Đang tải... (xem toàn văn)
Khảo sát tình hình nhiễm E.coli và Coliforms trong nước uống
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC ĐỒN NGỌC TUẤN KHẢO SÁT TÌNH HÌNH NHIỄM E coli VÀ Coliforms TRONG NƢỚC UỐNG, NƢỚC CÓ GAS, NƢỚC CÓ CỒN TRÊN ĐỊA BÀN QUẬN THỦ ĐỨC LUẬN VĂN KỸ SƢ CHUYÊN NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 9/2006 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHẢO SÁT TÌNH HÌNH NHIỄM E coli VÀ Coliforms TRONG NƢỚC UỐNG, NƢỚC CÓ GAS, NƢỚC CÓ CỒN TRÊN ĐỊA BÀN QUẬN THỦ ĐỨC LUẬN VĂN KỸ SƢ CHUYÊN NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giáo viên hƣớng dẫn Th.S NGUYỄN TIẾN DŨNG Sinh viên thực ĐỒN NGỌC TUẤN KHĨA: 2002-2006 Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 9/2006 MINISTRY OF EDUCATION AND TRAINING NONG LAM UNIVERSITY, HCMC FACULTY OF BIOTECHNOLOGY INVESTIGATING THE INFECTION RATE OF E coli AND Coliforms IN BOTTLED WATER, SOFT WATER AND BEER IN THU DUC DISTRICT GRADUATION THESIS MAJOR: BIOTECHNOLOGY Professor Ms NGUYEN TIEN DUNG HCMC, 09/2006 Student DOAN NGOC TUAN TERM: 2002 - 2006 LỜI CẢM ƠN Em xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Ban Giám Hiệu trƣờng Đại học Nông Lâm Thành phố Hồ Chí Minh, Ban chủ nhiệm Bộ Mơn Công Nghệ Sinh Học, tất quý thầy cô tận tâm dạy dỗ, truyền đạt tri thức khoa học kinh nghiệm quý báu cho em suốt trình rèn luyện học tập trƣờng Đặc biệt em xin chân thành cảm ơn đến thầy Nguyễn Tiến Dũng tạo điều kiện tốt nhất, tận tình hƣớng dẫn giúp đỡ em suốt thời gian thực tập tốt nghiệp bƣớc đầu nghiên cứu khoa học Em xin cảm ơn thầy Hồ Thanh Bá, Nguyễn Thị Hun Phịng thí nghiệm Cơng Nghệ Sinh Học Môi Trƣờng, trƣờng Đại học Nông Lâm với gia đình bạn bè thân yêu lớp Cơng Nghệ Sinh Học khóa 28 hết lịng quan tâm hỗ trợ, động viên tạo điều kiện thuận lợi cho em thực tốt khóa luận Một lần em xin chân thành cảm ơn tất Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2006 Sinh viên Đồn Ngọc Tuấn iv TĨM TẮT ĐỒN NGỌC TUẤN, Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh Tháng 8/2006 “KHẢO SÁT TÌNH HÌNH NHIỄM E coli VÀ Coliforms TRONG NƢỚC UỐNG, NƢỚC CÓ GAS, NƢỚC CÓ CỒN TRÊN ĐỊA BÀN QUẬN THỦ ĐỨC” Giáo viên hƣớng dẫn: Th.S NGUYỄN TIẾN DŨNG Ngày nay, sống ngƣời ngày đƣợc nâng cao điều mà họ quan tâm vệ sinh ăn uống Hàng năm có hàng trăm ca ngộ độc thực phẩm phải nhập viện, gây hậu nghiêm trọng đến sức khoẻ cộng đồng Điều không phổ biến Việt Nam mà nƣớc khác giới Một nguyên nhân gây tình trạng diện mức cho phép vi sinh vật gây hại thực phẩm Để có biện pháp phòng tránh, ngăn chặn làm giảm bớt số ca ngộ độc thực phẩm Chúng tiến hành khảo sát diện Coliforms E coli loại nƣớc uống lƣu hành thị trƣờng Mục tiêu xác định đánh giá giới hạn định lƣợng mật độ nhiễm Coliforms E coli loại nƣớc uống Những kết đạt đƣợc: Có khác biệt giới hạn định lƣợng Coliforms E coli nhóm nƣớc uống, nƣớc có gas nƣớc có cồn Đồng thời xác định đƣợc giới hạn định lƣợng loại nƣớc uống Trong 45 mẫu khảo sát, tỷ lệ nhiễm Coliforms E coli vƣợt tiêu cho phép mẫu nƣớc khơng đóng chai 100%, mẫu nƣớc đóng chai 0% Có khác biệt lớn mật độ ô nhiễm Coliforms E coli loại nƣớc giải khác đóng chai khơng đóng chai Ngồi cho thấy khơng có khác biệt loại nƣớc nhóm v MỤC LỤC TRANG Trang tựa Lời cảm tạ iv Tóm tắt v Mục lục vi Danh sách chữ viết tắt viii Danh sách hình ix Danh sách bảng x MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích 1.3 Nội dung thực 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Hệ vi sinh vật nƣớc 2.2 Các tiêu vi sinh vật nƣớc 2.2.1 Nƣớc dùng cho mục đích sinh hoạt, sản xuất 2.2.2 Nƣớc uống 2.3 Sơ lƣợc Coliforms 2.4 Sơ lƣợc E coli 2.4.1 Đại cƣơng 2.4.2 Tính chất vi sinh học 2.4.3 Đặc điểm nuôi cấy 2.4.4 Đặc tính sinh hố 10 2.4.5 Sức đề kháng 10 2.4.6 Kháng nguyên 10 2.4.7 Độc tố 11 2.4.8 Tình hình nhiễm 11 2.5 Phƣơng pháp định lƣợng vi sinh vật MPN (Most probable number ) 13 2.5.1 Khái niệm 13 vi 2.5.2 Cách tiến hành 13 2.5.3 Cách lập số MPN 14 2.5.4 Cách tính kết 15 VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP TIẾN HÀNH 16 3.1 Thời gian địa điểm 16 3.1.1 Thời gian 16 3.1.2 Địa điểm 16 3.2 Vật liệu 16 3.2.1 Dụng cụ thiết bị 16 3.2.2 Hoá chất môi trƣờng 17 3.2.3 Vật liệu thí nghiệm 18 3.3 Phƣơng pháp thực 18 3.3.1 Bố trí thí nghiệm 18 3.3.2 Cách lấy mẫu 19 3.3.3 Chọn mẫu âm tìm giói hạn phát 19 3.3.4 Định lƣợng Coliforms E coli nƣớc 19 3.3.5 Phƣơng pháp định lƣợng E coli dịch pha loãng phƣơng pháp đếm khuẩn lạc 21 3.3.6 Xử lý số liệu 21 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 25 4.1 Khảo sát giới hạn định lƣợng Coliforms E coli loại nƣớc phƣơng pháp MPN 25 4.2 Khảo sát mật độ Coliforms E coli loại nƣớc giải khát 27 4.3 Đánh giá tình hình nhiễm Coliforms E coli nƣớc giải khát 30 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 31 5.1 Kết luận 31 5.2 Đề nghị 31 TÀI LIỆU THAM KHẢO 32 PHỤ LỤC 34 vii DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT BGA : Brilliant green agar BGBL : Brilliant Green Lactose Bile Salt CFU : Colony Forming Unit EMB: Eosin Methylene Blue E coli: Escherichia coli LT: Heat Labile ST: Heat stable MR-VP: Methyl Red- Voges Proskauer MPN: Most Probable Number 10 MCK: MacConKey 11 KIA: Kligler Iron agar 12 IMViC: Indol, Methyl red, Voges proskauer, Citrate 13 SPW: Saline Peptone Water 14 TSA: Tryptone Soya agar 15 TCVN: Tiêu chuẩn Việt Nam viii DANH SÁCH CÁC HÌNH VÀ SƠ ĐỒ TRANG Hình 2.1: Hình dạng vi khuẩn E coli Hình 2.2: Vị trí kháng ngun E coli 11 Sơ đồ 3.1: Quy trình định lƣợng Coliforms E coli 22 Hình 3.1: Biểu E coli môi trƣờng canh BGBL 23 Hình 3.2: Khuẩn lạc E coli mơi trƣờng EMB 23 Hình 3.3: Biểu sinh hóa E coli 24 Biểu đồ 4.1: Biểu đồ so sánh độ thu hồi nhóm nƣớc 26 Biểu đồ 4.2: Biểu đồ so sánh Coliforms E coli mẫu nƣớc giải khát 28 ix DANH SÁCH CÁC BẢNG TRANG Bảng 2.1: Biểu sinh hoá giống Coliforms Bảng 2.2: Thí dụ lựa chọn kết dƣơng tính việc tính tốn MPN 15 Bảng 3.1: Biểu sinh hoá E coli 20 Bảng 4.1: Kết khảo sát giới hạn dịnh lƣợng Coliforms E coli nhóm nƣớc 25 Bảng 4.2: Kết khảo sát mật độ Coliforms E.coli loại nƣớc giải khát 27 x 24 Hình 3.3 Biểu sinh hóa E coli 1: Indol (+), 2: Methyl Red (+), 3: Voges Prokauer (-), 4: Citrate (-) 25 Phần KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Khảo sát giới hạn định lƣợng Coliforms E coli loại nƣớc phƣơng pháp MPN Thí nghiệm đƣợc tiến hành mẫu âm, mẫu không nhiễm Coliforms Các mẫu đƣợc sử dụng thí nghiệm thuộc nhóm: nƣớc uống tinh khiết đóng chai Lavie, nƣớc có gas đóng chai Pepsi, nƣớc giải khác có cồn bia Sai Gịn đỏ Mẫu chọn đƣợc gây nhiễm E coli với mật độ: 0, 1-10, 10 – 100, > 100 CFU/100ml Kết khảo sát đƣợc thể Bảng 4.1 Bảng 4.1 Kết khảo sát giới hạn định lƣợng Coliforms E coli nhóm nƣớc Nƣớc uống Lavie Nƣớc có gas Pepsi Nƣớc có cồn bia Sài Gịn Mật độ gây nhiễm (CFU/100ml) Mật độ phát (MPN/100ml) 21 56 39 105 296 Mẫu 64 240 0 21 56 105 296 28 64 240 21 56 0 23 105 296 48 150 Độ thu hồi(%) trung bình 60,86 b 38,40 a 27,49 a 26 Ghi *: Các số trung bình có chữ khác theo cột dọc thể khác biệt có ý nghĩa mật thống kê mức P
![Hình 2.1 Vi khuẩn Escherichia coli [19] - Khảo sát tình hình nhiễm E.coli và Coliforms trong nước uống](https://media.store123doc.com/figures/000/045/hinh-vi-khuan-escherichia-coli-45962.png)
