CHẾ PHẨM SINH HỌC CHẾ PHẨM SINH HỌC EPN BIOSTAR EPN BIOSTAR GIẢNG VIÊN: ThS. LÊ THANH HẢI HÀ GIẢNG VIÊN: ThS. LÊ THANH HẢI HÀ THỰC HIỆN : THỰC HIỆN : NGUYỄN THỊ HẰNG NGUYỄN THỊ HẰNG PHẠM PHƯƠNG LINH PHẠM PHƯƠNG LINH TUYẾN TRÙNG EPN TUYẾN TRÙNG EPN  Tuyến trùng trong nhóm Tuyến trùng trong nhóm này được gọi là tuyến này được gọi là tuyến trùng gây bệnh côn trùng trùng gây bệnh côn trùng và được xem là quan và được xem là quan trọng nhất trong việc sử trọng nhất trong việc sử dụng tuyến trùng trong dụng tuyến trùng trong bảo vệ mùa màng. bảo vệ mùa màng. A và C: Đầu của tuyến trùng gây A và C: Đầu của tuyến trùng gây nhiễm, và tuyến trùng cái thế hệ nhiễm, và tuyến trùng cái thế hệ một của một của Steinernema. Steinernema. B và D: Đầu của tuyến trùng gây B và D: Đầu của tuyến trùng gây nhiễm và tuyến trùng cái thế hệ nhiễm và tuyến trùng cái thế hệ hai của hai của Heterorhabditis Heterorhabditis . . EPN CÓ KHẢ NĂNG DIỆT TRỪ NHIỀU EPN CÓ KHẢ NĂNG DIỆT TRỪ NHIỀU LOẠI SÂU LOẠI SÂU  Sâu tơ Sâu tơ gây hại các cây thuộc họ cải. Sâu gây hại các cây thuộc họ cải. Sâu non ăn lá,sâu tơ ăn tạo các lỗ thủng lá, non ăn lá,sâu tơ ăn tạo các lỗ thủng lá, làm lá xơ xác làm lá xơ xác Sâu khoang Sâu khoang còn được gọi còn được gọi là sâu ăn tạp gây hại trên là sâu ăn tạp gây hại trên nhiều loại rau, là đối tượng nhiều loại rau, là đối tượng gây hại nặng trên rau gây hại nặng trên rau muống. Sâu non làm muống. Sâu non làm lá cây xơ xác lá cây xơ xác ,gặm ăn vỏ ,gặm ăn vỏ quả làm giảm phẩm chất. quả làm giảm phẩm chất. Sâu xám thường gây hại giai đoạn cây con trên tất cả các loại rau. Loài sâu này thường cắn đứt các thân và cành n on kéo xuống đất để ăn. Sâu xanh da láng Sâu xanh da láng gây hại trên nhiều loại rau khác gây hại trên nhiều loại rau khác như hành, cà chua, đậu phộng, đậu bắp, đậu đỗ… như hành, cà chua, đậu phộng, đậu bắp, đậu đỗ… Sâu non ăn lá, lúc nhỏ chừa lại biểu bì, sâu tuổi lớn Sâu non ăn lá, lúc nhỏ chừa lại biểu bì, sâu tuổi lớn ăn thủng lỗ trên lá. ăn thủng lỗ trên lá. Bướm Bướm Sâu non Sâu non THUỐC TRỪ SÂU SINH HỌC TUYẾN THUỐC TRỪ SÂU SINH HỌC TUYẾN TRÙNG TRÙNG  Thuốc trừ sâu EPN là Thuốc trừ sâu EPN là một tổ hợp cộng sinh một tổ hợp cộng sinh của tuyến trùng và vi của tuyến trùng và vi khuẩn, trong đó khuẩn, trong đó tuyến trùng là vật ký tuyến trùng là vật ký sinh và mang truyền sinh và mang truyền vi khuẩn, trong khi vi khuẩn, trong khi vi khuẩn này sẽ sản vi khuẩn này sẽ sản sinh độc tố mạnh sinh độc tố mạnh giết chết côn trùng. giết chết côn trùng. Cơ chế xâm nhiễm của tuyến trùng Cơ chế xâm nhiễm của tuyến trùng steinernema steinernema  Khi gặp côn trùng ký chủ, tuyến trùng Khi gặp côn trùng ký chủ, tuyến trùng sẽ chui vào bên trong bằng miệng, sẽ chui vào bên trong bằng miệng, hậu môn hay khí khổng rồi xuyên hậu môn hay khí khổng rồi xuyên qua màng ruột, màng khí quản để vào qua màng ruột, màng khí quản để vào bên trong và tuyến trùng sẽ phóng bên trong và tuyến trùng sẽ phóng thích vi trùng từ ruột của chúng vào thích vi trùng từ ruột của chúng vào máu của côn trùng. máu của côn trùng.  Vi trùng phát triển rất nhanh tạo hiện Vi trùng phát triển rất nhanh tạo hiện tượng ngộ độc máu,làm côn trùng tượng ngộ độc máu,làm côn trùng chết sau 24-48h và tuyến trùng ăn vi chết sau 24-48h và tuyến trùng ăn vi trùng để lớn lên thành tuyến trùng trùng để lớn lên thành tuyến trùng tuổi 3, tuổi 4 và thành trùng thế hệ 1. tuổi 3, tuổi 4 và thành trùng thế hệ 1.  Tuyến trùng đực và cái của thế hệ 1 Tuyến trùng đực và cái của thế hệ 1 bắt cặp và đẻ trứng,trứng nở ra ấu bắt cặp và đẻ trứng,trứng nở ra ấu trùng tuổi 1. Vào lúc này,tuỳ theo tình trùng tuổi 1. Vào lúc này,tuỳ theo tình trạng dinh dưỡng, tuyến trùng có thể trạng dinh dưỡng, tuyến trùng có thể theo hai chu trình khác nhau : theo hai chu trình khác nhau : Chu trình của tuyến trùng Steinernema scapterisci kèm theo một số đặc Chu trình của tuyến trùng Steinernema scapterisci kèm theo một số đặc tính hình thể học qua kính hiển vi điện tử ở các giai đoạn khác nhau. IJ tính hình thể học qua kính hiển vi điện tử ở các giai đoạn khác nhau. IJ = ấu trùng gây nhiễm, J1, J2, J3, J43 = ấu trùng tuổi 1, 2, 3 và 4, PI = = ấu trùng gây nhiễm, J1, J2, J3, J43 = ấu trùng tuổi 1, 2, 3 và 4, PI = dạng trung gian trước khi thành ấu trùng gây nhiễm (IJ). G1 = thành dạng trung gian trước khi thành ấu trùng gây nhiễm (IJ). G1 = thành trùng thế hệ 1, G2 = thế hệ 2. trùng thế hệ 1, G2 = thế hệ 2. Xâm nhiễm của tuyến trùng Xâm nhiễm của tuyến trùng Heterorhabditis Heterorhabditis  Tương tự như Tương tự như Steinernema Steinernema chỉ khác là thành trùng thế chỉ khác là thành trùng thế hệ 1 là lưỡng tính hệ 1 là lưỡng tính (hermaphroditic), tuyến (hermaphroditic), tuyến trùng này có hình dạng của trùng này có hình dạng của tuyến trùng cái và có bộ tuyến trùng cái và có bộ phận sinh dục lưỡng tính phận sinh dục lưỡng tính Tuyến trùng mẹ lưỡng tính Tuyến trùng mẹ lưỡng tính này đẻ trứng, trứng nở ra này đẻ trứng, trứng nở ra con thuộc thế hệ 2 lớn lên con thuộc thế hệ 2 lớn lên như trong chu trình của như trong chu trình của Steinernema (thế hệ 2 có cả Steinernema (thế hệ 2 có cả đực và cái.) đực và cái.) Ưu điểm khi sử dụng tuyến trùng diệt trừ sâu Ưu điểm khi sử dụng tuyến trùng diệt trừ sâu hại hại  Có khả năng gây chết cho nhiều loại sâu Có khả năng gây chết cho nhiều loại sâu khác nhau. khác nhau.  An toàn cho người,động vật,thực vật và An toàn cho người,động vật,thực vật và môi trường. môi trường.  Sâu hại không có khả năng kháng thuốc. Sâu hại không có khả năng kháng thuốc.  Khả năng sản xuất lớn bằng công nghệ Khả năng sản xuất lớn bằng công nghệ nhân nuôi nhân nuôi invitro tuyến trùng. invitro tuyến trùng.  Tuyến trùng tồn tại lâu dài trong đất và Tuyến trùng tồn tại lâu dài trong đất và nhân nhanh số lượng khi có sâu hại nên nhân nhanh số lượng khi có sâu hại nên tạo được ổ dự trữ thiên địch trong tự tạo được ổ dự trữ thiên địch trong tự nhiên. nhiên.  Dễ tuyển chọn di truyền các loài tuyến Dễ tuyển chọn di truyền các loài tuyến trùng để tạo ra các chủng tốt theo ý trùng để tạo ra các chủng tốt theo ý muốn.Từ đó sản xuất ra nhiều chế phẩm muốn.Từ đó sản xuất ra nhiều chế phẩm thuốc trừ sâu khác nhau. thuốc trừ sâu khác nhau.  Có khả năng bảo quản lâu, từ 2 đến 6 Có khả năng bảo quản lâu, từ 2 đến 6 tháng, trong điều kiện thường, không cần tháng, trong điều kiện thường, không cần bảo quản lạnh. bảo quản lạnh. Ấu trùng của lòai sâu gây bệnh ở củ cải đường, bị tuyến trùng tấn công. Từ một vài con, trùng sau khi ký sinh có thể tạo ra hàng ngàn con non, và có thể tìm thấy nhiều hơn thế trong đất. [...]...HẠN CHẾ  Giá thành còn khá cao và khả năng bảo quản khó khăn so với thuốc hóa học và một số chế phẩm sinh học khác Để khắc phục nhược điểm này,nhiều nhóm nghiên cứu đã cải tiến quy trình công nghệ invitro,áp dụng công nghệ cao, sử dụng môi trường lỏng và thiết bị lên men tự động (bio-reactor) sản xuất EPN, cho phép tăng sản lượng và hạ giá thành sản phẩm, thương mại hóa,đủ sức... giá thành sản phẩm, thương mại hóa,đủ sức cạnh tranh với thuốc trừ sâu hoá học, mà lợi ích lâu dài về môi trường sẽ còn lớn hơn nhiều Sản xuất EPN Phương pháp sử dụng ký chủ tốt Dùng sâu trong tổ ong (Galleria mellonella) để sản xuất tuyến trùng Sở dĩ côn trùng này được sử dụng vì chúng được xem là ký chủ tốt của hầu hết những loài EPN • • Dùng pipet hút 15- 20ml dung dịch tuyến trùng, cho vào giấy lọc... lót hai miếng giấy lọc và đã được cấy tuyến trùng • Sau 24-48 giờ,Ấu trùng Galleria chết được sắp vào trong bẩy White Bẩy White được cất trong chỗ không có ánh sáng Khi nào thấy tuyến trùng IJ xuất hiện trong nước thì thu hoạch (khoảng 1 tuần lễ sau khi làm White trap) Galleria đã chết do Steinernema; B: Galleria đã chết do Heterorhabditis (có màu nâu hoặc đỏ.) Thu hoạch tuyê’n trùng IJ bằng cách đổ... đổ nước bên trên ra.Làm như thê’ khoảng 4 lần thì đem chai tuyê’n trùng đưa vào trong tủ lạnh nhiệt độ khoảng 15oC Cần chú ý nếu không rửa sạch IJ, thì những chất bẩn trong nước sẽ làm cho tuyến trùng chết rất nhanh Phương pháp nuôi trồng nhân tạo  Bedding (1981, 1984) đã dùng đồ dư thừa của kỹ nghệ làm thịt gà để nuôi tuyến trùng Phương pháp này có thể nuôi được hàng triệu tuyến trùng và có thể đem . CHẾ PHẨM SINH HỌC CHẾ PHẨM SINH HỌC EPN BIOSTAR EPN BIOSTAR GIẢNG VIÊN: ThS. LÊ THANH HẢI HÀ GIẢNG VIÊN:. bảo quản khó khăn so với thuốc hóa học và một số chế thuốc hóa học và một số chế phẩm sinh học khác. phẩm sinh học khác. Để khắc phục nhược