... ấ
•
Bi t hóa t bào g cệ ế ố là quá trình bi n đ i t ế ổ ừ
t bào g c không có ch c năng chuyên bi t ế ố ứ ệ
thành t bào chuyên hóaế .
E. Bi t hóa t bào g c.ệ ế ố
D. NUÔI C Y T BÀO G CẤ Ế Ố
∗
Mu ... t ậ ề ế
bào
Thu nh n x ng đùi chu tậ ươ ộ
Lóc b ph n c và th tỏ ầ ơ ị
R a l i b ng dung d ch PBSử ạ ằ ị
C t b hai đ u x ng đùiắ ỏ ầ ươ
Nuôi t bào trong d ng c nuôi phù h pế ụ ụ ợ
2. Nuôi c y ... ề
l n th nh tầ ứ ấ
G m các b c: thu nh n mô ồ ướ ậ tách r i các ờ
t bào ế nuôi c y t bào ế
Thu nh n và nuôi c y t bào g c t t y x ng chu tậ ấ ế ố ừ ủ ươ ộ
Đùi chu t v a đ c thu nh nộ ừ...
... NỘI DUNG
1. CẤY CHUYỂN TẾBÀO LỚP ĐƠN
2. CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN PHÙ TẾ BÀO
3. ĐÔNG LẠNH TẾ BÀO
4. GIẢI ĐÔNG TẾ BÀO
5. XÁC ĐỊNH SỐ LƯỢNG TẾ BÀO
6. CHUẨN BỊ TẾBÀO CHO VẬN CHUYỂN
24
... tế bào
Nạp buồng đếm hồng cầu
Đếm tế bào
Tính tổng số lượng tếbào
Nhuộm tếbào để xác định sức sống của tếbào
Tính số lượng tếbào sống
34
CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN
PHÙ TẾ ... ĐỊNH SỐ LƯỢNG TẾ BÀO
6. CHUẨN BỊ TẾBÀO CHO VẬN CHUYỂN
15
XÁC ĐỊNH SỐ LƯỢNG TẾ BÀO
Chuẩn bị huyền phù tế bào
- Đối với các tếbào phát triển trong nuôicấy lớp đơn, tách
tế bào từ bề mặt...
... (SE).
Thời gian nuôicấy (ngày)
Mật độ tếbào (tế bào/ mL)
Nuôi cấy
lỏng lắc
Nuôi cấy
lỏng tĩnh
Thời gian nuôicấy (ngày)
Nuôi cấy
lỏng lắc
Nuôi cấy
lỏng tĩnh ...
Tăng trưởng huyền phù tếbào
Sự tăng trưởng của huyền phù tếbào trong bình
nuôi cấy lắc cao hơn rất nhiều so với hệ thống nuôi
cấy lỏng tĩnh (Hình 5, 6). Nuôicấy lắc thúc đẩy sự
phân ... trưởng, cho phép thu nhận tế
bào bằng cách lọc, và quan trọng là tếbào trong nuôi
cấy lỏng vẫn giữ được khả năng phát triển thành mô
sẹo (Phillips et al., 1996). Nuôicấytếbào trong các
bình...
... được thu từ những tếbàonuôicấy chớ không phải thu
từ các động vật thực nghiệm. Đó là sản phẩm của các tếbào lai tạo giữa một tếbào
Thử nghiệm phân lập và nuôicấytếbào ung thư cổ tử ... phần tếbào còn lại. Toàn bộ phần tế
bào thu được sẽ được huyền phù với môi trường nuôicấy và chuyển vào đóa nuôi.
1.4.2.3. Phương pháp tách tếbào bằng enzym
Sử dụng enzym để tách tếbào ... tử của tếbào ung thư và mang
khả năng sản xuất ra các kháng thể của tếbào B. Người ta có thể tách riêng từng tế
bào lai và nuôi riêng rẽ. Mỗi tếbào sẽ nhân lên thành một dòng tếbào thuần...
... bào trần với nuôi
cấy các tếbào vẫn còn thành tế bào:
So với quy trình nuôicấy mô tếbào bình thường thì
nuôi cấytếbào trần thường yêu cầu 1 số thay đổi do
bản chất của tếbào trần. Các ... sinh trưởng để kích
thích sự phân chia tế bào.
Nuôi cấytếbào trần có nhiều ưu thế hơn so với nuôi
cấy các tếbào vẫn còn thành tế bào
6. Dung hợp tếbào trần
Dung hợp là hiện tượng cắt ... gen. Tếbào với kiểu gen
biến đổi sẽ được bảo tồn khi tái sinh tếbào thành cây
hoàn chỉnh. Điều này rất khó thực hiện ở các tếbào
vẫn còn thành tế bào.
3.So sánh đặc điểm nuôicấytế bào...
... huyền phù tế bào)
39
NỘI DUNG
1. CẤY CHUYỂN TẾBÀO LỚP ĐƠN
2. CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN PHÙ TẾ BÀO
3. ĐÔNG LẠNH TẾ BÀO
4. GIẢI ĐÔNG TẾ BÀO
5. XÁC ĐỊNH SỐ LƯỢNG TẾ BÀO
6. CHUẨN BỊ TẾBÀO CHO ... của tếbào đông lạnh….
21
NỘI DUNG
1. CẤY CHUYỂN TẾBÀO LỚP ĐƠN
2. CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN PHÙ TẾ BÀO
3. ĐÔNG LẠNH TẾ BÀO
4. GIẢI ĐÔNG TẾ BÀO
5. XÁC ĐỊNH SỐ LƯỢNG TẾ BÀO
6. CHUẨN BỊ TẾ ... DUNG
1. CẤY CHUYỂN TẾBÀO LỚP ĐƠN
2. CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN PHÙ TẾ BÀO
3. ĐÔNG LẠNH TẾ BÀO
4. GIẢI ĐÔNG TẾ BÀO
5. XÁC ĐỊNH SỐ LƯỢNG TẾ BÀO
6. CHUẨN BỊ TẾBÀO CHO VẬN CHUYỂN
28
CẤY CHUYỂN...
... (BA), Kinetin.
•
Kích thích sự phân chia tế bào.
•
Tạo chồi.
•
Được tổng hợp ở rễ.
Các giai đoạn nuôicấy mô TBTV
•
Đưa mẫu nuôicấy lên môi trường nuôicấy thích hợp
(mỗi loài, giống cây trồng ... kính.
Lựa chọn mẫu nuôi cấy
Các đặc tính mong
muốn:
•
Dễ tiệt trùng
•
Non
•
Phản ứng tốt với môi
trường nuôi cấy
•
Ngọn (mô phân sinh
đỉnh)
•
Chồi nách
•
Hạt
•
Lá
Các giai đoạn nuôicấy mô TBTV
•
Tiệt ... là môi
trường nuôicấy chồi phổ biến nhất.
•
Môi trường Gamborgs B5 được sử dụng phổ biến
cho canh trường huyền phù tếbào (không chứa
NH
4
).
Môi trường
•
Khi cắt mẫu nuôicấy
ra khỏi cây...
... trình nuôi cấy. Tuy
nhiên, các tếbào không phân hóa trong nuôicấy huyền phù thường tạo thành một khối vài
trăm tế bào, các tếbào ở giữa khối có sự tiếp xúc với môi trường khác với các tếbào ... trong nuôicấytếbào T. cuspidata. Srinivasan và cs (1995) nghiên cứu
quá trình sản xuất taxol bằng nuôicấytếbào của T. baccata. Lee và cs (1995) đã nghiên cứu
sản xuất taxol bằng nuôicấytế ... tối ưu hóa hiệu suất nuôi cấy.
Chọn lọc các dòng tếbào cho năng suất cao. Các tếbào thực vật trong nuôicấy là
một tập hợp các đặc điểm sinh lý độc lập. Chọn lọc tếbào dựa vào khả năng tổng...
... effects (bệnh
tích tế bào- CPE).
D PRV có thể được nuôicấy trên một phổ rộng các loại tếbào như tế
bào phổi thỏ (rabbit lung-ZP), tếbào thận thỏ (rabbit kidney-
RK13), tếbào thận chuột Hamster ... kidney-BHK21), tế
bào thận heo (porcine kidney-PK15), tếbào thận khỉ xanh (green
monkey kidney-GMK), tếbàophổi chồn Vizon (mink lung-MK),
tế bào thận chồn furo (ferret kidney-FK), tếbàophôibào ... lọc 0.2 um và đưa vào môi trường tế bào.
• Mẫu huyết thanh cho qua lọc 0.2 um và đưa vào môi trường tế
bào.
b) Chuẩn b
ị môi trường tếbào
D Cả hai loại tếbào PK-15 và BT được phát triển...
... thuật sinh
học là tạo ra bất cứ mảnh tếbào nào
hay hệ thống cơ quan nào để cho nó
được người bệnh chấp nhận.
Nghiên cứu sản xuất da
nuôi bằng tếbàogốc
Các bác sĩ tại bệnh viện Concord ... sở để
cứu bạn. Giáo sư Maitz đã can thiệp
và lấy đi những tếbào bị hủy hoại của
tôi. Họ đã dùng một loại bàn chải chà
lên thịt để bào đi những lớp da bị
... Khi
một đám cháy rừng trùm lên mảnh đất
của nông gia chăn nuôi gia súc này
hồi năm ngoái, ông đã bị bỏng nặng
đến mức nhân viên y tế không nghĩ là
ông sẽ qua khỏi.
Ông Schulte nói: "Khi...
... thấy vật chất trong tếbào chất dương tính mạnh trong
tế bào chất của mô bào và những tếbào thực bào hoạt hóa.
Không có sự khác biệt nào về dạng tếbào nhuộm hoặc sự nhuộm nội bào giữa hai
phương ... cấy được cấy chuyển
bằng cách tách tếbào PK15 sử dụng trypsin versene, tái hòa tan những tếbào tách
này trong 20 ml MEM-G, đưa chúng vào bình nuôicấy 75 ml sạch ở nồng độ 4 x
10
5
tế bào/ ... trong tếbào chất và nhân tếbào của những nang trong hạch lympho
phổi (hình 2)
13
thể vùi riêng biệt hoặc sự tích đọng tếbào chất đến sự hòa nhập chất nhuộm ở tế
bào chất...
... trình nuôi cấy. Tuy
nhiên, các tếbào không phân hóa trong nuôicấy huyền phù thường tạo thành một khối vài
trăm tế bào, các tếbào ở giữa khối có sự tiếp xúc với môi trường khác với các tếbào ... trong nuôicấytếbào T. cuspidata. Srinivasan và cs (1995) nghiên cứu
quá trình sản xuất taxol bằng nuôicấytếbào của T. baccata. Lee và cs (1995) đã nghiên cứu
sản xuất taxol bằng nuôicấytế ... tếbàonuôi
cấy (Rao 2000, Dixon 1999). Tếbàonuôicấy tích lũy một lượng lớn hợp chất thứ cấp chỉ khi
ở những điều kiện đặc biệt như (1) chọn lựa thành phần môi trường và điều kiện nuôi cấy...
... thuật nuôicấytếbào
a. Giới thiệu về kỹ thuật nuôicấytếbào
Nuôi cấytếbào là là đơn vị nuôicấy nhỏ nhất, là kỹ thuật duy trì và phát triển các tếbào
ngoài cơ thể sống, các tếbào trong ... chuyên biệt của tế bào. Nuôicấytếbào
Kỹ thuật nuôicấytếbào được tiến hành lần đầu vào năm 1907 bởi Harrison với những tế
bào thần kinh ếch.
Ngày nay, kỹ thuật nuôicấytếbào được ứng dụng ...
3.4.1. Chẩn đoán bằng kỹ thuật nuôicấytếbào 15
• Giới thiệu về kỹ thuật nuôicấytếbào 15
• Chẩn đoán virus lở mồm long móng bằng kỹ thuật nuôicấytếbào 19
3.4.2. Các kỹ thuật chẩn...
... của tế bào.
2.2 Các loại tếbàonuôi cấy: Tếbào biểu mô, Nguyên sợi bào, Tếbào cơ,
Tếbào thần kinh, Lympho bào.
2.3 Một số máy móc thiết bị cần thiết
Tủ cấy vô trùng chuyên nuôicấytế bào, ... Kiểm soát việc nuôi cấp tế bào.
- Đưa tếbào vào môi trường nuôicấy tiệt trùng.
- Mật độ lúc cấp 10
4
- 10
5
tếbào tb/ml.
- Sau 3 – 4 ngày đạt 10
6
tếbào hoặc 10
5
tế bào/ cm
2
/bề ... Triệu chứng và bệnh tích 14
2. Phương pháp nuôicấytế bào. 16
2.1 Khái niệm 16
2.2 Các loại tếbàonuôi cấy: Tếbào biểu mô, Nguyên sợi bào, Tếbào cơ, 16
2.3 Một số máy móc thiết bị cần...
... (duy trì và/hay tăng sinh)
các tế bào, mô và các cơ quan
• Các kiểu nuôicấy mô
– Nuôicấy cơ quan
– Nuôicấy mô
– Nuôicấytế bào
Experimental Methods 2006 5
Nuôi cấy mô
• Các mảnh của mô được ... trong tếbào (like viral DNA)
Experimental Methods 2006 6
Nuôi cấytế bào
• Mô được tách thành tếbào đơn, hầu hết
là bằng enzyme, thành huyền phù tế bào
được nuôicấy in vitro như monolayer hay
nuôi ... Thường chứa kiểu êế bào đơn
– Có thể tăng sinh liên tục trong nhiều thế hệ
– Có hai kiểu dòng tếbào khi nuôi cấy:
• Dòng tế bào
• Dòng tếbào liên tục
Các kiểu nuôicấytế bào
Experimental Methods...