BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC VINH Vế HUY TRUNG Phân lập xác định cấu tạo số hợp chất từ rễ Vối (CLEISTOCALYX OPERCULATUS (ROXB) MERR ET PERRY) ë NghƯ An LN V¡N TH¹C SÜ Hãa häc VINH, 2012 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC VINH Vâ Huy Trung Ph©n lËp xác định cấu tạo số hợp chất từ rƠ c©y Vèi (CLEISTOCALYX OPERCULATUS (ROXB) MERR ET PERRY) ë Nghệ An Chuyên ngành: hóa hữu Mà số: 604427 LN V¡N TH¹C SÜ Hãa häc Ngêi híng dÉn khoa học: PGS.TS HOàNG VĂN LựU VINH, 2012 Lời cảm ơn Với lòng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin chân thành gửi lời cảm ơn tới: PGS.TS Hoàng Văn Lựu - khoa Hoá học - Trờng Đại học Vinh, ngời đà giao đề tài tận tình hớng dẫn, giúp đỡ suốt trình học tập, nghiên cứu hoàn thiện luận văn PGS.TS Chu Đình Kính - Viện Hoá học - Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam, ngời đà tận tình hớng dẫn, giúp đỡ trình ghi phổ xác định cấu trúc hợp chất PGS.TS Lê Văn Hạc, TS.Trần Đình Thắng đà có ý kiến đóng góp quý giá cho luận văn ThS NCS Nguyễn Văn Thanh đà tận tình giúp đỡ suốt trình thực nghiệm Nhân dịp này, xin bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc tới thầy giáo, cô giáo khoa Hoá Học; khoa Sau Đại học-Trờng Đại Học Vinh; gia đình, ngời thân bạn bè đà động viên giúp đỡ vật chất lẫn tinh thần để hoàn thành đợc luận văn Lời cảm ơn Mục lục Danh sách bảng Danh sách hình Danh sách sơ đồ Bảng kí hiệu viết tắt Mở đầU .1 LÝ chọn đề tài NhiƯm vơ nghiªn cøu .2 Đối tợng nghiên cứu Đối tợng nghiên cứu phạm vi nghiên cứu Những đóng góp đề tài Chơng Tæng quan 1.1 Đại cơng thực vật học 2 Đặc điểm thành phần hoá học 1.3 Giíi thiƯu mét sè c©y thuéc chi Syzygium 1.3.1 C©y gioi (Syzygium jambos) .3 1.3.2 C©y MËn .8 1.3.3 Cây Sắn thuyền .10 1.3.4 Cây Đing hơng .12 1.4 C©y Vèi 16 1.4.1 Tªn gäi 16 1.4.2 Ph©n bè 16 1.4.3 Mô tả thực vật 16 1.4.4 Thành phần hóa học Vối 17 1.4.5 Tác dụng dợc lí .29 Chơng Phơng pháp nghiên cứu thực nghiệm 31 2.1 Phơng pháp nghiên cứu 31 2.1.1 Ph¬ng ph¸p lÊy mÉu 31 2.1.2 Phơng pháp phân tích, tách phân lập hợp chất 31 2.1.3 Phơng pháp khảo sát cấu trúc hợp chất 31 2.2 Thùc nghiÖm .32 2.2.1 Thiết bị ho¸ chÊt 32 2.2.2 Tách xác định cấu trúc hợp chÊt 32 2.2.3 X¸c định cấu trúc hợp chất 34 Chơng Kết thảo luận .35 Xác định cấu tạo hợp chất 35 3.1 Xác định cấu tạo hợp chÊt (TDRV 169) 35 3.2 Xác định cấu tạo hợp chất (TDRV170) 54 KÕt luËn 68 Tài liệu tham khảo .69 Mở đầu Lý chọn đề tài Thế giới hớng tìm kiếm chất có hoạt tính chữa bệnh có thảo dợc nc Vit Nam ta c thiờn nhiờn u đãi với cánh rừng nguyên sinh chạy dọc đất nước, Thống kê có 5000 loại thuốc có nhiều đặc hữu Đơng dược có nguồn gốc từ động vật, khoáng vật thực vật cổ nhân phát sử dụng hàng ngàn năm để phục vụ cho sức khoẻ người Ngày ngành hóa học dược học tìm cách phân lập xác định cấu tạo chất có loại thảo dược Trong nhiỊu loµi thùc vật đó, họ Sim (Myrtaceae) họ lớn, gồm khoảng 100 chi với gần 3000 loài phân bố chủ yếu nớc nhiệt đới châu Đại Dơng nớc ta, họ Sim chủ yếu đợc dùng để làm thuốc chữa bệnh, có vối (Cleistocalyx operculatus (Roxb) Merr Et perry), thuéc chi Syzygium C©y vối mọc hoang đợc trồng hầu khắp tØnh ë níc ta, tËp trung nhiỊu ë miỊn B¾c, miền Trung, đợc nhân dân sử dụng nhiều sèng nh nÊu níc ng, kÝch thÝch tiªu hãa Trong vối, nụ vối có tanin, số chất khống, vitamin có khoảng 4% tinh dầu với mùi thơm dễ chịu, số chất kháng sinh có khả diệt nhiều loại vi khuẩn gây bệnh Streptococcus, Staphylococcus, vi khuẩn bạch hầu, phế cầu, Salmonella,Bacillus subtilis Lá vối tươi hay khô sắc đặc coi thuốc sát khuẩn dùng chữa nhiều bệnh da ghẻ lở, mụn nhọt Trong thực tế, nhân dân ta thường lấy vối để tươi vò nát, nấu với nước sôi lấy nước đặc gội đầu chữa chốc lở hiệu nghiệm Theo tài liệu"Thuốc sức khỏe": Lá vối có tác dụng kiện tỳ, giúp ăn ngon, tiêu hóa tốt Chất đắng vối kích thích tiết nhiều dịch tiêu hóa, chất tanin bảo vệ niêm mạc ruột, cịn chất tinh dầu có tính kháng khuẩn khơng hại vi khuẩn có ích ruột Nước vối sử dụng giải khát, giải nhiệt, có tác dụng lợi tiểu mát, dùng thích hợp cho tất mùa năm đặc biệt mùa nóng V× sù kỳ diệu tác dụng chữa bệnh vối nên đà có nhiều tác giả nớc đà phân lập xác định cấu tạo chất có Vối nhiều hợp chất chứa đợc phân lập xác định phận khác thuốc quý này( đặc biệt rễ cây) Vỡ lớ ú nờn tụi chn ti: Phân lập xác định cấu tạo số hợp chất từ rễ Vối (CLEISTOCALYX OPERCULATUS (ROXB) MERR ET PERRY) ë NghÖ An” nh»m gãp phần xác định thành phần hóa học vối, tìm nguồn nguyên liệu cho ngành công nghiệp dợc liệu, công nghiệp hơng liệu, khai thác sử dụng có hiệu nguồn tài nguyên quý giá địa phơng Mục đích nghiên cứu Phân lập xác định đợc cấu tạo hợp chất có rễ vối Nghệ An Nhiệm vụ nghiên cứu - LÊy mÉu rƠ c©y vèi - Ng©m víi dung môi metanol chiết với dung môi khác - Phân lập hợp chất phơng pháp sắc ký cột sắc ký lớp mỏng - Làm chất phơng pháp rửa kết tinh phân đoạn - Xác định cấu trúc hợp chất phơng pháp phổ: Phổ ESI-MS phổ cộng hởng từ hạt nhân chiều (1H - NMR, 13C - NMR, DEPT, HMBC, HSQC) Đối tợng nghiên cứu phạm vi nghiên cứu Đối tợng nghiên cứu rễ vối, mẫu lấy thành phố Vinh, tĩnh Nghệ An Những đóng góp đề tài Góp phần hoàn thiện hợp chất có dợc liệu từ có hớng nghiên cứu hợp chất có hoạt tính chữa bệnh có vối để tìm cách chiết tách điều chế theo quy mô công nghiệp Chơng Tổng quan 1.1 Đại cơng vÒ thùc vËt häc hä Sim (Myrtaceae) Hä Sim (Myrtaceae) họ lớn Sim (Myrtales) hay gọi Đào kim nơng thuộc phân lớp hoa hồng - lớp hoa mầm ngành thực vật hạt kÝn Trªn thÕ giíi, hä Sim gåm 100 chi với gần 3000 loài phân bố vùng nhiệt đới nhiệt đới, chủ yếu Châu Mỹ Châu úc Việt Nam, họ Sim gồm 13 chi với gần 100 loài đợc phân bố khắp miền Bắc, Trung Nam Các thuộc họ Sim gỗ lớn, nhỏ, hay bụi Lá mọc đối, đơn nguyên, kèm Hoa chúng tập hợp thành cụm, hình chùm, mọc đơn độc Các đài dính lại với dới thành hình chén, cánh hoa rời dính mép ống đài Nhị nhiều, bất định xếp không theo trật tự nào, nhị thờng cuộn lại nụ, nhị rời hay dính dới thành ống ngắn Bộ nhị có số noÃn thờng số cánh hoa hơn, dính lại với thành bầu dới bầu với số ô tơng ứng số noÃn, đính noÃn trụ giữa, vòi, đầu nhuỵ Quả mọng, thịt, thờng đế hoa phát triển thành, có khô mở, mang đài tồn đỉnh Hạt nội nhũ [12, 15, 17] Trong lịch sử, họ Myrtaceae đà đợc chia thành hai phân họ: -Phân họ Myrtoideae có nhiều cùi thịt đối mép trơn Phần lớn chi họ có ba dạng phôi dễ nhËn C¸c chi cđa Myrtoideae cã thĨ rÊt khã phân biệt đà chín Phân họ Myrtoideae đợc tìm thấy khắp giới khu vực nhiệt đới cận nhiệt đới, với trung tâm đa dạng nằm Trung Mỹ, Nam Mỹ, đông bắc Australia Malaysia - Phân họ Leptospermoideae có khô, không nứt (quả nang) mọc so le hay theo vòng xoắn Phân họ Leptospermoideae chủ yếu đợc tìm thấy Australia Nhiều chi miền tây Australia có bị suy thoái mạnh hoa mang đặc điểm điển hình cho vùng sinh trởng khô cằn Trong họ Sim, chi lớn Eugenia (trên giới có 600 loài, nớc ta có 26 loài đợc chuyển vào chi Syzygium) Những chi phần lớn gỗ trung bình đa số hoang dại Trong chi có thuốc quí đinh hơng (E caryophyllata thunb hay Syzygium aromaticum Merr et Perry), cã nô dïng làm thuốc làm gia vị Một số loài thuộc chi Eugenia đà đợc tách đặt vào chi míi nh c©y gioi (Syzygium jambos (L.) Alston, Eugenia jambos L) có ăn ngon, vối (Cleislocalyx operculatus (Roxb.) Merr et Perry) đợc trồng lấy nụ để uống nớc làm thuốc chữa bệnh 1.2 Đặc điểm thành phần hoá học Các thuộc họ Sim có chứa hợp chất thuộc khung flavonoit, tritecpenoit, steroit ankaloit Ngoài có số axit béo hidrocacbon 1.3 Giới thiệu sè c©y thuéc chi Syzygium 1.3.1 C©y gioi (Syzygium jambos) 1.3.1.1 Mô tả thực vật Cây gioi thuộc họ sim có tên khoa học Syzygium jambos (L.)Alston Cây gioi đợc trồng rải rác nhiều vùng ®Êt níc ta, mét sè níc trªn thÕ giíi nh vùng Đông Nam á, Trung Quốc, ấn Độ, Pakistan, Iraq, Guatemal Cây gioi thân gỗ cao khoảng 6-10 m, mọng tròn nh lê, đỉnh có hốc lõm đài tồn hạt có hình bầu dục, gioi mùi thơm hoa hồng Cây roi ( Lý, Mận bồ đào) ( Syzygium jambos), tên Anh Mỹ Rose apple, Malabar plum Cây thuộc thân mộc, cao trung bình 10-12 m Lá hình mũi giáo, thon hẹp nơi gốc, thon dài mảnh phía đầu, lớn cỡ 13-20 cm x 3-5 cm, cuống ngắn Hoa lớn màu trắng xanh nhạt, mọc thành chùm Quả mọng, gần nh hình cầu, có dạng lê, đờng kính cm, xốp, da vàng nhạt, hồng, bóng nh thoa sáp đính thêm đài hoa xanh Quả nớc nhng thoảng mùi thơm hoa hồng, có vài hạt màu xám Hạt rời nên lắc nghe tiếng lục cục bên Cây phân bố vùng ấnMÃ, Indonesia, rÊt phỉ biÕn ë ViƯt Nam [41] 1.3.1.2 Thµnh phần hoá học Bằng phơng pháp GC/MS đà nhận đợc 17 chất từ tinh dầu gioi Bảng 1.1 Thành phần hoá học tinh dầu gioi TT Tªn chÊt TT Tªn chÊt isobutylic 10 10-translinalooloxit hexanal 11 -linalooll butylic 12 geranol isoamylic 13 -benzylic 3-hydroxyl-2-butanol 14 2-phenyletylic hexanol 15 -3-phenyl-1propanol cis-hexen-1-ol 16 Andehydxinamic -trans-3-hexen-ol 17 -xinamic 9-cis-linalooloxit Mïi thơm gioi hai hợp chất thứ 10 gây nên Bảng 1.2 Thành phần hoá học tinh dầu bột gỗ gioi TT Tên chÊt TT Tªn chÊt Etoxuletyl acetat(39,2%) linalool(5,2%) -3-hexanol(9,3%) -xinamic(10,3%) Ngoài có 19 chất khác nhng hàm lợng thấp Hoa gioi có thành phần flavonoit [24] Bảng 1.3 Thành phần hoá học tinh dầu hoa gioi TT Tên chất Hàm lợng 8-hydroxyl-6-metoxyl-flavonon 19,8 % 7-hydroxylflavonon 16,7% %),-8-hydroxyl-5-metyl flavonon 4,5% -5-hydroxyl,7-metoxyl,6,81,8 % dimetylflavonon Theo t¸c giả Nguyễn Quang Tuệ [14], nghiên cứu thành phần hóa học tinh dầu gioi Nghệ An Hà Tĩnh, tác giả thấy có 30 hợp chất, đà xác định đợc 18 hợp chất với thành phần - pinen (16,8 - 18,8%),  - pinen (6,3 - 11,0%),  - ocimen (26,5 - 14,0%), - terpinen (26,5 - 14,5%) Thành phần tinh dầu hoa gioi nerolidol (16,4%), caryophyllen (89,8%), - humulen (7,1%) Còn thành phần tinh dầu gỗ gioi terpinen (11,8%), - caryophyllen (8,3%) Từ dịch chiết ete dầu hỏa hoa gioi, tác giả xác định thấy có hai flavonoit chiếm hàm lợng cao - hyđroxy, - metoxy flavonon 14,5%) 5,7 - dimetoxy flavonon (9,59%), phần lại este axit béo nh 9,12 -octadecadienoic metyl este (8,31%) vµ hexadecanoic metyl este (8,20%) Thµnh phần dịch chiết metanol hoa gioi flavonoit gåm cã hỵp chÊt : - hydroxy, -metoxy flavanon (19,84%) ; 5,7 - dihydroxy flavanon (16,65%) ; 6,8 - dihydroxy - - metyl flavanon (4,45%) ; 5,7 dimetoxy flavanon (3,64%) ; - hydroxy - - metoxy - 6,8 - dimetyl flavanon (1,8%) Ngoµi xác định đợc ancaloit xetone phenyl - phenylpyaolo [1,5 - a] pyridin - - yl OH O H3CO O H3CO O (1) - dihydroxy - - metoxy flavanon OCH3 O (2) 5, - dimetoxy flavanon OH HO O O HO OH CH3 O (3) 5, - dihydroxy flavanon O (4) 6, - dihydroxy - - metyl flavanon CH3 H3CO O H3C OH O (5) - hydroxy - - metoxy - 6, - dimetyl flavanon Từ Gioi, Allsston đà tách xác định đợc cấu trúc 2flavonol glycosides axyl hoá :3-O-(4- oacetyl) -  -L-rhamnopyranoside cđa meamsetin(myricetin-4’- methyl ether vµ myricetin 3-O-( 4”-O-acetyl-2”- Ogalloyl)-  -L-rhamnopyranoside OH OR1 O OH OH O O OH O Me R3O OH R2O (6) R1 = Me, R2= H, R3=-COCH3 (7) R1 = H, R2 R3 = -COCH3 Vµ flavonoit: quercetin vµ myricetin 3-O- -D- xylo pyranosyl(1-2)- -Lrhamnopyranoside Từ cao ete dầu hoả vỏ gioi, phơng pháp sắc kí cột silicagen hệ dung môi rửa giải ete- benzen đà tách đợc: axit betulinic, friedelin, sitostrol ... DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC VINH Võ Huy Trung Phân lập xác định cấu tạo số hợp chất từ rễ Vối (CLEISTOCALYX OPERCULATUS (ROXB) MERR ET PERRY) Nghệ An Chuyên ngành: hóa hữu Mà số: 604427 LUậN VĂN... 32 2.2.3 Xác định cấu trúc hợp chÊt 34 Ch¬ng Kết thảo luận .35 Xác định cấu tạo hợp chất 35 3.1 Xác định cấu tạo hợp chất (TDRV 169) 35 3.2 Xác định cấu tạo hỵp chÊt... định cấu tạo chất có Vối nhiều hợp chất chứa đợc phân lập xác định phận khác thuốc quý này( đặc biệt rễ cây) Vì lí nên tơi chọn đề tài: “Ph©n lập xác định cấu tạo số hợp chất tõ rƠ c©y Vèi (CLEISTOCALYX