Luận văn Tốt nghiệp cao học Nguyễn Văn Sơn bộ giáo dục và đào tạo Trờng đại học vinh -------@& ?-------- nguyễn văn sơn Góp phần Nghiên cứu thành phần hóa học của cây bởi bung ( glycosmis pentaphylla corr.) ở nghệ an luận văn thạc sĩ hoá học Chuyên ngành: Hoá hữu cơ Mã số : 60. 44. 27 Vinh 2008 Chuyên ngành Hoá hữu cơ 1 Luận văn Tốt nghiệp cao học Nguyễn Văn Sơn Lời cảm ơn *********** Luận văn này đợc hoàn thành tại: phòng thí nghiệm chyên đề Hóa Hũ cơ, trung tâm ứng dụng và chuyển giao Công nghệ - Đại học Vinh, Viện Hóa, Viện khoa học và Công nghệ Việt Nam. Với sự kính trọng và lòng biết ơn chân thành nhất, tôi xin cảm ơn: - PGS. TS. NGƯT Lê Văn Hạc Đã giao đề tài và tận tình hớng dẫn, giúp đỡ, tạo mọi điều kiện về mọi mặt trong suốt quá trinh học tập và nghiên cứu hoàn thành luận văn này. - Tôi cũng xin chân thành cảm ơn: - PGS. TS Hoàng Văn Lựu, TS Nguyễn Xuân đã đóng góp nhiều ý kiến qúy báu cho luận văn. - PGS.TS Ngô Trực Nhã, bôi môn thực vật khoa Sinh, Đại học Vinh đã giúp tội định danh tên thực vật. - ThS. NCS TRần Đăng Thạch đã giúp tôi trong quá trình thực nghiệm làm luận văn. Nhân dịp này, tôi cũng xin gửi lời cảm ơn đến các thầy cô, CB khoa Hóa, bạn bè, gia đình và ngời thân đã tạo mọi điều kiện và giúp đỡ tôi hoàn thành tốt luận văn này. Vinh, Tháng 12 năm 2008 Chuyên ngành Hoá hữu cơ 2 Luận văn Tốt nghiệp cao học Nguyễn Văn Sơn Nguyễn Văn Sơn Chuyên ngành Hoá hữu cơ 3 Luận văn Tốt nghiệp cao học Nguyễn Văn Sơn Mục Lục trang Lời cảm ơn Danh mục các kí hiệu, các từ viết tắt Mở Đầu 1 1. Lý do chọn đề tài .1 2. Nhiêm vụ nghiên cứu 1 3. Đối tợng nghiên cứu 2 Chơng 1. Tổng quan .3 1.1. Chi Glycosmis 3 1.1. Đặc điểm thực vật và phân loại .3 1.1.2. Thành phần hoá học chi Glycosmis .4 1.2.1. Tritecpenoit .5 1.2.2. Flavonoit .6 1.2.3. Cumarin 6 1.2.4. Ancaloit .7 1.2.4.1. Dẫn xuất quinolon .7 1.2.4.2. Dẫn xuất quinazolin và quinazolon .8 1.2.4.3. Dẫn xuất furoquinolin và furoquinolon .9 1.2.4.4. Dẫn xuất acridon .10 1.2.4.5. Dẫn xuất cacbazol .12 1.2.4.6. Amit .12 1.3. Cây bởi bung (Glycosmis pentaphylla Corr.) .18 1 3.1. Đặc điểm thực vật 18 1.4. Thành phần hoá học .19 1.5. Hoạt tính sinh học và ứng dụng .25 Chơng 2 . Phơng pháp nghiên cứu và Thực nghiệm .27 Chuyên ngành Hoá hữu cơ 4 Luận văn Tốt nghiệp cao học Nguyễn Văn Sơn 2. 1. Phơng pháp nghiên cứu .27 2.1.1. Lấy mẫu và xử lý mẫu 27 2.1.2 Phơng pháp thu tinh dầu và phân lập các chất .27 2.1.3. Phơng pháp xác định và khảo sát cấu trúc các hợp chất 28 2.2. Tiến hành thực nghiệm .28 2.2.1. Hoá chất và thiết bị 28 2.2.1.1. Hóa chất 28 2.2.1.2. Dụng cụ và thiết bị máy móc .28 2.2.1.3. Xác định thành phần hoá học tinh dầu lá bởi bung .29 2.2.2. Cách tiến hành chng cất thu hồi tinh dầu lá cây bởi bung .29 2.2.3. Nghiên cứu các hợp chất từ thân cây bởi bung 29 2.2.3.1. Cách tiến hành chạy cột cao metanol của cây bởi bung .31 Chơng 3: Kết quả và thảo luận 34 3.1. Thành phần hóa học của cây bởi bung (Glycosmis pentaphylla Corr.) 34 3.1.1. Kết quả tinh dầu lá cây bởi bung 34 3.2. Xác định cấu trúc của các chất trong thân cây bởi bung .38 Chơng 4: Kết luận 53 Tài liệu tham khảo 54 Phụ lục .56 Chuyên ngành Hoá hữu cơ 5 Luận văn Tốt nghiệp cao học Nguyễn Văn Sơn Danh mục các bảng, sơ đồ, hình vẽ và phổ TT Tên các danh mục trang Bảng 1 mô tả tên khoa học, tên Việt Nam và vùng tìm thấy các loài thuốc chi Glycosmis ở Việt Nam. 3 Hình 1.1 Cây bởi bung (Glycosmis pentaphylla Corr.) 19 Hinh 1 2 Bộ dụng cụ chng cất tinh dầu lá cây bởi bung (Glycosmis pentaphylla Corr) 28 Sơ đồ 1: Quy trình ngâm, chiết, tách một số chất từ thân cây bởi bung Bảng 2 Thành phần hóa học ca lá và hoa cây bởi bung (G. pentaphylla (Retz) corr.) ở huyện Mê Linh Vĩnh Phúc 20 Bảng 3 Thành phần hóa học của tinh dầu lá cây bởi bung thu hái ở Hà Tĩnh 22 Bảng 4 Thành phần hóa học của tinh dầu lá cây bởi bung thu hái ở Nghệ An 22 Hình 2.2 Bộ dụng cụ chng cất tinh dầu lá cây bởi bung 28 Sơ đồ 1 Quy trình ngâm, chiết, tách một số hợp chất từ thân cây bởi bung 30 Hình 2.3 Cột chạy sắc kí 31 Bảng 5 Số liệu của quá trình chạy sắc kí cột cao thân bởi bung 32 Bảng 6 Số liệu của quá trình chạy sắc kí bản mỏng cao thân bởi bung 33 Bảng 7 Kết quả tách tinh dầu lá cây bởi bung 34 Bảng 8 Thành phần hóa học và hàm lợng % của tinh dầu lá cây bởi bung 34 Hình 3.1 Sắc kí đồ mao quản GC của tinh dầu lá cây bởi bung (Glycosmis pentaphylla Corr.) ở Nghệ An 37 Hình 3.2 Phổ khối của chất A 39 Hình 3.3 Phổ khối của chất A 40 Hình 3.4 Phổ 1 H-NMR của hợp chất 41 Hình 3.5 Phổ 1 H-NMR của hợp chất A 42 Hình 3.6 Phổ 13 C-NMR của hợp chất A 43 Hình 3.7 Phổ 13 C-NMR của hợp chất A 44 Hình 3.8 Phổ 13 C-NMR của hợp chất A 45 Bảng 9 Số liệu phổ 1 H - NMR, 13 C NMR của chất A 46 Hình 3.9 Phổ HMBC của hợp chất A 47 Hình 3.10 Phổ HMBC của hợp chất A 48 Chuyên ngành Hoá hữu cơ 6 Luận văn Tốt nghiệp cao học Nguyễn Văn Sơn h Hinh 3.11 Phổ HSQC của hợp chất A 49 Hình 3.12 Phổ HSQC của hợp chất A 50 Hình 3.13 Phổ HSQC của hợp chất A 51 Chuyên ngành Hoá hữu cơ 7 Luận văn Tốt nghiệp cao học Nguyễn Văn Sơn danh mục các kí hiệu, các chũ viết tắt 1 H-NMR (MHz, dung môi đo) Phổ cộng hởng từ hạt nhân proton 13 C-NMR (MHz, dung môi đo) Phổ cộng hởng từ hạt nhân cacbon 13 HMBC Heteronuclear Phổ cộng hởng từ hạt nhân hai chiều Multibond Correlation (phổ rơng quan đa kết dị hạt nhân) HSQC Heteronuclear Selected Phổ cộng hởng từ hạt nhân hai chiều Quantum Coherence (phổ rơng quan đa kết dị hạt nhân) EI-MS (70eV) Electron Impact- Mass- Phổ khối va chạm electron ở 70eV Spectroscopy MS Mass-Spectroscopy Phổ khối lợng GC Sắc kí khí mao quản GC/MS Gas chromatography- Sắc kí khí mao quản liên hợp với sắc Mass-Spectroscopy kí khối phổ s Singlet d Duplet dd Dublet của dublet dt Dublet của triplet dm Multiplet q Quarlet dq Dublet của quarlet t Triplet td Triplet của dublet TMS Tretramethylsilan DMSO Dimetylsulfoxid J(Hz) Hăng số tơng tác T 0 .n.c Điểm nóng chảy SKC Sắc ký cột (ppm) Độ chuyển dịch hoá học Chuyên ngành Hoá hữu cơ 8 Luận văn Tốt nghiệp cao học Nguyễn Văn Sơn Mở đầu 2. Lý do chọn đề tài Trong hệ thực vật Việt Nam, họ Cam quýt (Rutaceae) là một họ thực vật lớn, có 150 chi, 2000 loài thuộc các chi Glycosmis, Evodia, Clausena, Murraga, Zanthoxilum Trong đó có hơn 100 loài cây đợc dùng làm thuốc chữa bệnh. Ngoài ra các cây họ cam quýt còn đợc dùng làm thực phẩm và hơng liệu cho ngành mỹ phẩm. Cây bởi bung có tên khoa học là Glycosmis pentaphylla Corr. Thuộc họ Cam quýt (Rutaceae), phân họ Arantiodeae, phân nhóm Clauseneae. Cây mọc hoang phổ biến ở các nớc Đông Nam á, Trung Quốc, ấn Độ và Australia, ở nớc ta cây mọc hoang ở hầu hết các tỉnh từ đồng bằng, trung du đến vùng núi thấp d- ới 1000m. Trong đông y ngời ta dùng cây bởi bung làm thuốc giúp sự tiêu hoá, hồi phục sức khoẻ của phụ nữ sau khi sinh nở, chữa thấp khớp, đau lng, tiêu chảy, da vàng, dùng ngoài phối hợp với các thuốc khác sát trùng lên da, chữa một số bệnh về răng, tai, trị ho, thiếu máu, cảm cúm ngoài ra còn dùng làm thơm cơm rợu [3]. Đã có một số công trình trong nớc và ngoài nớc nghiên cứu về thành phần hoá học của cây bởi bung [3-20]. Tuy nhiên cha có công trình nào nghiên cứu về thành phần hoá học phần thân và rễ cây bởi bung ở Nghệ An. Chính vì vậy chúng tôi chọn đề tài Góp phần nghiên cứu thành phần hoá học của cây bởi bung (Glycosmis pentaphylla Corr.) ở Nghệ An. Từ đó góp phần xác định thành phần hoá học của cây bởi bung và tìm ra nguồn nguyên liệu cho ngành dợc liệu, hơng liệu và mỹ phẩm. Chuyên ngành Hoá hữu cơ 9 Luận văn Tốt nghiệp cao học Nguyễn Văn Sơn 2. Nhiêm vụ nghiên cứu. Trong luận văn này, chúng tôi có các nhiệm vụ: * Chng cất lôi cuốn hơi nớc thu tinh dầu phần lá cây bởi bung * Xác định thành phần hoá học của tinh dầu lá cây bởi bung * Xác định thành phần hoá học của thân cây bởi bung * Chiết chọn lọc với các dung môi thích hợp để thu đợc hỗn hợp các hợp chất của thân cây bởi bung. * Sử dụng các phơng pháp sắc kí và kết tinh phân đoạn để phân lập các hợp chất. *Sử dụng các phơng pháp phổ để xác định cấu trúc các hợp chất thu đợc. 3. Đối tợng nghiên cứu. Đối tợng nghiên cứu là toàn bộ các bộ phận lá và thân của cây bởi bung (Glycosmis pentaphylla Corr.) thuộc họ Cam quýt (Rutaceae) ở Nghệ An. Chuyên ngành Hoá hữu cơ 10 . bung ở Nghệ An. Chính vì vậy chúng tôi chọn đề tài Góp phần nghiên cứu thành phần hoá học của cây bởi bung (Glycosmis pentaphylla Corr.) ở Nghệ An. Từ đó góp. nớc nghiên cứu về thành phần hoá học của cây bởi bung [3-20]. Tuy nhiên cha có công trình nào nghiên cứu về thành phần hoá học phần thân và rễ cây bởi bung