... PGS.TS Trần Thị
Dân, chúng tôi thực hiện đề tài: “Ứng dụng kỹ thu t RT - PCR để phát hiện virus
gây hộichứngrốiloạn sinh sản và hô hấp ở lợn”.
1
Enzyme
Taq polymerase chịu nhiệt ...
Porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) là tác nhân
chính gây hộichứngrốiloạn sinh sản và hô hấp ở lợn – PRRS (porcine reproductive
and respiratory syndrome). Đây là một bệnh ... gần đây, kỹ thu t sinh học phân tử đã phát triển một cách
mạnh mẽ và chứng minh được vai trò ưu việt, trong đó kỹ thu t PCR ngày càng được
ứng dụng rộng rãi hơn. Đây là một kỹ thu t có độ chính...
... QUỐC, Đại Học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh. Đề tài:
“ỨNG DỤNG KỸ THU T RT-PCR ĐỂ PHÁT HIỆN VIRUS GÂY HỘICHỨNG
RỐI LOẠN SINH SẢN VÀ HÔ HẤP Ở LỢN”. Đề tài được thực hiện từ ngày
10/03/2005 đến ngày ...
***00***
KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP
ỨNG DỤNG KỸ THU T RT - PCR ĐỂ PHÁT HIỆN VIRUS
GÂY HỘICHỨNGRỐILOẠN SINH SẢN
VÀ HÔ HẤP Ở LỢN
Ngành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Niên ... PGS.TS Trần Thị
Dân, chúng tôi thực hiện đề tài: “Ứng dụng kỹ thu t RT - PCR để phát hiện virus
gây hộichứngrốiloạn sinh sản và hô hấp ở lợn”.
1
4.3. Điện di RNA trên mẫu ly trích...
...
tiêu quang an
nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lí của lợn mắc
hội chứngrốiloạn hô hấp và sinh sản (prrs),
Sử dụng kỹ thu t hóa mô miễn dịch để Phát HIệN VIRUS
Chuyên ngành : Bệnh ...
tiêu quang an
nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lí của lợn mắc
hội chứngrốiloạn hô hấp và sinh sản (prrs),
Sử dụng kỹ thu t hóa mô miễn dịch để Phát HIệN VIRUS
Luận án tiến sỹ ... ào tạo Sau ại học, Khoa Thú Y
tr-ờng Đại học Nông nghiệp Hà Nội đà tạo cho tôi những điều kiện thu n lợi
nhất để tôi hoàn thành ch-ơng trình học tập và nghiên cứu của mình.
Tôi xin chân thành...
... làm rõ thêm các triệu chứng lâm sàng, các biến đổi bệnh lý đại thể
và vi thể của lợn sau cai sữa và lợn choai mắc hộichứngrốiloạn sinh sản và hô hấp (PRRS).
Triệu chứng đầu tiên đối với ... (2007) đã công bố.
14
Đặc điểm bệnh lý Hộichứngrốiloạn sinh sản và hô hấp (PRRS) ở lợn con
sau cai sữa và lợn choai và xác định bằng kỹ thu t miễn dịch huỳnh quang
Nguyễn Thị Lan ... chỉ tiêu lâm sàng, chỉ tiêu máu ở lợn
mắc hộichứng rố loạn sinh sản và hô hấp (bệnh tai xanh) trên một số đàn lợn tại tỉnh Hải
Dương và Hưng Yên”, Hội thảo PRRS và bệnh liên cầu khuẩn ở lợn,...
... tiêu máu ở lợn mắc
hội chứng rố loạn sinh sản và hô hấp (bệnh
tai xanh) trên một số đàn lợn tại tỉnh Hải
Dương và Hưng Yên”, Hội thảo Hộichứng
rối loạn hô hấp - sinh sản và bệnh liên cầu ... dịch ở Hà Lan, được xác định là
nguyên nhân chính gây ra hộichứngrốiloạn
hô hấp và sinh sản ở lợn. Virus thu c nhóm
A
rterivirus, thu c họ Arteriviridae, bộ
Nidovirales, có cấu trúc hệ gen ... 306 TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI
CHẨN ĐOÁN HỘICHỨNGRỐILOẠN HÔ HẤP VÀ SINH SẢN (PRRS)
Ở LỢN CON CAI SỮA BẰNG KỸ THU T BỆNH LÝ VÀ KỸ THU T RT - PCR
Diagnosis of Porcine Reproductive...
...
tiêu quang an
nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lí của lợn mắc
hội chứngrốiloạn hô hấp và sinh sản (prrs),
Sử dụng kỹ thu t hóa mô miễn dịch để Phát HIệN VIRUS
Chuyờn ngnh : Bệnh ...
“Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lí của lợn mắc hộichứngrối
loạn hô hấp và sinh sản (PRRS), sử dụng kỹ thu t hóa mô miễn dịch để
phát hiện virus”.
+ ... ĐIỂM BỆNH LÝ CHỦ YẾU CỦA
LỢN MẮC PRRS
3.2.1. Kết quả xác định triệu chứng lâm sàng đặc trưng của lợn mắc PRRS
Bảng 3.7. Triệu chứng lâm sàng của lợn mắc PRRS
(n=100 cho mỗi loại lợn theo dõi,...
... Việc hấp riêng không có ý nghĩa để bất hoạt RNase. Tất cả các dung dịch trong
phòng thí nghiệm đều cần phải được xử lý với DEPC 0.05% bằng cách ủ qua đêm. Tất
cả các dịch trên cần phải được hấp ... trong khi thực
hiện các thao tác tinh sạch và các phân tích sau đó. Sau đây là một số chú ý và kỹ thu t
cần ghi nhớ khi làm việc với RNA:
1. Nguồn lây nhiễm RNA thông thường là RNA của da, vi ... và đã được xử lý với DEPC vào để đạt
thể tích là 600ml.
+ Chia nhỏ ra mỗi 200ml và tiến hành hấp khử trùng. Quá trình này có thể làm
cho dung dịch buffer chuyển sang màu vàng nhưng điều này...
... không thu nhận được RNA của virus. Để chứng
minh giả thuyết này, chúng tôi đã tiến hành lại quá trình ly trích bằng TRIzol một lần
nữa trên các mẫu ban đầu và một số mẫu khác nhưng vẫn không thu ... virus PRRS tại thời điểm lấy mẫu.
4.3 Điện di RNA trên mẫu ly trích
Để tạo điều kiện thu n lợi cho việc thu nhận RNA tổng số, chúng tôi đã tiến
hành ly trích theo quy trình sử dụng TRIzol trên ... chúng tôi chỉ kiểm tra khả năng thu
nhận RNA sau quá trình ly trích nên với kết quả này có thể kết luận với quy trình ly
trích trong thí nghiệm hoàn toàn có thể thu nhận được RNA nếu có sự tồn...
... huyết thanh
Mẫu máu được thu nhận từ những heo có biểu hiện lâm sàng nghi nhiễm virus
PRRS (sẩy thai, heo con sinh ra chết). Sau đó, mẫu máu được để đông tự nhiên và thu
lấy phần huyết thanh ... nhau.
Bước 3: Kết tủa RNA
- Thu lấy phần dịch không màu bên trên và cho vào một eppendorf mới. Thêm
0.5ml isopropanol và 1µl glycerol vào eppendorf có chứa dịch thu được.
- Vortex để trộn đều, ...
3.5.5. Kỹ thu t RT-PCR trên RNA của virus
Để thực hiện phản ứng phiên mã ngược và khuếch đại đoạn cDNA sau phiên
mã ngược với độ nhạy và độ đặc hiệu cao, chúng tôi sử dụng kỹ thu t RT-PCR...
... RT-PCR. Ông kết luận kết quả
phản ứng RT-PCR phụ thu c rất nhiều vào mẫu phân tích (7).Wagstrom và cộng sự
trong nghiên cứu của mình đã chứng minh kỹ thu t RT-PCR trực tiếp có khả năng
phát hiện ... cần được kiểm tra để phát hiện tình
trạng nhiễm virus PRRS của đàn.
2.2.4. Kỹ thu t PCR để phát hiện PRRSV
Kỹ thu t PCR được phát triển để phát hiện RNA của virus PRRS trong các mẫu
bệnh phẩm. ... phản ứng PCR giữa các phòng thí nghiệm khác nhau có thể sẽ khác
nhau, phụ thu c vào các điều kiện về mẫu; qui trình thu nhận và trữ mẫu; qui trình
chiết tách, tinh sạch; trang thiết bị phòng...
... cell
IL-12
IFN-gamma
Virus-infected host cell
IFN-α
IFN-α
IFN-α
Seminar virus PRRS
HỘI CHỨNGRỐILOẠN SINH SẢN VÀ HÔ HẤP TRÊN HEO ( PRRS)
Hội chứngrốiloạn sinh sản và hô hấp trên heo (PRRS) là tên một bệnh mới được ghi
nhận ... hiểm này là Hộichứngrốiloạn sinh sản và hô hấp ở heo (PRRS). Ở
Việt Nam, bệnh được phát hiện vào năm 1997 trên đàn heo nhập từ Mỹ. Ngày nay, Hội
chứng rốiloạn sinh sản và hô hấp ở heo đã ... biệt khi thời tiết thay đổi tạo thu n lợi cho vi rút PRRS
và các mầm bệnh khác phát triển gây bệnh.
1.2. Nguyên nhân gây ra PRRS
Hộichứngloạn sản và hô hấp trên heo (PRRS) do virus gây...
... ngành chăn nuôi loại trừ bệnh.
22
Seminar virus PRRS
HỘI CHỨNGRỐILOẠN SINH SẢN VÀ HÔ HẤP TRÊN HEO ( PRRS)
Hội chứngrốiloạn sinh sản và hô hấp trên heo (PRRS) là tên một bệnh mới được ghi
nhận ... hiểm này là Hộichứngrốiloạn sinh sản và hô hấp ở
heo (PRRS). Ở Việt Nam, bệnh được phát hiện vào năm 1997 trên đàn heo nhập từ
Mỹ. Ngày nay, Hộichứngrốiloạn sinh sản và hô hấp ở heo đã ... biệt khi thời tiết thay đổi tạo thu n lợi cho vi rút PRRS
và các mầm bệnh khác phát triển gây bệnh.
1.2. Nguyên nhân gây ra PRRS
Hộichứngloạn sản và hô hấp trên heo (PRRS) do virus gây...