biến nạp dna tái tổ hp vào tế bào
Tách dòng và xác định trình tự gene kháng thể tái tổ hợp kháng tế bào lympho bệnh ung thư vú
Ngày tải lên :
24/04/2013, 22:04
... Invitrogen Sau biến nạp, nhờ trợ giúp máy tổng hợp tế bào vi khuẩn, plasmid tái tổ hợp tạo số lượng lớn Quá trình bao gồm giai đoạn: tạo tế bào khả biến biến nạp * Tạo tế bào khả biến: - Tế bào E.coli ... dòng xác định trình tự nucleotid 2.2.3 Biến nạp DNA Plasmid vào tế bào E.coli DH5α Vector pCR 2.1 sau gắn đoạn gene kháng thể tái tổ hợp biến nạp vào tế bào vi khuẩn E.coli chủng DH5α có kít tách ... 1.3.2.2 Kháng thể tái tổ hợp ứng dụng Công nghệ kháng thể tái tổ hợp bao gồm việc thu nhận gene kháng thể từ tế bào nguồn, nhân tách dòng gene vector thích hợp, biến nạp vector vào tế bào chủ để biểu...
- 37
- 1.1K
- 2
Tài liệu HOÀN THIỆN QUY TRÌNH BIẾN NẠP ĐOẠN DNA VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN E. coli DH5α pot
Ngày tải lên :
25/02/2014, 15:20
... Giới thiệu tƣợng biến nạp Biến nạp phƣơng pháp đơn giản có để đƣa DNA tái tổ hợp vào tế bào Trong trƣờng hợp tế bào E coli biến nạp có nghĩa đƣa DNA plasmid vào tế bào Biến nạp đƣợc sử dụng với ... trúc DNA dùng cho mục tiêu gọi vector Việc biến nạp DNA tái tổ hợp vào tế bào thích hợp cho phép vector có khả tồn ổn định chép độc lập với gen tế bào Tế bào có khả tiếp nhận vector tái tổ hợp ... THẢO LUẬN 4.1 Các quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn B A C Hình 4.1 Biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn thể tích 10:1.5 (A) Biến nạp với tỷ lệ tế bào khả nạp plasmid theo thể tích...
- 68
- 449
- 1
Hoàn thiện quy trình biến nạp đoạn dna vào tế bào vi khuẩn E. coli DH5
Ngày tải lên :
27/10/2012, 10:53
... Giới thiệu tƣợng biến nạp Biến nạp phƣơng pháp đơn giản có để đƣa DNA tái tổ hợp vào tế bào Trong trƣờng hợp tế bào E coli biến nạp có nghĩa đƣa DNA plasmid vào tế bào Biến nạp đƣợc sử dụng với ... trúc DNA dùng cho mục tiêu gọi vector Việc biến nạp DNA tái tổ hợp vào tế bào thích hợp cho phép vector có khả tồn ổn định chép độc lập với gen tế bào Tế bào có khả tiếp nhận vector tái tổ hợp ... ứng nối vector DNA chèn - Biến nạp plasmid tái tổ hợp vào tế bào - Kiểm tra thể biến nạp môi trƣờng có chứa Ampicillin, X-gal, IPTG 3 PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Hiện tƣợng biến nạp vi khuẩn 2.1.1...
- 23
- 1.3K
- 15
Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coli DH5α
Ngày tải lên :
31/10/2012, 09:35
... chặt vào ComK promoter, điều đảm bảo phiên mã xác nồng độ ComK thấp 2.3 Sự biến nạp nhân tạo vào tế bào E.coly 2.3.1 Khái niệm biến nạp nhân tạo Biến nạp nhân tạo việc đƣa đoạn DNA vào tế bào ... đoạn DNA để chèn Cắt tinh vector Phản ứng sửa chữa sai sót đoạn DNA chèn, nhằm tạo đoạn DNA có đầu Phản ứng nối vector DNA chèn Biến nạp plasmid tái tổ hợp vào tế bào Kiểm tra thể biến nạp môi ... trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α” khoá luận tốt nghiệp 1.2 Mục tiêu đề tài Thiết lập quy trình chèn đoạn DNA vào plasmid pBluescipt chuyển đƣợc plasmid tái tổ hợp vào tế bào...
- 74
- 3.3K
- 15
Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.Coly DH5α
Ngày tải lên :
16/11/2012, 16:15
... chặt vào ComK promoter, điều đảm bảo phiên mã xác nồng độ ComK thấp 2.3 Sự biến nạp nhân tạo vào tế bào E.coly 2.3.1 Khái niệm biến nạp nhân tạo Biến nạp nhân tạo việc đƣa đoạn DNA vào tế bào ... đoạn DNA để chèn Cắt tinh vector Phản ứng sửa chữa sai sót đoạn DNA chèn, nhằm tạo đoạn DNA có đầu Phản ứng nối vector DNA chèn Biến nạp plasmid tái tổ hợp vào tế bào Kiểm tra thể biến nạp môi ... trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α” khoá luận tốt nghiệp 1.2 Mục tiêu đề tài Thiết lập quy trình chèn đoạn DNA vào plasmid pBluescipt chuyển đƣợc plasmid tái tổ hợp vào tế bào...
- 74
- 2.5K
- 5
Luận văn : HOÀN THIỆN QUY TRÌNH BIẾN NẠP ĐOẠN DNA VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN E. coli DH5α part 3 pptx
Ngày tải lên :
28/07/2014, 02:21
... 4.13 Biến nạp plasmid tái tổ hợp (A) Biến nạp plasmid chèn đoạn 223bp; (B) Biến nạp plasmid chèn đoạn 900bp; (C) Biến nạp plasmid chưa tái tổ hợp C 47 Kết biến nạp hoàn toàn plasmid tái tổ hợp vào ... THẢO LUẬN 4.1 Các quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn B A C Hình 4.1 Biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn thể tích 10:1.5 (A) Biến nạp với tỷ lệ tế bào khả nạp plasmid theo thể tích ... lọc thể biến nạp theo quy trình (ở thể tích biến nạp 3:0.5, dịch biến nạp pha loãng ½ trang lên đĩa) cho kết tốt chọn lọc thể biến nạp theo quy trình (ở thể tích biến nạp 3:0.5, dịch biến nạp không...
- 22
- 492
- 0
Luận văn : HOÀN THIỆN QUY TRÌNH BIẾN NẠP ĐOẠN DNA VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN E. coli DH5α part 2 doc
Ngày tải lên :
28/07/2014, 02:22
... với tế bào thực vật, ta có khả tạo biến nạp Tuy nhiên, việc tạo tế bào trần (protoplast) thực vật cách dùng enzyme cellulose phân hủy thành tế bào thực vật Sau trộn tế bào trần với DNA tái tổ ... tăng trƣởng tế bào chủ Trƣớc hết, biến nạp plasmid vào tế bào chủ, sau nuôi cấy tế bào chủ môi trƣờng chọn lọc thích hợp thu nhận sinh khối tế bào Quá trình tách chiết plasmid từ tế bào chủ công ... hấp thụ DNA tái tổ hợp Bằng phƣơng pháp ta thu đƣợc hiệu biến nạp cao 2.4.2 Phƣơng pháp chọn lọc thể biến nạp plasmid tái tổ hợp Sau xâm nhập, plasmid tái thể gen kháng kháng sinh tế bào chủ...
- 23
- 492
- 0
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 9 pptx
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... 2.1.2.2 Ứng dụng 2.2 Cơ sở sinh hóa tế bào học hiên tƣợng biến nạp 2.3 Sự biến nạp nhân tạo vào tế bào E.coly 2.3.1 Khái niệm biến nạp nhân tạo 2.3.2 Sự điều hoà gen ... bị tế bào khả nạp .29 3.3.5 Biến nạp plasmid pBluescript vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α phƣơng pháp sốc nhiệt 30 3.3.6 Chọn lọc khuẩn lạc mong muốn tính hiệu suất biến nạp ... 3.3 Phƣơng pháp nghiên cứu .26 3.3.1 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn 26 3.3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E.coly DH5α kiểm tra .27 3.3.3 Xác định mật...
- 8
- 295
- 0
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 8 pptx
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... đoạn DNA vào tế bào chủ DH5α Quy trình sử dụng cho thí nghiệm tạo dòng áp dụng trực tiếp phòng thí nghiêm Các bƣớc quy trình Chuẩn bị khả nạp Dịch tế bào chuẩn bị để làm khả nạp phải có mật độ tế ... CaCl2 100mM lạnh vào hòa tan phần kết tủa Thêm 20μl glycerol 98% vào trữ -700C Biến nạp plasmid vào khả nạp Bƣớc 1: Hút 3µl dịch huyền phù tế bào competen cell đƣơc chuẩn bị cho vào eppendorf 1.5 ... hoàn thiện quy trình theo điều kiện phòng thí nghiệm, chuyển đoạn DNA từ sản phẩm cắt vào tế bào, chuyển gen hoàn chỉnh vào tế bào chủ kiểm soát biểu của gen 59 Nếu trƣờng hợp không đủ hoá chất...
- 8
- 284
- 0
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 7 pdf
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... Hình 4.17 Kết cấy vi khuẩn biến nạp plasmid tái tổ hợp với đoạn DNA 580bp môi trƣờng LB/amp/ X-gal/IPTG (a )Biến nạp với tỉ lệ tế bào khả nạp plasmid tái tổ hợpvới đoạn DNA 580bp theo thể tích (μl) ... Kết biến nạp plasmid tái tổ hợp Thực phản ứng blunt-end sản phẩm PCR, tinh sản phẩm phản ứng blunt-end, nối đoạn sản phẩm PCR vào plasmid ta đƣợc plasmid tái tổ hợp Biến nạp plasmid tái tổ hợp vào ... khả nạp, thu đƣợc kết nhƣ sau 52 a b Hình 4.16 Kết cấy vi khuẩn biến nạp plasmid tái tổ hợp với đoạn DNA 629 bp môi trƣờng LB/amp(100μg/ml)/ X-gal/IPTG (a) Biến nạp với tỉ lệ tế bào khả nạp plasmid...
- 8
- 333
- 2
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 6 doc
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... lọc thể biến nạp với nồng độ kháng sinh 100µg/ ml 4.2.2 Chọn lọc vi khuẩn biến nạp với nồng độ kháng sinh 100µg/ ml Hình 4.5 Kết cấy vi khuẩn biến nạp đối chứng Biến nạp có tế bào khả nạp plasmid ... chọn lọc thể biến nạp Biến nạp 60 giây với tỉ lệ khả nạp : plasmid 30 : ; 10 : ; : 0.5 đối chứng đƣợc thể Hình 4.4 Kết tƣơng tự với kết biến nạp 90 giây Nhƣ vậy, quy trình biến nạp khác biệt ... môi trường LB agar/ Amp(60μg/ml)/ X-gal/ IPTG, ủ qua đêm 37oC.(DC) biến nạp có tế bào khả nạp plasmid ( thể tích 30μl tế bào khả nạp) phục hồi 800μl môi trường LB lỏng, cấy 150μl dịch phục hồi lên...
- 8
- 339
- 1
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 5 pot
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... vector DNA insert theo số mol Đổi từ số mol lượng (ng) phân tử DNA μg μg DNA = Kích thƣớc DNA (bp) fmole DNA x x 3000 fmol 1000 bp Từ lượng vector DNA tính lượng DNA chèn Vector (ng) x DNA chèn ... lệ DNA chèn (bp) (ng )DNA chèn = Vector (kb) Vector Căn vào tỉ lệ số mol vector DNA chèn dựa vào để tính lƣợng DNA cần sử dụng Thực phản ứng nối với thành phần nhƣ sau T4 reaction buffer 1µl DNA ... khả nạp (theo quy trình Sambrook cộng sự, 1989 có chỉnh sửa) Thực biến nạp theo quy trình sau Hút 10µl dịch huyền phù tế bào competen cell đƣơc chuẩn bị cho vào eppendorf 1.5 ml, thêm 3µl DNA...
- 8
- 308
- 0
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 4 pps
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... pháp nghiên cứu 3.3.1 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn Nhiễm sắc thể + CaCl2 + DNA plasmid Màng tế bào trở nên khả nạp sốc nhiệt ổn định tế bào Màng tế bào hồi phục plasmid bắt đầu ... nhƣng không cho DNA plasmid vào tế bào khả nạp để làm đối chứng Quy trình Hút 3µl dịch huyền phù tế bào khả nạp đƣợc chuẩn bị cho vào eppendorf 1.5 ml, thêm 0.5µl DNA plasmid vào, đảo nhẹ, giữ ... plasmid,kiểm tra Sơ đồ 3.2 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn 26 3.3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E.coly DH5α kiểm tra + CaCl2 Vi khuẩn Ecoly DH5α Khả nạp Plasmid Bluescript II...
- 8
- 369
- 1
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 3 ppt
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... biến nạp DNA Cohen công (1973), thành công biến nạp plasmid tái tổ hợp vào tế bào vi khuẩn E.coly phƣơng pháp Calcium chloride Sambrook cộng (1989), đƣa phƣơng pháp chuẩn bị tế bào E.coly khả nạp, ... E.coly khả nạp, biến nạp plasmid vào tế bào theo phƣơng pháp hóa chất sốc nhiệt, sau ông đƣa công thức tính hệ số biến nạp N = A x10n x OV/PV N: hệ số biến nạp, tính CFU/µg plasmid DNA A: số khuẩn ... plasmid Các bƣớc tạo DNA tái tổ hợp : Làm phóng thích DNA phage khỏi vỏ, làm cho đầu tận đọan DNA insert có khả tƣơng hợp với đầu tận DNA phage, sau dùng lygase để nối lyền đoạn DNA, tái tạo vỏ phage...
- 8
- 308
- 0
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 1 pdf
Ngày tải lên :
28/07/2014, 06:20
... chặt vào ComK promoter, điều đảm bảo phiên mã xác nồng độ ComK thấp 2.3 Sự biến nạp nhân tạo vào tế bào E.coly 2.3.1 Khái niệm biến nạp nhân tạo Biến nạp nhân tạo việc đƣa đoạn DNA vào tế bào ... đoạn DNA để chèn Cắt tinh vector Phản ứng sửa chữa sai sót đoạn DNA chèn, nhằm tạo đoạn DNA có đầu Phản ứng nối vector DNA chèn Biến nạp plasmid tái tổ hợp vào tế bào Kiểm tra thể biến nạp môi ... trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α” khoá luận tốt nghiệp 1.2 Mục tiêu đề tài Thiết lập quy trình chèn đoạn DNA vào plasmid pBluescipt chuyển đƣợc plasmid tái tổ hợp vào tế bào...
- 8
- 499
- 1
Xây dựng quy trình biến nạp đoạn ADN vào tế bào vi khuẩn Ecoli DH5a
Ngày tải lên :
07/04/2013, 21:46
... chặt vào ComK promoter, điều đảm bảo phiên mã xác nồng độ ComK thấp 2.3 Sự biến nạp nhân tạo vào tế bào E.coly 2.3.1 Khái niệm biến nạp nhân tạo Biến nạp nhân tạo việc đƣa đoạn DNA vào tế bào ... đoạn DNA để chèn Cắt tinh vector Phản ứng sửa chữa sai sót đoạn DNA chèn, nhằm tạo đoạn DNA có đầu Phản ứng nối vector DNA chèn Biến nạp plasmid tái tổ hợp vào tế bào Kiểm tra thể biến nạp môi ... trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α” khoá luận tốt nghiệp 1.2 Mục tiêu đề tài Thiết lập quy trình chèn đoạn DNA vào plasmid pBluescipt chuyển đƣợc plasmid tái tổ hợp vào tế bào...
- 74
- 2.7K
- 7
tải nạp, biến nạp DNA
Ngày tải lên :
23/10/2014, 05:00
... nhầm chứa DNA vi khuẩn gắn vào vi khuẩn khác bơm phần DNA đóng gói vào tế bào, vơ tình chuyển DNA vi khuẩn từ tế bào sang tế bào khác Phân tử DNA trở thành phần DNA nhiễm sắc thể tế bào mới, từ ... - Điều kiện thực biến nạp: Hiệu biến nạp phụ thuộc vào yếu tố: + Tính dung nạp tế bào thể nhận Những tế bào dung nạp bề mặt có nhân tố dung nạp Người ta tạo khả dung nạp tế bào thể nhận số xử ... xét tượng biến nạp vi khuẩn Khác với tiếp hợp tải nạp ,biến nạp ko cần tiếp xúc trực tiếp tế bào ko cần vật trung gian phage Các tế bào trạng thái biến nạp gọi khả nạp vậy,qua biến nạp nòi vi...
- 49
- 436
- 3