 21 n 28 ngy sau nhim Tựy thuc vo th nghim, nhng n v khỏng th ... sau nhim, sau ú b gim dn Yoon v cng s mt thớ nghim ó chng minh rng khụng th phỏt hin khỏng th khong n thỏng i vi IFA, n 10 thỏng i vi ELISA 11 n 12 thỏng i vi IMPA v khong 12 thỏng i vi SNV sau...
... nhim bnh lõm sng sau ú c gi 270C v c kim tra s hin din virus PRRS, kt qu, PRRSV cú th phỏt hin trờn rui khong thi gian t gi n gi sau tip xỳc Nhng nhng khong thi gian quan sỏt sau ú (12, 24, 48, ... thi gian t n ngy, n 11 ngy, n 13 ngy, v n 28 ngy sau nhim Khỏng th IgM c hiu i vi virus PRRS c phỏt hin t ngy th sau nhim v kộo di t 21 n 28 ngy sau nhim Tựy thuc vo th nghim, nhng n v khỏng th ... sau nhim, sau ú b gim dn Yoon v cng s mt thớ nghim ó chng minh rng khụng th phỏt hin khỏng th khong n thỏng i vi IFA, n 10 thỏng i vi ELISA 11 n 12 thỏng i vi IMPA v khong 12 thỏng i vi SNV sau...
... ngâm với nước DEPC 0.005% gia nhiệt cách sấy Nước cất hai lần khử ion cần xử lý để đảm bảo diện RNase Cóthể kiểm tra điều cách ủ RNA nước mong muốn sau kiểm tra cách điện di Tất dụng cụ hoá chất ... tube có chứa dịch Bước 9: Mở nắp QIAamp spin column cách cẩn thận, thêm 500 µl buffer AW2, đóng nắp lại ly tâm với tốc độ 20000 x g (14000 vòng) phút Cóthể thực bước 10 hay thực bước 9a Bước ... vào tube ml loại bỏ tube có chứa dịch lọc (có thể ly tâm với tốc độ cao ) Bước 7: Mở QIAamp spin column lặp lại bước Bước 8: Mở nắp QIAamp spin column cách cẩn thận thêm 500 µl Buffer AW1, đóng...
... việc có diện virus máu heo có kháng thể 5.2 Đề nghị Cần hoàn thiện quy trình ứng dụng RT-PCR việc phát virus PRRS, khử băng phụ giảm thành phần phản ứng nhằm làm giảm giá thành cho phản ứng xét ... TRIzol hoàn toàn có khả thu nhận RNA Quy trình điện di RNA tổng số có khả kiểm tra RNA tổng số sau trình ly trích Tất mẫu không tồn virus PRRS thời điểm lấy mẫu Sự diện kháng thể kháng virus gây ... xuất băng phụ rõ Đây sai sót thường gặp thực phản ứng PCR Nguyên nhân do: - Hoạt lực enzyme phiên mã ngược bị giảm 30 - Nhiều primer nên chúng tự bắt cặp với - Cặp primer sử dụng có độ đặc hiệu...
... Probe Đây primer đặc hiệu cho virus PRRS, chúng có khả khuếch đại đặc hiệu đoạn có kích thước khoảng 400bp Cặp primer P1, P2 theo tác giả Meritxel Donadeu, 1999 thiết kế có khả khuếch đại đoạn có ... transcriptase, sau tiến hành khuếch đại đoạn cDNA vừa tạo Thành phần chu kỳ nhiệt cho phản ứng trình bày sau Thành phần phản ứng RT-PCR: Bảng 3.2 Thành phần phản ứng RT-PCR Thành Phần DDung dịch gốc Thể ... vào eppendorf có chứa dịch thu - Vortex để trộn đều, sau để nhiệt độ phòng 10 phút Ly tâm với tốc độ 12000 vòng/phút 10 phút 40C Loại bỏ phần dịch thu lấy phần tủa có chứa RNA Bước 4: Rửa RNA...
... ngày, đến 28 ngày sau nhiễm Kháng thể IgM đặc hiệu virus PRRS phát từ ngày thứ sau nhiễm kéo dài từ 21 đến 28 ngày sau nhiễm Tùy thuộc vào thử nghiệm, đơn vị kháng thể đạt đến giá trị cao khoảng ... đến 90 ngày (SNV) sau nhiễm, sau bị giảm dần Yoon cộng thí nghiệm chứng minh phát kháng thể khoảng đến tháng IFA, đến 10 tháng ELISA 11 đến 12 tháng IMPA khoảng 12 tháng SNV sau nhiễm Những kết ... từ heo có biểu lâm sàng virus PRRS không đủ sở cho việc chẩn đoán virus PRRS (Van Alstine cộng sự, 1993) Cóthể diện kháng thể mẹ truyền cho heo Albina nghiên cứu năm 1994 cho thấy kháng thể truyền...
... việc phát virus PRRS lớp vỏ loài chân khớp saucó trận bùng phát bệnh dịch PRRS Sau đó, họ chứng minh truyền lây học điều kiện thí nghiệm đến thử nghiệm cách cho côn trùng chân khớp kiếm ăn heo ... lây lan bệnh xảy thường xuyên khoảng cách vài km vùng có mật độ gia súc lớn Ở Việt Nam, bệnh phát lần phản ứng huyết học vào năm 1997, đàn lợn nhập từ Mỹ phát có 10 bị bệnh tổng số 51 Trong báo ... truyền lây gián tiếp (4) Sự truyền lây gián tiếp truyền lây thông qua vật mang tác nhân lây nhiễm Các vật mang kiến, loài chân đốt (arthropods) khí dung (aerosol) Theo nghiên cứu trước đây, PRRS...
... BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ***00*** ỨNG DỤNG KỸ THUẬT RT - PCR ĐỂ PHÁT HIỆN VIRUS GÂY HỘI CHỨNG RỐI LOẠN SINH SẢN VÀ HÔ HẤP Ở LỢN Giáo viên ... mã ngược 19 Bảng 3.1 Cặp primer sử dụng phản ứng 21 Bảng 3.2 Thành phần phản ứng RT-PCR 25 Bảng 3.3 Chu kỳ nhiệt cho phản ứng RT-PCR 26 Hình 4.1 Sản phẩm RT-PCR mẫu ... RNA từ mẫu huyết dịch nuôi cấy tế bào từ lợn nghi ngờ bị nhiễm bệnh PRRS dựa vào kết ELISA Sau thực phản ứng RT-PCR để kiểm tra diện RNA virus gây bệnh PRRS mẫu Kết quả, thành công việc xây dựng...
... đại thể vi thể đặc trưng 2.1.6.3 Chẩn đoán huyết học Cóthể phát kháng thể kháng virus PRRS huyết thanh, dịch thể từ thai chết lưu số phương pháp dùng như: - Phương pháp kháng thể huỳnh quang gián ... dương, có đặc điểm chung họ Arterivirus Sợi ARN có kích thước khoảng 15 kb, có ORF (open reading frame) mã hoá cho protein cấu trúc Tuy nhiên, có phân tử protein cấu trúc có khả trung hoà kháng thể ... ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Trong năm gần đây, ngành chăn nuôi nước ta có bước phát triển vượt bậc, đạt nhiều thành tựu to lớn, đápứng nhu cầu tiêu thụ sản phẩm thịt, trứng, sữa người dân Tuy nhiên, ngành...
... GP4 chứa vị trí có tính định miễn dịch (Immuno dominant) trung hòa kháng thể (neutralizing epitope) So sánh trình tự amino acid GP4 dòng virus có gây đápứng miễn dịch với kháng thể đơn dòng đặc ... ứng PCR đƣợc thực chu kỳ nhiệt Đây máy đun nóng làm nguội ống phản ứng nhiệt độ xác cho phản ứng thƣờng đƣợc thực với bƣớc sau: Biến tính: Bƣớc hệ thống nhân bội PCR làm biến tính mẫu DNA cách ... Lan với chủng có nguồn gốc châu Âu, Bắc Mỹ cung cấp thông tin quý giá cho việc đánhgiá mức độ biến đổi di truyền tiến hoá phân tử chủng này, cụ thể là: chủng virus 0INPI đƣợc cho có nguồn gốc...
... phải có kính hiển vi huỳnh quang, diện màu huỳnh quang mẫu xét nghiệm chứng tỏ mẫu có kháng thể kháng virus Phản ứngcó độ đặc hiệu cao 99,5 % cho phép phát kháng thể kháng virus đến tháng sau ... quy mô lớn * Phản ứng SN (Serum Neutralizing) Đây phản ứng trung hòa virus, phản ứngcó độ đặc hiệu cao nhất, sử dụng để phát định hiệu giá kháng thể kháng virus Nhược điểm phản ứng đắt tiền, khó ... Buffer AW2 Đóng nắp ly tâm phút Cóthể thực bước 11 hay để loại trừ hết buffer AW2 thực bước 10 tiếp tục bước 11 Thành phần buffer AW2 ảnh hưởng đến ứng dụng sau 10 Đề nghị: Bỏ colletion tube...
... vào triệu chứng lân sàng bệnh tích mô tả phần Trong phòng thí nghiệm, dùng phản ứng Immunoperoxidase lớp (IPMA) để phát kháng thể 1-2 tuần sau nhiễm; phản ứng kháng thể huỳnh quang gián tiếp (IFA) ... huỳnh quang gián tiếp (IFA) kiểm tra kháng thể IgM 5-28 ngày sau nhiễm kiểm tra kháng thể IgG 7-14 ngày sau nhiễm: phản ứng ELISA phát kháng thể vòng tuần sau tiếp xúc Ngoài ra, phương pháp PCR phân ... bị nhiễm virus - Kháng thể huỳnh quang gián tiếp (IFA) kiểm tra kháng thể IgM có lẻ phát kháng thể 5-28 ngày sau nhiễm kiểm tra IgG 7-14 ngày sau nhiễm có lẻ kéo dài 3-5 tháng.thực trực tiếp...
... vào triệu chứng lân sàng bệnh tích mô tả phần Trong phòng thí nghiệm, dùng phản ứng Immunoperoxidase lớp (IPMA) để phát kháng thể 1-2 tuần sau nhiễm; phản ứng kháng thể huỳnh quang gián tiếp (IFA) ... huỳnh quang gián tiếp (IFA) kiểm tra kháng thể IgM 5-28 ngày sau nhiễm kiểm tra kháng thể IgG 7-14 ngày sau nhiễm: phản ứng ELISA phát kháng thể vòng tuần sau tiếp xúc Ngoài ra, phương pháp PCR phân ... Seminar virus PRRS - Kháng thể huỳnh quang gián tiếp (IFA) kiểm tra kháng thể IgM có lẻ phát kháng thể 5-28 ngày sau nhiễm kiểm tra IgG 7-14 ngày sau nhiễm có lẻ kéo dài 3-5 tháng.thực trực tiếp...
... bi t L n nái có virus huy t s m lúc ngày sau tiêm truy n, có th ñoán sau ñó virus nhân lên dài (lên t i 14 ngày) ñi n hình ñ i th c bào ph nang Virus huy t kéo l n nái; v y chúng có ñ th i gian ... n teo nh , lòng ng r ng, có tr vùng lành có ho t ñ ng bù, m ch qu n giãn r ng, phân nhi u nhánh T cung c a l n nái có s bi n ñ i l n, thâm nhi m t bào viêm dày ñ c, có m t nhi u h ng c u, niêm ... n ng huy t ñ i v i virus PRRS Nhưng có nh ng nghiên c u ch ng minh r ng chim di trú (như v t tr i) có th b nhi m, b i v y chúng có kh truy n virus ñi xa s có lưu hành b nh, môi trư ng b ô nhi...
... tính t l ch t 20% B nh có t c ñ lây lan nhanh, ch sau ngày b nh có th lây toàn ñàn, v i bi u hi n s t cao 40 - 420C, nên năm 2006 b nh có tên “B nh s t cao” Năm 2007 d ch l i bùng phát Trung Qu c, ... xe thư ng có màu xám ñ , r n, ch c Khi c t ñôi ñám ph i có bi u hi n b nh tích th y có m ch y ra, mô ph i l i có màu ñ xám loang l n c bi u hi n màu gi ng ñá granit Trong m t thuỳ ph i có nhi u ... giây - Phân tích k t qu xét nghi m: Các giá tr m c ñ nh ñã ñư c thi t l p ñ phát hi n virus Kit PRRS M u cógiá tr Ct ≤ 35 ñư c coi dương tính M u cógiá tr Ct kho ng 35 40 ñư c coi nghi ng ...