Gen, Liệu pháp hormone, và Mật độ nhũ ảnh Ảnh hưởng của hiện tượng đa hình thụ thể Estrogen α và thụ thể Progesterone trên những tác động của liệu pháp hormone trong mật độ nhũ ảnh. Fraenzel J.B. van Duijnhoven, 1 Petra H.M. Peeters, 1 Ruth M.L Warren, 2 Sheila A. Bingham, 3 André G. Uitterlinden, 4 Paulus A.H van Noord, 1 Evenlyn M. Monninkhof, 1 Diederick E. Grobbee, 1 and Carla H. van Gils 1 Trung tâm Khoa học sức khoẻ và Chăm sóc bước đầu Julius,Trường Đại học trung tâm Y khoa Utrecht, Utrecht, Hà Lan, Ban ngành X quang, Bệnh viện Addenbrooke, Đơn vị về vú Cambridge, Hội đồng nghiên cứu Y học Đơn vị Dinh dưỡng con người, Cambridge, Vương quốc Anh; Ban Y học nội địa, Trung tâm Y học Erasmus, Rotterdam, Hà Lan. Tóm tắt Liệu pháp hormone hậu mãn kinh làm tăng mật độ của nhũ ảnh (Nhũ ảnh là ảnh của những khối u ở ngực qua tia X) ,một nhân tố gây nguy cơ ung thư vú chắc chắn, nhưng những tác động thay đổi tuỳ từng phụ nữ. Chúng tôi đã nghiên cứu tỉ mỉ có hay không tác dụng của việc sử dụng liệu pháp hormone đã bị giảm bớt bởi hiện tượng đa hình trong những gen quy định thụ thể estrogen (ESR1) và thụ thể progesterone (PGR) trong những nhóm Prospect-EPIC Hà Lan và EPIC-Norfolk Anh. Thông tin của việc sử dụng liệu pháp hormone đã được sử dụng thành công trong suốt những bảng câu hỏi điều tra của các thành viên mới và sau đó 5 năm. Những mẫu máu đã được thu thập và những nhũ ảnh liên tục có giá trị xuyên suốt trong những chương trình chiếu bộ phim về ung thư vú. Có 795 người sử dụng liệu pháp hormone, một nhũ ảnh trước và một nhũ ảnh thứ hai trong thời gian sử dụng liệu pháp hormone đã được tính đến. Có 781 người không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone, những nhũ ảnh với những khoảng cách về thời gian giống nhau cũng đã được tính đến. Mật độ của nhũ ảnh được đánh giá nhờ sử dụng phương pháp máy tính hỗ trợ. Những thay đổi trong mật độ đã được phân tích sử dụng phép hồi quy tuyến tính. Một sự khác biệt mang ý nghĩa thống kê trong sự thay đổi tỉ lệ phần trăm về mật độ giữa những người sử dụng liệu pháp hormone và những người không bao giờ sử dụng đã cho thấy trong những người phụ nữ có kiểu gen ESR1 PvuII Pp hoặc pp (2,24%; P < 0,01), nhưng không có trong những người có kiểu gen là PP (0,90%; P = 0,47). Tương tự, những ảnh hưởng của liệu pháp hormone trên tỉ lệ phần trăm về mật độ đã được theo dõi trong những phụ nữ có kiểu gen ERS1 XbaI Xx hoặc xx (2,20%; P < 0,01), nhưng không có trong những người có kiểu gen XX (-0,65%; P = 0,70). Ngoài ra, những ảnh hưởng đã thấy trong những phụ nữ với kiểu gen PGR +331 GG (2,04%; P < 0,01), nhưng không thấy trong những người có kiểu gen GA hoặc AA (0,98%; P = 0,53). Hiện tượng đa hình PGR PROGINS đã không cho thấy làm cho những người phụ nữ nhạy cảm hơn với những tác động của việc sử dụng liệu pháp hormone. Kết luận, Những kết quả của chúng tôi đề xuất rằng những hiện tượng đa hình riêng biệt trong những gen ESR1 và PGR có thể làm cho những phụ nữ nhạy cảm hơn với những tác động của việc sử dụng liệu pháp hormone trên mật độ nhũ ảnh. (Những marker sinh học của bệnh ung thư 2006;15(3):426-7). Nghiên cứu Marker sinh học dịch tễ ung thư 2006; 15/03/2006 Gen, Liệu pháp hormone, và Mật độ nhũ ảnh Lời giới thiệu Khoa nghiên cứu bệnh dịch học đã nghiên cứu đã nghiên cứu và đưa ra những bằng chứng chắc chắn rằng việc sử dụng liệu pháp hormone hậu mãn kinh đã kết hợp với một sự tăng nguy cơ ung thư vú (1-3). Sự tăng lên này có thể giải thích bằng những sự tác động của việc sử dụng liệu pháp hormone trên mật độ nhũ ảnh, một nhân tố gây ung thư vú thực sự (4,5). Những nghiên cứu khác từ nhóm chúng tôi cho thấy rằng chắc chắn nghĩa là sự giảm đi trong tỉ lệ phần trăm về mật độ giữa những nhũ ảnh, những sự sụt giảm này là trên trung bình 3 năm riêng biệt, là 7,36% từ những người không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone và 5,58% cho những người sử dụng liệu pháp hormone (sự khác nhau giữa 2 nhóm là 1,78%; P < 0,01). Những đề xuất này cho rằng việc sử dụng liệu pháp hormone hậu mãn kinh làm chậm lại sự biến đổi tự nhiên trong mật độ nhũ ảnh. Những nghiên cứu khác đã cho thấy rằng việc sử dụng liệu pháp hormone hậu mãn kinh còn làm tăng mật độ vú (6-15). Tuy nhiên những tác động này không thấy trong tất cả những phụ nữ sử dụng liệu pháp hormone (6-13). Những thụ thể hormone trong vú có thể tác dụng lên tính nhạy cảm tới những tác động của của việc sử dụng liệu pháp hormone như estrogen và progesterone áp dụng những tác động của chúng xuyên suốt lên những thụ thể của estrogen và progesterone (16,17). Một vài hiện tượng đa hình trong mã gen cho những thụ thể này có thể thay đổi sự biểu hiện của những thụ thể này và vì thế có thể giảm bớt tác dụng của việc sử dụng liệu pháp hormone trên mật độ nhũ ảnh. Bên trong gen thụ thể α estrogen (ERS1), hiện tượng đa hình PvuII (cũng được biết tới như là c.454- 397T→C, IVS1-397 T/C, hoặc rs2234693) và hiện tượng đa hình XbaI (cũng được biết tới như là c.454-351A→G, IVSI-351 A/G hoặc rs9340799) đã được chọn. Những hiện tượng đa hình này kết hợp với mật độ nhũ ảnh cũng như là nguy cơ gây ung thư vú (19-23). Bên trong gen thụ thể progesterone (PGR), hiện tượng đa hình +331 G/A và hiện tượng đa hình C/T Hist770Hist (cũng được biết đến như là rs1042839) đã được lựa chọn. Hiện tượng đa hình +331 G/A đã được xác định trên vùng promoter và hiện tượng đa hình C/T Hist770Hist trong đoạn mang nghĩa 5 của PGR. Tính đa hình sau cùng là sự liên kết hoàn toàn không cân xứng với một hiện tượng đa hình C/T Val660Leu trong đoạn mang nghĩa số 4 và đoạn Alu chèn vào trong đoạn vô nghĩa số 7 và cùng với nhau chúng được gọi là phức hợp PROGINS (24). Cả hai hiện tượng đa hình +331 G/A và hiện tượng đa hình PROGINS đã dược nghiên cứu tỉ mỉ trong mối quan hệ với nguy cơ ung thư vú nhưng không mang lại kết quả cuối cùng (25-28). Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã nghiên cứu tỉ mỉ có hay không hiện tượng đa hình trong những gen ERS1 và PGR làm bớt tác động của việc sử dụng liệu pháp hormone trên mật độ nhũ ảnh. Vật liệu và phương pháp Nghiên cứu quần thể: những phụ nữ đã được chọn từ nghiên cứu của Prospect-EPIC (29) và EPIC-Norfolk (30), một nhóm người Hà Lan và một nhóm người Anh, cả hai nhóm tham gia vào Tổ chức nghiên cứu về ung thư và dinh dưỡng trong tương lai của người Châu Âu (EPIC; ref. 31). Nghiên cứu Marker sinh học dịch tễ ung thư 2006; 15/03/2006 Gen, Liệu pháp hormone, và Mật độ nhũ ảnh Giữa hai năm 1993 và 1997, những người tham gia được khám sức khoẻ, đã ghi ra những cách sống và thực phẩm thường xuyên sử dụng vào bảng câu hỏi điều tra (32, 33), và được lấy một mẫu máu. Khi kết thúc tất cả các giai đoạn, 17.357 phụ nữ đã được bao gồm từ Prospect-EPIC và 16.744 phụ nữ và 13.698 đàn ông đã được tính đến trong EPIC-Norfolk. Tất cả những người tham gia đều đã cam kết bằng miệng hay viết ra là đồng ý và những nghiên cứu này đã được phê chuẩn của uỷ ban về đạo đức của địa phương. Khoảng chừng 5 năm sau khi tuyển dụng, những người tham gia trong cả hai nhóm đã ghi vào một bảng câu hỏi điều tra tiếp tục. Ngoài những dữ liệu từ bảng câu hỏi điều tra, những nhũ ảnh liên tục có giá trị đối với các phụ nữ xuyên suốt những chương trình chiếu phim về ung thư vú của địa phương. Dữ liệu tham khảo giống như bảng câu hỏi điều tra tiếp tục thường hay thu được trong việc sử dụng liệu pháp hormone hậu mãn kinh. Việc sử dụng liệu pháp hormone được định nghĩa là sử dụng những hormone cho các chứng bệnh mãn kinh. Cả hai bảng câu hỏi điều tra đã bao gồm những câu hỏi cho các thời kỳ tại thời điểm mà người phụ nữ bắt đầu và kết thúc sử dụng liệu pháp hormone. Những người sử dụng liệu pháp hormone được định nghĩa rõ ràng là những phụ nữ này, những người gián tiếp trong dữ liệu tham khảo hoặc những bảng câu hỏi điều tra tiếp tục rằng họ luôn luôn sử dụng liệu pháp hormone. Những người không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone được định nghĩa là những người phụ nữ này những người gián tiếp trong cả hai bảng câu hỏi điều tra rằng họ không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone. Những người luôn luôn sử dụng liệu pháp hormone là thích hợp nếu một bộ phim nhũ ảnh trước khi sử dụng liệu pháp hormone và nhũ ảnh thứ hai trong khi sử dụng liệu pháp hormone có thể sử dụng được. Những người không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone cũng giống như những người sử dụng liệu pháp hormone trong một năm của nhũ ảnh, sự kéo dài khoảng thời gian giữa những lần chụp nhũ ảnh, và năm ra đời, theo cách đó hai nhũ ảnh với khoảng chừng khoảng thời gian giống nhau đã được lựa chọn vào nhóm những người không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone. Những người sử dụng liệu pháp hormone cũng như những người không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone đều loại trừ khả năng họ sử dụng những biện pháp tránh thai vào thời điểm chụp nhũ ảnh đầu tiên hoặc khi họ chẩn đoán ung thư vú sớm hoặc trong hai năm khi chụp nhũ ảnh thứ hai. Lý do cho việc này là các hormone trong những biện pháp tránh thai hoặc sự hiện diện của một khối u có thể ảnh hưởng tới mật độ trong các nhũ ảnh. Các nhũ ảnh đã được chọn lựa từ 620 người sử dụng liệu pháp hormone và 620 người không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone từ Prospect-EPIC và từ 175 người sử dụng liệu pháp hormone và 161 người không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone từ EPIC-Norfolk. Những mẫu máu có giá trị sử dụng từ tất cả những phụ nữ này trừ 18 người sử dụng liệu pháp hormone và 15 người không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone từ EPIC-Norfolk. Phân tích di truyền. Trong nhóm Prospect-EPIC, DNA bộ gen được tách chiết từ WBC sử dụng bộ kit mini QIAamp DNA máu (Qiagen Benelux B.V., Venlo, Hà Lan) theo lời chỉ dẫn của nhà sản xuất. Nghiên cứu Marker sinh học dịch tễ ung thư 2006; 15/03/2006 Gen, Liệu pháp hormone, và Mật độ nhũ ảnh Trong nhóm EPIC-Norfolk, DNA bộ gen được tách chiết nguyên vẹn từ mẫu máu sử dụng phương pháp phenol-chloroform bởi Whatman International (Ely, Vương quốc Anh). DNA cung cấp từ hai nhóm đã được định lượng sử dụng một phẩm nhuộm huỳnh quang (PicoGreen, Liên hợp khảo sát phân tử, Eugen, OR) và những mẫu được làm cô đặc tới cuối cùng là 5 ng/µL (Prospect-EPIC) hoặc 4 ng/µL (EPIC-Norfolk). Kiểu di truyền đã hoàn tất được sử dụng công nghệ giải mã gen Taqman SNP (Hệ thống sinh học ứng dụng, thành phố Foster, CA). Mồi và cực dò được thiết kế hoàn toàn bởi nhà sản xuất (những chuỗi có thể sử dụng tuỳ theo yêu cầu), và phản ứng được hoàn thành theo quy trình của nhà sản xuất. Những mẫu được phân loại như PP, Pp, hoặc pp (tương ứng với những kiểu gen CC, CT, và TT của PvuII, theo thứ tự); XX, Xx hoặc xx (ứng với những kiểu gen GG, GA, và AA của XbaI, theo thứ tự); GG, GA, và AA cho kiểu gen +331 G/A; và CC, CT, và TT cho kiểu gen PROGINS. Thí nghiệm này được lặp lại trên nhiều mẫu với kiểu gen thiếu như ban đầu. Sauk hi lặp lại PCR , tỉ lệ phần trăm của những mẫu ở dưới cùng là 0,5% (7/1543) cho kiểu gen PvuII, 0,2% (3/1543) cho kiểu gen XbaI, 2,9% (45/1543) cho kiểu gen +331 G/A, và 2,4% cho kiểu gen PROGINS. Phân tích mật độ nhũ ảnh. Mật độ nhũ ảnh quyết định việc chụp nhũ ảnh theo góc xiên từ một bên, việc này là một cách thông thường trong việc chụp phim về ung thư vú ở Hà Lan và Vương quốc Anh. Trước đây nó được coi là hình chụp cân xứng của mật độ trong nhũ ảnh trên góc nhìn từ phía sau sọ và cách quan sát từ bên trái và bên phải có tương quan chắc chắn với nhau và thể hiện thông tin về mật độ nhũ ảnh là đầy đủ hơn so với một cách nhìn đơn lẻ. Mật độ nhũ ảnh đã được quyết định chụp từ bên trái cho tất cả những phụ nữ. Sau khi số hoá những phim sử dụng một máy quét phim laser (Lumiscan 50, Lumisys cho Prospect-EPIC, và Lumiscan 85, Lumisys cho EPIC-Norfolk), mật độ nhũ ảnh được xác định số lượng sử dụng một máy tính hỗ trợ phương pháp cơ bản dựa trên mức liều lượng bức xạ trong nhũ ảnh đã được số hoá (35). Với mỗi bức ảnh, đầu tiên máy đọc đặt một điểm bắt đầu được xác định rõ nằm bên ngoài đường ranh giới của vú và phân biệt giữa vùng tối bên ngoài vú và vùng sáng ở trong vú. Một điểm bắt đầu khác được đặt xác định trong vùng mô dày đặc bên trong vú, cái đó là vùng mô sáng có thể nhìn thấy trong nhũ ảnh. Sau đó chương trình xác định số lượng của những điểm ảnh toàn bộ bên trong vùng vú và bên trong vùng dày đặc và tính toán tỉ lệ phần trăm của vùng mô dày đặc bên trong vú, lấy vùng dày đặc chia cho tổng toàn bộ vùng vú và nhân với 100. Trong tài liệu, tỉ lệ phần trăm của vùng mô dày đặc, cái đó là một tiêu chuẩn để dánh giá vùng mô dày đặc, hầu hết đều sử dụng. Tuy nhiên, nó có thể thích hợp hơn cho việc nghiên cứu số lượng xác thực của mô dày đặc, cái đó gồm có mô liên kết và biểu mô đã được coi như mô dích của ung thư vú. Vì thế, những kết quả hiện tại trên cả hai nhóm chắc chắn liên quan đến tiêu chuẩn để đánh giá mật độ nhũ ảnh, chúng tôi dựa vào “tỉ lệ phần trăm về mật độ” và “vùng dày đặc”, theo thứ tự. Những nhũ ảnh từ Propect-EPIC (Hà Lan) và EPIC-Norfolk (Vương quốc Anh) đã được đọc tách biệt nhau nhưng cả hai được đọc bởi những giám sát viên giống nhau (F.J.B van Duijnhoven). Họ đã đọc trong những tập hợp của 68 (Vương quốc Anh) và 70 (Hà Lan) những bức Nghiên cứu Marker sinh học dịch tễ ung thư 2006; 15/03/2006 Gen, Liệu pháp hormone, và Mật độ nhũ ảnh ảnh đã được sắp xếp của cả hai nhóm các nhũ ảnh từ 34 hoặc 35 được lựa chọn một cách ngẫu nhiên. Những đánh giá đáng tin cậy của người đọc trong hai tập hợp trong thư viện của 68 (Vương quốc Anh) và 70 (Hà Lan) những bức ảnh đã được tạo ra, cái đó gồm có những nhũ ảnh đã được lựa chọn một cách ngẫu nhiên. Tập hợp thư viện giống như này đã được đọc trước tập hợp đầu tiên, sau đó là tập hợp cuối cùng, và vào thời gian đặc biệt khác nhau giữa các tập hợp, cái đó không rõ ràng cho người đọc. Những bức ảnh trong tập hợp thư viện được sắp đặt ngẫu nhiên trong mọi thời gian, họ đọc thầm để ngăn cản các giám sát viên nhận ra tập hợp này. Một số trung bình bên trong lớp có hệ số tương quan là 0,88 (phạm vi 0,82-0,93) cho vùng dày đặc và 0,94 (phạm vi 0,91-0,95) cho tỉ lệ phần trăm về mật độ đã đạt được giữa những lần đọc lặp lại. Những kết quả này có thể so sánh được với những nghiên cứu trước đó sử dụng cùng một phương pháp (35). Phân tích dữ liệu. Phân bố của những nhân tố gây nguy cơ ung thư vú tại đường chuẩn cho những người sử dụng liệu pháp hormone và những người không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone từ Prospect-EPIC và EPIC-Norfolk là như nhau, sử dụng những giá trị trung bình với SDs, những giá trị trung bình với phạm vi hoặc những tần số (tại điểm thích hợp). Những sự khác biệt đã được kiểm tra bằng kiểm tra t (t test) của sinh viên, kiểm tra Mann-Whitney, hoặc phân tích χ 2 . Tình trạng mãn kinh đã được phân loại trong tiền mãn kinh cùng với gần mãn kinh ngược với hậu mãn kinh. Những phụ nữ đã được coi như những phụ nữ tiền mãn kinh khi họ vẫn có kinh nguyệt và không sử dụng những biện pháp tránh thai hoặc những hormone khác. Những phụ được coi như là những phụ nữ hậu mãn kinh khi họ đã trải qua ít nhất 12 tháng liên tiếp bị mất kinh. Tất cả những phụ nữ khác được coi như là những phụ nữ gần mãn kinh. Tiền sử gia đình của bệnh ung thư vú được định nghĩa là có ít nhất một mẹ hoặc một chị gái được chẩn đoán bị bệnh ung thư vú. Hút thuốc lá được phân loại thành những tập hợp theo năm, cái đó được định nghĩa là số trung bình của những điếu thuốc cho mỗi ngày chia với 25 và nhân lên với những năm hút thuốc lá. Lượng rượu uống vào được đo bằng số gram rượu cho một ngày và phân ra trong một điều kiện gần đúng. Hoạt động của cơ thể được chia ra làm bốn mức, cái đó bắt nguồn từ hoạt động của cơ thể tuỳ theo nghề nghiệp cùng với thời gian tham gia theo một chu kỳ và các bài tập giải trí cơ thể khác (36). Những sự phân bố kiểu gen được theo dõi so sánh nét tương đồng với những điểm mong đợi bên dưới của trạng thái cân bằng Hardy-Weinberg, thực hiện χ 2 test tốt nhất với tham số tự do bậc một. Sự thay đổi chắc chắn trong tỉ lệ phần trăm về mật độ và vùng dày đặc đã được so sánh giữa những người sử dụng liệu pháp hormone và những người không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone bằng phân tích hồi quy tuyến tính. Xác định rõ những thay đổi, mật độ nhũ ảnh trong nhũ ảnh thứ hai đã sử dụng như kết quả biến thiên và mật độ nhũ ảnh trong nhũ ảnh đầu tiên đã bao gồm như là một đồng biến trong mô hình không thích ứng. Mật độ nhũ ảnh trung bình trong nhũ ảnh thứ hai được tính toán từ mô hình và sự thay đổi mật độ đã được tính toán bằng cách trừ đi mật độ nhũ ảnh trung bình trong nhũ ảnh đầu tiên, từ những con số của những người sử dụng liệu pháp hormone và những người không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone tách biệt nhau. Điều tra sự thay đổi ảnh hưởng tiềm tàng, những kết quả đã được phân tầng bởi kiểu gen PvuII (PP ngược với Pp và pp), kiểu gen XbaI (XX ngược với Xx và xx), kiểu gen +331 G/A (GG ngược với GA và Nghiên cứu Marker sinh học dịch tễ ung thư 2006; 15/03/2006 Gen, Liệu pháp hormone, và Mật độ nhũ ảnh AA), và kiểu gen PROGINS (CC ngược với CT và TT).Những phụ nữ với một hoặc hai bản sao của alen (PvuII) và những cái này với một hoặc hai bản sao của alen x (XbaI) được kết hợp trong một tầng, bởi vì những alen này liên quan với những mật độ vú cao (18) và nguy cơ ung thư vú cao (21). Ngoài ra, những phụ nữ với một hoặc hai bản sao của alen A (+331 G/A) hoặc alen T (PROGINS) liên kết trong một tầng với những con số nhỏ. Sự tương tác được kiểm tra bằng tổng sản phẩm giới hạn của việc sử dụng liệu pháp hormone (không/có) và những đối tượng (trong những hạng mục đã được đề cập ở trên) bằng mô hình hồi quy tuyến tính. Trong những mô hình đã được điều chỉnh thêm vào việc sử dụng liệu pháp hormone (không/có) và mật độ nhũ ảnh trong nhũ ảnh đầu tiên, tuổi tác, chỉ số khối lượng cơ thể, tuổi có kinh nguyệt, tình trạng (chưa sinh đẻ/đã có con), tình trạng mãn kinh (tiền mãn kinh và gần mãn kinh, hậu mãn kinh), lịch sử gia đình về ung thư vú (không/có), việc sử dụng các biện pháp tranh thai trước đó (không/có) hút thuốc lá (0, <5, 5-15, và lớn hơn 15 năm liền), sự tiêu thụ rượu, hoạt động của cơ thể (thiếu hoạt động, hoạt động vừa phải, thiếu hoạt động vừa phải, hoạt động) và nghiên cứu quần thể (Prospect-EPIC và EPIC-Norfolk) được kể đến như là các hiệp biến. Tất cả các phân tích được thực hiện hoàn toàn với SPS vertion 12.0. Kết quả Sự phân bố của những nhân tố gây nguy cơ ung thư vú tại vạch ranh giới đã cho thấy trong những phụ nữ những người bắt đầu việc sử dụng liệu pháp hormone và những phụ nữ những người không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone (Bảng 1). Tỉ lệ phần trăm về mật độ trong nhũ ảnh đầu tiên là thấp hơn đối với những người không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone (37,0%) và cao hơn đối với những người bắt đầu sử dụng liệu pháp hormone sau nhũ ảnh đầu tiên (40,5%). Tương tự, vùng dày đặc trong nhũ ảnh đầu tiên là thấp hơn đối với những người không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone (40,6 cm 2 ) và cao hơn đối với những người sử dụng liệu pháp hormone (47,2 cm 2 ). Những người không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone thường nhiều hơn là tỉ lệ hậu mãn kinh (74,8% so với 68,3%) và thường ít hơn là việc sử dụng những biện pháp tránh thai trong quá khứ (63,4% so với 67,2%) so sánh với những người sử dụng liệu pháp hormone. Những người không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone có tần số sử dụng rượu ít hơn những người sử dụng liệu pháp hormone. Dữ liệu từ những nghiên cứu trước của chúng tôi cho thấy rằng sự sụt giảm giá trị trung bình thực sự trong tỉ lệ phần trăm về mật độ giữa các nhũ ảnh là 7,36% đối với những người không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone và 5,58% đối với những người sử dụng liệu pháp hormone (sự khác biệt giữa hai nhóm là 1,78%; P < 0,01). Trong nghiên cứu này những thay đổi xác thực trong tỉ lệ phần trăm về mật độ của việc sử dụng liệu pháp hormone đã được phân tầng bởi kiểu gen (Bảng 2). Sự phân loại kiểu gen của PvuII, XbaI, +331 G/A, và PROGINS theo sự cân bằng Hardy-Weinberg (giá trị P là 0,42; 0,33; 0,22; và 0,07; theo thứ tự). Tương ứng với toàn bộ những kết quả của chúng tôi, sự giảm xuống trong mật độ của nhũ ảnh là sự thay đổi lớn cho những người không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone sau đó là những người sử dụng liệu pháp hormone trong mọi lớp trừ ra lớp của những phụ nữ với một kiểu gen XX. Một sự khác biệt có ý nghĩa thống kê trong sự thay đổi tỉ lệ phần trăm về mật độ giữa những người sử dụng liệu pháp hormone và những người không bao giờ sử dụng liệu pháp hormone là thấy trong những phụ nữ với kiểu gen ESR1 PvuII Pp hoặc pp (2.24%; P < 0.01) nhưng không có những cái đó với kiểu gen PP (0.90%; P = 0.47). Tương tự, những tác động của liệu pháp hormone lên tỉ lệ phần trăm mật độ đã được theo dõi trong những phụ nữ có kiểu gen ESR1 XbaI Xx hoặc xx (2.20%; P < 0.01), nhưng không có những cái đó với kiểu gen XX Nghiên cứu Marker sinh học dịch tễ ung thư 2006; 15/03/2006 Gen, Liệu pháp hormone, và Mật độ nhũ ảnh (_0.65%; P = 0.70). Ngoài ra, những ảnh hưởng đã thấy được trên những phụ nữ với kiểu gen PGR +331 GG (2.04%; P < 0.01), nhưng không có những cái đó với kiểu gen GA hoặc AA (0.98%; P = 0.53). Sự khác nhau trong sự thay đổi có ý nghĩa thống kê trong cả hai lớp của hiện tượng đa hình PROGINS. Không có gì của những sự tương tác của việc sử dụng liệu pháp hormone và các đối tượng trong bảng 2 mang ý nghĩa thống kê. Sự thay đổi xác thực bằng việc sử dụng liệu pháp thống kê và bằng những lớp này cũng quyết định cho vùng dày đặc thay cho tỉ lệ phần trăm mật độ. Những kết quả tương tự cũng được tìm thấy trong lớp của các kiểu gen (dữ liệu không được trình bày). Thảo luận Những kết quả của nghiên cứu này đã đề xuất rằng việc sử dụng liệu pháp hormone không ảnh hưởng đến mật độ nhũ ảnh trong những phụ nữ với kiểu gen là ERS1 PP hoặc XX, nhưng việc đó làm chậm lại quá trình phức tạp trong những phụ nữ có một hoặc hai bản sao của alen p hoặc alen x. Tương tự, việc sử dụng liệu pháp hormone không thấy có sự ảnh hưởng trên mật độ nhũ ảnh trong những phụ nữ có một hoặc hai bản sao của alen +331 A, nhưng ngược lại trong những phụ nữ có kiểu gen GG. Hiện tượng đa hình PROGINS trong PGR không thấy làm cho những phụ nữ nhạy cảm hơn với những tác động của việc sử dụng liệu pháp hormone trên mật độ nhũ ảnh. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã tập trung vào những gen đó có thể làm cho những người phụ nữ nhạy cảm hơn với những tác động của việc sử dụng liệu pháp hormone trên mật độ nhũ ảnh. Duy nhất một nghiên cứu khác có báo cáo những kết quả trên hiện tượng đa hình về khía cạnh này. Lord và cộng sự (37) đã tìm ra được một sự tương tác có ý nghĩa thống kê giữa việc kết hợp việc sử dụng liệu pháp hormone và hiện tượng đa hình CYP1B1 cũng như là hiện tượng đa hình AKR1C4 trong mối quan hệ với những thay đổi trong mật độ nhũ ảnh. Những hiện tượng đa hình trong nghiên cứu này đã được xác định trên những gen cái đó đã bao gồm trong sự biến dưỡng hormone, nhưng ngược lại những hiện tượng đa hình trong nghiên cứu của chúng tôi đã xác định được trong những gen cái đó là mã của những thụ thể hormone. Trong một nghiên cứu khác đã nghiên cứu tỉ mỉ sự tương tác của việc sử dụng liệu pháp hormone với những kiểu gen thụ thể hormone nam trong sự liên quan tới mật độ nhũ ảnh (38). Tuy nhiên, nghiên cứu này đã không xác định được những sự thay đổi trong mật độ, nhưng đơn thuần là mật độ được đo lường tại một điểm trong một thời gian. Lillie và cộng sự (38) đã báo cáo rằng trong những người sử dụng kết hợp với liệu pháp hormone, những phụ nữ với một tần số cao của các đoạn dài lặp lại CAG có ý nghĩa thống kê cao, có nghĩa là tỉ lệ phần trăm về mật độ lớn hơn những người phụ nữ với một tần số thấp của các đoạn lặp lại này. Những kết quả từ nghiên cứu này, cùng với những kết quả của chúng tôi, cho biết rằng những khác biệt của những gen thụ thể hormone có thể làm cho những người phụ nữ nhạy cảm hơn với sự tác động của việc sử dụng liệu pháp hormone trên mật độ nhũ ảnh. Sự giải nghĩa phân tử của những phát hiện của chúng tôi là không dễ hiểu một cách trọn vẹn. Hai nghiên cứu đều đưa ra những giả thiết rằng alen P ERS1 PvuII làm tăng sự phiên mã ESR1 (39, 40), nhưng ngược lại những nghiên cứu khác chỉ ra rằng alen p PvuII và alen x XbaI làm tăng sự phiên mã của ESR1 (41). Những kết quả này cho biết rằng những hiện tượng đa hình PvuII và XbaI bao hàm những sản phẩm của ERS1, nhưng chức năng của chất chiết cần thiết được làm cho dễ hiểu. Alen +331 A (24) và alen PROGINS T (42) đã gián tiếp làm tăng sự phiên mã của PGR. Trong lý thuyết này, một số sẽ cho rằng tác động việc sử dụng liệu pháp hormone sẽ là lớn nhất trong những phụ nữ khác biệt, kết quả đó trong một sự biểu hiện cao của thụ thể. Những kết quả cho hiện tượng Nghiên cứu Marker sinh học dịch tễ ung thư 2006; 15/03/2006 Gen, Liệu pháp hormone, và Mật độ nhũ ảnh đa hình +331 G/A, tuy nhiên, cho thấy rằng những tác động của việc sử dụng liệu pháp hormone chỉ thấy trong những người phụ nữ với alen G, cái nào đã có liên kết với sự biểu hiện thấp của PGR. Ngoài ra, hiện tượng đa hình PROGINS không thấy làm cho những người phụ nữ nhạy cảm hơn với những tác động của việc sử dụng liệu pháp hormone. Những kết quả của chúng tôi không thấy phù hợp với những gì đã được cho là nền tảng của những nghiên cứu về mặt chức năng kể trên. Tuy nhiên, nó sẽ được giữ trong trí nhớ như là về mặt chức năng của hiện tượng đa hình +331 G/A cũng như là hiện tượng đa hình PROGINS chỉ được khám phá trong nghiên cứu này. Vì thế, nghiên cứu xa hơn nữa về mặt phân tử là cần thiết để cung cấp một sự giải nghĩa cho những khám phá trong nghiên cứu của chúng tôi. Những điểm mạnh trong nghiên cứu của chúng tôi bao gồm bản phác thảo theo chiều dọc và sử dụng một phương pháp đo lường mật độ liên tục. Hơn nữa, nghiên cứu được theo dõi của chúng tôi mang lại cơ hội nghiên cứu tỉ mỉ có hay không những đặc điểm tác dụng lên hiệu quả của việc sử dụng liệu pháp hormone trên mật độ nhũ ảnh trong những phụ nữ, những người sử dụng liệu pháp hormone trong đời sống thực sự. Như việc phản đối những thử nghiệm lâm sàng, ở nơi mà những phụ nữ đượcchọn lựa một cách ngẫu nhiên được nhận giả dược hoặc một chế độ ăn uống theo liệu pháp hormone, những phụ nữ trong nghiên cứu được theo dõi đã quy định việc sử dụng liệu pháp hormone bởi vì một sự chỉ dẫn về cách dùng thuốc. Bởi vì những bối cảnh khác nhau của chúng, tác động của liệu pháp hormone có thể không giống nhau trong những người phụ nữ này (43). Bảng 1: Những nhân tố gây ung thư vú theo việc sử dụng liệu pháp hormone Những nhân tố gây ung thư vú Không sử dụng Sử dụng P liệu pháp hormone (n = 781) liệu pháp hormone (n = 795) GTTB (SD)/ Điểm giữa(miền) GTTB (SD)/ Điểm giữa(miền) Tuổi khảo sát (năm) 55.4 (4.3) 55.7 (4.3) 0.22 Chỉ số khối cơ thể (kg/m2) 25.7 (3.7) 25.5 (3.7) 0.16 Tuổi bắt đầu có kinh nguyệt (năm) 13.2 (1.5) 13.5 (2.1) <0.01 Tỉ lệ phần trăm mật độ nhũ ảnh đầu tiên (%) 37.0 (0.3-88.2) 40.5 (0.1-88.8) <0.01 Vùng dày đặc trong nhũ ảnh đầu tiên (cm2) 40.6 (0.2-173.9) 47.2 (0.5-199.6) <0.01 n (%) n (%) P Tình trạng Chưa sinh đẻ 80 (10.3) 88 (11.1) Đã có con 700 (89.7) 707 (88.9) 0.60 Tình trạng mãn kinh Tiền mãn kinh/Gần mãn kinh 197 (25.2) 252 (31.7) Hậu mãn kinh 584 (74.8) 543 (68.3) <0.01 Tiền sử gia đình về ung thư vú Không 673 (87.6) 704 (89.7) Có 95 (12.4) 81 (10.3) 0.20 Sử dụng biện pháp tránh thai trước đây Không bao giờ 285 (36.6) 261 (32.8) Luôn luôn 494 (63.4) 534 (67.2) 0.12 Hút thuốc (theo năm) 0 399 (52.4) 375 (48.6) 0.01-4.99 131 (17.2) 149 (19.3) 5.00-14.99 131 (17.2) 134 (17.4) >_15.00 101 (13.3) 114 (14.8) 0.45 Nghiên cứu Marker sinh học dịch tễ ung thư 2006; 15/03/2006 Gen, Liệu pháp hormone, và Mật độ nhũ ảnh Lượng rượu uống vào (g/d) <1.70 293 (37.8) 237 (29.9) 1.70-9.99 240 (31.0) 269 (33.9) >_10.00 242 (31.2) 287 (36.2) <0.01 Hoạt động cơ thể Thiếu hoạt động 54 (6.9) 58 (7.3) Thiếu hoạt động vừa phải 221 (28.3) 233 (29.3) Hoạt động vừa phải 227 (29.1) 237 (29.8) Hoạt động 279 (35.7) 267 (33.6) 0.85 PvuII PP 166 (21.4) 183 (23.6) Pp 402 (51.8) 385 (49.7) pp 208 (26.8) 207 (26.7) 0.55 XbaI XX 98 (12.6) 96 (12.4) Xx 362 (46.4) 371 (47.9) xx 320 (41.0) 308 (39.7) 0.84 +331 G/A GG 661 (86.7) 672 (89.6) GA 100 (13.1) 76 (10.1) AA 1 (0.1) 2 (0.3) 0.09x PROGINS CC 560 (73.2) 539 (71.3) CT 185 (24.2) 191 (25.3) TT 20 (2.6) 26 (3.4) 0.54 Bảng 2: Thay đổi mật độ hoàn toàn trong tỉ lệ phần trăm mật độ bởi việc sử dụng liệu pháp hormone và phân tầng bởi kiểu gen β+ P Không sử dụng liệu pháp Sử dụng liệu pháp hormone (n = 713) hormone (n = 721) Thay đổi mật độ (n) Thay đổi mật độ (n) Thụ thể estrogen PvuII PP 0.90 0.47 -7.47 (147) -6.57 (167) Pp/pp 2.24 <0.01 -7.40 (563) -5.16 (554) XbaI XX -0.65 0.70 -6.70 (87) -7.35 (87) Xx/xx 2.20 <0.01 -7.48 (626) -5.28 (634) Thụ thể progesterone +331 G/A GG 2.04 <0.01 -7.48 (601) -5.44 (623) GA/AA 0.98 0.53 -7.12 (95) -6.14 (74) PROGINS CC 1.58 0.02 -7.20 (512) -5.63 (503) CT/TT 2.67 0.02 -8.26 (187) -5.59 (200) Mặc dù, trong nghiên cứu của chúng tôi ngoài ra còn có những hạn chế chắc chắn, những cái đó có thể làm giảm bớt cơ hội thấy những biến đổi bị ảnh hưởng bởi di truyền học. Độ tuổi mà tại đó những người phụ nữ bắt đầu và kết thúc việc sử dụng liệu pháp hormone được đánh giá là cơ bản của một bảng câu hỏi điều tra và những nhũ ảnh trước và trong thời gian sử dụng liệu pháp Nghiên cứu Marker sinh học dịch tễ ung thư 2006; 15/03/2006 Gen, Liệu pháp hormone, và Mật độ nhũ ảnh hormone đã được chọn một cách phù hợp. Nếu những phụ nữ làm một lỗi sai trong khi trả lời câu hỏi về tuổi bắt đầu hoặc kết thúc của liệu pháp hormone, lỗi sai trong phân loại là không có sự phân biệt, nếu hiện nay, có thể đọc thành sự đánh giá không đúng mức của sự tác động. Khả năng khác là sự thay đổi tác động đó là chủ yếu hiện nay trong một dang riêng biệt của việc sử dụng liệu pháp hormone. Nghiên cứu của Lord và cộng sự (37) là một ví dụ, chỉ cho thấy những sự tương tác mang tính thống kê của những hiện tượng đa hình và sử dụng kết hợp với liệu pháp hormone và không đối lập với liệu pháp estrogen. Dạng chính xác của sự chuẩn bị liệu pháp hormone đã biết cho tập hợp con của những phụ nữ Prospect-EPIC (n = 231), nhưng chúng tôi đã chọn không phải làm sự khác biệt giữa những dạng khác nhau của việc sử dụng liệu pháp hormone bởi vì độ lớn của mẫu khi đó quá nhỏ. Sự hạn chế khác của nghiên cứu có thể là chúng tôi không có thông tin về những thay đổi trong chỉ số khối cơ thể và vì thế chúng tôi có thể không điều chỉnh cho vấn đề này trong những phân tích của chúng tôi. Tuy nhiên, chỉ số khối cơ thể cho thấy chỉ có một tác động trên mô không dày đặc trong vú (44). Điều chỉnh cho những thay đổi trong chỉ số khối cơ thể, vì thế sẽ chỉ có một ảnh hưởng lên những kết quả đo lường tương đối của mật độ nhũ ảnh (tỉ lệ phần trăm về mật độ). Những kết quả trong nghiên cứu này cho sự đo lường tuyệt đối của mật độ nhũ ảnh (vùng dày đặc) vẫn sẽ giống nhau. Mặc dù không chứng minh được bây giờ, nó rất có khả năng rằng những phụ nữ, những người có một tác động ngược của việc sử dụng liệu pháp hormone trên mật độ nhũ ảnh là một ai có nguy cơ cao bị ung thư vú khia họ sử dụng liệu pháp hormone. Tuy nhiên, nếu không phải trường hợp này, những tác động ngược lên mật độ vú có thể có kết quả trong tính nhạy cảm được giảm bớt và nét riêng biệt của những phim X-quang về ung thư vú(45, 46). Nhận biết được phân nhóm nhạy cảm nhất với tác động của liệu pháp hormone trên mật độ nhũ ảnh là rất quan trọng. Khi những phân nhóm này đã thành lập, hành động đặc trưng có thể hướng vào những phụ nữ với tính nhạy cảm cao. Ví dụ, những người phụ nữ này có thể phản đối đúng đắn về việc sử dụng liệu pháp hormone hoặc khi họ sử dụng liệu pháp hormone có thể được hướng dẫn một cách than mật để thấy cách những mô vú phản ứng lại như thế nào. Cuối cùng những kết quả của chúng tôi đề xuất rằng hiện tượng đa hình trong những gen ERS1 và PGR có thể thay đổi mối quan hệ giữa việc sử dụng liệu pháp hormone và mật độ nhũ ảnh. Những cái này có thể cung cấp một sự giải thích cho sự quan sát những điểm khác biệt nhau giữa các cá thể trong những ảnh hưởng của việc sử dụng liệu pháp hormone trên mật độ nhũ ảnh và được cho là nguy cơ gây ung thư vú. Lời cảm ơn Chúng tôi cảm ơn Dr. Norman Boyd vì sự huấn luyện trong việc dạy về mật độ nhũ ảnh và Prof. Martin Yaffe và những kiến thức của ông vì sự ủng hộ về kỹ thuật của phần mềm máy tính hỗ trợ quyết định mật độ nhũ ảnh; Stichting Preventicon, ‘‘Dự án Vereniging van Vriendinnen van het DOM,’’ và Đơn vị chụp nhũ ảnh Norwich vì đã làm nên những nhũ ảnh có giá trị từ tất cả những người tham gia; Robert Luben và Bernard Slotboom vì đã hỗ trợ trong việc chọn lựa những quần thể cho nghiên cứu; Iqbal Warsi, Jose´ Drijvers, Joke Metselaar-van den Bos, Bert Rodenburg, và Jelmer Hoefakker vì đã hỗ trợ xác định và chọn lựa những nhũ ảnh; Arjan Barendrecht vì đã hỗ trợ đo lường sự cô đặc DNA; và Pascal Arp vì sự hỗ trợ của ông trong thí nghiệm Taqman PCR. Tài liệu tham khảo Nghiên cứu Marker sinh học dịch tễ ung thư 2006; 15/03/2006 . Gen, Liệu pháp hormone, và Mật độ nhũ ảnh Ảnh hưởng của hiện tượng đa hình thụ thể Estrogen α và thụ thể Progesterone trên những tác động của liệu pháp hormone. những thụ thể này và vì thế có thể giảm bớt tác dụng của việc sử dụng liệu pháp hormone trên mật độ nhũ ảnh. Bên trong gen thụ thể α estrogen (ERS1), hiện tượng