Đang tải... (xem toàn văn)
Đề tài trong phân tích vi sinh thực phẩm bào gồm 2 đề tài Đinh-luong-Clostridium-perfringens Thử nghiệm decarboxylase, có hình ảnh thực nghiệm và cách tiến hành thí nghiệm, gồm mục đích, nguyên tác và cơ sở sinh hóa trong mỗi đề tài.
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA CƠNG NGHỆ THỰC PHẨM PHÂN TÍCH VI SINH THỰC PHẨM ĐỊNH LƯỢNG CLOTRIDIUM PERFRINGENES THỰC HIỆN: NHÓM GVHD: PHAN THỊ KIM LIÊN Danh sách nhóm La Thị Hiền Nguyễn Thị Thúy Lan Đỗ Thị Yến Nhi Nguyễn Thùy Trang 2005130112 2005130066 2022130144 2005130101 Nội dung Giới thiệu chung Phạm vi áp dụng Ngun tắc Mơi trường hóa chất Quy trình định lượng tính kết Giới thiệu chung Phạm vi áp dụng Ngun tắc Mơi trường hóa chất Quy trình định lượng tính kết Giới thiệu chung ᶧ Trực khuẩn G(+), di động ᶧ Kỵ khí, sinh bào tử • topt = 37-450C ᶧ Là nguyên nhân gây ngộ độc thực phẩm giống Clostridia • Tác nhân gây bệnh cho thực phẩm + tác nhân gây ngộ độc thực phẩm • VSV thị khả nhiễm phân • Len men đường lactose glucose • Sinh tổng hợp nhiều loại độc tố • type kháng nguyên: A-E Giới thiệu chung Phạm vi áp dụng Nguyên tắc Mơi trường hóa chất Quy trình định lượng tính kết • PP tham chiếu theo TCVN 4991:2005 (ISO 7937:2004) dùng định lượng C.Perfringenes có khả mọc đĩa thạch • Phương pháp áp dụng cho sản phẩm dùng cho người, thức ăn cho động vật mẫu môi trường khu vực sản xuất xử lí thực phẩm Giới thiệu chung Phạm vi áp dụng Ngun tắc Mơi trường hóa chất Quy trình định lượng tính kết Ngun tắc Cấy lượng mẫu thử quy Rót mơi trường chọn lọc (kỹ định Địnhlên lượng bề mặt cácmôi khuẩn trường lạc thuật rót đĩa), phủ lên cấy đặc điển chọn hình.lọc đựng mt đĩa petri Khẳng định số lượng Chuẩn bị đĩa khác khuẩn Ủ tronglạc điều điển kiện hình kỵ khítính 370số C, điều kiện, sử dụng dd lượng C.perfringenes 24h pha loãng thập phân 1ml hoặc1g mẫu Nội dung Giới thiệu chung Phạm vi áp dụng Ngun tắc Mơi trường hóa chất Quy trình định lượng tính kết Sp dạng lỏng Dịch mẫu [10-1] đĩa petri 15-20ml đĩa petri Sản phẩm dạng khác 10g mẫu + 90 ml SPW Dịch mẫu [10-1] Dịch mẫu [10-2] đĩa petri đĩa petri 15-20ml 15-20ml 15-20ml Sau đông đặc thêm 10ml TSC đĩa, chờ đông đặc, lật ngược đĩa ủ kỵ khí 370C 20±2h Thioglycolate broth, ủ kỵ khí 370C, 1824h Lactose sunfit Nitrate, Lactosegelatin ủ hiếu khí 460C/ 18-24h Đọc kết Clostridium perfringenes Cách tính tốn • ᶧ ᶧ ᶧ ᶧ ᶧ ᶧ C: tổng số khuẩn lạc C.Perfringenes đếm đĩa độ pha loãng liên tiếp V: thể tích dịch cấy cấy đĩa, mm n1: số đĩa giữ lại độ pha loãng thứ n2: số đĩa giữ lại độ pha loãng thứ hai d: hệ số pha loãng ứng với độ pha loãng thứ R: tỉ lệ khẳng định dương tính TÀI LIỆU THAM KHẢO • Phương pháp phân tích vi sinh vật nước, thực phẩm mĩ phẩm - Trần Linh Thước, Nhà xuất giáo dục Việt Nam Phân tích vi sinh thực phẩm Đề tài : Thử nghiệm decarboxylase GVHD: Phạm Thị Kim Liên Danh sách nhóm La Thị Hiền 2005130112 Nguyễn Thùy Trang 2005130101 DECACBOXYLASE TEST • Mục đích: Sử dụng để phát vi khuẩn sinh ezyme decarboxylase • Nguyên tắc: enzyme tương tác với amino acid có gốc carboxyl (COOH) cuối, tạo thành amine hay diamine carbon dioxide (CO2) • Cơ sở sinh hóa: Các sản phẩm tạo thành làm tăng pH mơi trườngđổi màu chất thị DECACBOXYLASE TEST Cơ chế test Cơ chế test Nếu thị pH thay đổi sang kiềm nhanh mạnh hệ thống arginine dehydrolase phân hủy arginine Kết Môi trường: - Decarboxylase Basal medium - pH=6.0 - Bromocresol purple – Kiểm tra dương tính: màu tím đục tới màu tím nhạt (sinh cadaverine) – Kiểm tra âm tính: màu vàng sáng, (chỉ glucose lên men) MT trước ni cấy (+) (-) Ví Dụ :Dùng thử nghiệm sinh hóa để khẳng định Salmonella có thực phẩm hay không Thử nghiệm Lysin Decarboxylase: - Cấy vi sinh vật làm vào môi trường canh Lysin decarboxylase (môi trường nuôi cấy) Vặn chặt nắp nuôi ủ 37.0 ±1.0oC khoảng thời gian 48 giờ. Nhưng phải kiểm tra sau 24 - Salmonella làm kiềm mơi trường Lisin decarboxylase, giữ ngun màu tím mơi trường (phản ứng dương tính) Phản ứng âm tính môi trường chuyển thành màu vàng.