các bước chính chế tạo plasmid tái tổ hợp

ỨNG DỤNG tạo PLASMID tái tổ hợp để NGHIÊN cứu các CHỦNG VI rút RHINO lưu HÀNH tại KHÁNH hòa và BÌNH ĐỊNH năm 2008 2010

ỨNG DỤNG tạo PLASMID tái tổ hợp để NGHIÊN cứu các CHỦNG VI rút RHINO lưu HÀNH tại KHÁNH hòa và BÌNH ĐỊNH năm 2008 2010

Ngày tải lên : 21/08/2015, 11:20
... Đo n chèn Vi rút Rhino (~923bp) Hình 1: C u trúc c a plasmid tái t h p thu đư c A B Hình 2: (A) Cây ph h phân loài c a vi rút Rhino nghiên c u (B) T l phân ... loài có s khác bi t rõ theo nhóm tu i, HRV-C ch y u m c tr nh , HRV-A l i ch y u nhóm tu i l n Các ch ng có s bi n đ i đa d ng trình t nucleotit tương ng v i nhi u ki u huy t khác S bi n đ i...
  • 3
  • 239
  • 1
Các bước sản xuất enzyme Protease tái tổ hợp từ chủng Bacillus sp Việt Nam biết trên genbank có một số trình tự mã hóa cho protein của một số loài trong chi Bacillus.

Các bước sản xuất enzyme Protease tái tổ hợp từ chủng Bacillus sp Việt Nam biết trên genbank có một số trình tự mã hóa cho protein của một số loài trong chi Bacillus.

Ngày tải lên : 23/04/2013, 09:34
... gen tương đồng) tiến hành bước Bước 3: Tạo vector tái tổ hợp Để nhân dòng gen quan tâm ta lắp ghép gen nhân PCR vào vector nhân dòng để tạo vector tái tổ hợp SV: Vũ Xuân Tạo 13 K5 Công nghệ sinh ... ghi Bước 6: Nuôi cấy lên men tiến hành thu sản phẩm enzyme Protease tái tổ hợp Sử dụng phương pháp lên men: lên men bề mặt hay lên men chìm Bước 7: Tách chiết tinh thu chế phẩm enzyme Protease tái ... Protease mạnh Các vi khuẩn thường tổng hợp Protease hoạt động thích hợp vùng pH trung tính kiềm yếu.[2] Các Protease trung tính vi khuẩn hoạt động khoảng pH hẹp (pH 58) có khả chịu nhiệt thấp Các Protease...
  • 18
  • 1.6K
  • 13
LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC SINH HỌC: NGHIÊN CỨU CHẾ TẠO GELATINASE TÁI TỔ HỢP VÀ ĐÁNH GIÁ ĐẶC TÍNH CỦA ENZYME

LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC SINH HỌC: NGHIÊN CỨU CHẾ TẠO GELATINASE TÁI TỔ HỢP VÀ ĐÁNH GIÁ ĐẶC TÍNH CỦA ENZYME

Ngày tải lên : 12/08/2016, 08:17
... gelatinase tái tổ hợp đánh giá đặc tính enzyme ” MỤC TIÊU 2.1 Mục tiêu chung Chế tạo gelatinase tái tổ hợp đánh giá đặc tính gelatinase tái tổ hợp 2.2 Mục tiêu cụ thể Chế tạo enzyme tái tổ hợp gelatinase ... hóa kỹ thuật công nghệ tạo enzyme tái tổ hợp nói chung công nghệ tạo gelatinase tái tổ hợp nói riêng - Đưa điều kiện để chế tạo gelatinase tái tổ hợp ứng dụng xử lý phụ phẩm chế biến cá da trơn ... tái tổ hợp 58 3.1 Đánh giá hoạt tính gelatinase gelatin bột .58 3.2 Xác định đặc tính vật lý gelatinase tái tổ hợp 60 3.3 Xác định đặc tính hóa học gelatinase tái tổ hợp...
  • 80
  • 1.8K
  • 0
Tóm tắt luận văn thạc sỹ: Nghiên cứu chế tạo gelatinase tái tổ hợp và đánh giá đặc tính của enzyme

Tóm tắt luận văn thạc sỹ: Nghiên cứu chế tạo gelatinase tái tổ hợp và đánh giá đặc tính của enzyme

Ngày tải lên : 12/08/2016, 14:25
... hóa kỹ thuật công nghệ tạo enzyme tái tổ hợp nói chung công nghệ tạo gelatinase tái tổ hợp nói riêng - Đưa điều kiện để chế tạo gelatinase tái tổ hợp ứng dụng xử lý phụ phẩm chế biến cá da trơn ... 2.2 Mục tiêu cụ thể Chế tạo enzyme tái tổ hợp gelatinase Xác định điều kiện thích hợp để biểu gen mã hóa gelatinase Xác định đặc tính gelatinase tái tổ hợp, bao gồm: đặc tính vật lý, ... biểu 16h - Sự phối hợp ion phù hợp cho tăng sinh chủng vi khuẩn tái tổ hợp E.coli BL21(DE3) - pET 32a(+)/GelE 1mM Ca2+ + 1mM Mg2+ + 1mM Mn2+ Đã xác định đặc tính gelatinase tái tổ hợp 3.1 Khả phân...
  • 25
  • 782
  • 0
chế tạo vật liệu tổ hợp pzt-nife-cofe bằng phương pháp phún xạ các màng mỏng sắt từ lên đế áp điện pzt phân cực quang và phân cực dọc

chế tạo vật liệu tổ hợp pzt-nife-cofe bằng phương pháp phún xạ các màng mỏng sắt từ lên đế áp điện pzt phân cực quang và phân cực dọc

Ngày tải lên : 12/08/2015, 19:54
... tin Một số loại vật liệu tổ hợp đa pha phương pháp chế tạo tổng kết bảng 1.2 14 Bảng 1.2 Một số vật liệu multiferroics tổ hợp đa pha Vật liệu tổ hợp Phương pháp chế tạo BaTiO3-CoFe2O4 - Phản ... Nhiệt độ chế tạo cao làm mát Pb bay Ngoài ra, súng điện tử tích hợp bên chuông chính, nên nhiệt độ cao ảnh hưởng đến thiết bị Các thông số chế tạo cho bảng dưới: Bảng 2.2 Thông số chế tạo mẫu ... mong muốn trình chế tạo vật liệu tổ hợp loại làm xuất pha thứ 3, dẫn tới việc giảm độ phân cực điện tính chất từ giảo chúng pha riêng rẽ Để vượt qua trở ngại này, việc chế tạo tổ hợp dạng liên...
  • 75
  • 287
  • 1
Bài giảng các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật, thực vật, vi sinh vật và tạo ADN tái tổ hợp

Bài giảng các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật, thực vật, vi sinh vật và tạo ADN tái tổ hợp

Ngày tải lên : 14/06/2016, 20:34
... tạo phân tử lai Cắt phân tử DNA lai enzyme EcoRI, ta phân tử lai có hai đầu lệch Phương pháp dùng đầu lệch Dùng đoạn nối linker tạo DNA tái tổ hợp Tạo vector tái tổ hợp Để tạo vector tái tổ hợp, ... DNA tái tổ hợp dùng để thiết lập ngân hàng gen, cDNA tổng hợp protein, enzyme, hormone, Nh ững yêu cầu DNA tái tổ h ợp - DNA tái tổ hợp phải đạt yêu cầu cần thiết vector chuyển gen - DNA tái tổ ... hợp plasmid tái tổ hợp mang gen chuyển chép tế bào vi khuẩn phân chia Sau đó, hàng triệu plasmid tái tổ hợp mang gen chuyển tách chiết từ tế bào vi khuẩn đoạn gen chuyển tách từ plasmid tái tổ...
  • 59
  • 727
  • 0
Thiết kế Ti-plasmid tái tổ hợp pBI121 mang gen mã hóa kháng nguyên glycoprotein của virus dại phục vụ chuyển gen

Thiết kế Ti-plasmid tái tổ hợp pBI121 mang gen mã hóa kháng nguyên glycoprotein của virus dại phục vụ chuyển gen

Ngày tải lên : 30/10/2012, 14:53
... Ti -plasmid tái tổ hợp enzym hạn chế 35 3.4 Kết biến nạp Ti -plasmid tái tổ hợp pbi121 mang gen glyP vào tế bào A tumefaciens .36 3.3.1 Biến nạp Ti -plasmid tái tổ hợp ... tách plasmid tái tổ hợp dòng khuẩn lạc âm tính 2,3,4 Plasmid dòng khuẩn lạc dơng tính 3.3.3 Kiểm tra có mặt gen GlyP Ti -plasmid tái tổ hợp enzym hạn chế Lấy plasmid vừa tách đợc cắt enzym hạn chế ... Kiểm tra có mặt vectơ Ti -plasmid tái tổ hợp dòng khuẩn lạc colony-PCR cắt enzym hạn chế Các dòng khuẩn lạc A tumefaciens đợc tạo nhờ xung điện chứa Ti -plasmid tái tổ hợp đợc phát phơng pháp chọn...
  • 47
  • 975
  • 5
BÁO CÁO " NGHIÊN CỨU CHẾ TẠO VẬT LIỆU TỔ HỢP Ag-NANO/ CARBON NANOTUBES (CNTs)/ COTTON VÀ ỨNG DỤNG TRONG XỬ LÝ NƯỚC NHIỄM KHUẨN " doc

BÁO CÁO " NGHIÊN CỨU CHẾ TẠO VẬT LIỆU TỔ HỢP Ag-NANO/ CARBON NANOTUBES (CNTs)/ COTTON VÀ ỨNG DỤNG TRONG XỬ LÝ NƯỚC NHIỄM KHUẨN " doc

Ngày tải lên : 22/03/2014, 17:20
... độ 70oC 2.5 Tổng hợp vật liệu tổ hợp Ag-nano/CNTs-funct/cotton b ng phương pháp th y nhiệt Sau chức hóa CNTs acid HNO3, nhờ tương hợp tốt nhóm chức –COOH tạo bề mặt CNTs Ag, Ag nano tạo thành từ ... hương pháp tổng hợp thân thiện với môi trường hóa chất sử dụng không gây độc hại Hình 4: Dung dịch keo bạc nano 3.2 Vật liệu tổ hợp g-nano/CNTs-funct/cotton Kết chụp TEM vật liệu CNTs tổng hợp được ... thí nghiệm khoa Hóa, trường Đại học Bách Khoa – Đại Học Đà Nẵng, tổng hợp thành công vật liệu tổ hợp Ag-nano/ CNTs-funct/cotton Các kết phân tích chứng tỏ có hình thành bạc nano có kích thước...
  • 10
  • 869
  • 7
So sánh các hệ thống biểu hiện PROTEIN tái tổ hợp

So sánh các hệ thống biểu hiện PROTEIN tái tổ hợp

Ngày tải lên : 10/04/2014, 22:36
... MCS tạo nên bacmid tái tổ hợp Bacmid sau tách, tinh chuyển vào tế bào côn trùng, nơi mà nhân lên virus Baculovirus tái tổ hợp sau cho xâm nhiễm dòng tế bào nuôi cấy để tổng hợp protein tái tổ hợp ... protein tái tổ hợp việc dung hợp với protein tiết khác Vevtor protein dung hợp plasmid cho phép gene quan tâm dung hợp với gene mã hóa cho protein mang thích hợp Lựa chọn giúp tinh protein tái tổ hợp ... có đặc tính kiểm soát protein tái tổ hợp tạo Hai hệ thống biểu thông thường pET pBAD E coli Các hệ thống biểu có chế để bật hay tắt trình tổng hợp protein tái tổ hợp, hệ thống pBAD kiểm soát lượng...
  • 18
  • 2.7K
  • 23
Nghiên cứu tạo enzyme tái tổ hợp thủy phân lignocelluloses phục vụ sản xuất cồn nhiên liệu

Nghiên cứu tạo enzyme tái tổ hợp thủy phân lignocelluloses phục vụ sản xuất cồn nhiên liệu

Ngày tải lên : 16/04/2014, 12:31
... tra plasmid tái t h p 141 Hình III.3.6 Sơ ñ trình b t c p trao ñ i chéo gi a plasmid pPIC9 h gen c a t bào n m men ch P pastoris SMD1168 142 Hình III.3.7 K t qu n tính hóa plasmid tái ... endoglucanase tái t h p 104 III.1.5 Thuy t minh quy trình công ngh thu nh n endoglucanase tái t h p 108 III.2 NGHIÊN C U T O CH NG VÀ THU NH N EXOGLUCANASE TÁI T H P 113 III.2.1 Nghiên c u t o ch ng tái ... ñóng d u) Kim Anh M CL C M ð U DANH M C CÁC KÝ HI U VÀ CÁC CH VI T T T DANH M C CÁC B NG DANH M C CÁC HÌNH V , ð TH 10 CHƯƠNG I T NG QUAN ...
  • 372
  • 907
  • 3
Nghiên cứu xây dựng quy trình công nghệ sản xuất chế phẩm enzyme tái tổ hợp streptokinase và yếu tố hoạt hóa plasminogen mô (+PA) sử dụng trong điều trị

Nghiên cứu xây dựng quy trình công nghệ sản xuất chế phẩm enzyme tái tổ hợp streptokinase và yếu tố hoạt hóa plasminogen mô (+PA) sử dụng trong điều trị

Ngày tải lên : 16/04/2014, 12:38
... pháp sốc nhiệt Plasmid tái tổ hợp cắt kiểm tra enzyme hạn chế xác định trình tự nucleotide Tinh chế vector biểu (Kit Qiagen for maxi-prep) Một khuẩn lạc E coli DH5α tái tổ hợp mang plasmid cần tách ... .73 3.5.2 Thiết kế vector tái tổ hợp biểu msk .73 3.5.3 Biểu tinh SK từ chủng B subtilis tái tổ hợp 74 3.5.4 Đánh giá tính chất SK tái tổ hợp từ B subtilis 75 Ảnh ... tiêu sau: - Tạo chủng vi sinh vật tái tổ hợp sinh tổng hợp SK với suất cao xây dựng quy trình công nghệ sản xuất SK đạt tiêu chuẩn dược điển Việt Nam; - Tạo dòng tế bào sinh tổng hợp tPA cao...
  • 149
  • 1.4K
  • 4
Nghiên cứu chế tạo vật liệu tổ hợp thép o8s+hợp kim nhôm amr6 dùng trong hàn kết cấu

Nghiên cứu chế tạo vật liệu tổ hợp thép o8s+hợp kim nhôm amr6 dùng trong hàn kết cấu

Ngày tải lên : 05/05/2014, 16:38
... công nghệ chế tạo máy lĩnh vực tạo phôi vật liệu có tính đặc biệt bimetal thép – thép không gỉ, thép – hợp kim nhôm, thép – hợp kim đồng… Những vật liệu tổ hợp có tính kỹ thuật chế tạo công nghệ ... triển không phù hợp Do vậy, nhà nghiên cứu nước có đề xuất phương pháp công nghệ sử dụng lượng nổ để chế tạo vật liệu tổ hợp thép hợp kim nhôm Tấm vật liệu tổ hợp thép 08s – nhôm hợp kim nhôm; ... thép 08s + hợp kim nhôm AMг6 Chương 4: Kết thực nghiệm thảo luận -3- Mục tiêu nghiên cứu đề tài: - Nắm vững bí chế tạo vật liệu tổ hợp 08s + hợp kim nhôm AMг6 công nghệ mới; - Chế tạo thử sản...
  • 66
  • 554
  • 1
Chế tạo vật liệu tổ hợp chitosan fe3o4  Al(OH)3 cấu trúc nano và ứng dụng hấp phụ kim loại nặng (pb, cd, co, cu, ni) trong bảo vệ môi trường

Chế tạo vật liệu tổ hợp chitosan fe3o4 Al(OH)3 cấu trúc nano và ứng dụng hấp phụ kim loại nặng (pb, cd, co, cu, ni) trong bảo vệ môi trường

Ngày tải lên : 02/07/2014, 14:02
... đồng thời, phân chia thành cách nhỏ sau: Cách 2: Tổng hợp sẵn hạt nano từ tính Fe3O4 Quá trình bọc thực đồng thời với trình đồng trùng hợp tạo copolime Cách 3: Tổng hợp sẵn dung dịch polime Quá ... in-situ Mỗi cách bọc có ưu điểm nhược điểm riêng Bọc ex-situ: cách bọc mà hạt nano Fe3O4 copolime tổng hợp riêng rẽ, sau từ chất tổng hợp tiến hành trình bọc (Cách 1) Bọc in-situ: cách bọc mà ... hòa tan nước thích hợp với môi trường thể (pH=7,4) Các hóa chất sử dụng tương tự vật hóa chất chế tạo vật liệu hấp phụ có độ tinh khiết cao (Merck) 2.4.1 Tổng hợp Quá trình tổng hợp chất lỏng từ...
  • 84
  • 891
  • 1
Tạo vaccine tái tổ hợp ứng dụng trong phòng bệnh mủ gan do vi khuẩn edwarwsiella ictaluri gây ra ở cá tra khu vực đồng bằng sông cửu long

Tạo vaccine tái tổ hợp ứng dụng trong phòng bệnh mủ gan do vi khuẩn edwarwsiella ictaluri gây ra ở cá tra khu vực đồng bằng sông cửu long

Ngày tải lên : 04/07/2014, 15:22
... đoạn gen Bước 3: Cắt gen thể truyền phage T4 Bước 4: Nối gen kháng nguyên vào gen thể truyền Bước 5: Chuyển gen tái tổ hợp vào thể truyền Bước 6: Nuôi cấy thể truyền vi khuẩn e.Coli Bước 7: Thu ... dân II TẠO VACCINE TÁI TỔ HỢP Bước 1: Xác định đoạn gen mang kháng nguyên vi khuẩn… Chọn số protein có tính kháng nguyên E.ictaluri OmpA, OmpN, GAPDH Các protein biểu hệ thống E coli Bước 2: ... nặng, tổn thương lan rộng làm gan không chức khử độc lọc máu, làm chất độc tích tụ thể kết hợp với yếu tố khác làm cá chết Ngoài ra, tổ chức gan bị hư hại làm khả tiết mật gan Một số cá chết mổ...
  • 14
  • 543
  • 0
nghiên cứu điều kiện lên men và tinh chế interleukin-2 tái tổ hợp của người từ escherichia coli

nghiên cứu điều kiện lên men và tinh chế interleukin-2 tái tổ hợp của người từ escherichia coli

Ngày tải lên : 29/11/2014, 18:18
... s n ph m protein tái t h p mong mu n S n xu t protein tái t h p trình ñưa m t gen vào m t vi sinh v t ñ vi sinh v t t ng h p s n ph m protein mong mu n Các s n ph m protein tái t h p ñư c t o ... IL-2………………………………………………………12 2.3.3 S n ph m IL-2 tái t h p ng d ng………………………………………… 14 2.3.4 Các nghiên c u ng d ng IL-2 ñi u tr ung thư th gi i Vi t Nam.17 2.3.5 Lên men s n xu t protein tái t h p h th ng lên men Bioflo ... u………………………….…………………………………………………………24 3.1.1 Các ch ng sinh v t, plasmid t bào CTLL2………………………………….24 3.1.2 Hóa ch t, enzym, máy móc thi t b ………………… ………………………24 3.1.3 Các dung d ch s d ng môi trư ng nuôi...
  • 74
  • 593
  • 2
Tinh sạch và nghiên cứu đặc tính của cellulase tự nhiên và tạo cellulase tái tổ hợp từ nấm sợi tại Việt Nam

Tinh sạch và nghiên cứu đặc tính của cellulase tự nhiên và tạo cellulase tái tổ hợp từ nấm sợi tại Việt Nam

Ngày tải lên : 20/07/2015, 16:20
... Việc nghiên cứu tạo chế phẩm cellulase tái tổ hợp ứng dụng chế phẩm hạn chế Xuất phát từ lý tiến hành thực đề tài: “Tinh nghiên cứu đặc tính cellulase tự nhiên tạo cellulase tái tổ hợp từ nấm sợi ... pastoris Kết tạo endoglucanase tái tổ hợp không chứa peptide tín hiệu củng cố thêm sở khoa học hướng cải biến hoạt tính tính chất enzyme tái tổ hợp cách cắt bỏ đoạn peptide tín hiệu Các báo khoa ... chủng nấm men P pastoris tái tổ hợp sử dụng để lên men lượng lớn, phù hợp để sản xuất chế phẩm endoglucanase tự nhiên tái tổ hợp điều kiện thực tiễn Việt Nam 5 Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Cellulase...
  • 149
  • 415
  • 1
Tóm tắt luận án tiến sĩ tinh sạch và nghiên cứu đặc tính của cellulase tự nhiên và tạo cellulase tái tổ hợp từ nấm sợi tại việt nam

Tóm tắt luận án tiến sĩ tinh sạch và nghiên cứu đặc tính của cellulase tự nhiên và tạo cellulase tái tổ hợp từ nấm sợi tại việt nam

Ngày tải lên : 21/07/2015, 14:15
... nghiên cứu tạo chế phẩm cellulase tái tổ hợp ứng dụng chế phẩm hạn chế Xuất phát từ lý tiến hành thực đề tài luận án: “Tinh nghiên cứu đặc tính cellulase tự nhiên tạo cellulase tái tổ hợp từ nấm ... pastoris Kết tạo endoglucanase tái tổ hợp không chứa peptide tín hiệu củng cố thêm sở khoa học hướng cải biến hoạt tính tính chất enzyme tái tổ hợp cách cắt bỏ đoạn peptide tín hiệu Các báo khoa ... gen mã hóa rRNA DNA tổng số (A-1); Sản phẩm PCR nhân gen mã hóa rRNA từ khuôn DNA tách chiết từ chủng NDVN01 (B-2); Plasmid tái tổ hợp (C-3); Sản phẩm cắt plasmid tái tổ hợp/ XbaI XhoI (D-4);...
  • 27
  • 372
  • 0
LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Tinh sạch và nghiên cứu đặc tính của cellulase tự nhiên và tạo cellulase tái tổ hợp từ nấm sợi tại Việt Nam

LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Tinh sạch và nghiên cứu đặc tính của cellulase tự nhiên và tạo cellulase tái tổ hợp từ nấm sợi tại Việt Nam

Ngày tải lên : 24/07/2015, 16:06
... Việc nghiên cứu tạo chế phẩm cellulase tái tổ hợp ứng dụng chế phẩm hạn chế Xuất phát từ lý tiến hành thực đề tài: “Tinh nghiên cứu đặc tính cellulase tự nhiên tạo cellulase tái tổ hợp từ nấm sợi ... pastoris Kết tạo endoglucanase tái tổ hợp không chứa peptide tín hiệu củng cố thêm sở khoa học hướng cải biến hoạt tính tính chất enzyme tái tổ hợp cách cắt bỏ đoạn peptide tín hiệu Các báo khoa ... chủng nấm men P pastoris tái tổ hợp sử dụng để lên men lượng lớn, phù hợp để sản xuất chế phẩm endoglucanase tự nhiên tái tổ hợp điều kiện thực tiễn Việt Nam 5 Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Cellulase...
  • 149
  • 461
  • 0
Tóm tắt luận án tiến sĩ sinh học Tinh sạch và nghiên cứu đặc tính của cellulase tự nhiên và tạo cellulase tái tổ hợp từ nấm sợi tại Việt Nam

Tóm tắt luận án tiến sĩ sinh học Tinh sạch và nghiên cứu đặc tính của cellulase tự nhiên và tạo cellulase tái tổ hợp từ nấm sợi tại Việt Nam

Ngày tải lên : 27/07/2015, 21:50
... nghiên cứu tạo chế phẩm cellulase tái tổ hợp ứng dụng chế phẩm hạn chế Xuất phát từ lý tiến hành thực đề tài luận án: “Tinh nghiên cứu đặc tính cellulase tự nhiên tạo cellulase tái tổ hợp từ nấm ... pastoris Kết tạo endoglucanase tái tổ hợp không chứa peptide tín hiệu củng cố thêm sở khoa học hướng cải biến hoạt tính tính chất enzyme tái tổ hợp cách cắt bỏ đoạn peptide tín hiệu Các báo khoa ... gen mã hóa rRNA DNA tổng số (A-1); Sản phẩm PCR nhân gen mã hóa rRNA từ khuôn DNA tách chiết từ chủng NDVN01 (B-2); Plasmid tái tổ hợp (C-3); Sản phẩm cắt plasmid tái tổ hợp/ XbaI XhoI (D-4);...
  • 27
  • 293
  • 0

Xem thêm