BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THANH HUYỀN HỒN THIỆN QUY TRÌNH BAO VIÊN VÀ NGHIÊN CỨU ĐỘ ỔN ĐỊNH VIÊN THẨM THẤU TỰ TẠO LỖ XỐP VENLAFAXIN GIẢI PHÓNG KÉO DÀI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ HÀ NỘI - 2019 BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THANH HUYỀN MÃ SINH VIÊN: 1401288 HỒN THIỆN QUY TRÌNH BAO VIÊN VÀ NGHIÊN CỨU ĐỘ ỔN ĐỊNH VIÊN THẨM THẤU TỰ TẠO LỖ XỐP VENLAFAXIN GIẢI PHÓNG KÉO DÀI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Người hướng dẫn PGS TS Vũ Thị Thu Giang ThS Nguyễn Văn Hà Nơi thực Bộ môn Bào Chế Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung Ƣơng HÀ NỘI - 2019 LỜI CẢM ƠN Với tất lịng kính trọng biết ơn sâu sắc xin gửi tới PGS.TS Vũ Thị Thu Giang ThS Nguyễn Văn Hà ngƣời trực tiếp hƣớng dẫn tơi hồn thành khóa luận Tôi xin gửi lời cảm ơn đến thầy cô, anh chị kỹ thuật viên môn Bào chế anh chị khóa trƣớc nhiệt tình giúp đỡ tơi suốt q trình thực khóa luận Tơi xin chân thành cảm ơn tới tồn thể anh chị Viện Kiểm Nghiệm Thuốc Trung Ƣơng giúp đỡ tạo điều kiện cho q trình nghiên cứu, thực đề tài Tơi xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu toàn thể thầy cô giáo trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội dạy dỗ tạo điều kiện thuận lợi cho thời gian học tập trƣờng Và cuối lời cảm ơn gửi tới gia đình bạn bè động viên giúp đỡ tơi suốt thời gian thực khóa luận Do thời gian làm thực nghiệm nhƣ kiến thức thân cịn hạn chế nên khóa luận cịn có nhiều thiếu sót Tơi mong nhận đƣợc góp ý thầy cơ, bạn bè để khóa luận đƣợc hoàn thiện i MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ…………………………………………………………….1 CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Venlafaxin 1.1.1 Công thức cấu tạo 1.1.2 Tính chất lý hóa 1.1.3 Dƣợc động học 1.1.4 Tác dụng dƣợc lý 1.1.5 Một số dạng bào chế viên nén giải phóng kéo dài venlafaxin 1.2 Hệ thẩm thấu dùng đƣờng uống tự tạo lỗ xốp 1.2.1 Khái niệm hệ thẩm thấu 1.2.2 Ƣu nhƣợc điểm hệ thẩm thấu dùng đƣờng uống 1.2.3 Thành phần hệ thẩm thấu dùng đƣờng uống 1.2.4 Một số nghiên cứu hệ giải phóng kéo dài chứa venlafaxin theo chế bơm thẩm thấu 10 1.3 Nghiên cứu độ ổn định 13 1.3.1 Các tiêu đánh giá độ ổn định thuốc 14 1.3.2 Các yếu tố ảnh hƣởng đến độ ổn định thuốc 13 1.3.3 Các phƣơng pháp nghiên cứu độ ổn định 13 1.3.4 Tần suất kiểm tra đánh giá 15 CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị đối tƣợng nghiên cứu 17 2.1.1 Nguyên vật liệu dùng nghiên cứu 17 2.1.2 Thiết bị, dụng cụ nghiên cứu 18 2.2 Nội dung nghiên cứu 18 ii 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 18 2.3.1 Hồn thiện quy trình bào chế 18 2.3.2 Phƣơng pháp đánh giá chất lƣợng viên 21 2.3.3 Đánh giá độ ổn định thuốc 25 CHƢƠNG 3: THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 26 3.1 Hồn thiện quy trình bào chế viên nén venlafaxin giải phóng kéo dài 26 3.2 Đánh giá viên nén venlafaxin GPKD 31 3.2.1 Tính chất 35 3.2.2 Định tính 35 3.2.3 Độ đồng khối lƣợng 35 3.2.4 Độ hòa tan 35 3.2.5 Hàm lƣợng 35 3.3 Theo dõi độ ổn định viên 37 3.3.1 Về hình thức 37 3.3.2 Hàm lƣợng viên 37 3.3.3 Độ hòa tan 38 3.3.4 Tạp chất 41 CHƢƠNG 4: BÀN LUẬN 43 4.1 Hồn thiện quy trình bào chế 43 4.2 Về xây dựng tiêu chuẩn chất lƣợng 43 4.3 Về nghiên cứu đánh giá độ ổn định 43 PHỤ LỤC 55 iii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ASTT Áp suất thẩm thấu BP Dƣợc điển Anh (Bristish Pharmacopoeia) CA Cellulose acetat CPOP Bơm thẩm thấu tự tạo lỗ xốp (controlled porosity osmotics pumps) EOP Bơm thẩm thấu qui ƣớc (Elementary osmotic pump) GPDC Giải phóng dƣợc chất GPKD Giải phóng kéo dài kl/tt Khối lƣợng/ thể tích KSGP Kiểm sốt giải phóng NSX Nhà sản xuất ODV O-desmethylvenlafaxin PEG Polyethylen glycol PVP Polyvinylpyrrolidon Ptl Phân tử lƣợng SSRIs Thuốc ức chế tái hấp thu serotonin (Selective serotonin reuptake inhibitors) TCAs Thuốc chống trầm cảm vòng (Tricyclic Antidepressants) TDD Tá dƣợc dính TDKMM Tác dụng khơng mong muốn TKHH Tinh khiết hóa học tt/tt Thể tích/ thể tích USP Dƣợc điển Mỹ (United States Pharmacopoeia) iv DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Một số chế phẩm thuốc viến nén GPKD chứa venlafaxin thị trường .5 Bảng 2.1 Nguyên liệu hóa chất nghiên cứu 17 Bảng 2.2 Thiết bị, dụng cụ nghiên cứu 18 Bảng 2.3 Thành phần viên nhân màng bao 19 Bảng 2.4 Điều kiện, thời gian bảo quản chu kỳ lẫy mẫu kiểm tra 25 Bảng 3.1.Thơng số kỹ thuật q trình bao 26 Bảng 3.2 Các tiêu chất lượng viên nén venlafaxin bào chế 27 Bảng 3.3 Hiệu suất bao thay đổi hệ dung môi 28 Bảng 3.4 Kết khảo sát ảnh hưởng thông số kỹ thuật 30 Bảng 3.5.Kết thẩm định phƣơng pháp định lƣợng dƣợc chất Bảng 3.6 Kết thẩm định phƣơng pháp hòa tan Bảng 3.7 Kết thẩm định phƣơng pháp định lƣợng tạp chất Bảng 3.8 Khối lượng trung bình viên lơ ( n=20) 35 Bảng 3.9 Kết thử hịa tan lơ 35 Bảng 3.10 Hàm lượng trung bình viên lô 36 Bảng 3.11 Đề xuất tiêu chuẩn viên nén venlafaxin GPKD 36 Bảng 3.12 Hàm lượng venlafaxin sau tháng bảo quản 37 Bảng 3.13 Kết khảo sát độ hịa tan lơ sau tháng điều kiện bảo quản lão hóa cấp tốc 38 Bảng 3.14 Kết khảo sát độ hịa tan lơ sau tháng điều kiện bảo quản thực 39 Bảng 3.15 Tuổi thọ dự đốn theo độ hịa tan 39 Bảng 3.16 Hàm lượng tạp (%) sau tháng bảo quản 42 v DANH MỤC CÁC HÌNH Tên hình Trang Hình 1.1 Cấu trúc hóa học venlafaxin hydroclorid Hình 1.2 Cấu tạo hệ bơm thẩu thấu tự tạo lỗ xốp (CPOP) 10 Hình 2.1 Sơ đồ bào chế viên nhân venlafaxine 19 Hình 3.1 Dự đốn tuổi thọ Venlafaxin Minitab18 33 Hình 3.2 Đƣờng hồi quy giá trị trung bình hịa tan venlafxin để dự 36 đốn tuổi thọ thời điểm hịa tan bảo quản điều kiện thực lơ Hình 3.3 Đƣờng hồi quy giá trị trung bình hịa tan venlafxin để dự 36 đốn tuổi thọ thời điểm hòa tan bảo quản điều kiện thực lơ Hình 3.4 Đƣờng hồi quy giá trị trung bình hịa tan venlafxin để dự 37 đốn tuổi thọ thời điểm hịa tan bảo quản điều kiện thực lơ Hình 3.5 Đƣờng hồi quy giá trị trung bình hịa tan venlafxin để dự 37 đốn tuổi thọ thời điểm hòa tan 12 bảo quản điều kiện thực lơ Hình 3.6 Đƣờng hồi quy giá trị trung bình định lƣợng tạp chất liên quan để dự đoán tuổi thọ bảo quản điều kiện thực lô vi 38 ĐẶT VẤN ĐỀ Khoảng vài chục năm gần đây, số ngƣời bị rối loạn trầm cảm ngày chiếm tỷ lệ cao hầu hết nƣớc giới Theo ƣớc tính, có khoảng 350 triệu ngƣời mắc phải triệu chứng trầm cảm Ở Việt Nam, theo nhiều điều tra khác cho thấy tỷ lệ mắc bệnh rối loạn trầm cảm khoảng - 6% dân số, tỷ lệ gặp nữ giới nhiều gấp hai lần nam giới, thƣờng gặp độ tuổi 25 - 44 (độ tuổi lao động) [7], [8] Venlafaxin chất ức chế mạnh tái hấp thu serotonin, norepinephrin ức chế yếu tái hấp thu dopamin, đƣợc sử dụng để điều trị bệnh trầm cảm Xét tác dụng chống trầm cảm venlafaxin, số cơng trình nghiên cứu cho thấy venlafaxin có tác dụng tƣơng đƣơng với thuốc chống trầm cảm nhƣ thuốc chống trầm cảm vòng (TCAs), thuốc ức chế chọn lọc tái hấp thu serotonin (SSRIs) Bên cạnh đó, venlafaxin gây tác dụng phụ lên ngƣời sử dụng so với thuốc chống trầm cảm khác [19] Thời gian bán thải venlafaxin giờ, điều trị dạng thuốc quy ƣớc cần định -3 lần ngày để trì nồng độ có hiệu thuốc Vì vậy, để tránh phải dùng thuốc nhiều lần ngày, giúp trì ổn định nồng độ thuốc vùng điều trị, giảm tác dụng không mong muốn, việc bào chế venlafaxin dƣới dạng thuốc giải phóng kéo dài cần thiết Thuốc kiểm sốt giải phóng theo chế bơm thẩm thấu có ƣu điểm tốc độ giải phóng dƣợc chất theo động học bậc khơng bị phụ thuộc vào pH đƣờng tiêu hóa nhu động ruột, bị ảnh hƣởng thức ăn đƣờng tiêu hóa Trong đó, dạng viên thẩm thấu tự tạo lỗ xốp có ƣu điểm đơn giản, q trình bào chế giai đoạn, thuận lợi nâng cấp quy mô bào chế, phù hợp để sản xuất công nghiệp đồng thời dùng khoan laser để tạo miệng giải phóng dẫn đến giảm chi phí sản suất, giảm giá thành sản phẩm DS Phạm Đăng Lƣợng tiến hành “Nghiên cứu xây dựng qui trình bào chế viên thẩm thấu tự tạo lỗ xốp chứa venlafaxin qui mô 5000 viên/mẻ” nhiên hạn chế mặt thời gian nên hiệu suất trình bao viên chƣa cao Vì vậy, chúng tơi tiếp tục thực đề tài: “Hồn thiện quy trình bao viên nghiên cứu độ ổn định viên thẩm thấu tự tạo lỗ xốp Venlafaxin giải phóng kéo dài” với mục tiêu: - Hoàn thiện qui trình bào chế viên thẩm thấu tự tạo lỗ xốp chứa venlafaxin giải phóng kéo dài qui mơ 5000 viên/mẻ - Đề xuất tiêu chuẩn chất lƣợng bƣớc đầu đánh giá độ ổn định viên venlafaxin giải phóng kéo dài Tiến hành định lƣợng mẫu thử venlafaxin nhƣ mục 2.3.2.1, thực với 06 mẫu thử độc lập(mỗi thử tiêm 01 lần) Bảng PL2.4 Kết thử độ lặp lại phương pháp định lượng dược chất Khối lƣợng cân Diện tích pic Kết định ( mg) (mAU.s) lƣợng % 83,87 3762791 98,87 84,63 3799014 99,11 84,78 3818802 100,31 84,32 3794645 99,36 84,61 3803098 99,24 83,82 3763033 99,12 STT TB 99,34 RSD= 0,50 %( LOD= 0,045µg/ml => LOQ=0,15 µg/ml 4) Độ tuyến tính Chuẩn bị dung dịch chuẩn venlafaxin hydroclorid có nồng độ khác nhau: nồng độ LOQ, 50%, 75%, 100% 120% so với nồng độ định lƣợng tạp (0,5 µg/ml), pha lỗng pha động Các dung dịch đƣợc pha loãng từ dung dịch mẫu chuẩn gốc với hệ số pha loãng khác Tiến hành chạy sắc ký dung dịch Xác định phƣơng trình hồi quy tuyến tính, hệ số tƣơng quan tuyến tính nồng độ chất chuẩn có mẫu đáp ứng pic thu đƣợc sắc ký đồ phƣơng pháp bình phƣơng tối thiểu Bảng PL3.2 Kết thử tuyến tính phương pháp định lượng tạp Nồng độ Thể tích dung dịch Bình định Diện tích pic (µg/ml) chuẩn gốc(ml) mức (ml) (mAU.s) 0,15 50 6049,5 0,25 50 10050 0,375 20 14640 0,5 25 19755 0,6 25 23331 Phƣơng trình hồi quy: y = 38672x + 242,94 Diện tích ( mAu.s) Hệ số tƣơng quan: r= 0,9997 25000 y = 38502x + 326.62 R² = 0.9996 20000 15000 10000 5000 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 Nồng độ (µg/ml) Hình PL3 Đồ thị biểu diễn mối tƣơng quan tuyến tính nồng độ diện tích pic tạp chất liên quan Nhận xét: Quy trình thử đạt yêu cầu độ tuyến tính 5) Độ - Chuẩn bị 05 mẫu tự tạo cách thêm xác lƣợng chất chuẩn venlafaxin hydroclorid vào mẫu placebo Lƣợng venlafaxin hydroclorid thêm vào tƣơng ứng với mức nồng độ LOQ, 50%, 75%, 100% 120% so với nồng độ định lƣợng tạp (0,5 µg/ml) Mỗi mức nồng độ tiến hành lặp lại lần - Dung dịch chuẩn: Chuẩn bị nhƣ quy trình phân tích mục 2.3.2.2 % thu hồi = Lƣợng hoạt chất thu hồi Lƣợng hoạt chất thêm vào x 100 % Bảng PL3.3 Kết thử độ phương pháp định lượng tạp Thể Tỷ lệ % tích Lƣợng Lƣợng dung chuẩn placebo dịch thêm (g) chuẩn vào gốc (µg) Diện tích pic Lƣợng chuẩn % thu (mAU.s) tìm lại hồi TB (%) RSD (µg) (ml) 30 50 75 100 120 0,0683 15,462 6166 15,685 101,44 0,0681 15,462 6102 15,720 101,67 0,0688 15,462 6002 15,263 0,0686 10 25,77 10130 26,097 101,27 0,0684 10 25,77 10071 25,945 100,68 0,0690 10 25,77 9940 25,607 99,37 0,0688 15 38,655 14986 38,608 99,88 0,0682 15 38,655 15023 38,701 100,12 0,0686 15 38,655 15526 40,00 103,48 0,0686 20 51,54 20568 52,57 102,0 0,0692 20 51,54 20408 51,782 100,47 0,0684 20 51,54 19928 51,339 0,0688 24 61,848 24635 63,467 102,62 0,0685 24 61,848 23967 61,743 99,83 0,0691 24 61,848 24096 62,07 100,37 100,61 1,64 100,44 0,97 101,16 2,01 100,69 1,21 100,94 1,48 98,72 99,61 => % Thu hồi từ 98,72% đến 103,48% nằm khoảng [95,0%- 105,0 %] RSD tỷ lệ thu hổi mức nồng độ từ 0,97% đến 2,01% (