Đang tải... (xem toàn văn)
Chủng Paecilomyces sp. P1 được phân lập từ đất trồng hồ tiêu khu vực tỉnh Đăk Lăk là chủng nấm sợi diệt tuyến trùng tiềm năng. Chế phẩm sinh học P1 dạng dịch thể được tiến hành thử nghiệm khả năng diệt tuyến trùng ở quy mô nhà lưới cho hiệu lực đạt 22,2% - 52,48% sau 30 ngày. Đối với cây hồ tiêu từ 5 - 7 năm tuổi, khi sử dụng chế phẩm cho năng suất hồ tiêu tăng 7,42% so với đối chứng sau 12 tháng trên mô hình 3 ha. Mời các bạn tham khảo!
Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 4(113)/2020 Coliform chịu nhiệt Escherichia coli gỉ định Phần 2: Phương pháp nhiều ống (số có xác suất cao nhất) TCVN 4829:2005 (ISO 6578:2002) Tiêu chuẩn Việt Nam vi sinh vật thực phẩm th́c ăn chăn nuôi - Phương pháp phát Salmonella đĩa thạch Võ hị Kìu hanh, Lê hị Ánh Hồng, Phùng Huy Huấn, 2012 Nghiên ću s̉n xuất phân vi sinh cố định đạm từ bùn th̉i nhà máy bia Việt Nam Tạp ch́ Sinh ḥc, 34:137-144 Alemnesh Bejiga, 2019 College of natural and computational sciences center for enviromental science Addis Ababa University Fillaudeau L., Blanpain-Avet P., Dauin G., 2006 Water, wastewater and waste management in brewing industries Journal of Cleaner Production, 14: 463-471 Gulizar Caliskan, Gokhan Giray, Tugba Keskin Gundogdu, Nuri Azbar, 2014 Anaerobic Biodegradation of Beer Production Wastewater at a Field Scale and Explotation of Bioenergy Potential of Other Solid Wastes from Beer Production International Journal of Renewable Energy & Biofuels DOI: 10.5171/2014.664594 Kanagachandran K., Jayaratne R., 2006 Utilization Potential of Brewery Waste Water Sludge as an Organic Fertilizer J Inst Bew., 112 (2); 92-96 Prescott L.M., Harley J.P., Klein D.A., 2002 Microbiology, 5th Edition, McGraw-Hill, New York 1014pp Stocks C, Barker A J., Guy S., 2002 he composting of brewery sludge Journal of the Institute of Brewing 108: 452-458 Treatment of brewery waste sludge as an organic fertilizer Vu huy Nga, Luong Huu hanh, Nguyen hi hu, Dam hi Huyen, Dam Trong Anh, Nguyen Ngoc Quynh, Hua hi Son, Nguyen Kieu Bang Tam, Do Van Manh Abstract he objective of this study was to evaluate the biochemical characteristics and the potential of treatment of brewery waste sludge as an organic fertilizer for crops he results indicated that Saigon brewery sludge contained quite high organic content (33.74 - 33.87%); the total nitrogen was high (1.378 - 3.85%); the potassium level was medium (0.133 - 0.411%) and the total phosphorus level was poor (0.039 - 0.12%) 30 days of treatment of sludge using microbial inoculants, the composting process changed the content of ingredients and eliminated pathogenic microorganisms he organic matter reached 21.42%; total N reached 1.84%; total P reached 0.06% and total K reached 0.128%; the moisture reached 29.4% he compost product met organic fertilizer standards according to Decree No.84/2019/ ND-CP of Vietnam Government he evaluation of the efect of compost product on common bean in pots showed that roots grew better and fruit weight was 23.6%, higher than in the control he brewery sludge treatment process yielded an organic fertilizer that could be used in agriculture as a soil addition nutrient source Keywords: Sludge, brewery, composting, treatment, organic fertilizer Ngày nhận bài: 12/3/2020 Ngày ph̉n biện: 19/3/2020 Ngừi ph̉n biện: TS Lê hị hanh hủy Ngày duyệt đăng: 23/03/2020 NGHIÊN CỨU THỬ NGHIỆM CH́ PHẨM SINH HỌC P1 DIỆT TUÝN TRÙNG GÂY BỆNH CÂY HỒ TIÊU TẠI TỈNH ĐĂK LĂK Chu hanh Bình1, Trần Văn Tuấn1,2, Bùi hị Việt Hà1,3 TĨM TẮT Chủng Paecilomyces sp P1 phân lập từ đất trồng hồ tiêu khu vực tỉnh Đăk Lăk chủng nấm sợi diệt tuyến trùng tiềm Chế phẩm sinh học P1 dạng dịch thể tiến hành thử nghiệm kh̉ diệt tuyến trùng quy mô nhà lưới cho hiệu lực đạt 22,2% - 52,48% sau 30 ngày Đối với hồ tiêu từ - năm tủi, sử dụng chế phẩm cho suất hồ tiêu tăng 7,42% so với đối ch́ng sau 12 tháng mơ hình Từ khóa: Cây hồ tiêu, tuyến trùng, Paecilomyces sp., chế phẩm sinh học P1 Trừng Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Phịng thí nghiệm trọng điểm Enzyme Protein, Trừng Đại học Khoa học Tự nhiên Trung tâm Khoa học Sự sống, Khoa Sinh học, Trừng Đại học Khoa học Tự nhiên 126 Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 4(113)/2020 I ĐẶT VẤN ĐỀ Cây hồ tiêu (Piper nigrum L.) cơng nghiệp có giá trị kinh tế cao trồng nhiều vùng c̉ nước, đặc biệt vùng Tây Nguyên Đông Nam Bộ heo quy hoạch, diện tích trồng hồ tiêu tỉnh Đăk Lăk đến năm 2020 15.000 Tuy nhiên, tháng năm 2017 diện tích trồng hồ tiêu tăng lên tới 38.616 Việc tăng nhanh diện tích trồng hồ tiêu kèm theo số diện tích bị sâu dịch hại tăng nhanh heo Chi cục B̉o vệ thực vật tỉnh Đăk Lăk, từ đầu năm 2016 đến đầu năm 2017 có 2.776 trồng hồ tiêu bị sâu bệnh gây hại, chiếm 10% t̉ng diện tích hồ tiêu tồn tỉnh Hầu hết tuyến trùng thuộc chi Meloidogyne nhóm ký sinh thực vật quan trọng ̉nh hưởng sâu rộng đến nơng nghiệp tồn giới (Djian-Caporalino et al., 2007) Tương tự, tuyến trùng gây hại hồ tiêu khu vực Tây Nguyên chủ yếu thuộc chi Meloidogyne (Lê Đ́c Khánh ctv., 2013; Trịnh hu hủy, 2010) Khi nhóm cơng vào rễ làm cho bề mặt có dạng sần sùi tạo thành u cục sau vi sinh vật hội dễ dàng xâm nhập gây bệnh Đây vấn đề khó khăn xử lý triệt để, dễ bị lại mắc bệnh Hơn nữa, nhiều nghiên ću cho thấy, ký chủ Meloidogyne cịn có kh̉ tồn đất lâu c̉ điều kiện khắc nghiệt mùa khô Tây Nguyên (Trinh, P.Q et al., 2012) Nhằm khắc phục số tồn tuyến trùng gây hại trên, nghiên ću, thử nghiệm chế phẩm sinh học P1 (từ chủng nấm Paecilomyces sp P1) việc phòng trừ tuyến trùng hại hồ tiêu quy mô nhà lưới quy mơ đồng ruộng ha/mơ hình Đăk Lăk, góp phần nâng cao suất hồ tiêu b̉o vệ môi trừng II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật lịu nghiên cứu Chủng nấm sợi Paecilomyces sp P1 phân lập từ đất trồng hồ tiêu tỉnh Đăk Lăk (Chu hanh Bình ctv., 2019) Hồ tiêu giống Vĩnh Linh: 3,5 tháng tủi Giống ươm dây thân theo TCVN 10684-4:2018 (Cây công nghiệp lâu năm Phần 4: Hồ tiêu) - cung cấp Công ty giống trồng Đăk Lăk nghiệm nhà lưới thuộc Xí nghiệp s̉n xuất phân bón - Cơng ty C̉ phần Nicotex, xã EaNi, huyện Bn Đơn Mơ hình ha: Hồ tiêu kinh doanh từ - năm tủi, giống Vĩnh Linh, trụ sống trụ hỗn hợp Trung bình 1800 trụ/ha 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Xác định hiệu lực chế phẩm sinh học diệt tuyến trùng đ́t trồng hồ tiêu nh̀ lứi Mẫu đất lấy điểm theo hình tam giác đều, lấy gốc làm trung tâm Mẫu trộn Mỗi mẫu đất lấy 500 gram Dụng cụ dùng lấy mẫu ph̉i vô trùng để tránh nhiễm chéo Dùng dao hay x̉ng lau cồn để lấy mẫu đất Đầu tiên loại bỏ lớp đất dày - cm bề mặt, sau lấy phần đất cho vào túi khử trùng, gài cẩn thận Túi dán nhãn ghi rõ đặc điểm, công th́c thí nghiệm lấy mẫu Mẫu thu b̉o qủn phòng mát nhiệt độ khỏng 20 - 22ºC, túi đựng mẫu riêng để tủ lạnh (9 - 10ºC) Mẫu đất xử lý vòng - ngày kể từ ngày nhận mẫu Trộn phần đất đỏ bazan phần phân hữu xử lý cách tr̉i mỏng, phủ màng nilon, phơi nắng từ - ngày để tiêu diệt bớt vi sinh vật Chia lượng đất vào chậu, trung bình 10 kg/ chậu đưa vào nhà lưới Cây hồ tiêu trồng ̉n định vào chậu theo dõi th̀i gian từ đến 10 ngày trước đưa vào thử nghiệm nghiệm bố trí theo kiểu ngẫu nhiên đầy đủ lần lặp lại gồm công th́c, công th́c 30 Các mẫu thử nghiệm: ĐC1 (đối ch́ng âm): không tuyến trùng; ĐC (đối ch́ng dương +): tập quán ngừi trồng tiêu B̉ sung tuyến trùng mẫu ĐC 2, ĐC 3, TN1, TN2, TN3, TN4 Mật độ tuyến trùng b̉ sung 100 con/100 gram đất; ĐC (đối ch́ng dương ++): sử dụng chế phẩm thông thừng thị trừng Nokaph (có thành phần Ethoprophos: 10% phụ gia khác) Các công th́c thử nghiệm: TN1: Chế phẩm sinh học P1 pha loãng 50 lần; pha loãng nước thừng từ chế phẩm sinh học P1 dịch thể gốc ban đầu; TN2: Chế phẩm sinh học P1 pha loãng 100 lần; TN3: Chế phẩm sinh học P1 pha loãng 150 lần; TN4: Chế phẩm sinh học P1 pha loãng 200 lần Mỗi lần tưới cho chậu 200 ml chế phẩm, th̀i gian tưới trung bình từ - ngày, mẫu ĐC tưới nước thừng Chỉ tiêu theo dõi: Đánh giá mật độ tuyến trùng qua giai đoạn: trước xử lý, sau 10 ngày, sau 20 ngày, sau 30 ngày h̀i gian lấy mẫu đất phân tích tuyến trùng: trước xử lý, sau 10 ngày, sau 20 ngày, sau 30 ngày 127 Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 4(113)/2020 Quá trình thử nghiệm tiến hành 30 ngày, nhiệt độ thử nghiệm nhà lưới trì trung bình 26 oC đến 29 oC Tuyến trùng Meloidogyne sp thu nhận từ nguồn nhân nuôi đất trồng rễ bị sưng Mật độ tuyến trùng lây nhiễm cho chậu đất 100 con/100 g đất Sau lây nhiễm, để ̉n định tồn tuyến trùng khỏng đến ngày, kiểm tra lại mật độ tuyến trùng có 100 g đất 2.2.2 h̉ nghiệm mơ hình a) Bố tŕ th̉ nghiệm Mơ hình hồ tiêu: ha, q trình chăm sóc hồ tiêu theo Quyết định 730/QĐ-BNN-TT, ngày 05 tháng 03 năm 2015 - Bộ Nông nghiệp PTNT Lơ đối ch́ng (ĐC) thí nghiệm (TN) tiến hành vừn, vừn ha; trung bình khỏng 1800 trụ/ha Kết qủ đánh giá từ vừn lấy giá trị trung bình Đánh giá 10 điểm/vừn Mỗi điểm 06 trụ, trụ điều tra cấp độ bệnh theo khung hình vng theo hướng đối lập (Bắc Nam) quan trắc theo thang cấp độ Độ cao tính từ đất lên phần đặt khung 1,5 m Quy trình sử dụng chế phẩm: Lơ ĐC chăm sóc áp dụng theo “Quy trình kỹ thuật trồng, chăm sóc thu hoạch hồ tiêu” Lơ TN sử dụng theo quy trình chăm bón Sử dụng chế phẩm sinh học P1 pha loãng 100 lần (theo kết qủ nghiên ću mục 3.2 để chăm sóc b) Phương pháp đánh giá, quan tŕc cấp độ ḅ bệnh Đánh giá, quan trắc cấp độ bị bệnh biểu qua theo QCVN 01-166:2014 QCVN 01172:2014/BNNPTNT phân cấp bị bệnh R (%) = (F/B) 100 Trong đó: R: Tỷ lệ (%) số ḅ vàng; B: Tổng số khung điều tra; F: Tổng số ḅ vàng Cấp độ 0: Cây có xanh bình thừng, khơng có biểu bị vàng; Cấp độ 1: có vàng nhẹ, 25% biểu vàng; Cấp độ 2: Từ 25 - 50%; Cấp độ 3: Từ 50 - 75%; Cấp độ 4: Trên 75% biểu vàng c) Phương pháp ḷc tĩnh thu tuýn trùng hiết kế sở phương pháp Berman d) Phương pháp đ́m tuýn trùng heo Nguyễn Ngọc Châu (2003) e) Phương pháp thu hoạch suất h̀i điểm thu hoạch tiêu vào cuối tháng đầu tháng chùm tiêu có 5% qủ chín có 128 màu vàng đỏ hu hái xong đưa vào phơi khỏng - nắng tránh bị mốc Năng suất hồ tiêu thu hoạch tính tấn/ha (khi tiêu đạt 12 - 13% độ ẩm) 2.2.3 Hiệu lực chế phẩm Tính theo cơng th́c Henderson - Tilton (1955) 2.2.4 Phương pháp x̉ ĺ số liệu Số liệu thu thập từ thí nghiệm chuyển đ̉i thành số liệu thống kê tương ́ng sử dụng chương trình Excel xử lý trắc nghiệm Duncan Số liệu % chuyển đ̉i qua arcsin K A Gomez A A Gomez (1986) 2.3 hời gian địa điểm nghiên cứu h̀i gian thử nghiệm nhà lưới: Từ tháng đến tháng 10 năm 2017 Mỗi đợt thử nghiệm tiến hành 30 ngày Địa điểm thử nghiệm: Tại nhà lưới thuộc Xí nghiệp s̉n xuất phân bón - Cơng ty C̉ phần Nicotex, xã EaNi, huyện Bn Đơn Q trình thử nghiệm mơ hình ha: Tiến hành từ tháng năm 2018 đến tháng năm 2019 vừn trồng hồ tiêu nhà ông Nguyễn Văn Chương (có diện tích 2,2 ha) nhà bà Đỗ hị Lan (có diện tích 1,5 ha) thuộc thôn xã Eabar huyện Buôn Đôn Năng suất trung bình tồn vừn nhà ơng Chương 2,578 tấn/ha (vụ 2017); Năng suất trung bình nhà bà Lan 2,653 tấn/ha (vụ 2017) Điều kiện vừn tiêu nhà ông Chương trước xây dựng mơ hình có 35% cấp độ bệnh 0; 30% cấp độ bệnh 1; 15% cấp độ bệnh 2; 15% cấp độ bệnh 3; khỏng 5% cấp độ bệnh Điều kiện vừn tiêu nhà bà Lan trước xây dựng mô hình có 35% cấp độ bệnh 0; 35% cấp độ bệnh 1; 20% cấp độ bệnh 2; 5% cấp độ bệnh 3; 5% cấp độ bệnh III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Nghiên cứu khả dịt tuyến trùng Meloidogyne sp hại hồ tiêu đìu kịn nhà lưới chế phẩm sinh học P1 Chủng P1 nuôi cấy tăng sinh khối, phối trộn với cám gạo tinh bột hồ hóa tạo chế phẩm sinh học dạng dịch thể Quá trình thử nghiệm diễn nhà lưới với nhiệt độ trung bình dao động từ 26 oC đến 29 oC Kết qủ xác định kh̉ sống sót tuyến trùng đất, rễ, hiệu lực chế phẩm sinh học (H, %) tuyến trùng sau 10 ngày, 20 ngày, đến ngày th́ 30 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 4(113)/2020 Hình Diễn biến mật độ tuyến trùng th̀i gian 30 ngày (XL: xử lý) Kết qủ hình cho thấy, th̀i điểm kiểm tra sau xử lý, mật độ tuyến trùng chậu đối ch́ng có tăng thêm từ 4,7% đến 9,9%, điều gỉi thích đất số tŕng tuyến trùng gặp điều kiện thích hợp phát triển thành tuyến trùng Trong chậu thí nghiệm, mật độ tuyến trùng cịn sống gỉm xuống nhiều 56,5 (con/100 g đất) mẫu TN1 Mẫu TN2 mật độ tuyến trùng gỉm xuống xấp xỉ mẫu TN1 57,3 (con/100 g đất) Mật độ tuyến trùng gỉm 68 con/100 g đất (mẫu TN4) 3.2 ̉nh hưởng chế phẩm sinh học đến hịu lực dịt tuyến trùng đìu kịn nhà lưới Bảng Hiệu lực diệt tuyến trùng chế phẩm sinh học P1 Công thức ĐC1 (không b̉ sung tuyến trùng) Hịu lực chế phẩm sau xử lý (%) Sau Sau Sau 10 ng̀y 20 ng̀y 30 ng̀y 0c 0c 0c ĐC2-(+1) (theo tập quán canh tác) 23,11a 30,92a 44,9a ĐC3-(+2) (Nokaph 10GR) 20.91b 27,6b 38,8b TN1 (CPSH pha 50x) 33,27a 42,77a 53,57a TN2 (CPSH pha 100x) 31,23a 41,84a 52,48a TN3 (CPSH pha 150x) 24,8b 35,03b 45,51b TN4 (CPSH pha 200x) 22,2b 31,81b 42,31b Ghi chú: Các chữ không giống theo hàng ḍc thể khác biệt có ý nghĩa ḿc α = 0,05 Kết qủ b̉ng cho thấy, hiệu lực diệt tuyến trùng dao động khỏng 20 - 53% ĐC cho hiệu lực diệt cao ĐC mẫu ĐC sử dụng theo tập quán canh tác ngừi trồng hồ tiêu ĐC sử dụng loại chế phẩm bán sẵn thị trừng (Nokaph) Xét hiệu lực diệt tuyến trùng ḿc pha loãng 50 100 lần xấp xỉ Mẫu TN1 cho hiệu lực diệt 53,57%, TN2 52,48% Mẫu TN3 TN4 hiệu lực diệt gỉm hẳn Nhằm tiết kiệm chi phí s̉n xuất, mơ hình thử nghiệm áp dụng chế phẩm sinh học P1 pha lỗng 100 lần, q trình thử nghiệm tiến hành vừn trồng hồ tiêu thuộc xã Eaba, huyện Buôn Đôn, tỉnh Đăk Lăk 3.3 Đánh giá khả không phục hồi hồ tiêu mơ hình Sau th̀i gian sử dụng chế phẩm, vừn hồ tiêu mơ hình thu hoạch khỏng cuối tháng 4, th̀i điểm thích hợp để đánh giá số lượng khơng có kh̉ phục hồi cấp bệnh thấp (ví dụ trước thử nghiệm bị bệnh cấp độ 2, sau thử nghiệm cấp độ 2) cho thu hoạch suất thấp Kết qủ nghiên ću b̉ng cho thấy cấp độ bị bệnh tỷ lệ không phục hồi 20,6%, cấp độ bị bệnh tỷ lệ không phục hồi lên tới 88,3% Điều gỉi thích chế phẩm sinh học có tác dụng giai đoạn chớm bị bệnh, cấp độ bệnh nặng, thừng khó ću chữa ngồi tuyến trùng hại cịn có nhiều vi sinh vật gây bệnh khác công Đối với mẫu đối ch́ng, tỷ lệ không phục hồi tất c̉ cấp bị bệnh 95% 129 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 4(113)/2020 Bảng Tỷ lệ không phục hồi Tỷ ḷ không phục hồi (%) Cấp bị ḅnh ĐC Cấp - Mơ hình - Cấp 96,1 a 20,6a Cấp 96,1a 23,8a Cấp 98,3b 52,8b Cấp 99,7b 88,3b Ghi chú: Các chữ không giống theo hàng ḍc thể khác biệt có ý nghĩa ḿc α = 0,05 3.4 Năng suất hồ tiêu mơ hình thử nghịm Năng suất trồng thể qua sống cho thu hoạch qủ Số liệu bình quân trồng hồ tiêu 1800 trụ/1 ̉ khu vực, cấp bệnh, mơ hình triển khai đánh giá suất 10 trụ hồ tiêu x điểm thu hoạch 60 trụ, từ tính bình qn cho trồng thực tế để tính suất bình qn Bảng Năng suất hồ tiêu vừn mơ hình (tấn /ha) Công thức Vườn ông Chương Vườn bà Lan Trung bình Tăng so với đối chứng (%) Đối ch́ng 2,578a 2,653a 2,616a - Mơ hình b 2,79 2,831 2,81 7,42 LSD0,05 0,622 0,651 b b Ghi chú: Các chữ không giống theo hàng ḍc thể khác biệt có ý nghĩa ḿc α = 0,05 Kết qủ b̉ng cho thấy, mơ hình sử dụng chế phẩm c̉ vừn nhà ông Chương vừn nhà bà Lan cho suất tăng cao so với đối ch́ng Cụ thể suất trung bình tăng so với đối ch́ng 7,42% th̀i gian 12 tháng sử dụng chế phẩm sinh học diệt tuyến trùng từ nấm sợi P1 đơn chủng dạng dịch thể để thử nghiệm Từ kết qủ thử nghiệm trên, khuyến cáo sử dụng chế phẩm sinh học từ trồng mới, kiến thiết vừn hồ tiêu kiểm tra định kỳ có biểu vàng ph̉i sử dụng chế phẩm sinh học, tác dụng chế phẩm sinh học từ từ cần có th̀i gian Đồng th̀i hộ trồng tiêu nên kết hợp chế phẩm sinh học diệt tuyến trùng với chế phẩm diệt vi sinh vật gây bệnh hồ tiêu nhằm tăng hiệu qủ 130 IV ḰT LUẬN - Chế phẩm sinh học P1 dạng dịch thể độ pha loãng 100 lần cho hiệu lực diệt tuyến trùng lên tới 52,48% điều kiện nhà lưới với th̀i gian thử nghiệm 30 ngày - Đối với mơ hình thử nghiệm ha, suất tăng 7,42% so với đối ch́ng sau 12 tháng thử nghiệm L̀I CẢM ƠN Nhóm tác gỉ trân trọng c̉m ơn TS Hồ Tuyên - Chủ nhiệm đề tài “Ứng dụng công nghệ nano s̉n xuất chế phẩm sinh học dạng dịch thể từ vi sinh vật th̉o mộc phòng trừ tuyến trùng bệnh rễ hồ tiêu Tây Nguyên”, Mã số ĐTĐL.CN07/16, Hợp đồng số 07/16-ĐTĐL.CN-CNN ngày 10/6/2016 Bộ Khoa học Công nghệ với Viện Công nghệ sinh học, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam TÀI LIỆU THAM KHẢO Chu hanh Bình, Nguyễn Phương Nhụ, Hồ Tuyên, Bùi hị Vịt Hà, 2019 Tinh xác định hoạt tính chitinase từ nấm diệt tuyến trùng Paecilomyces sp P1 Tạp ch́ Khoa ḥc Tự nhiên Công nghệ, Đại học Quốc gia Hà Nội, 35 (1): 90-96 Bộ Nông nghiệp PTNT, 2015 Quyết định số 730/ QĐ-BNN-TT ngày 05/3/2015 gỉi pháp phòng trừ dịch bệnh Nguyễn Ngọc Châu, 2003 Tuýn trùng thực vật sở phòng trừ NXB Khoa học kỹ thuật Hà Nội, Hà Nội Lê Đức Khánh, Lê Quang Khải, Đào hị Hằng, Phùng Sinh Hoạt, Trần hị húy Hằng, Trần hanh Tồn, Đặng Đình hắng, Nguyễn Ngọc Châu, Trịnh Quang Pháp, Nguyễn Văn Vấn, Đào hị Lan Hoa, Lương Đình Khoa, 2013 hành phần tuyến trùng ký sinh thực vật cà phê, hồ tiêu số vùng trồng tập trung Tây Nguyên Tạp ch́ B̉o vệ thực vật, 6: 6-12 QCVN 01-172:2014/BNNPTNT Quy chuẩn Kỹ thuật Quốc gia Phương pháp điều tra phát sinh vật hại tiêu TCVN 10684-4:2018 Cây công nghiệp lâu năm Phần 4: Hồ tiêu Djian-Caporalino, C., A Fazari, M Arguel, T Vernie, C VandeCasteele, I Faure, G Brunoud, L Pijarowski, A Palloix, V Lefebvre, 2007 Root-knot nematode (Meloidogyne sp.) Me resistance genes in pepper (Capsicum annuum L.) are clustered on the P9 chromosome heoretical and Applied Genetics, 114 (3): 473-486 Henderson, C.F E.W Tilton, 1955 Tests with acaricides against the brown wheat mite Journal of Economic Entomology, 48 (2): 157-161 Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 4(113)/2020 huy, T.T.T., 2010 Incidence and efect of Meloidogyne incognita (Nematoda: Meloidogyninae) on black pepper plants in Vietnam hesis, Katholieke Universiteit Leuven, België Unpublish Trinh, P.Q., W.M Wesemael, H.A Tran, C.N Nguyen, M Moens, 2012 Resistance screening of Cofea spp accessions for Pratylenchus cofeae and Radopholus arabocofeae in Vietnam Euphytica, 185 (2): 233-241 Testing of bio-product P1 to control nematodes causing disease on black pepper in Dak Lak province Chu hanh Binh, Tran Van Tuan, Bui hi Viet Ha Abstract Paecilomyces sp P1 was isolated from pepper soil in Dak Lak province, which was a potential ilamentous fungus for killing nematodes Bio-product P1 was tested for the ability to kill nematodes at the nursery with the eiciency of 22.2% - 52.48% ater 30 days he black pepper at -7 old age had the yield higher than that of the control by 7.42% when using bio-product P1 ater 12 months on model Keywords: Black pepper, nematode, Paecilomyces sp., Bio-product P1 Ngày nhận bài: 17/4/2020 Ngày ph̉n biện: 25/4/2020 Ngừi ph̉n biện: TS Trương Hồng Ngày duyệt đăng: 29/4/2020 NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG GEN KHÁNG NOURSEOTHRICIN LÀM MARKER CHỌN LỌC DÙNG CHO CHUYỂN GEN VÀO NẤM ƯA NHIỆT Myceliophthora thermophila NHỜ VI KHUẨN Agrobacterium tumefaciens Trần Văn Tuấn1,2 TÓM TẮT Myceliophthora thermophila lồi nấm ưa nhiệt có kh̉ săng sinh t̉ng hợp nhiều loại enzyme bền nhiệt Một số enzyme loài nấm sinh cellulase, xylanase phytase có tiềm sử dụng để b̉ sung vào th́c ăn chăn nuôi Phát triển công cụ phục vụ c̉i biến di truyền nhằm tăng kh̉ sinh t̉ng hợp enzyme M thermophila giữ vai trò quan trọng Trong nghiên ću này, lần gen kháng nourseothricin sử dụng thành công làm marker chọn lọc để chuyển gen vào chủng nấm M thermophila DSM 1799 nh̀ vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens Chủng M thermophila DSM 1799 đánh giá ḿc độ mẫn c̉m với kháng sinh nourseothricin Kết qủ cho thấy chủng nấm bị ́c chế hoàn toàn nồng độ nourseothricin thấp (50 μg/ml) Kết qủ nghiên ću ch́ng minh gen huỳnh quang GFP chuyển thành công vào hệ gen chủng M thermophila DSM 1799 sử dụng marker chọn lọc gen kháng nourseothricin Sử dụng PCR với cặp mồi đặc hiệu GFP-F/GFP-R xác nhận có mặt gen GFP hệ gen thể chuyển gen thu Đặc biệt quan sát kính hiển vi huỳnh quang, thể chuyển gen có kh̉ sinh t̉ng hợp protein GFP để phát màu huỳnh quang xanh hệ sợi bào tử nấm Từ khóa: Chuyển gen thơng qua Agrobacterium tumefaciens, Myceliophthora thermophila, marker chọn lọc kháng nourseothricin, vector nhị thể I ĐẶT VẤN ĐỀ Myceliophthora thermophila coi nhà máy tế bào tiềm cho s̉n xuất loại enzyme bền nhiệt (Singh, 2016) Đặc điểm vượt trội lồi nấm có kh̉ sinh t̉ng hợp số enzyme có giá trị để b̉ sung vào th́c ăn chăn nuôi cellulase, xylanase giúp chuyển hóa cellulose xylan thành phân tử đừng đơn gỉn, hay phytase phân gỉi phytate để gỉi phóng photpho vơ giúp vật ni dễ hấp thụ (Gomes et al., 2019; Maheshwari et al., 2000) Tuy nhiên, kh̉ sinh t̉ng hợp enzyme chủng nấm tự nhiên thừng tương đối thấp Để nâng cao lực cho chủng tự nhiên, kỹ thuật c̉i biến chỉnh sửa hệ gen thừng áp dụng Việc can thiệp vào hệ gen nấm giúp tăng hiệu suất sinh t̉ng Khoa Sinh học, Trừng Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại hoc Quốc gia Hà Nội Phịng thí nghiệm Trọng điểm Cơng nghệ Enzym Protein, Trừng Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQGHN 131 ... dụng chế phẩm sinh học, tác dụng chế phẩm sinh học từ từ cần có th̀i gian Đồng th̀i hộ trồng tiêu nên kết hợp chế phẩm sinh học diệt tuyến trùng với chế phẩm diệt vi sinh vật gây bệnh hồ tiêu nhằm... tuyến trùng gây hại trên, nghiên ću, thử nghiệm chế phẩm sinh học P1 (từ chủng nấm Paecilomyces sp P1) việc phòng trừ tuyến trùng hại hồ tiêu quy mô nhà lưới quy mô đồng ruộng ha/mơ hình Đăk Lăk, ... nghiệm áp dụng chế phẩm sinh học P1 pha loãng 100 lần, trình thử nghiệm tiến hành vừn trồng hồ tiêu thuộc xã Eaba, huyện Buôn Đôn, tỉnh Đăk Lăk 3.3 Đánh giá khả không phục hồi hồ tiêu mơ hình Sau