BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI PHẠM VĂN HẢI NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT VÀ PHÂN BIỆT MỘT SỐ LOÀI MANG TÊN CÁT SÂM TẠI BẮC GIANG VÀ QUẢNG NINH LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI PHẠM VĂN HẢI NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT VÀ PHÂN BIỆT MỘT SỐ LOÀI MANG TÊN CÁT SÂM TẠI BẮC GIANG VÀ QUẢNG NINH LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: DƯỢC LIỆU - DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN MÃ SỐ: 8720206 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Thị Bích Thu PGS.TS Trần Văn Ơn HÀ NỘI 2019 LỜI CẢM ƠN Với lịng biết ơn sâu sắc, tơi xin gửi lời biết ơn chân thành, lịng kính trọng tới PGS.TS Nguyễn Thị Bích Thu PGS.TS Trần Văn Ơn – người trực tiếp hướng dẫn tận tình, chu đáo, ln động viên khích lệ tạo điều kiện thuận lợi cho em suốt thời gian thực luận văn Xin chân thành cảm ơn ThS Nghiêm Đức Trọng, chị Chu Thị Thoa, DS Lê Thiên Kim với thầy cô anh chị em Bộ môn Thực vật – Trường Đại học Dược Hà Nội ln tận tình, tạo điều kiện thuận lợi hết lịng giúp đỡ tơi q trình thực luận văn Bộ môn Xin trân trọng cảm ơn Ban lãnh đạo Viện Dược liệu, toàn thể anh chị Khoa Hố phân tích - Tiêu chuẩn, Viện Dược liệu tạo điều kiện, giúp đỡ, động viên tơi hồn thành luận văn Xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo Cục Quản lý Y, Dược cổ truyền – Bộ Y tế, toàn thể đồng nghiệp Phòng Quản lý Dược cổ truyền tạo điều kiện, xếp công việc hợp lý, động viên q trình học tập hồn thành luận văn Và cuối xin gửi lời cảm ơn tới bạn bè, người thân gia đình ln tạo điều kiện, quan tâm, giúp đỡ, động viên suốt trình học tập, nghiên cứu Hà Nội, ngày 28 tháng 03 năm 2019 Học viên Phạm Văn Hải MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG I: TỔNG QUAN 1.1 Đặc điểm thực vật chi Callerya 1.1.1 Vị trí phân loại chi Callerya 1.1.2 Đặc điểm thực vật khóa phân loại chi Callerya 1.1.3 Phân bố chi Callerya giới Việt Nam 1.2 Đặc điểm thực vật loài chi Callerya Việt Nam 11 1.2.1 Callerya atropurpurea (Wall.) Schot 11 1.2.2 Callerya cinerea (Benth.) Schot 11 1.2.3 Callerya cochinchinensis Gagn 12 1.2.4 Callerya eurybotrya Drake 12 1.2.5 Callerya fordii (Dunn) Schot 13 1.2.6 Callerya oosperma (Dunn) Z Wei & Pedley 13 1.2.7 Callerya reticulata var reticulata 14 1.3 Tổng quan Cát sâm (Callerya speciosa (Champ.) Schot) 14 1.3.1 Đặc điểm thực vật 14 1.3.2 Phân bố sinh thái 15 1.3.3 Thành phần hóa học 16 CHƯƠNG II: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 2.1 Đối tượng nghiên cứu 24 2.2 Địa điểm nghiên cứu 25 2.3 Phương pháp nghiên cứu 26 2.3.1 Phương tiện nghiên cứu 26 2.3.2 Phương pháp nghiên cứu 27 CHƯƠNG III: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 30 3.1 Đặc điểm thực vật mẫu nghiên cứu thu hái Bắc Giang Quảng Ninh 30 3.1.1 Đặc điểm hình thái chung mẫu nghiên cứu 30 3.1.2 Đặc điểm hình thái chung mẫu số M1, M3 32 3.1.3 Đặc điểm hình thái chung mẫu số M2, M4 35 3.1.4 Đặc điểm hình thái mẫu M6 37 3.1.5 So sánh đặc điểm hình thái mẫu nghiên cứu 39 3.1.6 So sánh đặc điểm thực vật mẫu nghiên cứu với mẫu mô tả theo tài liệu nước 41 3.1.7 Đặc điểm giải phẫu Callerya speciosa (Champ.) Schot 50 3.1.8 Đặc điểm giải phẫu Callerya fordii (Dunn) Schot 55 3.1.9 Đặc điểm giải phẫu Callerya sp 61 3.2 Định tính thành phần hóa học xác định hàm lượng flavonoid toàn phần mẫu nghiên cứu 63 3.2.1 Đặc điểm sắc ký đồ TLC định tính nhóm chất flavonoid mẫu nghiên cứu 63 3.2.2 Đặc điểm sắc ký đồ TLC định tính nhóm chất saponin mẫu nghiên cứu 66 3.2.3 Khảo sát hàm lượng flavonoid tổng số mẫu nghiên cứu 67 CHƯƠNG IV: BÀN LUẬN 69 4.1 Về đặc điểm thực vật phân bố 69 4.1.1 Về đa dạng loài mẫu nghiên cứu 69 4.1.2 Về xác định tên khoa học mẫu nghiên cứu 69 4.2 Về đặc điểm giải phẫu thân, bột rễ 71 4.2.1 Về đặc điểm giải phẫu thân, 71 4.2.2 Về đặc điểm bột rễ phân biệt loài 72 4.3 Về đặc điểm sắc ký đồ sắc ký lớp mỏng định tính nhóm chất flavonoid saponin dịch chiết rễ số loài mang tên Cát sâm 73 KẾT LUẬN 74 KIẾN NGHỊ 75 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC 1: PHIẾU GIÁM ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA CÁC MẪU NGHIÊN CỨU PHỤ LỤC 2: GIẤY CHỨNG NHẬN MÃ SỐ TIÊU BẢN CÁC MẪU NGHIÊN CỨU PHỤ LỤC 3: ẢNH TIÊU BẢN CỦA CÁC MẪU TRÊN THẾ GIỚI PHỤ LỤC 4: ẢNH TIÊU BẢN CỦA CÁC MẪU NGHIÊN CỨU PHỤ LỤC 5: ẢNH GIẢI PHẪU THÂN, LÁ VÀ BỘT RỄ MẪU NGHIÊN CỨU DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu Tên tiếng Anh tên khoa học C Callerya EtOAc Ethyl acetat EtOH Ethanol HPTLC MeOH Tiếng Việt High – Performance Thin Liquid Sắc ký lớp mỏng hiệu Chromatography cao Methanol SKLM Sắc ký lớp mỏng TLC Sắc ký lớp mỏng TLTK Tài liệu tham khảo DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Danh sách mẫu nghiên cứu 24 Bảng 3.1 Đặc điểm phân biệt lồi mang tên Cát sâm Bắc Giang Quảng Ninh 39 Bảng 3.2 So sánh đặc điểm mẫu nghiên cứu (M1, M3) với Callerya speciosa (Champ.) Schot theo Thực vật chí Trung Quốc, Thực vật chí đại cương Đơng Dương Thực vật chí Campuchia, Lào Việt Nam 41 Bảng 3.3 So sánh đặc điểm mẫu nghiên cứu (M2, M4) với loài Callerya fordii (Dunn) Schot theo Thực vật chí Trung Quốc Thực vật chí Campuchia, Lào Việt Nam 44 Bảng 3.4 So sánh đặc điểm mẫu nghiên cứu M6 với loài chi Callerya phân bố Việt Nam 47 Bảng 3.5 Giá trị Rf vết phát quang màu xanh xuất sắc ký đồ định tính flavonoid 64 Bảng 3.6 Giá trị Rf vết xuất màu hồng vàng sắc ký đồ định tính saponin 66 Bảng 3.7 Hàm lượng flavonoid tổng số (tính theo catechin) mẫu nghiên cứu 68 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Hình ảnh Cát sâm xóm Khe Táu, xã Yên Định, 15 huyện Sơn Động, tỉnh Bắc Giang 15 Hình 1.2 Các alcaloid phân lập từ Cát sâm 16 Hình 1.3 Các coumarin lignan phân lập từ Cát sâm 20 Hình 1.4 Các terpenoid steroid phân lập từ Cát sâm 21 Hình 1.5 Các saponin phân lập từ Cát sâm 22 Hình 1.6 Các acid hữu phân lập từ Cát sâm 23 Hình 3.1 Hình ảnh mẫu nghiên cứu thực địa 31 Hình 3.2 Đặc điểm hình thái thân, mẫu nghiên cứu 31 Hình 3.3 Đặc điểm hình thái quan sinh dưỡng Callerya speciosa (Champ.) Schot 33 Hình 3.4 Đặc điểm hình thái hoa Callerya speciosa (Champ.) Schot 34 Hình 3.5 Đặc điểm hình thái Callerya speciosa (Champ.) Schot 34 Hình 3.6 Đặc điểm hình thái Callerya fordii (Dunn) Schot 36 Hình 3.7 Đặc điểm hình thái thân, Callerya sp 38 Hình 3.8 Đặc điểm hình thái hoa Callerya sp 38 Hình 3.9 Hình ảnh mẫu nghiên cứu (M1) lồi C speciosa Thực vật chí Trung Quốc 43 Hình 3.10 Hình ảnh mẫu nghiên cứu (M2) lồi C fordii (Dunn) Schot Thực vật chí Trung Quốc 46 Hình 3.11 Đặc điểm vi phẫu thân Callerya speciosa (Champ.) Schot 50 Hình 3.12 Đặc điểm vi phẫu Callerya speciosa (Champ.) Schot 52 Hình 3.13 Đặc điểm vi phẫu rễ Callerya speciosa (Champ.) Schot 53 Hình 3.14 Đặc điểm bột rễ Callerya speciosa (Champ.) Schot 54 Hình 3.15 Đặc điểm giải phẫu thân Callerya fordii (Dunn) Schot 56 Hình 3.16 Đặc điểm giải phẫu Callerya fordii (Dunn) Schot 58 Hình 3.17 Đặc điểm giải phẫu rễ Callerya fordii (Dunn) Schot 59 Hình 3.18 Đặc điểm bột rễ Callerya fordii (Dunn) Schot 60 Hình 3.19 Đặc điểm giải phẫu thân Callerya sp 61 Hình 3.20 Đặc điểm giải phẫu Callerya sp 63 Hình 3.21 Sắc ký đồ TLC định tính flavonoid mẫu nghiên cứu 64 Hình 3.22 Mối quan hệ gần gũi mẫu nghiên cứu dựa theo sắc ký đồ TLC nhóm chất flavonoid 65 Hình 3.23 Sắc ký đồ TLC định tính saponin mẫu nghiên cứu 66 10 Hình ảnh giải phẫu thân M1 Chú thích: Biểu bì; Tầng phát sinh bần lục bì; Tinh thể calci oxalat hình khối; Mô dày; Mô mềm; Mô cứng; Libe cấp 2; Gỗ cấp 2; Sợi gỗ; 10 Mô mềm ruột A d c b B a Hình ảnh giải phẫu M1 Chú thích: A Phần gân lá: Biểu bì dưới; Tinh thể Calci oxalat hình thoi; Mơ dày dưới; Sợi mơ cứng; Libe; Gỗ Sợi mô cứng; Mơ dày trên; Biểu M1 Lá bì B: Phần phiến lá: a Biểu bì dưới, b Mơ khuyết; c Mơ giậu; d Biểu bì Hình ảnh giải phẫu rễ M1 Chú thích: Mơ cứng; Mơ mềm; Sợi libe; Libe cấp 2; Gỗ cấp 2; Mô mềm ruột M1 Rễ M2 10 11 Hình ảnh giải phẫu thân M2 Chú thích: Biểu bì; Mơ dày; Tầng phát sinh bần lục bì; Mơ mềm vỏ; Mơ cứng; Tinh thể calci oxalat hình khối; Libe cấp 2; Gỗ cấp 2; Sợi gỗ; 10 Gỗ cấp 1; 11 Mô mềm ruột 10 A M2 A 4b 4a d c B b a Hình ảnh giải phẫu M2 Chú thích: A Phần gân lá:1 Biểu bì mang lơng che chở; Mơ mềm; Mô dày dưới; 4a Tinh thể calci oxalat hình khối; 4b Tinh thể calci oxalat hình thoi; Sợi mô cứng; Libe; Gỗ Sợi mô cứng; Mơ dày trên; 10 Biểu bì B: Phần phiến lá: a Biểu bì dưới, b Mơ khuyết; c Mơ giậu; d Biểu bì M2 5 6 8 Hình ảnh giải phẫu rễ M2 Chú thích: Bần; Mơ mềm vỏ; Sợi mơ cứng; Mô mềm; Sợi libe; Libe cấp 2; Gỗ cấp 2; Mô mềm ruột 10 11 Hình ảnh giải phẫu thân M3 Chú thích: Biểu bì; Mơ dày; Tầng phát sinh bần lục bì; Mơ mềm vỏ; Mơ cứng; Libe cấp 2; Gỗ cấp 2; Sợi gỗ; Gỗ cấp 1; 10 Mô mềm ruột; 11 Tinh thể calci oxalat hình khối M3 A B d c b a 10 Hình ảnh giải phẫu M3 Chú thích: A Phần gân lá: Biểu bì dưới; Tinh thể calci oxalat hình khối; Mơ dày dưới; Mơ mềm; Sợi mô cứng; Libe; Gỗ.; Mơ dày trên; Biểu bì trên; 10 Lơng che chở B: Phần phiến lá: a Biểu bì dưới, b Mơ khuyết; c Mơ giậu; d Biểu bì Hình ảnh giải phẫu rễ M3 Chú thích: Bần; Mơ mềm vỏ; Sợi mô cứng; Mô mềm; Sợi libe; Libe cấp 2; Sợi gỗ; Gỗ cấp 2; Mô mềm ruột 10 11 Hình ảnh giải phẫu thân M4 Chú thích: Lơng che chở; Biểu bì; Mơ dày; Mơ mềm vỏ; Mô cứng; Libe cấp 2; Gỗ cấp 2; Sợi gỗ; Gỗ cấp 1; 10 Mô mềm ruột; 11 Tinh thể calci oxalat hình khối A d c b a B Hình ảnh giải phẫu M4 Chú thích: A Phần gân lá: Biểu bì dưới; Mô dày dưới; Mô mềm; Sợi mô M4 cứng dưới; Libe; Gỗ Sợi mô cứng trên; Mơ dày trên; Biểu bì B: Phần phiến lá: a Biểu bì dưới, b Mơ khuyết; c Mơ giậu; d Biểu bì M4 Hình ảnh giải phẫu rễ M4 Chú thích: Bần; Sợi mơ cứng; Mô mềm vỏ; Libe cấp 2; Gỗ cấp 2; Sợi mơ cứng; Mơ mềm ruột Hình ảnh bột rễ M1 Chú thích: Bần; Bó sợi sợi; Mảng mạch điểm; Mảnh mô mềm mang tinh bột; Tinh thể calci oxalat; Tinh bột; Tế bào cứng Hình ảnh bột rễ M2 Chú thích: Mảnh biểu bì; Bần; Sợi; Mảng mạch điểm Tinh bột; Tinh thể calci oxalat; Thể cứng Hình ảnh bột rễ M3 Chú thích: Mơ mềm chứa tinh bột; Bần; Sợi; Tinh bột; Mảnh mạch điểm; Tinh thể calci oxalat; Thể cứng Hình ảnh bột rễ M4 Chú thích: Mơ mềm chứa tinh bột; Bần; Tế bào cứng; Sợi; Tinh bột; Mạch điểm; Tinh thể calci oxalate ... biệt số loài mang tên Cát sâm Bắc Giang Quảng Ninh? ?? với mục tiêu: Mô tả, so sánh đặc điểm thực vật giám định tên khoa học loài mang tên Cát sâm trồng mọc tự nhiên Bắc Giang Quảng Ninh So sánh đặc. .. Cát sâm) Tân Mẫu phân tích đặc Nghiên cứu Uyên, tỉnh Bắc điểm thực vật thu đặc điểm HNIP/18548/19 Giang hái vào tháng thực vật 11/2018 2.2 Địa điểm nghiên cứu Nghiên cứu thực vật: Tại Bộ môn Thực. ..BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI PHẠM VĂN HẢI NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT VÀ PHÂN BIỆT MỘT SỐ LOÀI MANG TÊN CÁT SÂM TẠI BẮC GIANG VÀ QUẢNG NINH LUẬN VĂN THẠC