Đang tải... (xem toàn văn)
1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư vòm mũi họng (UTVMH - NPC: Nasopharyngeal Carcinoma) là khối u ác tính xuất phát chủ yếu từ lớp tế bào biểu mô phủ vòm mũi họng, còn gọi là vòm hầu, với các mức độ biệt hóa khác nhau. Đây là một trong mười bệnh ác tính thường gặp nhất trong các loại ung thư vùng đầu mặt cổ ở nước ta (Bùi Diệu, 2012). Xuất độ mắc bệnh thay đổi khác nhau tùy thuộc chủng tộc và khu vực địa lý (Zeng and Zeng, 2010). Trên phạm vi toàn thế giới, bệnh UTVMH xuất hiện nhiều ở các nước Đông Nam Châu Á: Trung Quốc là quốc gia có tỷ lệ mắc bệnh lý này cao nhất (ASR: 20-40 người/100.000 dân/năm). Kế đến là vùng Bắc Phi, vùng biển Caribee (8-12 người/100.000 dân/năm) và ở Châu Âu và Châu Mỹ, bệnh có tỷ lệ mắc thấp nhất (0,7-1 người/100.000 dân/năm) (Murray and Young, 2001; Simon and Jiade, 2010; Cao et al., 2011; Neda et al., 2016). Việt Nam có tỷ lệ mắc bệnh trung bình (ASR: 5,4 người/100.000 dân/năm) và bệnh thường gặp nhiều ở miền Bắc hơn miền Nam (Bùi Công Toàn và ctv, 2008; Bùi Diệu, 2011). Bệnh UTVMH thường được chẩn đoán muộn vì nhiều lý do, trong đó lý do được kể đến nhiều nhất là do tính phức tạp về mặt giải phẫu: vị trí khoang vòm họng nằm cao và sâu (ở sau cửa mũi sau, dưới nền sọ và ở phía trên vòm hầu mềm) nên việc phát hiện sớm khối u vùng vòm mũi họng qua thăm khám lâm sàng không dễ dàng, triệu chứng của UTVMH thường là triệu chứng vay mượn của các cơ quan kế cận như ù tai, nhức đầu, nghẹt mũi,… do đó, rất dễ chẩn đoán nhầm với các bệnh lý khác của vùng đầu mặt cổ. Bên cạnh đó, còn do tâm lý người bệnh thường chủ quan nên không đi khám bệnh sớm khi triệu chứng bệnh còn chưa rõ ràng. Do vậy, đa số bệnh nhân thường được chẩn đoán bệnh ở giai đoạn muộn, dẫn đến kết quả điều trị kém đi và làm tỷ lệ tử vong tăng cao: Đặng Huy Quốc Thịnh, 2010 công bố tỷ lệ sống còn 5 năm sau điều trị của bệnh nhân (BN) UTVMH giảm từ 80-85% (giai đoạn I, II) xuống còn 34-56% (giai đoạn III, IV). Từ đó cho thấy, việc tìm một giải pháp giúp chẩn đoán bệnh UTVMH ở giai đoạn sớm là yêu cầu bức thiết hiện nay, nhằm giúp việc điều trị mang lại kết quả tích cực, hiệu quả hơn. Vấn đề phát hiện muộn, làm giảm hiệu quả điều trị ở bệnh nhân UTVMH còn do diễn tiến sinh bệnh học của bệnh phức tạp, liên quan đến nhiều yếu tố. Cho đến nay, các y văn đã khẳng định, đặc điểm bệnh sinh học của UTVMH có liên quan đến các nhóm yếu tố gây bệnh chính sau đây: một là do nhiễm Virus Epstein-Barr (EBV), hai là do yếu tố cơ địa gen HLA (Human Leukocyte Antigen) của bệnh nhân nhạy cảm với bệnh, ba là do ảnh hưởng của các yếu tố dinh dưỡng và gần đây, có sự xác quyết về vai trò của một tiểu nhóm dòng tế bào gốc mang đặc tính “tự làm mới” (self-renew), “tính biệt hóa” (differentiate) thành những dòng bào khác nhau gọi là tế bào gốc ung thư, có vai trò chủ đạo trong cơ chế sinh ung, tái phát cũng như di căn. Trong các yếu tố này, nhiễm EBV được xem là yếu tố nguyên nhân trong bệnh sinh học của UTVMH, vì thế, đây là vấn đề đã được quan tâm nhiều nhất. Nhiều nghiên cứu về đặc điểm gen học của EBV đã ghi nhận: gen LMP1 (Latent Membrance Protein 1), một trong các gen của EBV được tìm thấy ở hầu hết các mẫu mô sinh thiết vòm mũi họng của bệnh nhân UTVMH (Phạm Thị Nguyệt Hằng, Phan Thị Phi Phi và ctv., 2003); là gen mã hóa cho protein màng LMP1, một sản phẩm gen EBV duy nhất có khả năng gây biến đổi, ức chế sự biệt hóa của tế bào biểu mô; đây cũng là protein khởi đầu cho sự biến chuyển ác tính của tế bào (Đỗ Hòa Bình, 2003; Nguyễn Đình Phúc và Lê Thanh Hòa, 2008). Bên cạnh đó, sự né tránh đáp ứng miễn dịch của EBV bằng cách đột biến gen LMP1, tạo ra các sản phẩm LMP1 không có khả năng sinh miễn dịch cũng là cách mà EBV khởi đầu sự phát sinh và phát triển khối u (Gourzones et al., 2013). Đa số các nghiên cứu về bệnh sinh học của UTVMH được thực hiện tại miền Bắc của Việt Nam, kết quả các nghiên cứu này đã khẳng định rằng đột biến gen LMP1 có liên quan chặt chẽ đến cơ chế sinh bệnh UTVMH ở các bệnh nhân, đặc biệt là kiểu đột biến mất đoạn 30 bp, có đến 90% kiểu đột biến mất đoạn 30 bp của gen LMP1 được phát hiện ở mô sinh thiết UTVMH bằng kỹ thuật khuếch đại và điện di sản phẩm gen LMP1 (Phạm Thị Nguyệt Hằng, Phan Thị Phi Phi và ctv., 2003); 60% đột biến mất đoạn 30 bp của gen LMP1 được phát hiện bằng kỹ thuật giải trình tự gen (Nguyen-Van D et al., 2008). Điều này gợi ý rằng, việc xác định đột biến gen LMP1 có thể xem là yếu tố quyết định cho việc chẩn đoán sớm bệnh hay không? Một yếu tố thứ hai liên quan đến đặc điểm bệnh sinh học của UTVMH cũng được nhiều nghiên cứu đề cập đến, đó là yếu tố cơ địa HLA của bệnh nhân nhạy cảm với UTVMH. Chính yếu tố này góp phần giải thích về tỷ lệ mắc UTVMH khác nhau giữa các khu vực địa lý. Mặc khác, phân tử HLA, sản phẩm gen HLA, có nhiều chức năng, trong đó có chức năng tham gia vào việc trình diện kháng nguyên cho tế bào miễn dịch của vật chủ nhận biết, từ đó, một vấn đề nữa được đặt ra là tình trạng đột biến gen LMP1, đặc biệt là kiểu đột biến mất đoạn 30 bp của gen LMP1 và gen HLA nhạy cảm với UTVMH ở bệnh nhân có mối liên quan gì với nhau hay không? Đây là những câu hỏi chưa có lời giải đáp. Xuất phát từ cơ sở phân tích trên, luận án “ Nghiên cứu tỷ lệ biểu lộ và đột biến gen LMP1 của Virus Epstein-Barr và HLA trên bệnh nhân ung thư vòm mũi họng tại Thành phố Cần Thơ ” được thực hiện.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ TRỊNH THỊ HỒNG CỦA NGHIÊN CỨU TỶ LỆ BIỂU LỘ VÀ ĐỘT BIẾN GEN LMP1 CỦA VIRUS EPSTEIN-BARR VÀ HLA TRÊN BỆNH NHÂN UNG THƯ VÒM MŨI HỌNG TẠI THÀNH PHỐ CẦN THƠ LUẬN ÁN TIẾN SĨ Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã ngành: 62 42 02 01 Cần Thơ - 2020 CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc CAM KẾT KẾT QUẢ Tôi xin cam kết luận án “Nghiên cứu tỷ lệ biểu lộ đột biến gen LMP1 Virus Epstein-Barr HLA bệnh nhân ung thư vòm mũi họng Thành phố Cần Thơ” hoàn thành dựa kết nghiên cứu thực hướng dẫn PGs.Ts.Trần Ngọc Dung Gs.TSKH.Phan Thị Phi Phi Các kết cơng trình nghiên cứu chưa dùng cho luận án cấp khác Tác giả luận án Trịnh Thị Hồng Của vii MỤC LỤC Trang xác nhận người hướng dẫn khoa học i Lời cám ơn ii Tóm tắt iii Abstract v Cam kết kết vii Mục lục viii Danh sách bảng xii Danh sách biểu đồ xiv Danh sách hình xv Danh mục từ viết tắt xvii CHƯƠNG 1: GIỚI THIỆU CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Sơ lược cấu trúc giải phẫu hệ thống mạch bạch huyết vùng VMH 2.1.1 Cấu trúc giải phẫu vòm mũi họng 2.1.2 Hệ thống mạch bạch huyết vùng vòm mũi họng 2.2 Bệnh ung thư vòm mũi họng 2.2.1 Định nghĩa 2.2.2 Dịch tễ học bệnh ung thư vòm mũi họng giới Việt Nam 2.2.3 Đặc điểm lâm sàng cận lâm sàng bệnh ung thư vòm mũi họng 2.2.4 Đánh giá xếp loại giai đoạn theo T, N, M cho UTVMH 12 2.3 Bệnh sinh học ung thư vòm mũi họng 13 2.3.1 Nguyên nhân yếu tố nguy gây bệnh bệnh UTVMH 13 2.3.2 Virus Epstein-Barr (EBV) 13 2.3.3 Yếu tố địa HLA 21 2.3.4 Những biến đổi sinh học di truyền UTVMH liên quan đến gen LMP1 EBV 32 2.4 Các kỹ thuật SHPT ứng dụng phát gen LMP1 EBV định type gen HLA 34 2.4.1 Các kỹ thuật SHPT ứng dụng phát gen LMP1 EBV 34 2.4.2 Các kỹ thuật SHPT ứng dụng xác định type gen HLA 35 2.5 Tình hình nghiên cứu gen LMP1 EBV, type HLA BN UTVMH 36 2.5.1 Các nghiên cứu gen LMP1 EBV bệnh ung thư vòm mũi họng 36 2.5.2 Các nghiên cứu HLA bệnh ung thư vòm mũi họng 37 CHƯƠNG 3: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 39 3.1 Đối tượng nghiên cứu 39 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu 39 viii 3.1.2 Tiêu chuẩn chọn mẫu 39 3.1.3 Tiêu chuẩn loại trừ 39 3.1.4 Thời gian địa điểm nghiên cứu 39 3.2 Phương tiện phương pháp nghiên cứu 40 3.2.1 Phương tiện nghiên cứu 40 3.2.2 Phương pháp nghiên cứu 41 3.2.3 Đạo đức nghiên cứu 54 CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 55 4.1 Đặc điểm chung BN UTVMH nghiên cứu 55 4.1.1 Đặc điểm giới tính, nhóm tuổi dân tộc BN nghiên cứu 55 4.1.2 Đặc điểm nơi cư trú nghề nghiệp BN nghiên cứu 56 4.1.3 Đặc điểm chẩn đoán giai đoạn bệnh theo T, N, M bệnh nhân nghiên cứu 56 4.1.4 Đặc điểm loại mẫu mô sinh thiết thể mô bệnh học bệnh nhân UTVMH nghiên cứu 57 4.2 Tỷ lệ diện gen LMP1 EBV mẫu mô sinh thiết vòm bệnh nhân UTVMH nghiên cứu 58 4.2.1 Tỷ lệ diện gen LMP1 EBV mẫu mơ sinh thiết vịm bệnh nhân UTVMH nghiên cứu 58 4.2.2 Tỷ lệ diện gen LMP1 EBV mẫu mơ sinh thiết vịm theo số đặc điểm chung BN nghiên cứu 59 4.3 Tỷ lệ loại đột biến gen LMP1 EBV mẫu mô sinh thiết vòm BN UTVMH nghiên cứu 60 4.3.1 Tỷ lệ loại đột biến gen LMP1 EBV mẫu mơ sinh thiết vịm BN nghiên cứu kỹ thuật PCR điện di sản phẩm 60 4.3.2 Tỷ lệ loại đột biến gen LMP1 EBV mẫu mơ sinh thiết vịm BN nghiên cứu kỹ thuật giải trình tự đoạn gen 61 4.4 Tần suất alen gen HLA mẫu máu BN UTVMH nghiên cứu 63 4.4.1 Đặc điểm chung mẫu NC HLA (BN UTVMH nhóm chứng) 63 4.4.2 Tần suất alen HLA lớp I BN UTVMH nghiên cứu 64 4.4.3 Tần suất alen HLA lớp II BN UTVMH nghiên cứu 68 4.4.4 Tần suất haplotype HLA xuất BN UTVMH nghiên cứu 72 4.5 Giá trị đột biến gen LMP1 EBV tần suất alen HLA chẩn đoán xác định bệnh ung thư vòm mũi họng tại Bệnh viện Ung bướu Cần Thơ 73 4.5.1 Liên quan tỷ lệ đột biến đoạn 30 bp gen LMP1 EBV với giai đoạn bệnh, thể mô bệnh học tần suất alen HLA BN UTVMH NC 73 4.5.2 Liên quan tần suất alen HLA với thể mô bệnh học giai đoạn bệnh BN UTVMH nghiên cứu 77 ix 4.5.3 Độ nhạy, độ đặc hiệu số haplotype HLA chẩn đoán bệnh UTVMH 82 CHƯƠNG 5: BÀN LUẬN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 83 5.1 Đặc điểm chung BN UTVMH nghiên cứu 83 5.1.1 Đặc điểm giới tính BN UTVMH nghiên cứu 83 5.1.2 Đặc điểm nhóm tuổi BN UTVMH nghiên cứu 83 5.1.3 Đặc điểm dân tộc BN UTVMH nghiên cứu 84 5.1.4 Đặc điểm nơi cư trú BN UTVMH nghiên cứu 84 5.1.5 Đặc điểm nghề nghiệp BN UTVMH nghiên cứu 84 5.1.6 Đặc điểm chẩn đoán giai đoạn bệnh theo T, N, M BN UTVMH nghiên cứu 85 5.1.7 Đặc điểm loại mẫu mô sinh thiết BN UTVMH nghiên cứu 86 5.1.8 Đặc điểm thể mô bệnh học BN UTVMH nghiên cứu 86 5.2 Tỷ lệ diện gen LMP1 EBV mẫu mơ sinh thiết vịm BN NC 88 5.2.1 Tỷ lệ diện gen LMP1 EBV mẫu mơ sinh thiết vịm BN NC 88 5.2.2 Tỷ lệ diện gen LMP1 EBV mẫu mơ sinh thiết vịm mũi họng theo số đặc điểm chung BN UTVMH nghiên cứu 90 5.3 Tỷ lệ loại đột biến gen LMP1 EBV mẫu mô sinh thiết vòm BN UTVMH nghiên cứu 93 5.3.1 Tỷ lệ loại đột biến gen LMP1 EBV mẫu mơ sinh thiết vịm BN nghiên cứu kỹ thuật PCR điện di sản phẩm khuếch đại 94 5.3.2 Tỷ lệ loại đột biến gen LMP EBV mẫu mô sinh thiết vòm mũi họng BN nghiên cứu kỹ thuật giải trình tự đoạn gen 95 5.4 Tần suất alen HLA BN UTVMH nghiên cứu 99 5.4.1 Đặc điểm chung mẫu NC HLA BN UTVMH nhóm chứng người bình thường 99 5.4.2 Tần suất alen HLA lớp I BN UTVMH nghiên cứu 99 5.4.3 Tần suất alen HLA lớp II BN UTVMH nghiên cứu 104 5.4.4 Tần suất haplotype HLA BN UTVMH nghiên cứu 107 5.5 Giá trị đột biến gen LMP1 EBV tần suất alen HLA chẩn đoán bệnh UTVMH Bệnh viện Ung bướu Cần Thơ 108 5.5.1 Liên quan tỷ lệ đột biến đoạn 30 bp gen LMP1 EBV với giai đoạn bệnh, thể mô bệnh học tần suất alen HLA BN UTVMH nghiên cứu 108 5.5.2 Liên quan tần suất alen HLA với thể mô bệnh học, giai đoạn bệnh BN UTVMH nghiên cứu 112 5.5.3 Độ nhạy, độ đặc hiệu tần suất số haplotype HLA chẩn đoán bệnh UTVMH 113 CHƯƠNG 6: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 114 x Tài liệu tham khảo 116 Các cơng trình nghiên cứu tác giả có liên quan đến luận án 129 Phụ lục A-Bảng thu thập số liệu nghiên cứu Phụ lục B-Danh sách BN nghiên cứu Phụ lục C-Kết nghiên cứu LMP1 EBV Phụ lục D-Kết nghiên cứu HLA Phụ lục E-Một số hình ảnh kết nghiên cứu Phụ lục F-Hình ảnh trang thiết bị phịng thí nghiệm thực nghiên cứu xi DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng 3.1 Thành phần ống phản ứng PCR LMP1 EBV 51 Bảng 3.2 Chu kỳ luân nhiệt phản ứng khuếch đại gen HLA 51 Bảng 4.1 Đặc điểm giới tính, nhóm tuổi dân tộc BN UTVMH nghiên cứu 55 Bảng 4.2 Đặc điểm nơi cư trú BN UTVMH nghiên cứu 56 Bảng 4.3 Đặc điểm nghề nghiệp BN UTVMH nghiên cứu 56 Bảng 4.4 Giai đoạn theo T, N, M BN UTVMH nghiên cứu 56 Bảng 4.5 Phân loại thể mơ bệnh học mơ sinh thiết vịm BN UTVMH 57 Bảng 4.6 Tỷ lệ diện gen LMP1 EBV theo giới tính, nhóm tuổi, giai đoạn bệnh BN UTVMH nghiên cứu 59 Bảng 4.7 Tỷ lệ diện gen LMP1 EBV theo loại mẫu mô sinh thiết BN UTVMH nghiên cứu 57 Bảng 4.8 Tỷ lệ diện gen LMP1 EBV mẫu mô sinh thiết vịm theo thể mơ bệnh học BN UTVMH nghiên cứu 60 Bảng 4.9 Tỷ lệ sản phẩm khuếch đại gen LMP1 EBV có kích thước 200 bp phát mẫu mơ sinh thiết vịm BN UTVMH nghiên cứu 60 Bảng 4.10 Tỷ lệ kiểu đột biến đoạn 30 bp gen LMP1 EBV kỹ thuật giải trình tự 62 Bảng 4.11 Tỷ lệ thay đổi nucleotide gen LMP1 EBV mẫu nghiên cứu phát kỹ thuật giải trình tự gen 62 Bảng 4.12 Đặc điểm chung mẫu BN UTVMH nhóm chứng khảo sát gen HLA 63 Bảng 4.13 Tần suất alen HLA lớp I (HLA-A HLA-B) BN UTVMH nghiên cứu 64 Bảng 4.14 Liên quan tần suất alen HLA-A BN UTVMH nhóm chứng Liên quan tần suất alen HLA-B BN UTVMH nhóm chứng 65 Bảng 4.16 Tần suất alen HLA lớp II (DRB1, DQB1 DQA1) BN UTVMH nghiên cứu 68 Bảng 4.17 Liên quan tần suất alen HLA-DRB1 BN UTVMH nhóm chứng 70 Bảng 4.15 xii 67 Bảng 4.18 Bảng 4.19 Bảng 4.20 Bảng 4.21 Bảng 4.22 Bảng 4.23 Bảng 4.24 Bảng 4.25 Bảng 4.26 Bảng 4.27 Bảng 4.28 Bảng 4.29 Liên quan tần suất alen HLA-DQB1 BN UTVMH nhóm chứng Liên quan tỷ lệ đột biến đoạn 30 bp gen LMP1 EBV với giai đoạn bệnh BN UTVMH nghiên cứu Liên quan tỷ lệ đột biến đoạn 30 bp gen LMP1 EBV (kỹ thuật PCR) với thể mô bệnh học BN UTVMH nghiên cứu Liên quan tỷ lệ đột biến đoạn 30 bp gen LMP1 EBV (kỹ thuật giải trình tự) với thể mơ bệnh học BN UTVMH nghiên cứu Liên quan tỷ lệ đột biến đoạn 30 bp gen LMP1 EBV với tần suất alen HLA lớp I BN UTVMH nghiên cứu Liên quan tỷ lệ đột biến đoạn 30 bp gen LMP1 EBV với tần suất alen HLA lớp II BN UTVMH nghiên cứu Liên quan tần suất alen lớp I (HLA-A HLA-B) với thể mô bệnh học BN UTVMH nghiên cứu Liên quan tần suất alen HLA-DRB1 (lớp II) với thể mô bệnh học BN UTVMH nghiên cứu Liên quan tần suất alen HLA-DQB1 DQA1 (lớp II) với thể mô bệnh học BN UTVMH nghiên cứu Liên quan tần suất alen HLA lớp I với giai đoạn bệnh BN UTVMH Liên quan tần suất alen HLA lớp II với giai đoạn bệnh BN UTVMH Độ nhạy, độ đặc hiệu số haplotype HLA chẩn đoán bệnh UTVMH xiii 71 73 74 74 75 76 77 78 79 80 81 82 DANH SÁCH BIỂU ĐỒ Trang 57 Biểu đồ 4.3 Tỷ lệ loại mẫu mô sinh thiết BN UTVMH nghiên cứu (n = 108) Tỷ lệ diện gen LMP1 EBV mẫu mơ sinh thiết vịm BN UTVMH nghiên cứu (n = 108) Tần suất alen HLA-A BN UTVMH nhóm chứng Biểu đồ 4.4 Tần suất alen HLA-B BN UTVMH nhóm chứng 66 Biểu đồ 4.5 Tần suất alen HLA-DRB1 BN UTVMH nhóm chứng 69 Biểu đồ 4.6 Tần suất alen HLA-DQB1 BN UTVMH nhóm chứng 71 Biểu đồ 4.7 Tần suất haplotype HLA lớp I BN UTVMH nhóm chứng 72 Biểu đồ 4.8 Tần suất haplotype HLA lớp II BN UTVMH nhóm chứng 72 Biểu đồ 4.1 Biểu đồ 4.2 xiv 58 65 DANH SÁCH HÌNH Trang Hình 2.1 Hình ảnh giải phẫu vùng vịm mũi họng Hình 2.2 Phân chia nhóm hạch vùng cổ Hình 2.3 Sự phân bố tỷ lệ mắc bệnh ung thư vòm mũi họng châu Á năm 2012 Hình 2.4 Cấu trúc virus Epstein-Barr 13 Hình 2.5 14 Hình 2.6 Cấu trúc hệ gen virus Epstein-Barr dạng mạch vòng dạng mạch thẳng Cấu trúc chi tiết protein LMP1 Hình 2.7 Quá trình phát triển EBV tế bào bị nhiễm 18 Hình 2.8 Các dạng tiềm ẩn virus Epstein-Barr 19 Hình 2.9 Vị trí HLA nhiễm sắc thể số người 22 Hình 2.10 Sự di truyền haplotype HLA từ bố mẹ sang hệ 23 Hình 2.11 Cấu trúc phân tử HLA người 24 Hình 2.12 Vai trị trình diện kháng nguyên phân tử HLA người 26 Hình 2.13 Đáp ứng miễn dịch chống ung thư 27 Hình 2.14 Cơ chế né tránh đáp ứng miễn dịch chống ung thư 28 Hình 3.1 Hình ảnh có vạch điện di sản phẩm khuếch đại gen LMP1 EBV (LMP1 EBV dương tính) BN UTVMH nghiên cứu: kích thước 230 bp mẫu 010 200 bp mẫu 005 khơng có vạch điện di (LMP1 EBV âm tính): mẫu 001, mẫu 009 mẫu 014 gel agarose 44 Hình 3.2 Chu kỳ nhiệt phản ứng PCR với mồi LMP1-1 LMP1-2 51 Hình 3.3 Chu kỳ nhiệt phản ứng PCR với mồi đặc hiệu gen HLA Hình ảnh vạch điện di gel agarose thể có diện gen LMP1 EBV (LMP1 EBV dương tính: mẫu 165, 166, 169, 173, 176) khơng có diện gen LMP1 EBV (LMP1 EBV âm tính: mẫu 167, 170) Kết đột biến đoạn 30 bp LMP1 EBV mẫu 111(so với chủng chuẩn B95-8 (Genbank V01555) vị trí 168266168295) 52 Hình 4.1 Hình 4.2 xv 15 58 61 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 B14019 B14020 B14023 B14025 B15030 B15031 B15032 B15035 B15036 B15037 B15039 B15040 B15041 B15042 B15043 B15044 B15052 ST tươi Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin ST tươi ST tươi Block parafin ST tươi ST tươi ST tươi ST tươi Block parafin Block parafin Block parafin ST tươi ST tươi A14-8463 Carcinome KBH 87.5 2.04 (+) A14-1218 Carcinome KBH 397.6 1.80 (-) A14-5601 Carcinome KBH 128.4 1.80 (+) A14-6056 Carcinome KBH 8.4 1.60 A14-7846 Carcinome TBGKSH 119.9 A15-854 Carcinome KBH A15-960 Carcinome KBH A15-885 Carcinome TBGKSH A15-1302 Carcinome KBH A15-1493 Carcinome TBGKSH A15-1879 Carcinome KBH A15-5348 200 T2N3M0 IVB T3N2M0 III T1N2M0 III (-) T1N1M0 II 1.85 (-) T3N0M0 III 175 2.10 (+) 200 T4N0M0 IVA 119.5 2.10 (+) 200 T2N2M0 III 7.9 1.60 (-) T4N2M0 IVA 109.6 1.94 (+) 200 PK 917 1.83 (+) 200 PK 372.3 1.81 (+) 200 PK Carcinome TBGKSH 293 1.98 (-) PK A15-1094 Carcinome KBH 27.3 1.60 (-) T2N2M0 III A15-2431 Carcinome KBH 44.91 1.88 (-) T3N1M0 III A15-2681 Carcinome KBH 215.4 1.90 (+) 200 30bp del T2N3M0 IVB A15-5128 Carcinome TBGKSH 54.89 1.97 (+) 200 30bp del T3N2M0 III A15-6143 Carcinome KBH 5.3 2.10 (+) 230 T1N1M0 II 200 30bp del 30bp del 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 B15055 B15056 B15057 B15059 B15060 B15062 B15063 B15064 B15066 B15067 B16077 B16083 B16089 B16091 B16093 B16101 B16102 Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin ST tươi ST tươi ST tươi ST tươi Block parafin ST tươi Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin A15-4551 Carcinome KBH 11.67 1.75 (-) T1N1M0 II A15-2586 Carcinome TBGKSH 197.2 1.82 (+) T2N2M0 III A15-4638 Carcinome KBH 15.34 1.84 (-) T3N0M0 III A15-6172 Carcinome KBH 355.9 1.82 (+) T2N2M0 III A15-3007 Carcinome KBH 1972 1.82 (-) T2N2M0 III A15-7240 Carcinome TBGKSH 76.15 1.95 (-) T2N0M0 II A15-7285 Carcinome TBGKSH 213.7 1.82 (+) 200 T3N1M0 III A15-7951 Carcinome KBH 35.49 2.03 (+) 200 PK A15-9142 Carcinome KBH 17.37 2.08 (+) 230 PK A15-8914 Carcinome KBH 4.5 1.82 (-) T2N2M0 III A17-1654 Carcinome TBGKSH 7.2 2.20 (-) T4N3M0 IVB A15-1300 Carcinome KBH 4.1 1.98 (+) T4N1M0 IVA A16-1207 Carcinome KBH 25.44 2.05 (-) T4N1M0 IVA A16-640 Carcinome TBGKSH 8.4 1.92 (-) T2N1M0 II A16-1359 Carcinome TBGKSH 9.5 2.12 (+) T3N2M0 III A16-3963 Carcinome TBGKSH 9.1 1.60 (-) T4N2M0 IVA A16-5399 Carcinome TBGKSH 19.14 1.89 (-) T1N2M0 III 200 200 30bp del 200 200 30bp del 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 B16103 B16107 B16108 B16110 B16111 B16112 B16115 B16117 B16121 B17123 B17124 B17126 B17129 B17131 B17135 B17139 B17140 Block parafin ST tươi ST tươi Block parafin ST tươi Block parafin Block parafin ST tươi Block parafin ST tươi ST tươi Block parafin Block parafin Block parafin ST tươi Block parafin ST tươi A16-3818 Carcinome TBGKSH 141.5 1.87 (+) 200 A16-5769 Carcinome TBGKSH 88.1 1.70 (+) 230 A16-5815 Carcinome TBGKSH 2.3 1.80 (-) T2N2M0 III A16-6120 Carcinome TBGKSH 5.9 1.60 (-) T4N2M0 IVA A16-6603 Carcinome KBH 21.7 1.60 (+) 200 30bp del T1N0M0 I A16-5246 Carcinome KBH 2.3 1.60 (+) 200 30bp del T3N3M0 IVB A16-6326 Carcinome TBGKSH 7.1 2.10 (-) T2N2M0 III A16-7694 Carcinome KBH 3.3 2.10 (-) T2N2M0 III A16-8341 Carcinome TBGKSH 80.38 1.90 (-) T1N2M0 III A17-110 Carcinome TBGKSH 111.15 1.93 (+) 200 T4N2M0 IVA A17-376 Carcinome TBGKSH 56.38 1.92 (+) 200 PK A17-9723 Carcinome KBH 3.4 2.10 (-) T2N1M0 II A17-692 Carcinome TBGKSH 3.8 2.10 (-) T4N2M0 VA A17-691 Carcinome TBGKSH 3.3 2.10 (-) T2N2M0 III T2N2M0 III T2N2M0 III T2N2M0 III A17-4274 Carcinome TBGKSH A17-3689 Carcinome KBH A17-5353 Carcinome TBGKSH 59.85 1.82 (+) 7.4 2.10 (-) 181.1 1.88 (+) 230 200 30bp del T2N2M0 III PK No 30bp del 30bp del 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 B17141 B17142 B17144 B17145 B17146 B17148 B17149 B17150 B17151 B17152 B17153 B17154 B17156 B17157 B17158 B17159 B18160 Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin ST tươi Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin ST tươi Block parafin Block parafin ST tươi Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin A17-2612 Carcinome TBGKSH 4.9 1.60 (-) T4N1M0 IVA A17-4820 A1716311 Carcinome KBH 28.44 1.73 (+) 200 T1N2M0 III 230 30bp del No 30bp del Carcinome TBGKSH 7.9 1.60 (+) T4N1M0 IVA A17-6200 Carcinome TBGKSH 7.1 2.10 (+) 200 30bp del T3N2M0 III A17-6450 Carcinome KBH 1315 1.78 (+) 200 30bp del T4N0M0 IVA A17-6816 Carcinome TBGKSH 9.2 1.60 (+) 200 30bp del T2N2M0 III A17-2156 Carcinome TBGKSH 29.95 1.77 (+) 200 T3N1M1 IVC A17-7798 Carcinome TBGKSH 18.65 1.75 (+) 200 T4N1M0 IVA A17-7444 Carcinome KBH 158.9 1.80 (+) 200 T1N2M0 III A17-8015 Carcinome TBGKSH 14.32 1.90 (-) T4N2M0 IVA A17-7948 Carcinome TBGKSH 5.0 1.72 (+) 200 T4N2M0 IVA A17-6594 Carcinome TBGKSH 27.01 1.93 (+) 200 T2N2M0 III A17-8488 Carcinome TBGKSH 25.63 2.03 (+) 230 T2N2M0 III A17-8456 Carcinome TBGKSH 7,245 2.10 (-) T2N1M0 II A17-4484 Carcinome TBGKSH 17.1 1.88 (-) T1N0M0 I A17-8087 A1710071 Carcinome TBGKSH 8.1 1.99 (+) T4N0M0 IVA Carcinome TBGKSH 19.57 1.85 (-) T2N2M0 III 200 30bp del 30bp del No 30bp del 30bp del 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 B18161 B18162 B18163 B18165 B18166 B18167 B18169 B18170 B18171 B18172 B18173 B18174 B18176 B18177 B18178 B18179 B18181 Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin ST tươi Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin A17-9620 Carcinome TBGKSH 4.0 2.10 (-) T2N2M0 III A17-9980 Carcinome KBH 17.64 2.04 (+) T2N2M0 III A17-6845 Carcinome TBGKSH 11.57 2.08 (-) T3N3M0 IVB A17-9917 Carcinome KBH 26.45 2.12 (+) 230 T2N0M0 II A18-01 Carcinome TBGKSH 24.39 2.14 (+) 200 T2N1M0 II A17-4275 Carcinome TBGKSH 6.1 1.97 (-) T2N2M1 IVC A17-6021 Carcinome TBGKSH 8.5 1.90 (+) 230 TNM1 IVC A18-472 Carcinome KBH 8.71 1.90 (+) 200 T2N2M0 III A17-6037 Carcinome TBGKSH 113.3 1.85 (+) 200 T1N2M0 III A17-1316 Carcinome KBH 23.96 1.72 (-) T2N1M0 II A18-214 Carcinome TBGKSH 3.6 2.10 (+) 200 T2N2M0 III A18-297 Carcinome TBGKSH 605.6 1.91 (+) 200 200 30bp del 30bp del A18-2109 Carcinome KBH 272.1 1.99 (+) 230 No 30bp del A17-9754 Carcinome KBH 53.1 2.04 (+) 200 30bp del A17-9297 Carcinome TBGKSH 47 1.88 (+) 230 A18-1650 Carcinome KBH 22 2.10 (+) 200 A17-7610 Carcinome KBH 126.7 1.90 (+) 200 30bp del T2N2M0 III T2N2M0 III T2N2M0 III T4N0M0 IVA T2N2M0 III T2N2M0 III 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 B18183 B18184 B18186 B18187 B18188 B18189 B18190 B18192 B18193 B18194 B18195 Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin Block parafin A18-1715 Carcinome TBGKSH 11 1.60 (+) 230 A18-1241 Carcinome TBGKSH 19.99 1.70 (+) 230 A18-2814 Carcinome TBGKSH 16.86 1.71 (+) 230 A18-4658 Carcinome TBGKSH 42.06 2.00 (+) 200 A18-5182 Carcinome TBGKSH 37.5 1.92 (+) 230 A18-4352 Carcinome TBGKSH 76.32 1.85 (+) 200 A18-5127 Carcinome TBGKSH 148.3 1.94 (+) 200 A18-1675 Carcinome TBGKSH 119.4 1.91 (+) A18-4674 Carcinome TBGKSH 143.8 1.87 A18-4308 Carcinome TBGKSH 203.7 A18-5849 Carcinome TBGKSH 104.2 No 30bp del No 30bp del T4N2M0 IVA T2N2M0 III T4N0M0 IVA T2N1M0 II T4N1M0 IVA T2N0M0 II T2N0M0 II 230 30bp del No 30bp del T1N2M1 IVC (+) 200 30bp del T3N1M0 III 1.91 (+) 230 T2N1M0 II 1.89 (+) 200 T2N1M0 II 30bp del No 30bp del 30bp del PHỤ LỤC D KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU HLA Tên luận án: "Nghiên cứu tỷ lệ biểu lộ đột biến gen LMP1 Virus Epstein-Barr HLA bệnh nhân ung thư vòm mũi họng Thành phố Cần Thơ" ST T 10 11 12 13 14 15 COD E B15044 B15052 B15059 B15063 B16093 B16112 B17140 B17144 B17145 B17146 B17153 B17154 B17156 B17159 B18162 DNA MÁU CO A260/ N 280 64 27 1.7 81 1.8 43 11 45 1.7 1.7 1.775 32 13 34 19 14 94 26 21 72 125 102 55 22 1.9 1,714 82 1.78 1.6 1.6 1,583 2.1 1,812 1.78 ST T HLA NPC HLA-A A*0 A*1 A*0 A*1 A*0 A*2 A*1 A*3 A*0 A*0 2 A*0 A*2 A*0 A*2 A*1 A*1 1 A*0 A*2 A*0 A*0 2 A*2 A*3 A*1 A*1 A*3 A*1 A*0 A*3 Bla Bla nk nk HLA-B B*1 B*5 B*1 B*1 5 B*0 B*4 B*0 B*1 B*4 B*4 6 B*3 B*4 B*1 B*5 B*4 B*1 B*4 B*1 B*3 B*5 B*4 B*5 B*3 B*1 5 B*1 B*5 B*5 B*3 Bla Bla nk nk HLA-DRB1 DRB1 DRB1 *12 *12 DRB1 DRB1 *08 *12 DRB1 DRB1 *07 *12 DRB1 DRB1 *08 *14 DRB1 DRB1 *08 *09 DRB1 DRB1 *09 *12 DRB1 DRB1 *09 *10 DRB1 DRB1 *09 *15 DRB1 DRB1 *12 *15 DRB1 DRB1 *10 *16 DRB1 DRB1 *07 *12 DRB1 DRB1 *12 *09 DRB1 DRB1 *03 *12 DRB1 DRB1 *15 *14 DRB1 DRB1 *04 *13 HLA-DQB1 DQB1 DQB1 *03 *03 DQB1 DQB1 *03 *06 DQB1 DQB1 *03 *05 DQB1 DQB1 *05 *06 DQB1 DQB1 *03 *06 DQB1 DQB1 *03 *03 DQB1 DQB1 *03 *05 DQB1 DQB1 *03 *06 DQB1 DQB1 *03 *05 DQB1 DQB1 *05 *05 DQB1 DQB1 *02 *03 DQB1 DQB1 *03 *03 DQB1 DQB1 *03 *05 DQB1 DQB1 *03 *03 DQB1 DQB1 *04 *06 HLA-DQA1 DQA1 DQA1 *04 *06 DQA1 DQA1 *01 *04 DQA1 DQA1 *01 *01 DQA1 DQA1 *01 *01 DQA1 DQA1 *01 *03 DQA1 DQA1 *03 *06 DQA1 DQA1 *01 *03 DQA1 DQA1 *03 *06 DQA1 DQA1 *01 *06 DQA1 DQA1 *01 *01 DQA1 DQA1 *02 *06 DQA1 DQA1 *03 *06 DQA1 DQA1 *01 *06 DQA1 DQA1 *02 *03 DQA1 DQA1 *01 *03 10 11 12 13 14 15 HLA CONTROL HLA-A A*1 A* 24 A*0 A* 29 A*0 A* 02 A*0 A* 33 A*2 A* 29 A*0 A* 33 A*0 A* 24 A*0 A* 02 A*0 A* 33 A*2 A* 33 A*2 A* 24 A*1 A* 33 A*1 A* 11 A*1 A* 24 A*0 A* 03 HLA-B B*3 B* 40 B*0 B* 46 B*3 B* 38 B*1 B* 58 B*0 B* 35 B*4 B* 58 B*3 B* 46 B*2 B* 46 B*4 B* 58 B*0 B* 58 B*1 B* 15 B*0 B* 15 B*1 B* 15 B*1 B* 15 B*3 B* 46 HLA-DRB1 DRB1* DRB1 09 *12 DRB1* DRB1 04 *12 DRB1* DRB1 10 *11 DRB1* DRB1 03 *12 DRB1* DRB1 10 *12 DRB1* DRB1 09 *10 DRB1* DRB1 08 *09 DRB1* DRB1 09 *12 DRB1* DRB1 09 *10 DRB1* DRB1 03 *10 DRB1* DRB1 09 *12 DRB1* DRB1 12 *15 DRB1* DRB1 12 *12 DRB1* DRB1 12 *12 DRB1* DRB1 09 *10 HLA-DQB1 DQB1 DQB1 *03 *03 DQB1 DQB1 *03 *04 DQB1 DQB1 *03 *05 DQB1 DQB1 *02 *03 DQB1 DQB1 *03 *05 DQB1 DQB1 *03 *05 DQB1 DQB1 *03 *06 DQB1 DQB1 *03 *03 DQB1 DQB1 *03 *05 DQB1 DQB1 *02 *05 DQB1 DQB1 *03 *03 DQB1 DQB1 *03 *06 DQB1 DQB1 *03 *03 DQB1 DQB1 *03 *03 DQB1 DQB1 *03 *05 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 B18165 B18166 B18170 B18173 B18174 B18178 B18179 B18181 B18183 B18184 B18186 B18189 B18192 B18193 B18194 51 21 137 84 67 84 57 78 25 83 32 41 08 206 80 08 66 21 17 19 55 9.5 20 58 1.88 1.78 1,917 1.9 1,941 1,994 1,923 2,046 2,098 1.7 1.6 2.0 1,853 2.1 1.77 Bla nk Bla nk A*0 A*0 A*0 A*1 Bla nk A*0 A*0 A*0 A*0 A*0 A*0 A*0 A*0 Bla nk Bla nk A*0 A*2 A*2 A*2 Bla nk A*3 A*2 A*2 A*2 A*1 A*3 A*1 A*1 Bla nk Bla nk B*4 B*3 B*0 B*3 Bla nk B*4 B*1 B*1 B*1 B*1 B*4 B*1 B*1 Bla nk Bla nk B*1 B*5 B*0 B*3 Bla nk B*4 B*2 B*4 B*4 B*4 B*5 B*3 B*4 Blank DRB1 *04 DRB1 *04 DRB1 *04 DRB1 *14 DRB1 *08 DRB1 *07 DRB1 *07 DRB1 *12 DRB1 *09 DRB1 *04 DRB1 *04 DRB1 *07 DRB1 *04 DRB1 *09 Blank DRB1 *06 DRB1 *14 DRB1 *08 DRB1 *14 DRB1 *10 DRB1 *08 DRB1 *08 DRB1 *15 DRB1 *15 DRB1 *14 DRB1 *09 DRB1 *07 DRB1 *15 DRB1 *15 DQB1 *03 DQB1 *04 DQA1 *03 DQA1 *03 Blank DQB1 *03 DQB1 *02 DQB1 *03 DQB1 *05 Blank DQB1 *06 DQB1 *03 DQB1 *05 DQB1 *06 Blank DQA1 *01 DQA1 *03 DQA1 *06 DQA1 *01 Blank DQA1 *03 DQA1 *06 DQA1 *06 DQA1 *01 17 Blank DQB1 *02 DQB1 *03 DQB1 *04 DQB1 *02 DQB1 *03 DQB1 *02 DQB1 *04 DQB1 *03 Blank DQB1 *06 DQB1 *05 DQB1 *05 DQB1 *03 DQB1 *06 DQB1 *03 DQB1 *05 DQB1 *06 Blank DQA1 *01 DQA1 *01 DQA1 *01 DQA1 *02 DQA1 *03 DQA1 *02 DQA1 *01 DQA1 *01 Blank DQA1 *02 DQA1 *06 DQA1 *03 DQA1 *06 DQA1 *03 DQA1 *02 DQA1 *03 DQA1 *03 22 16 18 19 20 21 23 24 25 26 27 28 29 30 A*2 A*0 A*2 A*1 A*1 A*2 A*1 A*0 A*0 A*0 A*0 A*0 A*0 A*0 A*0 A* 33 A* 03 A* 33 A* 29 A* 11 A* 24 A* 24 A* 29 A* 24 A* 68 A* 34 A* 33 A* 26 A* 33 A* 33 B*1 B*1 B*3 B*0 B*1 B*1 B*1 B*1 B*1 B*1 B*4 B*4 B*1 B*1 B*5 B* 58 B* 46 B* 56 B* 15 B* 46 B* 44 B* 15 B* 46 B* 46 B* 57 B* 56 B* 54 B* 51 B* 44 B* 58 DRB1* 03 DRB1* 09 DRB1* 09 DRB1* 12 DRB1* 12 DRB1* 07 DRB1* 12 DRB1* 09 DRB1* 09 DRB1* 07 DRB1* 04 DRB1* 04 DRB1* 04 DRB1* 07 DRB1* 12 DRB1 *12 DRB1 *10 DRB1 *12 DRB1 *13 DRB1 *15 DRB1 *12 DRB1 *12 DRB1 *12 DRB1 *15 DRB1 *09 DRB1 *12 DRB1 *09 DRB1 *12 DRB1 *12 DRB1 *03 DQB1 *02 DQB1 *03 DQB1 *03 DQB1 *03 DQB1 *03 DQB1 *03 DQB1 *03 DQB1 *03 DQB1 *03 DQB1 *03 DQB1 *05 DQB1 *03 DQB1 *03 DQB1 *06 DQB1 *03 DQB1 *03 DQB1 *03 DQB1 *05 Blank Blank Blank Blank Blank Blank Blank Blank Blank Blank Blank Blank PHỤ LỤC E HÌNH ẢNH TRANG THIẾT BỊ CỦA PHỊNG THÍ NGHIỆM THỰC HIỆN NGHIÊN CỨU Phịng xét nghiệm Sinh học phân tử, Bệnh viện Trường Đại học Y Dược Cần Thơ Hình 1: Thực quy trình tách chiết DNA mẫu sinh thiết mẫu máu BN nghiên cứu Phịng thí nghiệm Sinh học phân tử, Viện nghiên cứu phát triển công nghệ sinh học, Trường Đại học Cần Thơ Hình 2: Hình thực quy trình khuếch đại gen LMP1 EBV chạy điện di sản phẩm mẫu nghiên cứu Hệ thống máy LabScan3DTM (máy Luminex, công nghệ XMAP, công ty Onelambda) đơn vị xét nghiệm - miễn dịch, Bệnh viện Chợ Rẫy Hình 3: Hệ thống máy LabScan3DTM PHỤ LỤC F MỘT SỐ HÌNH ẢNH VỀ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Hình ảnh khối u vịm mũi họng qua nội soi BN UTVMH nghiên cứu Hình 1: Hình ảnh khối u sùi vịm vị trí thành sau phải qua nội soi BN Đỗ Văn M., 49 tuổi, Vĩnh Long (Code 064) Kết mô bệnh học BN UTVMH nghiên cứu Hình 2: Kết mơ bệnh học ung thư biểu mơ khơng biệt hóa H.E 400X (A14-6056), BN Nguyễn Văn B., 62 tuổi, Cần Thơ (Code 025) Hình 3: Kết mơ bệnh học ung thư biểu mơ khơng biệt hóa H.E 400X (A15-960), BN Huỳnh Văn G., 45 tuổi, Sóc Trăng (Code 032) Hình 4: Kết hội chẩn tiêu với Bệnh viện K, Hà Nội Kết đo nồng độ độ tinh DNA Hình 5: Kết đo nồng độ (109.0 ng/µL) độ tinh DNA A260/A280 = 1,786 Kết điện di sản phẩm khuếch đại gen LMP1 EBV Hình 6: Hình ảnh điện di sản phẩm khuếch đại gen LMP1 EBV gel agarose Kết phân tích giải trình tự gen LMP1 EBV Hình 7: Hình kết phân tích giải trình tự mẫu 192 (Đột biến thêm nucleotide (168260-168295)) Kết gen HLA nhóm chứng Hình 8: Hình kết alen HLA nhóm chứng (STT 30) ... Nghiên cứu tỷ lệ biểu lộ đột biến gen LMP1 Virus Epstein-Barr HLA bệnh nhân ung thư vòm mũi họng Thành phố Cần Thơ ” thực 1.2 MỤC TIÊU ĐỀ TÀI (1) Xác định tỷ lệ diện đột biến gen LMP1 virus Epstein-Barr. .. luận án ? ?Nghiên cứu tỷ lệ biểu lộ đột biến gen LMP1 Virus Epstein-Barr HLA bệnh nhân ung thư vòm mũi họng Thành phố Cần Thơ? ?? hoàn thành dựa kết nghiên cứu thực hướng dẫn PGs.Ts.Trần Ngọc Dung Gs.TSKH.Phan... diện gen LMP1 EBV, tỷ lệ kiểu đột biến gen LMP1 đặc biệt kiểu đột biến đoạn 30 bp gen LMP1 EBV mẫu sinh thiết mơ ung thư vịm mũi họng tần suất alen HLA bệnh nhân ung thư vòm mũi họng thành phố Cần