Khóa luận tốt nghiệp LỜI CẢM ƠN Trước hết tơi xin bày tỏ lịng cảm ơn sâu sắc đến giáo : Võ Thị Hồ thạc sỹ hố học tận tình hướng dẫn giúp đỡ tơi q trình hồn thành đề tài Tơi xin chân thành cảm ơn thầy ,các khoa Hố học trường Đại Học Vinh, bạn bè giúp đở tơi q trình nghiên cứu hồn thành khố luận Do thời gian nghiên cứu cịn hạn chế khó khăn trang thiết bị thí nghiệm nên khơng thể tránh khỏi thiếu sót, mong thông cảm thầy cô bạn bè Tôi xin chân thành cảm ơn Vinh tháng /2010 MỞ ĐẦU Cùng với phát triển dân số , kinh tế xã hội, Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa Khóa luận tốt nghiệp khoa học cơng nghệ địi hỏi mặt hàng thực phẩm phải ngày dồi phong phú số lượng chất lượng trình chế tác thực phẩm bổ sung thêm chất phụ da, chất bảo quản vào Tuy nhiên bổ sung phải theo tiêu chuẩn Việt Nam hàm lượng chất bảo quản thực phẩm, thực phẩm đảm bảo an toàn Tuy nhiên nhiều sở sản xuất kinh doanh không tuân theo quy định tiêu chuẩn an toàn mà sử dụng chất bảo quản với hàm lượng vượt mức cho phép gây ảnh hưởng lớn đến sức khoẻ người tiêu dùng Trong chất bảo quản thường dùng axit sorbic muối kaly sorbat chất sử dụng nhiều Chúng chọn đề tài : xác định hàm lượng axit sorbic thuốc thử axit thiobarbiturric chất oxi hoá K2Cr2O7 Trong phạm vi đề tài đặt nhiệm vụ sau: - Tìm điều kiện tối ưu cho phép phân tích định lượng axit sorbic phương pháp trắc quang dùng thuốc thử axit thiobarbituric chất oxi hóa K2Cr2O7 - Tìm hiệu suất cất tối ưu để cất axit sorbic khỏi thực phẩm -Kiểm tra điều kiện tối ưu qua mẫu tự tạo - Áp dụng quy trình để xác định hàm lượng axit sorbic số mẫu nước mắn số mẫu hạt trân châu bán thị trường thành phố Vinh Hy vọng nhận nhiều ý kiến đóng góp bổ sung thầy để có phương pháp tốt áp dụng vào thực tế phân tích chất bảo quản thực phẩm thị trường Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa Khóa luận tốt nghiệp PHẦN I: TỔNG QUAN I.1 Axít SorbíC [7] I.1.1 Đặc điểm axít SorbíC [7] Cơng thức phân tử: C6H8O2 Cơng thức cấu tạo Axít Sorbic chất rắn kết tinh, màu trắng, có vị chua, khó tan nước Độ tan nước lạnh 0,16% Tan tốt dung môi hữu rượu ête số dung mơi khác Axit sorbic tìm thấy tro núi tìm thấy lần từ việc tách xanh lương trà roman Axít sorbic sử dụng axit thực phẩm tác nhân chống lại phát triển sinh vật,.Thông thường muối axit natri sorbat, kali sorbat, canxi sorbat ứng dụng rộng rãi dễ tan nước so với trạng thái axít I.1.2 Độc tính axit sorbic [6] Khi hấp thụ lượng lớn axit sorbic gây nở to gan thận, số trường hợp cịn có biến đổi mơ học quan Đặc biệt sản phẩm chuyển hoá axit sorbic thực phẩm bổ sung làm chất bảo quản điều đáng quan tâm Axit sorbic khơng phân ly phản ứng cộng, đặc biệt với HNO2 Sản phẩm Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa Khóa luận tốt nghiệp độc hại ngồi gây to nở gan thận gây khả đột biến gen Chất phụ da thực phẩm chất mà bình thường khơng tiêu thụ thực phẩm thực thụ không sử dụng thành phần đặc trưng thực phẩm ,có thể có hay khơng có giá trị dinh dưỡng, chủ yếu cho vào thực phẩm nhằm mục đích cơng nghệ I.3.1 Phân loại chất phụ da.[6] Phân loại theo tính chất cơng nghệ có: - Chất bảo quản - Chất chống oxi hoá - Chất tạo nhũ, chất ổn định chất tạo cấu trúc - Chất tạo màu Phân loại theo cấu trúc có: -Nhóm A nhóm có tính độc yếu - Nhóm B nhóm có chứa nhóm chức gây độc mang độc tính cao -Nhóm C nhóm có độc tính trung gian I.3.2 Một số vấn đề chất bảo quản thực phẩm [6,7] Chất bảo quản hóa chất tự nhiên hay tổng hợp thêm vào sản phẩm thực phẩm, dược phẩm, sơn, mẫu phẩm sinh học để ngăn ngừa làm chậm lại thối rửa, hư hỏng ngây phát triển vi sinh vật hay thay đổi không mong muốn mặt hóa học Các chất bảo quản thơng thường sử dụng gắn liền với phương pháp bảo quản khác Đôi người ta phối hợp biện pháp bảo quản kháng khuẩn với bảo quản chống ơxi hóa Trong bảo quản kháng khuẩn hoạt động nguyên tắc ngăn chặn Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa Khóa luận tốt nghiệp phát triển loại vi khuẩn, nấm mốc trùng, cịn bảo quản chống ơxi hóa hoạt động ngun tắc ngăn chặn q trình ơxi hóa thành phần thực phẩm Các chất bảo quản chia làm nhóm: + Nhóm bị cấm: chất có độ độc cao Ví dụ chất E103 ( Benzensunphonat natri) + Nhóm phép: Ví dụ chất E104 ( Vàng quinolin) + Nhóm thực phẩm chất có độ độc hại thấp Ngồi chất bảo quản axit sorbic cịn có chất bảo quản sau: + Axit malic - Axit malic loại axit phổ biến loại rau - Axit malic thường ứng dụng sản xuất mứt, loại nước quả, bánh kẹo rượu vang + Axit lactic Axit lactic có nhiều rau muối chua sản phẩm lên men chua sữa chua, bánh mì, bún, nước giải khát lên men, ứng dụng lên men rau bảo quản rau + Axit axetic (pKa = 4, 75) Axit axetic muối sử dụng chủ yếu để tạo vị chua chống vi sinh vật, chủ yếu chống nấm men vi khuẩn (ngoại trừ vi khuẩn lên men axit axetic, axit latic, axit butyric) Hoạt tính axit axetic thay đổi tuỳ thuộc vào sản phẩm thực phẩm, môi trường, vi sinh vật cần chống + Axit xitric Axít xitric axít hữu yếu, axít ba lần axít Nó chất bảo quản tự nhiên sữ dụng để bổ sung vị chua Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa Khóa luận tốt nghiệp cho thực phẩm hay loại nước Trong hóa sinh học, tác nhân trung gian quan trọng chu trình axít xitric xuất trao đổi chất gần sinh vật +.axit benzoic Axit benzoic: C7H6O2 (hoặc C6H5COOH), chất rắn tinh thể không màu dạng axit cacboxylic thơm đơn giản Axít yếu muối sử dụng làm chất bảo quản thực phẩm + Axit propionic: Sử dụng axit propionic muối propionat chủ yếu để chống nấm mốc; vài nấm men vi khuẩn bị ức chế axit propionic I.2.3.Hàm lượng sử dụng chất bảo quản thực phẩm[6] Axit lactic: lượng ăn vào hàng ngày chấp nhận (tính theo mg/kg trọng lượng thể/ngày): khơng giới hạn Mức dùng thông thường: không giới hạn Axit axetic: lượng ăn vào hàng ngày chấp nhận được: không giới hạn Mức dùng thông thường: không giới hạn Natriaxetat:lượng ăn vào hàng ngày chấp nhận được: 15 mg/kg thể/ngày Mức dùng thông thường: 0,3 – 0,5% Natri benzoat: lượng ăn vào hàng ngày chấp nhận được: mg/kg thể/ngày Mức dùng thông thường: 0,03 – 0,2% Natri propionat: lượng ăn vào hàng ngày chấp nhận được: 10 mg/kg thể/ngày Mức dùng thông thường: 0,1 – 0,3% Kaly sorbat: lượng ăn vào hàng ngày chấp nhận được: 25 mg/kg thể/ngày Mức dùng thông thường: 0,05 – 0,2% Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa Khóa luận tốt nghiệp Natri nitrit: lượng ăn vào hàng ngày chấp nhận được: 0,2 mg/kg thể/ngày Mức dùng thông thường: 0,01 – 0,02% Bộ phép sử dụng.: - Axit benzoic dùng chế biến nước giải khát, liều lượng tối đa cho phép 600 mg/kg; dùng dưa chuột dầm đóng lọ, tương cà chua; liều lượng tối đa g/kg - Axit sorbic dùng nước dứa ép đậm đặc, mứt, thạch không g/kg; dùng chế biến mơ khô không g/kg - Canxi benzoat dùng tương cà chua, nước ép đậm đặc, liều dùng tối đa g/kg; dùng rượu vang, đồ uống có rượu, liều lượng tối đa 200 mg/kg - khơng 500 mg/kg; dùng dưa chuột,thạch không g/kg - Natri sorbat (sodium sorbat) dùng mơ khô, mứt chanh không 500 mg/kg, dưa chuột, mứt thạch quả, không /kg I.3 Các phương pháp phân tích hàm lượng axit sorbic thực phẩm[7,8] I.3.1 Phương pháp đo phổ UV Nguyên tắc đo: axit sorbic sau chiết khỏi mẫu hòa tan vào hỗn hợp dung môi dietylete ete dầu hỏa, tỷ lệ 1/1 đo phổ hấp thụ bước sóng 250nm Hoặc: Cho dung dịch KMnO4 1N cho vào bình chứa mẫu axit sorbic rơì lắc phút sau cho hỗn hợp dietylete ete dầu hỏa 1/1 lắc đo phổ hấp phụ bước sống từ 220 - 300 nm Nếu có đỉnh píc xuất bước sóng 250 nm xác định có axit sorbic I.3.2 Phương pháp sắc ký lớp mỏng Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa Khóa luận tốt nghiệp Cách làm phương pháp: Axit sorbic sau chiết khỏi mẫu phương chiết cho dung dịch hidroxit vào sản phẩm chiết, cho thêm dietylete dung môi khác vào lắc đem chiết, tách, lọc lấy sản phẩm, đem phân tích sắc ký mỏng với lớp mỏng làm silycagen, thuốc thử màu axit thiobarbituric sắt clorua peoxit Nếu phun chất thử khơng khí khơ sắt cloruapeoxit tinh khiết axit sorbic (nếu có) có đốm vàng nằm phía Nếu phun chất thử axit thiobarbituric làm nóng 100 0C phút axit sorbit ( có) cho đốm màu hồng phía Ngồi cịn có số phương pháp xác định khác như: + Xác định hàm lượng axit sorbic phương pháp chuẩn độ so màu + Sắc khí lỏng cao áp Bahruddin, Md Fazlul Basi đưa quy trình xác định đồng thời số chất bảo quản axit sorbic axit benzoic…trong thực phẩm phương pháp HPLC I.4.Một số vấn đề phân tích quang phổ uv- vis [1,2] Nguyên tắc chung phương pháp phân tích trắc quang muốn xác định cấu tử X , ta chuyển dạng hợp chất có khả hấp thụ ánh sáng đo hấp thụ ánh sáng suy hàm lượng chất cần xác định X Những loại phản ứng dùng trắc quang có nhiều Để định lượng cấu tử vơ cơ, thường dùng loại phản ứng sau: - Phản ứng trực tiếp - Phản ứng gián tiếp - Phản ứng tạo kết tủa Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa Khóa luận tốt nghiệp Sau tách hồ tan kết tủa định lượng cấu tử phương pháp trắc quang Để định lượng chất hữu cơ, người ta dựa phản ứng tổng hợp chất màu Ngoài phân tích trắc quang cịn dùng phản ứng oxi hoá khử, phản ứng xúc tác… Đo mật độ quang dãy dung dịch có nồng độ C khác cuvet bước sóng định đồ thị đường thẳng Dựa vào ta xác định nồng độ chất cần tìm I.4.1.Phương pháp đường chuẩn [2] Khi phân tích hàng loại mẫu , dùng phương pháp đường chuẩn cho phép phân tích kết nhanh: Phương pháp có ưu điểm xác định hàng loạt mẫu để đo A cần có máy, máy đo xác kết tin cậy song để dùng phương pháp hấp thụ ánh sáng dung dịch cần tuân theo định luật Bia I.4.2 Phương pháp cặp đôi hay phương pháp chuẩn độ[2] Ưu điểm phương pháp:Xác định đơn giản, không cần máy Nhược điểm: phụ thuộc vào mắt quan sát, độ xác thấp I.4.3 Phương pháp thêm [2] Ưu điểm phương pháp: Loại trừ sai số ảnh hưởng ion lạ Nhược điểm: cần hóa chất tinh khiết I ĐẶC ĐIỂM THUỐC THỬ AXÍT THIO BARBITURIC [7] Ký hiệu TBA Công thức phân tử C4H4N2O2S Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa Khóa luận tốt nghiệp Cơng thức cấu tạo : Tên quốc tế : 2- thioxodihydroprimidime-4,6(1H, 5H) dion Khối lượng phân tử 144.15(g/mol) Nhiệt nóng chảy 245oc hay 518k, 473F Là chất bột màu trắng mịn , tan nước có mùi đặc trưng tan tốt kiềm axit Thio barbituric (TBA) phát triển để định lượng hợp chất andehyd PHẦN II THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN II.1 Dụng cụ thiết bị Cân phân tích có độ xác ±0.1 mg Máy đo phổ Light wave Cuvet thuỷ tinh Thiết bị chưng cất rượu Bình tia Máy pH cầm tay Milwan kee Bình định mức loại 1lit, 500ml, 250ml, 100ml, 50ml Một số dụng cụ thiết bị khác bếp điện ,bình tia, ống nghiệm II.2 Hố chất axit sorbic Axit Thiobarbicturric 10 Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa Khóa luận tốt nghiệp K2Cr207 H2SO4 HCl NaOH MgSO4.7H20 Nước cất hai lần Tất hóa chất tinh khiết phân tích Ngun liệu để phân tích: Hạt trân châu, nước mắm II.3 Chuẩn bị dung dịch -Dung dịch H2SO4.1N -Dung dịch H2SO4 0,01N -Dung dịch NaOH 1N - Dung dịch K2Cr2O7 O,05 % Axit Thiobarbituric.0,5%.(TBA) - axit sorbic 1(mg/ml) - Dung dịch axit Sorbic làm việc ( Dung dịch I) ( nồng độ dung dịch 50 µg/mg) - Dung dịch axit Sorbic ( Dung dịch II) nồng độ dung dịch (25µg/ml) III TIẾN HÀNH THÍ NGHIỆM III.1 XÁC ĐỊNH CÁC ĐIỀU KIỆN TỐI ƯU III.1.1 XÁC ĐỊNH BƯỚC SÓNG TỐI ƯU Cách làm sau: Lấy 2.0 ml dung dịch I cho 2,0 ml dung dịch K 2Cr2O7 0.05% đun 11 Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa Khóa luận tốt nghiệp nóng khoảng phút cho 2,0 ml TBA vào đun 10 phút cho vào bình 50 ml để yên 25 phút.Đo mật độ quang dung dịch bước sóng từ  =500 nm đến  =550 nm Vây bước sóng tối ưu opt=530nm III 1.,2 XÁC ĐỊNH THỜI GIAN OXI HOÁ TỐI ƯU Cách tiến hành sau: Lấy 2.0ml dung dịch I ( dung dịch axit Sorbic có nồng độ 50 µg/ml) cho vào ống nghiệm, thêm 2.0 ml chất oxi hoá K 2Cr2O7 0.05% Sau đun thời gian tăng dần từ o đến 20 phút Sau cho 2.0 ml thuốc thử Thio barbituric axit (TBA) vào đun n 10 phút cho vào bình định mức 50ml Để yên dung dịch 25 phút Đo mật độ quang dung dịch bước sóng tối ưu opt=530nm Ta có kết Giá trị mật độ quang cao thời gian đun phút III.1.3 XÁC ĐỊNH THỜI GIAN TÁC DỤNG CỦA THUỐC THỬ VỚI CHẤT CẦN PHÂN TÍCH Cách tiến hành sau: Lấy 2.0 ml dung dịch I cho ,thêm tiếp 2,0ml K2Cr2O7 0.05% đun nóng c phút sau cho 2.0ml thuốc thử Thio barbituric axit (TBA) vào đun nóng theo thời gian tăng dần từ đến 20 phút cho vào bình định mức 50ml cho nước cất vào đến vạch định mức Để yên 25 phút Đo mật độ quang dung dịch bước sóng tối ưu opt=530nm Vậy bước sóng tối ưu thời gian 10 phút III.1.4 XÁC ĐỊNH LƯỢNG CHẤT ƠXI HỐ K2Cr2O7 TỐI ƯU Cách tiến hành sau : Lấy 2.0 ml dung dịch I (dung dịch axit Sorbic nồng độ(50 µg/mol) cho vào ống nghiệm lượng dung dịch K 2Cr2O7 0.05% 12 Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa Khóa luận tốt nghiệp tăng dần từ đến ml bảng sau: đun nóng thời gian tối ưu phút cho 2.0 ml thuốc thử Thio barbituric axit (TBA) đun nóng thời gian tối ưu 10 phút vào bình định mức 50ml Để yên 25 phút Đo mật độ quang dung dịch bước sóng tối ưu opt=530nm Ta có kết sau lượng chất oxi hoá tối ưu 2.0ml III 1.5 XÁC ĐỊNH pH TỐI ƯU Cách làm sau: Dùng pipet lấy 2.0ml) cho 2ml dung dịch K2Cr2O7 0.05% vào đun nóng phút cho 2.0 ml thuốc thử Thio barbituric axit (TBA) vào, cho lượng axit hay bazo vào tăng dần sau đun nóng 10 phút cho vào bình định mức 50ml kiểm tra pH dung dịch Để yên 25 phút Đo mật độ quang dung dịch bước sóng tối ưu opt =530nm Vậy pH tối ưu 3.5 III.1.6 XÁC ĐỊNH THUỐC THỬ TBA TỐI ƯU Cách làm sau: Lấy 2.0ml dung dịch I cho 2,0 ml dung dịch K2Cr2O7 0,05% vào đun nóng phút cho thuốc thử Thio barbituric axit (TBA) vào ống nghiệm theo lượng tăng dần.từ đến ml đun nóng 10 phút cho vào bình định mức 50ml cho nước cất vào đến vạch định mức Để yên 25 phút Đo mật độ quang A bước sóng opt= 530nm kết thuốc thử tối ưu 2,0 ml Vậy điều kiện tối ưu 2.0ml axit sorbic cần 2.0ml dung dịch K2Cr2O7 0,05% đun phút cho 2.0ml axit thiobarbituric vào đun 10 phút đo mật độ quang bước sóng opt=530nm III.3 KHẢO SÁT THỜI GIAN ỔN ĐỊNH MÀU 13 Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa Khóa luận tốt nghiệp Cách làm sau: Lấy 2.0ml dung cho 2,0ml dung dịch K 2Cr2O7 0.05% vào.đun nóng ,cho 2.0 mlThio barbituric axit (TBA) đun nóng 10 phút cho vào bình định mức 50ml Cho mẫu ổn định thời gian tăng dàn sau Đo mật độ quang A bước sóng opt= 530nm Ta có kết Vậy thời gian đo mẫu tối ưu từ 25đến 30 phút XÂY DỰNG ĐƯỜNG CHUẨN Cách làm sau Lấy 0.00 ; 10.00; 20.00; 40.00; 60.00; 80.00 100 ml dung dịch I (dung dịch có nồng độ 50µg/ml) cho vào bình định mức 100 ml cho nước cất vào định mức đến vạch Sau lấy 2.0ml dung dịch cho tiếp 2.0ml dung dịch K2Cr2O7 0,005% vào đun nóng phút cho 2.0 ml thuốc thử Thio barbituric axit (TBA) đun nóng 10 phút, cho vào bình định mức 50ml cho nước cất vào đến vạch định mức.khi nồng độ dung dịch 0; 0.2; 0.4 ; 0.8; 1.2; 1.6; 2.0 (µg/ml )Tiến hành đo mật độ quang bước sóng tối ưu opt=530nm xây dựng đường chuẩn Ta có kết sau: Bảng ST Nồng độ axit(µg/ml) Mật độ quang ATB 0.0 0.001 0.2 0.082 0.4 0.210 0.8 0.412 1.2 0.606 1.6 0.772 T 14 Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa Khóa luận tốt nghiệp 2,0 1.001 Đồ thị có dạng: y=0.4968x+0.0007 R2=0.9985 Hình 1:Đồ thị phụ thuộc nồng độ chất phân tích mật độ quang V1 XÁC ĐỊNH HIỆU SUẤT CHƯNG CẤT Cách làm: Lấy 25,0 ml dung dịch II ( dung dịch axit sorbic nồng độ 25 µg/ml ) cho vào cốc 100ml, cho tiếp 25,0 ml dung dịch H 2SO4 1N, cho 10,00 g MgSO4 Định mức nước cất đến mức Cho tất vào bình cất Lấy 10,00 ml NaOH 1N cho vào bình chứa sản phẩm cất, cất khoảng 25 phút Lấy sản phẩm cất cho vào bình định mức 100 thêm 15,0 ml H2SO41N vào để trung hòa, cho nước vào định mức đến vạch Lấy 2,0 ml sản phẩm cất cho vào ống nghiệm tiếp tục tiến hành xây dựng đường chuẩn đo mật độ quang dung dịch 15 Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa Khóa luận tốt nghiệp bước sóng opt=530nm Tiến hành tương tự thay hàm lượng MgSO tăng dần từ 15g đến 30 g ta thấy hiệu suất tối ưu 99.20% lượng MgSO4 25g IV.2 KHẢO SÁT SỰ PHỤ THUỘC HIỆU SUẤT CẤT VÀO LƯỢNG H2SO4.1N Cách làm: Lấy 25,00 ml dung dịch II ( dung dịch axit sorbic nồng độ 25 µg/ml ) cho vào cốc 100ml, cho 25g MgSO Cho lượng H2SO41N vào cốc với thể tích tăng dần bảng sau, cho nước cất vào định mức đến vạch Cho tất vào bình cất Lấy 10,0 ml dung dich NaOH 1N cho vào bình chứa sản phẩm cất, cất khoảng 25 phút Lấy sản phẩm cất cho vào bình định mức 100 ml Thêm 15,0 ml H 2SO41N vào để trung hòa Cho nước cất vào định mức đến vạch Lấy 2,0 ml sản phẩm cất cho vào ống nghiệm tiếp tục tiến hành xây dựng đường chuẩn đo mật độ quang dung dịch bước sóng opt=530nm Nhận xét: hiệu suất tối ưu 99.20% lượng H2SO4 1N 25,0ml IV.3 XÁC ĐỊNH THỜI GIAN CẤT TỐI ƯU Cách làm: Lấy 25,00 ml dung dịch axit sorbic nồng độ (25 µg/ml) cho vào cốc 100 ml Cho 25 g MgSO4 25.0ml dung dịch H2SO41N cho vào bình cất đem cất theo thời gian tăng dần từ đến 60 phút Lấy 10,0 ml dung dịch NaOH 1N cho vào bình chứa sản phẩm cất, lấy sản phẩm cất cho vào bình định mức 100ml thêm 15,0 ml dung dịch H 2SO4 1N để trung hòa, cho nước cất vào định mức đến vạch 16 Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa Khóa luận tốt nghiệp Lấy 2.0 ml sản phẩm cất cho vào ống nghiệm tiếp tục tiến hành xây dựng đường chuẩn để đo mật độ quang bước sóng  opt =530nm.: Nhận xét: Thời gian cất tối ưu 25 phút IV.4.1 KIỂM TRA QUY TRÌNH PHÂN TÍCH QUA MẪU TỰ TẠO Mẫu tự tạo: Lấy 30,0 ml dung dịch axit sorbic nồng độ 25µg/ml cho vào cốc 100 ml, cho tiếp 25,0 ml dung dịch H2SO41N 25g MgSO4 vào bình cất, cho nước vào định mức đến vạch Lấy 10,0ml NaOH1N cho vào bình chứa sản phẩm cất, cất 25 phút Cho sản phẩm cất vào bình định mức 100 ml, cho 15,0 ml H2SO4 vào để trung hòa Cho nước cất vào định mức đến vạch Lấy 2.0 ml sản phẩm cất tiếp tục làm cách xây dựng đường chuẩn đo mật độ quang Thu kết bảng 12 sau: Bảng 13: Kiểm tra mẩu tự tạo Lần đo A C(µg/ml C0(µg/ml) 0.148 0.2965 7.4125 0.149 0.2985 7.4625 0.147 0.2945 7.3625 C0tb(µg/ml) 7.4125 Ta có Sx = 5.10-3 Vậy Ttn = 3.3 < T(95.3) = 4.3 Với độ tin cậy sai số ngẫu nhiên nên áp dụng phương pháp IV.4.2.KIỂM TRA HIỆU SUẤT CẤT VÀO MẪU NƯỚC MẮM KHƠNG CĨ AXIT SORBIC Lấy 100,0 ml nước mắm khơng có chất bảo quản axit sorbic , hút 5,0 ml nước mắm cho vào cốc 100 ml,cho tiếp 25,0 ml dung dịch H2SO41N 25g MgSO4 vào Cho tất vào bình cất, cho nước vào định mức đến vạch Lấy 10,0ml NaOH1N cho vào bình chứa sản phẩm cất, 17 Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa Khóa luận tốt nghiệp cất 25 phút Cho sản phẩm cất vào bình định mức 100 ml, cho 15,0 ml H2SO4 vào để trung hòa Cho nước cất vào định mức đến vạch Vậy nồng độ C= 25 (µg/ml ) Lấy 2.0 ml sản phẩm cất tiếp tục làm cách xây dựng đường chuẩn Đo mật độ quang ta có kết bảng sau 14: Bảng 14: mật độ quang mẫu thử Nồng độ Nồng độ C0 C(µg/ml) (C0 = C.25)(µg/ml ) Lần đo Mật độ quang A 0.485 0.9747 24.373 0.480 0.9648 24.120 0.482 0.9689 24.237 Vậy nồng độ COTB = 24.388 (µg/ml) Do hiệu suất cất 99,20% nên nồng độ C0TT = 24.443 (µg/ml) Vậy q 24, 443  25,000  2,36% 25,000 V KIỂM TRA MẪU V XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG AXIT SORBIC CÓ TRONG HẠT TRÂN CHÂU MẪU Hạt trân châu sa na (Đồng Nai) Cách làm: Cân 10,00g hạt trân châu cho vào cốc 100 ml cho 25g MgSO 25,0ml H2SO41N vào, cho nước cất vào định mức đến vạch Cho tồn vào bình cất Lấy 10,0ml NaOH 1N cho vào bình chứa sản phẩm cất,đem cất 25 phút Lấy sản phẩm cất cho vào bình định mức 50 ml thêm 15,0 ml H2SO4 1N vào, định mức đến vạch nước cất Lấy 2,0 ml dung dịch cho vào ống nghiệm, tiến hành cho chất 18 Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa Khóa luận tốt nghiệp oxi hóa, thuốc thử làm xây dựng đường chuẩn đo mật độ quang Ta thu kết bảng sau: 1000g mẫu thì: m = (5.816± 0.039).250.20 (µg) = 29.080 ± 0.19mg Hay hàm lượng axit sorbic trân châu sana là: 29,080 ± 0.19mg/ kg Theo tiêu chuẩn VN: m = 1g/1kg Mẫu hạt trân châu Hoa Trân (BD) Làm tương tự ta có: m =( 6,1869± 0,04 ).250.20 (µg) = 30.934 ± 0.2 mg/1kg Theo tiêu chuẩn VN: m = 1mg/1kg V.2 XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG AXIT SORBIC TRONG NƯỚC MẮM NAM NGƯ Cách làm: Lấy 10,0 ml nước mắm, cho tiếp 25g MgSO4 25ml H2SO4 cho nước cất vào đến vạch Cho vào bình cất Lấy 10,0ml NaOH1N cho vào bình chứa sản phẩm cất đem cất 25 phút Lấy sản phẩm cất cho vào bình 100 ml thêm 15,0 ml H2SO4 1N vào định mức đến vạch nước cất Lấy 2,0 ml dung dịch sản phẩm cất cho vào ống nghiệm đem tiến hành cho chất oxi hóa, thuốc thử điều kiện xây dựng đường chuẩn đo mật độ quang ta thu kết sau Hay hàm lượng axit sorbic nươc mắm m= 0.404± 0.0102g/l Theo TCVN cho phép 0.5g/l PHẦN III KẾT LUẬN Đã tổng quan số vấn đề về: đặc điểm axit sorbic, đặc 19 Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa Khóa luận tốt nghiệp điểm chất phụ gia, chất bảo quản thực phẩm Đã chọn điều kiện tối ưu để định lượng axit sorbic thực phẩm phương pháp trắc quang bước sóng tối ưu, chất oxi hóa K2Cr2O7 tối ưu, thuốc thử axit thiobarbituric tối ưu, thời gian tối ưu.v.v Đã tìm số điều kiện tối ưu để chưng cất axit sorbic khỏi thực phẩm: lượng MgSO 4, H2SO4 1N tối ưu, thời gian cất tối ưu Đã tiến hành xác định hàm lượng sorbic số mẫu nước mắm Nam Ngư hạt trân châu bán thị trường thu kết sau: Mẫu nước mắm Nam Ngư có m = 404,96± 10,m2g/l Trong hạt trân châu có m = 29.080± 0,19mg/kg.(của công ty sana – Đồng Nai) m = 30,934± 0,2mg/kg.(của công ty Hoa Trân- BD) Các mẫu phân tích có hàm lượng axit sorbic nằm giới hạn cho phép Do thời gian không cho phép nên chúng tơi khơng thể thực phân tích số hàm lượng axit sorbic số mẫu thực phẩm khác Chúng tơi hi vọng quy trình áp dụng để phân tích chất bảo quản axit sorbic thực phẩm có thị trường Vì điều kiện có hạn nên đề tài khơng thể tránh khỏi thiếu sót mong góp ý đạo thầy cô bạn TÀI LIỆU THAM KHẢO 1.Nguyễn Tình Dung – Hóa phân tích đại, NXB Giáo dục, 20 Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa Khóa luận tốt nghiệp 2006 Hoàng Minh Châu, Từ Văn Mạc, Từ Vọng Nghi – Cơ sở hóa phân tích – NXB Khoa học kỷ thuật, năm 2000 Nguyễn Khắc Nghĩa – Áp dụng thống kê xử lý số liệu hóa phân tích Hồ Viết Q – Cơ sở hóa phân tích đại – NXB Sư phạm Hồ Viết Q – Phân tích lý hóa – NXB Giáo dục, năm 2006 Lê Ngọc Tú - Độc học an toàn thực phẩm - Nhà xuất khoa học kỷ thuật 2006 www/ google.com.vn Lê Thị Sen- khóa luận tốt nghiệp năm 2004: xác định hàm lượng vitamin thuốc thử 2,6 điclophenolindophenol www/oi wah lan.com.vn 10 Manual of method of analysis of food Lab Manual New Delhi 2005 21 Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Kỳ - Lớp 47 B Hóa ... tài : xác định hàm lượng axit sorbic thuốc thử axit thiobarbiturric chất oxi hoá K2Cr2O7 Trong phạm vi đề tài đặt nhiệm vụ sau: - Tìm điều kiện tối ưu cho phép phân tích định lượng axit sorbic. .. mỏng làm silycagen, thuốc thử màu axit thiobarbituric sắt clorua peoxit Nếu phun chất thử khơng khí khơ sắt cloruapeoxit tinh khiết axit sorbic (nếu có) có đốm vàng nằm phía Nếu phun chất thử axit. .. thuốc thử axit thiobarbituric chất oxi hóa K2Cr2O7 - Tìm hiệu suất cất tối ưu để cất axit sorbic khỏi thực phẩm -Kiểm tra điều kiện tối ưu qua mẫu tự tạo - Áp dụng quy trình để xác định hàm lượng