”Nghiên cứu một số đặc tính sinh học của vi khuẩn streptococcus spp gây bệnh xuất huyết ở cá rô phi ở miền bắc

MỤC LỤCLời cam đoaniLời cảm ơn !iiMục lụciiiDanh mục chữ viết tắtviDanh mục bảngviiDanh mục hìnhviii1MỞ ĐẦU11.1Đặt vấn đề11.2Mục đích của đề tài:31.3Ý nghĩa khoa học của đề tài31.4Ý nghĩa thực tiễn của đề tài32TỔNG QUAN TÀI LIỆU42.1Một số đặc điểm sinh học của cá rô phi42.1.1Nguồn gốc42.1.2Phân loại42.1.3Đặc điểm môi trường sống và tập tính dinh dưỡng52.2Tình hình nuôi cá rô phi62.2.1Tình hình nuôi cá rô phi trên thế giới62.2.2Tình hình nuôi cá rô phi tại Việt Nam62.3Tình hình nghiên cứu dịch bệnh ở cá rô phi72.3.1Tình hình nghiên cứu dịch bệnh ở cá rô phi trên thế giới72.3.2Tình hình nghiên cứu dịch bệnh cá rô phi ở trong nước102.4Tình hình sử dụng thuốc trong nuôi trồng thủy sản153NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU173.1Thời gian và địa điểm nghiên cứu173.1.1Thời gian nghiên cứu173.1.2Địa điểm nghiên cứu173.2Nội dung nghiên cứu173.3Vật liệu nghiên cứu173.3.1Dụng cụ, thiết bị phục vụ nghiên cứu173.3.2Môi trường, hóa chất phục vụ nghiên cứu183.3.3Vật liệu nghiên cứu183.4Phương pháp nghiên cứu193.4.1Phương pháp thu mẫu cá bệnh193.4.2Phương pháp mổ cá để lấy nội tạng193.4.3Phương pháp phân lập vi khuẩn Streptococcus spp. có trong mẫu bệnhphẩm204.4.4Phương pháp đếm mật độ vi khuẩn213.4.5Phương pháp định danh vi khuẩn Streptoccocus spp.213.4.6Phương pháp xác định độc lực của các chủng vi khuẩn Streptococcus spp.263.4.7Phương pháp xác định tính kháng nguyên293.4.8Phương pháp kiểm tra khả năng mẫn cảm với kháng sinh của vi khuẩn323.4.9Phương pháp xử lý số liệu334KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN344.1Kết quả phân lập vi khuẩn Streptoccocus spp344.1.1Kết quả thu mẫu344.1.2Kết quả phân lập vi khuẩn354.2Kết quả xác định một số đặc tính sinh hóa của vi khuẩn Streptoccocusspp. phân lập được.374.2.1Kết quả xác định một số đặc tính sinh học374.2.2Kết quả định danh vi khuẩn384.3Kết quả xác định độc lực của các chủng vi khuẩn Streptococcusagalactiae phân lập được404.3.1Kết quả gây bệnh thực nghiệm của vi khuẩn Streptococcus agalactiaeở cá rô phi404.3.2Kết quả tăng cường độc lực của các chủng vi khuẩn Streptococcusagalactiae44 4.4Kết quả xác định tính kháng nguyên của vi khuẩn Streptococcusagalactiae phân lập được464.4.4Kết quả tạo kháng nguyên cho từng chủng vi khuẩn:464.4.2Kết quả tạo kháng thể kháng S.agalactiae trên cá rô phi464.4.3Kết quả phản ứng ngưng kết474.5Kết quả kiểm tra khả năng mẫn cảm với kháng sinh của vi khuẩnStreptococcus agalactiae phân lập được495KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ515.1Kết luận515.2Đề nghị51TÀI LIỆU THAM KHẢO52PHỤ LỤC55BÀI BÁO KHOA HỌC73 1. MỞ ĐẦU1.1. Đặt vấn đềNhững năm gần đây, nghề nuôi trồng thủy sản (NTTS) đã không ngừng pháttriển và ngày càng chiếm vị trí quan trọng trong ngành Thủy sản nói riêng và kinh tếđất nước nói chung. Với kim ngạch xuất khẩu năm 2010 đạt 4,94 tỷ USD thì đây làmột trong ba ngành có đóng góp lớn nhất cho tổng kim ngạnh xuất khẩu của ViệtNam. Tổng cục Thủy sản (Bộ Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn) cho biết, giaiđoạn 2011 – 2015 ngành Thủy sản hướng đến sự phát triển bền vững, là một ngànhxuất khẩu hàng hóa lớn, có khả năng cạnh tranh cao và hội nhập vững chắc với thếgiới. Mục tiêu quan trọng hàng đầu là đẩy mạnh xuất khẩu đạt kim ngạch 6,5 tỷUSD vào năm 2015 và chiếm khoảng 37% trong khối nông lâm ngư nghiệp. Vì vậyviệc quản lý dịch bệnh trên các đối tượng chủ lực là yếu tố quan trọng để đạt đượcmục tiêu trên. Tuy nhiên hiện tại nghề NTTS tại Việt Nam đang gặp phải những trởngại lớn như dịch bệnh BNP trên cá tra cá basa, dịch bệnh xuất huyết trên cá rô phi,bệnh đốm đỏ trên cá trắm cỏ, bệnh đốm trắng trên tôm sú, bệnh virus trên cáchép…. Để quản lý các dịch bệnh trên các đối tượng quan trọng, nhiều giải pháp đãđược đặt ra như: lựa chọn các con giống sạch bệnh, quản lý tốt môi trường, dinhdưỡng, sử dụng thuốc và hóa chất, tuy nhiên chưa mang lại hiệu quả cao. Vì vậyviệc phát triển và ứng dụng các chế phẩm sinh học, đặc biệt là vacxin trong NTTScó ý nghĩa cấp thiết trong việc quản lý dịch bệnh đạt hiệu quả cao hơn.Bên cạnh sự phát triển nhanh chóng của nghề nuôi ven biển và nghề nuôi biểnthì nghề nuôi cá nước ngọt vẫn khẳng định được vai trò của mình. Trong đó, đốitượng cá rô phi với những ưu điểm như cá ít bị sốc với biến đổi của môi trường vàcó khả năng kháng được một số bệnh, thức ăn không đòi hỏi chất lượng quá cao, giáthành sản xuất thấp nên các quốc gia đang phát triển đặc biệt chú trọng đến pháttriển nuôi loài cá này. Tuy nhiên, khi phát triển nuôi cá rô phi với mật độ cao vànuôi thâm canh thì cũng phát hiện một số bệnh ảnh hưởng đến năng suất và chấtlượng thực phẩm. Qua nghiên cứu, người ta đã chỉ ra rằng bệnh ở cá rô phi chủ yếu1 là do vi khuẩn, virút, nấm, và ký sinh trùng (Shoemaker, 2008). Đặc biệt là bệnh dodo vi khuẩn Streptococcus spp. (liên cầu khuẩn) gây ra là nguyên nhân gây nên thiệthại lớn cho cá rô phi nói riêng và cá nước ngọt nói chung, làm ảnh hưởng đến hiệuquả kinh tế của ngành nuôi trồng thủy sản. Theo thống kê thì liên cầu khuẩn gâybệnh trên cá chủ yếu là hai loài Streptococcus iniae và Streptococcus agalactiae.Hiện nay, việc phòng trị bệnh trên cá nước ngọt ở nước ta vẫn chủ yếu dựa vàoviệc sử dụng thuốc kháng sinh và hóa chất. Hiện tại chỉ có một loại vắc-xin bảo vệcá tra chống lại vi khuẩn Edwardsiella ictaluri. Vắc-xin ALPHA JECT ® Panga 1được Cục Thú y (Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn) vừa công bố cấp phéptiếp thị kể từ ngày 10/4/2013. Trong khi đó trên thế giới đã có 36 loại vacxin phòngbệnh do vi khuẩn gây ra và hai loại vacxin phòng bệnh do virut. Việc phòng trị bệnhchủ yếu phụ thuộc vào các loại thuốc kháng sinh và hóa chất gần đây đã khiến choviệc xuất khẩu thủy sản của Việt Nam gặp rất nhiều khó khăn do danh mục các loạithuốc và hóa chất cấm sử dụng trong nuôi trồng thủy sản ngày càng tăng. Ví dụ cụthể đó là việc cấm sử dụng chloramphenicol, flomequine và xanh malachite đã ảnhhưởng lớn cho nghề xuất khẩu cá Tra và cá Ba Sa của Việt Nam trong năm 2005 và2006. Mỹ là thị trường lớn nhất cho cá da trơn của Việt Nam trước năm 2005 đã cónhững chính sách tăng thuế nhập khuẩu cá tra và cá Ba Sa vào nước này. Bên cạnhchính sách bảo hộ nghề nuôi cá da trơn nội địa của chính phủ Mỹ thì việc sử dụngthuốc thuộc danh mục cấm là một trong những nguyên nhân dẫn đến việc khó khăntìm thị trường đầu ra cho các sản phẩm của hai đối tượng trên. Vì vậy việc nghiêncứu, phát triển các phương pháp phòng trị bệnh có hiệu quả như sử dụng các loạithảo dược, chất tách chiết từ thảo dược và vacxin cho cá nước ngọt là rất cần thiếtnhằm đảm bảo cho sự phát triển bền vững của nghề. Sử dụng vacxin phòng bệnhcho cá giúp giảm tỷ lệ chết, giảm việc sử dụng các loại kháng sinh trong nuôi trồngthủy sản và hạ giá thành sản phấm. Bên cạnh đó việc sử dụng vacxin cũng góp phầnvào việc tạo ra các sản phẩm đạt tiêu chuẩn vệ sinh an toàn thực phẩm. Hiện naychưa có bất kỳ loại vacxin phòng bệnh Streptococcosis gây bệnh trên cá rô phiđược nghiên cứu và ứng dụng vào sản xuất tại Việt Nam. Vì vậy, việc phân lập vàxác định đặc tính sinh học của Streptococcus spp. là cần thiết, là cơ sở khoa học để2 giúp cho việc nghiên cứu và sản xuất vacxin phòng bệnh do vi khuẩn Streptococcusspp. ở cá rô phi nuôi tại Việt Nam.Với mục tiêu như vậy, tôi tiến hành thực hiện đề tài: ”Nghiên cứu một số đặctính sinh học của vi khuẩn Streptococcus spp. gây bệnh xuất huyết ở cá rô phinuôi tại một số tỉnh miền Bắc Việt Nam” nhằm cung cấp nguồn giống vi khuẩn đểtiến hành nghiên cứu chế tạo kít và vacxin phục vụ cho chẩn đoán nhanh và phòng,trị bệnh.