BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC ĐẶC TÍNH CÁC DỊNG VI KHUẨN NỘI SINH TRONG CÂY SÀI ĐẤT (WEDELIA CHINENSIS (OSB.) MERR.) VÀ ỨNG DỤNG ĐỂ SẢN XUẤT PHÂN SINH HỌC BÓN CHO RAU ĂN LÁ CÁN BỘ HƯỚNG DẪN PGs Ts CAO NGỌC ĐIỆP SINH VIÊN THỰC HIỆN DƯƠNG THANH THẢO MSSV: 3064479 LỚP: CNSH K32 Cần Thơ, Tháng 6/2010 PHẦN KÝ DUYỆT CÁN BỘ HƯỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN PGs Ts Cao Ngọc Điệp Dương Thanh Thảo DUYỆT CỦA HỘI ĐỒNG BẢO VỆ LUẬN VĂN ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………… Cần Thơ, ngày tháng năm 2010 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG LỜI CẢM TẠ Đầu tiên chân thành cảm ơn Ban Giám Đốc tất quý thầy cô Viện Nghiên Cứu Phát Triển Công Nghệ Sinh Học, quý thầy cô Khoa Khoa học, Khoa Nông Nghiệp Sinh Học Ứng Dụng, phòng Quản lý Đào tạo, Trường Đại Học Cần Thơ tận tình truyền đạt kiến thức tạo điều kiện cho học tập, nghiên cứu năm qua ! Xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Thầy hướng dẫn PGs Ts Cao Ngọc Điệp, người tận tâm dìu dắt, tận tình dẫn tơi suốt thời gian học tập q trình thực thí nghiệm viết luận văn ! Xin thành thật biết ơn Thầy PGs Ts Nguyễn Hữu Hiệp Cô Ths Trần Thị Xuân Mai – cố vấn học tập lớp Công Nghệ Sinh Học K32 luôn quan tâm, động viên tạo điều kiện tốt cho suốt trình học tập trường thời gian thực đề tài luận văn tốt nghiệp ! Cảm ơn chị Nguyễn Thị Xuân Mỵ, chị Trần Thị Giang, anh Võ Văn Phước Quệ cán phịng thí nghiệm anh, chị, em phịng thí nghiệm Vi sinh vật đất Viện Nghiên cứu Phát triển Công Nghệ Sinh Học tất bạn lớp Công Nghệ Sinh Học K32 nhiệt tình giúp đỡ, động viên cho tơi lời khun bổ ích thời gian học tập lúc thực luận văn ! Xin gửi lời cảm ơn chân thành đến cha mẹ – người có cơng sinh thành, nuôi dưỡng dạy dỗ đến ngày hôm ! Cuối lời, xin kính chúc Cha Mẹ, quý Thầy Cô anh chị em luôn vui vẻ, sức khỏe dồi dào, thành công hạnh phúc; chúc tất bạn lớp Công Nghệ Sinh Học K32 tốt nghiệp trường thành công lĩnh vực bạn lựa chọn Cần Thơ, ngày tháng năm 2010 Dương Thanh Thảo Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32 – 2010 Trường Đại học Cần Thơ TÓM LƯỢC Vi khuẩn nội sinh vi khuẩn sống mơ thực vật, chúng có khả cố định đạm, hịa tan lân khó tan, tổng hợp IAA Dùng phép thử sinh hóa khảo sát đặc tính cố định đạm, hịa tan lân khó tan, tổng hợp IAA mười sáu dòng vi khuẩn nội sinh phân lập thân rễ Sài đất (Wedelia chinensis (Osb.) Merr.) Kết cho thấy dịng Fa2, rd1, Rh có đặc tính cố định đạm, hịa tan lân khó tan, tổng hợp IAA tốt Nhân nuôi sinh khối dòng vi khuẩn để tưới cho rau ăn Cải Nhíp (Lactuca sativa) Mồng Tơi (Basalla rubra) dạng phân sinh học với nghiệm thức tối ưu tưới 50% (5.000 lít/ha) dịch vi khuẩn 50% phân hóa học (30kg N,10kg P2O5, 10kg KCl)/ha cho suất ổn định lượng nitrate tồn dư thấp, an toàn cho người tiêu dùng Từ khóa: cố định đạm, hịa tan lân khó tan, phân vi sinh, rau ăn lá, Sài đất, tổng hợp IAA i Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32 – 2010 Trường Đại học Cần Thơ MỤC LỤC PHẦN KÝ DUYỆT LỜI CẢM TẠ TÓM LƯỢC i MỤC LỤC ii DANH SÁCH BẢNG iv DANH SÁCH HÌNH v TỪ VIẾT TẮT vii CHƯƠNG - ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG - LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Tình hình nghiên cứu vi khuẩn nội sinh nước giới 2.1.1 Trong nước 2.1.2 Ngoài nước 2.2 Chế phẩm vi sinh vật dạng dịch thể 2.3 Sơ lược rau nhân tố ảnh hưởng 2.3.1 Sự cần thiết rau bữa ăn hàng ngày 2.3.2 Tình trạng ngộ độc thực phẩm rau 2.3.3 Khái niệm “rau an toàn” 2.3.4 Dư lượng nitrate chất lượng nông sản 2.3.5 Sơ lược số giống rau ăn 2.3 Một số đặc tính vi khuẩn nội sinh 2.3.1 Khả cố định đạm 2.3.2 Khả hịa tan lân khó tan 2.3.3 Khả tổng hợp indole-3-acetic acid (IAA) 10 CHƯƠNG - PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12 3.1 Phương tiện nghiên cứu 12 3.1.1 Thời gian địa điểm thí nghiệm 12 3.1.2 Vật liệu thí nghiệm 12 ii Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32 – 2010 Trường Đại học Cần Thơ 3.1.3 Thiết bị dụng cụ thí nghiệm 12 3.1.4 Hóa chất 13 3.2 Phương pháp nghiên cứu 15 3.2.1 Xác định số đặc tính vi khuẩn nội sinh 15 3.2.1.1 Khả cố định đạm 15 3.2.1.2 Khả hòa tan lân khó tan 16 3.2.1.3 Khả tổng hợp indole-3-acetic acid (IAA) 17 3.2.2 Thử nghiệm hiệu dòng vi khuẩn tốt 19 CHƯƠNG - KẾT QUẢ THẢO LUẬN 20 4.1 Một số đặc tính dịng vi khuẩn nội sinh 20 4.1.1 Khả cố định đạm 20 4.1.1.1 Khả phát triển vi khuẩn môi trường không đạm 20 4.1.1.2 Định tính lượng ammonium vi khuẩn tạo 21 4.1.2 Khả hịa tan lân khó tan 24 4.1.3 Khả tổng hợp indol-3-acetic acid (IAA) 27 4.2 Khả ứng dụng rau ăn 31 4.2.1 Khảo nghiệm rau Cải Nhíp 31 4.2.2 Khảo nghiệm Mồng Tơi 32 CHƯƠNG - KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 34 5.1 Kết luận 34 5.2 Đề nghị 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO 35 iii Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32 – 2010 Trường Đại học Cần Thơ DANH SÁCH BẢNG Bảng Công thức môi trường Burk’s N-free 14 Bảng Công thức môi trường NBRIP lỏng (Nautiyal, 1999) 14 Bảng Xây dựng đường chuẩn đo đạm 15 Bảng Khả phát triển vi khuẩn môi trường Burk’s N-free 20 Bảng Hiệu phân sinh học phân hóa học trọng lượng cây, suất hàm lượng nitrate Cải Nhíp 32 Bảng Hiệu phân sinh học phân hóa học trọng lượng cây, suất hàm lượng nitrate Mồng Tơi 33 iv Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32 – 2010 Trường Đại học Cần Thơ DANH SÁCH HÌNH Hình Cải Nhíp Hình Mồng tơi Hình 3: Sơ đồ lộ trình sinh tổng hợp IAA Enterobacter cloacae 11 Hình Các thiết bị thí nghiệm cần thiết 13 Hình 5: Phản ứng màu lượng lân hịa tan với thuốc thử Oniani 17 Hình Sơ đồ bước xác định khả hòa tan lân khó tan 17 Hình 7: Phản ứng màu IAA vi khuẩn tổng hợp sau ngày nuôi với thuốc thử R2 17 Hình 8: Phản ứng màu ammonium tạo với thuốc thử 21 Hình Khả tổng hợp NH4+ (mg/l) trung bình dịng vi khuẩn nội sinh phân lập mơi trường Nfb 22 Hình 10 Khả tổng hợp Nh4+ (mg/l) dịng vi khuẩn mơi trường Nfb theo thời gian 23 Hình 11 Khả tổng hợp NH4+ (mg/l) trung bình 10 dịng vi khuẩn nội sinh phân lập môi trường RMR 23 Hình 12 Khả tổng hợp Nh4+ (mg/l) dịng vi khuẩn mơi trường RMR theo thời gian 24 Hình 13 Khả hịa tan lân khó tan (mg/P2O5/lít) trung bình dịng vi khuẩn phân lập mơi trường Nfb hịa tan 25 Hình 14 Khả hịa tan lân khó tan (mg/P2O5/lít) 10 dịng vi khuẩn nội sinh phân lập mơi trường RMR hịa tan theo thời gian 26 Hình 15 Hàm lượng IAA (µg/ml) trung bình dịng vi khuẩn phân lập môi trường Nfb tổng hợp 28 Hình 16 Hàm lượng IAA (µg/ml) dịng vi khuẩn phân lập môi trường Nfb tổng hợp theo thời gian 28 Hình 17 Hàm lượng IAA (µg/ml) trung bình 10 dịng vi khuẩn phân lập môi trường Nfb tổng hợp 29 Hình 18.Hàm lượng IAA (µg/ml) 10 dịng vi khuẩn phân lập môi trường RMR tổng hợp theo thời gian 29 v Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32 – 2010 Trường Đại học Cần Thơ Hình 19 Khả cố định đạm, hòa tan lân tổng hợp IAA trung bình dịng vi khuẩn mơi trường Nfb 30 Hình 20 Khả cố định đạm, hòa tan lân tổng hợp IAA trung bình 10 dịng vi khuẩn môi trường RMR 31 vi Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32 – 2010 Trường Đại học Cần Thơ TỪ VIẾT TẮT CFU: Colony Forming Unit DOA: Department of Agriculture ĐBSCL: Đồng Bằng Sông Cửu Long IAA: Indol Acetic Acid ICRISAT: International Crop Research Institute Semi Arid Tropics NADH: Nicotinamide Adenin Dinucleotide NBRIP: National Botanical Research Institute's phosphate growth medium Nfb: nitrogen-free semisolid malate NifTAL: Nitrogen Fixation by Tropical Agricultural Legumes OD: Optical density RMR: Rennie-N-free medium VSV: Vi sinh vật vii TN_THẢO_moi truong Nfb Hàm lượng P dể tiêu (mg/L) NT Ngày DC Dòng fc3 dòng Fp2 dòng Fa2 dòng Fb2 dòng Fd1 dòng Fb3 I 0.01 0.02 0.02 0.01 0.02 0.03 0.02 II III 0.02 0.03 0.02 0.01 0.01 0.01 0.02 0.02 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 TC TB 0.05 0.07 0.01 0.03 0.02 0.02 0.02 0.22 0.02 0.02 0.00 0.01 0.01 0.01 0.01 Bình phương (I) 0.0025 0.0049 0.0001 0.0009 0.0004 0.0004 0.0004 Bình phương (II) Bình phương (III) Bình phương (TB) 0.0001 0.0004 0.0004 0.0001 0.0004 0.0009 0.0004 0.0004 0.0009 0.0004 0.0001 0.0001 0.0001 0.006 0.0004 0.0004 0.0001 0.0001 0.0001 0.0001 0.0001 0.0081 0.2401 0.4096 4.6656 1.1664 0.1936 0.1444 0.0441 32.0356 0.2401 37.4544 51.6961 16.9744 0.4761 282.7567 0.0841 27.4576 0.2601 37.3321 55.5025 16.0801 0.2916 0.0009 0.0256 0.2116 0.2401 0.0036 0.0064 0.5041 0.0484 5.2441 0.5041 0.4489 0.5929 0.4356 0.3721 14.604 0.0324 4.0401 0.3721 0.3721 0.4761 0.3364 0.3364 0.0096 Ngày DC Dòng fc3 dòng Fp2 dòng Fa2 dòng Fb2 dòng Fd1 dòng Fb3 0.09 0.49 0.64 2.16 1.08 0.44 0.38 0.21 5.66 0.49 6.12 7.19 4.12 0.69 0.29 5.24 0.51 6.11 7.45 4.01 0.54 0.59 11.39 1.64 14.39 15.72 8.57 1.61 53.91 0.20 3.80 0.55 4.80 5.24 2.86 0.54 0.3481 129.7321 2.6896 207.0721 247.1184 73.4449 2.5921 662.9973 Ngày 10 DC Dòng fc3 dòng Fp2 dòng Fa2 dòng Fb2 dòng Fd1 dòng Fb3 0.03 0.16 0.46 0.49 0.06 0.08 0.71 0.22 2.29 0.71 0.67 0.77 0.66 0.61 0.18 2.01 0.61 0.61 0.69 0.58 0.58 0.43 4.46 1.78 1.77 1.52 1.32 1.9 13.18 0.14 1.49 0.59 0.59 0.51 0.44 0.63 0.1849 19.8916 3.1684 3.1329 2.3104 1.7424 3.61 34.0406 67.31 CF = 1.068413 697.0475 297.3667 71.91486 CV (%) = 11.64 ANOVA Nguồn df NT Vi khuẩn T.gian VK X TG Sai số Tổng 20 12 42 62 DC Dòng fc3 dòng Fp2 dòng Fa2 dòng Fb2 dòng Fd1 dòng Fb3 1.07 15.92 3.43 16.19 17.26 9.91 3.53 937.0489 SS MS 160.4343 6.17255 74.75414 79.50762 65.01753 225.4518 8.021715 1.028758 37.37707 6.625635 1.548037 1.1449 253.4464 11.7649 262.1161 297.9076 98.2081 12.4609 0.09 1.33 0.29 1.35 1.44 0.83 0.29 LSD.01 = 1.35 F tính F bảng 5% 1% 5.18 0.66 24.14 4.28 1.67 2.27 2.78 1.76 2.06 3.15 4.16 2.23 Ngày Ngày Ngày 10 3080.049 0.22 53.91 13.18 0.0484 2906.288 173.7124 0.01 2.57 0.63 LSD.01 = 1.02 LSD.01 (TT)= 2.70 TN_THẢO_moi truong Nfb Hàm lượng IAA (mg/l) NT Ngày DC Dòng fc3 dòng Fp2 dòng Fa2 dòng Fb2 dòng Fd1 dòng Fb3 I 0.01 0.01 0.02 0.01 0.01 0.03 0.01 II III 0.01 0.01 0.01 0.02 0.02 0.01 0.02 0.00 0.01 0.01 0.01 0.01 0.02 0.01 TC TB 0.02 0.03 0.04 0.04 0.04 0.06 0.04 0.00 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.02 0.01 0.09 Bình phương (I) 0.0004 0.0009 0.0016 0.0016 0.0016 0.0036 0.0016 Bình phương (II) Bình phương (III) Bình phương (TB) 0.0001 0.0001 0.0004 0.0001 0.0001 0.0009 0.0001 0.0001 0.0001 0.0001 0.0004 0.0004 0.0001 0.0004 0.0043 0.0001 0.0001 0.0001 0.0001 0.0004 0.0001 0.0004 0.1521 0.1764 0.1936 0.2704 0.1369 0.1681 0.0144 0.1296 0.1681 0.2025 0.2601 0.1089 0.1936 3.0241 0.0081 0.1369 0.1089 0.1681 0.2025 0.1156 0.1089 0.0841 0.3721 0.3969 0.4624 0.4225 1.4641 0.5041 0.0484 0.4356 0.4761 0.4489 0.3721 1.3456 0.3721 10.6734 0.0324 0.3844 0.3721 0.3721 0.4761 1.3689 0.4624 0.0049 0.0225 0.0225 0.0004 0.0025 0.0009 0.0001 0.0025 0.0361 0.0289 0.0049 0.0016 0.0016 0.0016 0.1809 0.0081 0.0144 0.0169 0.0016 0.0049 0.0036 0.0004 0.0113 Ngày DC Dòng fc3 dòng Fp2 dòng Fa2 dòng Fb2 dòng Fd1 dòng Fb3 0.02 0.39 0.42 0.44 0.52 0.37 0.41 0.12 0.36 0.41 0.45 0.51 0.33 0.44 0.09 0.37 0.33 0.41 0.45 0.34 0.33 0.23 1.12 1.16 1.3 1.48 1.04 1.18 7.51 0.08 0.37 0.39 0.43 0.49 0.35 0.39 0.0529 1.2544 1.3456 1.69 2.1904 1.0816 1.3924 9.0073 Ngày DC Dòng fc3 dòng Fp2 dòng Fa2 dòng Fb2 dòng Fd1 dòng Fb3 0.29 0.61 0.63 0.68 0.65 1.21 0.71 0.22 0.66 0.69 0.67 0.61 1.16 0.61 0.18 0.62 0.61 0.61 0.69 1.17 0.68 0.69 1.89 1.93 1.96 1.95 3.54 13.96 0.23 0.63 0.64 0.65 0.65 1.18 0.67 0.4761 3.5721 3.7249 3.8416 3.8025 12.5316 31.9488 Ngày DC Dòng fc3 dòng Fp2 dòng Fa2 dòng Fb2 dòng Fd1 dòng Fb3 0.07 0.15 0.15 0.02 0.05 0.03 0.01 CF = 0.05 0.19 0.17 0.07 0.04 0.04 0.04 0.09 0.12 0.13 0.04 0.07 0.06 0.02 0.21 0.46 0.45 0.13 0.16 0.13 0.07 1.61 23.08 0.274762 0.07 0.15 0.15 0.04 0.05 0.04 0.02 0.0441 0.2116 0.2025 0.0169 0.0256 0.0169 0.0049 0.5225 41.4899 13.8827 6.341505 CV (%) = 11.17 ANOVA Nguồn df NT Vi khuẩn T.gian VK X TG Sai số Tổng 27 18 56 83 DC Dòng fc3 dòng Fp2 dòng Fa2 dòng Fb2 dòng Fd1 dòng Fb3 1.15 3.5 3.58 3.43 3.63 4.77 3.29 84.9077 SS MS 7.488462 0.734137 5.747724 1.006601 0.052733 7.541195 0.27735 0.122356 1.915908 0.055922 0.000942 1.3225 12.25 12.8164 11.7649 13.1769 22.7529 10.8241 0.10 0.29 0.30 0.29 0.30 0.40 0.27 LSD.01 = 0.03 F tính F bảng 5% 1% 1.67 2.27 2.78 1.76 2.06 3.15 4.16 2.23 294.53 129.94 2034.59 59.39 Ngày Ngày Ngày Ngày 253.8738 0.09 7.51 13.96 1.61 56.4001 194.8816 2.5921 0.00 0.36 0.66 0.08 LSD.01 = 0.03 LSD.01 (TT)= 0.07 Phần Kết thống kê khả cố định đạm, hòa tan lân, tổng hợp IAA dòng vi khuẩn phân lập môi trường RMR TN_THẢO_moi truong RMR Hàm lượng N (mg/ml) NT I II III TC TB Bình phương (III) Bình phương (TB) 0.0001 0.1225 0.2025 0.0009 0.2916 0.0676 0.1369 0.9409 0.0196 0.0576 0.0676 0.0004 0.1089 0.1681 0.0036 0.2601 0.0441 0.1089 0.8836 0.0144 0.0784 0.0484 5.5434 0.0004 0.1024 0.1764 0.0025 0.2401 0.0529 0.0961 1.1025 0.0121 0.0529 0.0784 0.0004 0.0144 0.0001 0.0001 0.1521 0.3025 0.2025 0.1156 0.0576 0.0009 0.0001 0.0001 0.0121 0.0004 0.0004 0.1296 0.2601 0.2401 0.1089 0.0625 0.0004 0.0004 2.5866 0.0004 0.01 0.0001 0.0004 0.1444 0.3721 0.1681 0.1444 0.0841 0.0009 0.0004 0.0001 0.0001 0.0004 0.0004 0.0001 0.2601 0.0529 0.0784 0.0036 0.0009 0.0001 0.0004 0.0001 0.0004 0.0004 0.0004 0.2401 0.0484 0.0961 0.0064 0.0009 0.0004 0.0004 0.0004 0.0001 0.0001 0.0016 0.2704 0.0676 0.0841 0.0049 0.0004 0.0004 Bình phương (I) Bình phương (II) 0.0001 1.6384 0.0196 2.3716 0.49 1.0201 8.7616 0.1369 0.5625 0.5776 Ngày DC Ra1 Rk1 rg2 Rs rd2 Re Rg2 rt Rh rd1 0.01 0.35 0.45 0.03 0.54 0.26 0.37 0.97 0.14 0.24 0.26 0.02 0.33 0.41 0.06 0.51 0.21 0.33 0.94 0.12 0.28 0.22 0.02 0.32 0.42 0.05 0.49 0.23 0.31 1.05 0.11 0.23 0.28 0.01 1.28 0.14 1.54 0.7 1.01 2.96 0.37 0.75 0.76 10.52 0.00 0.33 0.43 0.05 0.51 0.23 0.34 0.99 0.12 0.25 0.25 0.96 16.5784 Ngày DC Ra1 Rk1 rg2 Rs rd2 Re Rg2 rt Rh rd1 0.02 0.12 0.01 0.01 0.39 0.55 0.45 0.34 0.24 0.03 0.01 0.01 0.11 0.02 0.02 0.36 0.51 0.49 0.33 0.25 0.02 0.02 0.02 0.1 0.01 0.02 0.38 0.61 0.41 0.38 0.29 0.03 0.02 0.05 0.33 0.04 0.05 1.13 1.67 1.35 1.05 0.78 0.08 0.05 6.58 0.02 0.11 0.01 0.02 0.38 0.56 0.45 0.35 0.26 0.03 0.02 0.60 0.0025 0.1089 0.0016 0.0025 1.2769 2.7889 1.8225 1.1025 0.6084 0.0064 0.0025 7.7236 Ngày DC Ra1 Rk1 rg2 Rs rd2 Re Rg2 rt Rh rd1 0.01 0.01 0.02 0.02 0.01 0.51 0.23 0.28 0.06 0.03 0.01 0.02 0.01 0.02 0.02 0.02 0.49 0.22 0.31 0.08 0.03 0.02 0.02 0.02 0.01 0.01 0.04 0.52 0.26 0.29 0.07 0.02 0.02 0.05 0.04 0.05 0.05 0.07 1.52 0.71 0.88 0.21 0.08 0.05 0.02 0.01 0.02 0.02 0.02 0.51 0.24 0.29 0.07 0.03 0.02 0.0025 0.0016 0.0025 0.0025 0.0049 2.3104 0.5041 0.7744 0.0441 0.0064 0.0025 3.71 0.12 3.6559 0.03 0.01 0.01 0.02 0.02 0.31 0.03 0.01 0.02 0.03 0.02 0.06 0.04 0.06 0.05 0.06 0.84 0.06 0.04 0.06 0.05 0.06 1.38 0.02 0.01 0.02 0.02 0.02 0.28 0.02 0.01 0.02 0.02 0.02 0.0036 0.0016 0.0036 0.0025 0.0036 0.7056 0.0036 0.0016 0.0036 0.0025 0.0036 0.7354 22.19 0.178952 1.2215 Ngày DC Ra1 Rk1 rg2 Rs rd2 Re Rg2 rt Rh rd1 0.01 0.01 0.02 0.01 0.02 0.28 0.01 0.01 0.02 0.01 0.02 CF = 0.02 0.02 0.03 0.02 0.02 0.25 0.02 0.02 0.02 0.01 0.02 0.0001 0.0001 0.0004 0.0001 0.0004 0.0784 0.0001 0.0001 0.0004 0.0001 0.0004 28.6933 0.0004 0.0004 0.0009 0.0004 0.0004 0.0625 0.0004 0.0004 0.0004 0.0001 0.0004 0.248 9.5995 3.970936 CV (%) = 11.70 ANOVA Nguồn df NT Vi khuẩn T.gian VK X TG Sai số Tổng 43 10 30 80 123 SS MS 5.593497 2.049489 1.169527 2.374481 0.035067 5.628564 0.130081 0.204949 0.389842 0.079149 0.000438 DC Ra1 Rk1 rg2 Rs rd2 Re Rg2 rt Rh 0.17 1.41 1.43 0.29 2.8 4.73 3.13 4.93 1.42 0.96 0.0289 1.9881 2.0449 0.0841 7.84 22.3729 9.7969 24.3049 2.0164 0.9216 0.01 0.12 0.12 0.02 0.23 0.39 0.26 0.41 0.12 0.08 rd1 0.92 72.2451 0.8464 LSD.01 = 0.08 0.02 F tính 296.76 467.56 889.37 180.57 F bảng 5% 1% 1.54 1.95 2.72 1.6 1.84 2.66 4.04 1.94 Ngày Ngày Ngày Ngày 169.6353 10.52 6.58 3.71 1.38 110.6704 43.2964 13.7641 1.9044 0.50 0.31 0.18 0.07 LSD.01 = 0.01 LSD.01 (TT)= 0.05 0.0009 0.0001 0.0001 0.0004 0.0004 0.0961 0.0009 0.0001 0.0004 0.0009 0.0004 TN_THẢO_moi truong RMR Hàm lượng P dể tiêu (mg/L) NT Ngày DC Ra1 Rk1 rg2 Rs rd2 Re Rg2 rt Rh rd1 I 0.01 0.02 0.02 0.01 0.02 0.03 0.02 0.01 0.02 0.01 0.02 II 0.02 0.03 0.02 0.01 0.01 0.01 0.02 0.01 0.02 0.01 III 0.02 0.02 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.02 0.02 0.02 TC 0.05 0.07 0.01 0.03 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.3 TB 0.02 0.02 0.00 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 Bình phương (I) 0.0025 0.0049 0.0001 0.0009 0.0004 0.0004 0.0004 0.0004 0.0004 0.0004 0.0004 Bình phương (II) Bình phương (III) Bình phương (TB) 0.0001 0.0004 0.0004 0.0001 0.0004 0.0009 0.0004 0.0001 0.0004 0.0001 0.0004 0.0004 0.0009 0.0004 0.0001 0.0001 0.0001 0.0004 0.0001 0.0004 0.0001 0.0093 0.0004 0.0004 0.0001 0.0001 0.0001 0.0001 0.0001 0.0001 0.0004 0.0004 0.0004 0.0081 71.9104 287.3025 528.0804 19.0969 122.7664 9148.923 252.4921 144.2401 127.0129 53.5824 0.0025 66.2596 259.5321 529.4601 17.5561 118.5921 9229.445 247.7476 143.5204 121.2201 49.1401 31996.46 0.0009 77.6161 289.3401 491.0656 26.1121 125.6641 8898.149 228.3121 133.6336 133.1716 55.5025 0.0009 171.8721 363.6649 439.7409 318.6225 115.5625 57.6081 3463.323 164.3524 8363.103 10901.45 0.0064 158.2564 365.1921 418.2025 330.8761 111.3025 58.6756 3381.423 146.6521 8181.203 11189.41 72754.68 0.0025 180.9025 340.4025 447.7456 311.5225 108.3681 56.1001 3295.908 170.3025 8465.84 10677.09 0.0096 Ngày DC Ra1 Rk1 rg2 Rs rd2 Re Rg2 rt Rh rd1 0.09 8.48 16.95 22.98 4.37 11.08 95.65 15.89 12.01 11.27 7.32 0.05 8.14 16.11 23.01 4.19 10.89 96.07 15.74 11.98 11.01 7.01 0.03 8.81 17.01 22.16 5.11 11.21 94.33 15.11 11.56 11.54 7.45 0.17 25.43 50.07 68.15 13.67 33.18 286.05 46.74 35.55 33.82 21.78 614.61 0.06 8.48 16.69 22.72 4.56 11.06 95.35 15.58 11.85 11.27 7.26 0.0289 646.6849 2507.005 4644.423 186.8689 1100.912 81824.6 2184.628 1263.803 1143.792 474.3684 95977.12 Ngày 10 DC Ra1 Rk1 rg2 Rs rd2 Re Rg2 rt Rh rd1 0.03 13.11 19.07 20.97 17.85 10.75 7.59 58.85 12.82 91.45 104.41 0.08 12.58 19.11 20.45 18.19 10.55 7.66 58.15 12.11 90.45 105.78 0.05 13.45 18.45 21.16 17.65 10.41 7.49 57.41 13.05 92.01 103.33 0.16 39.14 56.63 62.58 53.69 31.71 22.74 174.41 37.98 273.91 313.52 1066.47 0.05 13.05 18.88 20.86 17.90 10.57 7.58 58.14 12.66 91.30 104.51 0.0256 1531.94 3206.957 3916.256 2882.616 1005.524 517.1076 30418.85 1442.48 75026.69 98294.79 218243.2 1681.38 CF = 16.98364 314220.4 104751.1 28555.95 CV (%) = 2.41 ANOVA F bảng 5% 1% 14251.49 2772.80 130473.10 1.67 2.27 2.78 2.06 3.15 4.16 8368.68 1.76 2.23 Nguồn df SS MS F tính NT Vi khuẩn T.gian VK X TG Sai số Tổng 32 10 76184.17 4632.054 43591.85 2380.755 463.2054 21795.93 20 66 98 27960.27 11.0255 76195.2 1398.013 0.167053 0.38 64.64 106.71 130.76 67.38 64.91 308.81 221.17 73.55 307.75 335.32 0.1444 4178.33 11387.02 17098.18 4540.064 4213.308 95363.62 48916.17 5409.603 94710.06 112439.5 0.03 5.39 8.89 10.90 5.62 5.41 25.73 18.43 6.13 25.65 27.94 DC Ra1 Rk1 rg2 Rs rd2 Re Rg2 rt Rh rd1 398256 LSD.01 = 0.44 Ngày Ngày Ngày 10 1515104 0.3 614.61 1066.47 0.09 377745.5 1137358 0.01 29.27 50.78 LSD.01 = 0.27 LSD.01 (TT)= 0.89 TN_THẢO_moi truong RMR Hàm lượng IAA (mg/l) NT I II III TC TB Bình phương (I) Bình phương (II) Bình phương (III) Bình phương (TB) Ngày DC Ra1 Rk1 rg2 Rs rd2 Re Rg2 rt Rh rd1 0.01 0.34 0.09 0.26 0.51 0.09 0.68 0.17 0.51 2.05 0.26 0.02 0.33 0.08 0.22 0.46 0.11 0.61 0.15 0.49 2.14 0.22 0.02 0.32 0.05 0.24 0.49 0.13 0.59 0.13 0.53 2.33 0.28 0.01 0.99 0.22 0.72 1.46 0.33 1.88 0.45 1.53 6.52 0.76 14.87 0.00 0.33 0.07 0.24 0.49 0.11 0.63 0.15 0.51 2.17 0.25 1.35 0.0001 0.9801 0.0484 0.5184 2.1316 0.1089 3.5344 0.2025 2.3409 42.5104 0.5776 0.0001 0.1156 0.0081 0.0676 0.2601 0.0081 0.4624 0.0289 0.2601 4.2025 0.0676 0.0004 0.1089 0.0064 0.0484 0.2116 0.0121 0.3721 0.0225 0.2401 4.5796 0.0484 17.7047 0.0004 0.1024 0.0025 0.0576 0.2401 0.0169 0.3481 0.0169 0.2809 5.4289 0.0784 0.0001 0.1849 0.2601 0.0081 0.0289 0.0001 0.0289 0.0081 0.0676 1.8769 0.0081 0.0001 0.1681 0.2401 0.0049 0.0256 0.0004 0.0324 0.0064 0.0625 1.7689 0.0121 7.3159 0.0004 0.1521 0.3025 0.0121 0.0324 0.0004 0.0121 0.0121 0.0841 1.9044 0.01 0.0001 0.0004 0.0004 0.0009 0.0009 0.0004 0.0009 0.0016 0.0016 0.0016 0.0004 0.0004 0.0001 0.0004 0.0004 0.0004 0.0004 0.0004 0.0025 0.0025 0.0009 0.0004 0.0292 0.0004 0.0004 0.0001 0.0009 0.0016 0.0004 0.0016 0.0004 0.0025 0.0025 0.0004 52.9533 Ngày DC Ra1 Rk1 rg2 Rs rd2 Re Rg2 rt Rh rd1 0.01 0.43 0.51 0.09 0.17 0.01 0.17 0.09 0.26 1.37 0.09 0.01 0.41 0.49 0.07 0.16 0.02 0.18 0.08 0.25 1.33 0.11 0.02 0.39 0.55 0.11 0.18 0.02 0.11 0.11 0.29 1.38 0.1 0.04 1.23 1.55 0.27 0.51 0.05 0.46 0.28 0.8 4.08 0.3 9.57 0.01 0.41 0.52 0.09 0.17 0.02 0.15 0.09 0.27 1.36 0.10 0.87 0.0016 1.5129 2.4025 0.0729 0.2601 0.0025 0.2116 0.0784 0.64 16.6464 0.09 21.9189 Ngày DC Ra1 Rk1 rg2 Rs rd2 Re Rg2 rt Rh rd1 0.01 0.02 0.02 0.03 0.03 0.02 0.03 0.04 0.04 0.04 0.02 0.02 0.01 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.05 0.05 0.03 0.02 0.02 0.02 0.01 0.03 0.04 0.02 0.04 0.02 0.05 0.05 0.02 0.05 0.05 0.05 0.08 0.09 0.06 0.09 0.11 0.14 0.12 0.06 0.9 0.02 0.02 0.02 0.03 0.03 0.02 0.03 0.04 0.05 0.04 0.02 0.03 0.0025 0.0025 0.0025 0.0064 0.0081 0.0036 0.0081 0.0121 0.0196 0.0144 0.0036 0.0834 Ngày DC Ra1 Rk1 rg2 Rs rd2 Re Rg2 rt Rh rd1 0.01 0.02 0.07 0.02 0.02 0.03 0.02 0.02 0.03 0.05 0.02 CF = 0.02 0.02 0.06 0.02 0.02 0.04 0.02 0.02 0.02 0.05 0.02 0.01 0.01 0.11 0.02 0.02 0.03 0.03 0.01 0.03 0.04 0.02 0.04 0.05 0.24 0.06 0.06 0.1 0.07 0.05 0.08 0.14 0.06 0.95 26.29 0.212016 0.01 0.02 0.08 0.02 0.02 0.03 0.02 0.02 0.03 0.05 0.02 0.0016 0.0025 0.0576 0.0036 0.0036 0.01 0.0049 0.0025 0.0064 0.0196 0.0036 0.1159 0.0001 0.0004 0.0049 0.0004 0.0004 0.0009 0.0004 0.0004 0.0009 0.0025 0.0004 75.0715 0.0004 0.0004 0.0036 0.0004 0.0004 0.0016 0.0004 0.0004 0.0004 0.0025 0.0004 0.0405 25.0903 5.573904 CV (%) = 13.60 ANOVA Nguồn df SS MS NT Vi khuẩn T.gian VK X TG Sai số Tổng 43 10 19.44993 6.808188 3.953802 0.452324 0.680819 1.317934 30 80 123 8.68794 0.066467 19.5164 0.289598 0.000831 DC Ra1 Rk1 rg2 Rs rd2 Re Rg2 rt Rh 0.14 2.32 2.06 1.13 2.12 0.54 2.5 0.89 2.55 10.86 0.0196 5.3824 4.2436 1.2769 4.4944 0.2916 6.25 0.7921 6.5025 117.9396 0.01 0.19 0.17 0.09 0.18 0.05 0.21 0.07 0.21 0.91 rd1 1.18 148.5851 1.3924 LSD.01 = 0.10 0.03 F bảng 5% 1% 544.42 819.44 1586.28 1.54 1.95 2.72 1.84 2.66 4.04 348.56 1.6 1.94 F tính Ngày Ngày Ngày Ngày 314.4143 14.87 9.57 0.9 0.95 221.1169 91.5849 0.81 0.9025 0.71 0.46 0.04 0.05 LSD.01 = 0.02 LSD.01 (TT)= 0.06 0.0001 0.0001 0.0121 0.0004 0.0004 0.0009 0.0009 0.0001 0.0009 0.0016 0.0004 Phần Trọng lượng trung bình cây, suất tổng dư lượng Nitrate cải nhíp TN_Cải Nhíp Trọng lượng cải (g/cây) NT I II III TC TB Bình phương (I) 2.16 2.68 2.83 4.77 2.41 2.53 2.87 4.96 2.18 2.72 2.89 4.46 6.75 7.93 8.59 14.19 2.25 2.64 2.86 4.73 45.5625 62.8849 73.7881 201.3561 12.44 154.7536 12.77 163.0729 12.25 150.0625 37.46 4.6656 7.1824 8.0089 22.7529 Bình phương (III) 5.8081 6.4009 8.2369 24.6016 Bình phương (TB) 4.7524 7.3984 8.3521 19.8916 3.12 128.0518 467.889 CF = Bình phương (II) 383.5916 116.937633 LSD.01 = 0.48 CV (%) = ANOVA Nguồn df SS MS Khối 0.03461667 0.0173083 VK 10.9262333 3.6420778 Sai số 0.15331667 0.0255528 Tổng 11 11.1141667 F bảng 5% 1% 0.68 5.14 10.92 142.53 4.76 9.78 F tính 5.12 TN_Cải Nhíp Năng suất cải (kg/ha) NT I II III TC TB 600 930 951 1031 570 936 963 1042 620 926 955 1038 1790 2792 2869 3111 596.67 930.67 956.33 1037.00 3539 12524521 10562 880.17 3512 12334144 3511 12327121 Bình phương (II) Bình phương (III) 3204100 7795264 8231161 9678321 360000 864900 904401 1062961 324900 876096 927369 1085764 Bình phương (TB) 384400 857476 912025 1077444 9637736 37185786 CF = Bình phương (I) 28908846 9296320.33 LSD.01 = 45.03 CV (%) = 1.69 ANOVA Nguồn df SS MS Khối 126.166667 63.083333 VK 339961.667 113320.56 Sai số 1327.83333 221.30556 Tổng 11 341415.667 F bảng 5% 1% 0.29 5.14 10.92 512.05 4.76 9.78 F tính TN_Cải Nhíp hàm lượng nitrate cải (mg/kg) NT I II III TC TB Bình phương (I) 12.54 67.97 122.96 452.04 10.75 76.22 115.61 401.57 9.68 66.02 128.74 409.12 32.97 210.21 367.31 1262.73 10.99 70.07 122.44 420.91 1087.0209 44188.244 134916.64 1594487.1 655.51 429693.36 604.15 364997.223 613.56 376455.87 1873.22 156.10 Bình phương (III) Bình phương (TB) 157.2516 4619.9209 15119.162 204340.16 115.5625 5809.4884 13365.672 161258.46 93.7024 4358.6404 16573.9876 167379.174 593191.19 1171146.46 CF = Bình phương (II) 1774679 292412.764 LSD.01 = 43.82 CV (%) = 9.27 ANOVA Nguồn df SS MS Khối 373.850017 186.92501 VK 299146.887 99715.629 Sai số 1257.68705 209.61451 Tổng 11 300778.424 F bảng 5% 1% 0.89 5.14 10.92 475.71 4.76 9.78 F tính TN_Mồng Tơi Trọng lượng (g/cây) Bình phương (I) Bình phương (II) Bình phương (III) Bình phương (TB) NT I II III TC TB 14.01 13.81 12.13 39.95 13.32 1596.0025 196.2801 190.7161 147.1369 14.11 14.51 14.31 42.93 14.31 1842.9849 199.0921 210.5401 204.7761 18.61 19.31 18.01 55.93 18.64 3128.1649 346.3321 372.8761 324.3601 23.77 22.61 22.01 68.39 22.80 4677.1921 565.0129 511.2121 484.4401 70.5 70.24 66.46 4970.25 4933.6576 4416.9316 207.2 17.27 3752.7748 14320.8392 CF = 11244.3444 3577.653333 LSD.01 = 1.79 CV (%) = ANOVA F bảng Nguồn df SS MS Khối 2.556466667 1.278233333 VK 170.4614667 56.82048889 Sai số 2.103533333 0.350588889 Tổng 11 175.1214667 F tính 5% 1% 3.65 5.14 10.92 162.07 4.76 9.78 3.43 TN_Mồng tơi Năng suất (kg/ha) Bình phương (I) Bình phương (II) Bình phương (III) Bình phương (TB) NT I II III TC TB 214 221 204 639 213.00 408321 45796 48841 41616 229 232 228 689 229.67 474721 52441 53824 51984 298 309 288 895 298.33 801025 88804 95481 82944 353 361 380 1094 364.67 1196836 124609 130321 144400 1094 1123 1100 3317 276.42 1196836 1261129 1210000 961061 3667965 CF = 2880903 916874.0833 LSD.01 = 31.33 CV (%) = 3.74 ANOVA F bảng Nguồn df SS MS F tính Khối 117.1666667 58.58333333 VK 43426.91667 14475.63889 Sai số 642.8333333 107.1388889 Tổng 11 44186.91667 5% 1% 0.55 5.14 10.92 135.11 4.76 9.78 TN_Mồng Tơi hàm lượng nitrate rau (mg/kg) Bình phương (II) Bình phương (III) Bình phương (TB) 10530.8644 NT I II III TC TB Bình phương (I) 111.66 122.76 102.62 337.04 112.35 113595.9616 12467.9556 15070.0176 265.59 249.24 284.41 799.24 266.41 638784.5776 70538.0481 62120.5776 80889.0481 341.61 351.22 388.49 1081.32 360.44 1169252.942 116697.3921 123355.4884 150924.4801 7500587.238 857438.9604 765135.0784 879881.5204 925.98 874.72 938.02 2738.72 912.91 1644.84 1597.94 1713.54 4956.32 413.03 2705498.626 2553412.244 2936219.332 3145049.431 8195130.201 CF = 9422220.72 2047092.329 LSD.01 = 63.24 CV (%) = 5.06 ANOVA F bảng Nguồn df SS MS Khối 1690.221667 845.1108333 VK 1093647.911 364549.3038 Sai số 2618.969533 436.4949222 Tổng 11 1097957.103 F tính 5% 1% 1.94 5.14 10.92 835.17 4.76 9.78 ... dịng vi khuẩn nội sinh Sài đất (Wedelia chinensis (Osb.) Merr.) ứng dụng để sản xuất phân sinh học bón cho rau ăn lá” thực hiện, hướng đến vi? ??c ứng dụng dòng vi khuẩn nội sinh có khả cố định đạm,... sáu dòng vi khuẩn nội sinh phân lập thân rễ Sài đất (Wedelia chinensis (Osb.) Merr.) Kết cho thấy dòng Fa2, rd1, Rh có đặc tính cố định đạm, hịa tan lân khó tan, tổng hợp IAA tốt Nhân ni sinh. .. Sinh học Vi? ??n NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32 – 2010 Trường Đại học Cần Thơ Mục tiêu nghiên cứu: Khảo sát đặc tính vi khuẩn nội sinh rễ, thân Sài đất (Wedelia chinensis