... địnhtrìnhtự cao (highthroughput) đột ngột làm giảm chi phí xácđịnhtrìnhtự ADN, đem tới hy vọng cho nhiều nhà nghiên cứu thực việc với giá thành 1000 đô la [95] Mỹ Lượng lớn trìnhtựxácđịnh ... cứu trìnhtự phân tử liên quan tới nhiều bệnh di truyền người Khi xácđịnhtrìnhtự trở nên đỡ tốn hơn, với trợ giúp công cụ tính toán, nhà nghiên cứu xácđịnh gen nhiều sinh vật cách liên kết trình ... tự nhiều đoạn khác (quá trình gọi "lắp ráp gen" -genome [94] assembly) Những kỹ thuật sử dụng để xácđịnh gen người, hoàn thiện Dự án Bản đồ gen Người vào năm [39] 2003 Những kỹ thuật xác định...
... PCR đoạn ADN đặc hiệu gen cry1Ab vi khuẩn E coli nhân lên theo mong muốn Tuy nhiên để khẳng định cách chắn điều này, cần xácđịnhtrìnhtự đoạn ADN gắn vào vectơ II.4 Xácđịnhtrìnhtự nucleotid ... vectơ tái tổ hợp từ tế bào chủ, gen xácđịnhtrìnhtự theo phương pháp enzim học Sanger nhờ kit Hãng Amersham-Pharmacia Biotech với máy xácđịnhtrìnhtựADNtự động ALFExpress Hãng Pharmacia Phân ... dòng xácđịnhtrìnhtự đoạn ADN đặc hiệu gen cry1Ab từ chủng B thuringiensis var kurstaki H15 phân lập, đoạn ADN có chiều dài 236bp, mã hoá cho đoạn protein có chiều dài 78 axit amin Trìnhtự đoạn...
... dng húa cht phõn hy ADN cỏc v trớ base c hiu to cỏc on cú chiu di khỏc nucleotid Điện di đoạn ADN nhận biết vị trí chúng nhờ đánh dấu phóng xạ Dựa vào để đọc trìnhtựADN I.Phng phỏp Maxam-Gilbert ... hp b dng li v to cỏc on AND chờnh lch nucleotid Điện di đoạn ADN nhận biết vị trí chúng nhờ đánh dấu phóng xạ Dựa vào để đọc trìnhtựADN Nhõn t kt thỳc c hiu c s dng l cỏc dideoxynucleotit (phng ... Sanger 2.Cỏch tin hnh: Cắt ADN enzym cắt giới hạn, tách đoạn ADN cắt thành sợi đơn nhân dòng ( cloning ) chúng ( lượng ADN > àg ) vetơ mạch đơn: phage M13 để tạo đủ ADN làm nguyên liệu nghiên...
... 10µl 2.3.10 Xácđịnhtrìnhtự so sánh trìnhtự gen thu đƣợc với trìnhtự tƣơng ứng GenBank Tách dòng xácđịnhtrìnhtự gen: Sản phẩm PCR đƣợc gắn vào vector tách dòng pBT [4] biến nạp vào tế bào ... lại vị trí (trình tự) xácđịnh Do đặc tính RE khả nhận biết cắt trìnhtựxácđịnh phân tử DNA, dựa vào khả này, ngƣời ta chia chúng làm ba loại: (1) Khi enzym nhận biết đƣợc trình tự, di chuyển ... PRISM 3100 Avant Genetic Analyzer 3.3 XÁCĐỊNHTRÌNHTỰ NUCLEOTIT CỦA MỘT SỐ ĐOẠN TRONG GENOME CỦA RGSV Các trìnhtự RGSV thu đƣợc máy xácđịnhtrìnhtựtự động ABI PRISM® 3100 Avant Genetic...
... ion vô trùng 2.3.8 Xácđịnhtrìnhtự nucleic Trìnhtự DNA xácđịnh phương pháp enzyme Sanger Cơ sở phương pháp: dựa vào tổng hợp mạch bổ sung với đoạn DNA mạch đơn cần xácđịnh nhờ enzyme DNA-polmerase ... thư vú Vì vậy, trình bày phần tách dòng xácđịnhtrìnhtự nucleotid gene mã hoá kháng thể tái tổ hợp kháng lại lympho bào tách từ bệnh nhân ung thư vú Để tách dòng xácđịnhtrìnhtự gene mã hóa ... định Do đặc tính RE khả nhận biết cắt trìnhtựxácđịnh phân tử DNA nên dựa vào khả này, người ta chia chúng làm ba loại: - Loại I: Khi enzyme nhận biết trình tự, di chuyển phân tử DNA đến cách...
... 10µl 2.3.10 Xácđịnhtrìnhtự so sánh trìnhtự gen thu đƣợc với trìnhtự tƣơng ứng GenBank Tách dòng xácđịnhtrìnhtự gen: Sản phẩm PCR đƣợc gắn vào vector tách dòng pBT [4] biến nạp vào tế bào ... lại vị trí (trình tự) xácđịnh Do đặc tính RE khả nhận biết cắt trìnhtựxácđịnh phân tử DNA, dựa vào khả này, ngƣời ta chia chúng làm ba loại: (1) Khi enzym nhận biết đƣợc trình tự, di chuyển ... PRISM 3100 Avant Genetic Analyzer 3.3 XÁCĐỊNHTRÌNHTỰ NUCLEOTIT CỦA MỘT SỐ ĐOẠN TRONG GENOME CỦA RGSV Các trìnhtự RGSV thu đƣợc máy xácđịnhtrìnhtựtự động ABI PRISM® 3100 Avant Genetic...
... 0,5µl dH2O 2.5µl Tổng thể tích 10µl 2.3.8 Phương pháp xácđịnhtrìnhtự nucleotid đoạn gen tách dòng Trìnhtự nucleotid đoạn gen tách dòng xácđịnh theo phương pháp tổng hợp Sanger cs [1], [12], ... PCR 43 3.2 Tách dòng đọc trìnhtự gen cry1C .44 3.2.1 Tách dòng gen cry1C 44 3.2.2 Xácđịnhtrìnhtự đoạn gen cry1C 49 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .49 TÀI LIỆU ... đọc trìnhtự xếp vào 70 họ Gen cry tách dòng cập nhật sở liệu Crickmore gen cry56Aa23 (05/2012) [42] Nhóm gen cry1: Đây nhóm gen nghiên cứu chi tiết nhất, có 244 gen cry1 phân tích trìnhtự nucleotit...
... khuynh hng úng cc li gõy tc nghn mch mỏu Nguyờn nhõn l s thay th A thnh T gia b ba mó húa th trờn ADN quy nh tng hp protein hemoglobin dn n b ba mó húa axit amin glutamic thnh axit amin valin lm...
... cho giải trìnhtựtrình bày phần phương pháp nghiên cứu Quá trình giải trìnhtự thực máy giải trìnhtựtự động ABI 3100 Sau giải trìnhtự gen mã hóa kháng nguyên HA virus H5N1, trìnhtự phân tích ... đọc trìnhtự 38 3.5 Kết xácđịnhtrìnhtự Sử dụng DNA plasmit cho phản ứng PCR giải trìnhtự với việc sử dụng sinh phẩm BigDyeR Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit Applied Biosystems, quy trình ... Loại dịch thu cặn - Làm khô DNA - Thêm vào 15 µl hidiformamide - Biến tính phút 950C - Đưa mẫu vào máy xácđịnhtrìnhtựtự động ABI 3100 29 PHẦN 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết tách chiết RNA tổng...
... DNA tái tổ hợp 47 2.4.5 Giải trìnhtrìnhtự xử lý số liệu 48 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 51 3.1 Kết thu nhận, giải trìnhtrìnhtựxácđịnh gen E6 HPV-16 L1 HPV-18 ... VECTOR pCR2.1 TOPO) VÀ THU NHẬN DNA SẢN PHẨM DÒNG HOÁ GIẢI TRÌNHTỰ XỬ LÝ VÀ THU NHẬN CHUỖI GEN EBNA1 VÀ E6, L1 (Thành phần trìnhtự Nucleotide) SO SÁNH PHÂN TÍCH CHUỖI GEN EBV VÀ HPV-16/ HPV-18 ... thể Do biến động đa dạng này, việc định týp định chủng HPV phức tạp, đòi hỏi kỹ thuật cao xác Việc định týp chủng (biến thể) HPV dựa vào kết phân tích xácđịnh mức độ đồng thành phần nucleotid,...
... điện di khác Các băng ADNxácđịnh nhờ việc gắn đồng vị phóng xạ vào mồi, ddNTP Dựa vào để đọc trìnhtựADN Các bước tiến hành: - Cắt ADN enzyme cắt giới hạn, tách đoạn ADN cắt thành sợi đơn ... thêm ddCTP vào hỗn hợp phản ứng tổng hợp ADNtrình tổng hợp chỗi polipeptid dừng lại vị trí C Nếu thêm ddGTP vào hỗn hợp gặp ddGTP chuỗi polynucleotit dừng lại vị trí G + Điện di đoạn ADN với việc ... - Thu kết phương pháp tự ghi, chụp ảnh, làm phim phóng xạ tự ghi cho gel điện di đọc trìnhtự nucleotid điện di đồ mẫu từ cực âm gel lên cực dương theo nguyên tắc: Đoạn ADN ngắn dịch chuyển xa...
... tự đọc primer ITS4 primer ITS5 so sánh phần mềm Clustal chọn trìnhtự đọc đáng tin cậy So sánh trìnhtự PUL-Q2-4 RN-LA-10 phần mềm Clustal, tìm khác biệt So sánh trìnhtự PUL-Q2-4 với trìnhtự ... cặp GC Primer chọn phải đặc trưng cho trìnhtự DNA cần khuếch đại, không trùng với trìnhtự gen Trìnhtự nằm hai primer không lớn, phản ứng PCR tối ưu trìnhtự nhỏ kb (Hồ Huỳnh Thùy Dương, 1998) ... 19 2.4.3 Đọc trìnhtự sản phẩm PCR Có hai phương pháp đọc trìnhtự sản phẩm PCR: Một là, người ta tạo dòng phụ (subclone) sản phẩm PCR sau đọc trìnhtự subclone Hai là, đọc trìnhtự sản phẩm PCR...
... địnhtrìnhtự Kết xácđịnhtrìnhtự nucleotid sản phẩm PCR từ mẫu máu người Việt nam (sản phẩm PCR từ mẫu tóc chưa gửi xácđịnhtrình tự) sau: So sánh trìnhtự nucleotid sản phẩm PCR mà thu với trình ... gắn vào vector Kênh 5: Chỉ thị phân tửADNXácđịnhtrìnhtự đoạn gen vùng siêu biến I ADN plasmit sau kiểm tra khẳng định gắn sản phẩm PCR gửi cho “BIOSERVICE UNIT”, Bangkok, Thailand để xácđịnh ... cộng [10] Trìnhtự đoạn gen vùng siêu biến I Công ty “BIOSERVICE UNIT”, Bangkok, Thailand xácđịnh theo phương pháp Sanger KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Tách chiết ADN tổng số từ mẫu tóc máu ADN tổng số...