Đang tải... (xem toàn văn)
Các phương pháp phát hiện E.Coli trong thực phẩm
[Type text] [Type text] [Type text]Trường Đại Học Kỹ Thuật – Công Nghệ TP.HCMKhoa Công Nghê Thực PhẩmĐề tài:-Tp.HCM tháng 11/2011-Mục lụcChương 1 : Tổng quan 4[Type text] Page 1 [Type text] [Type text] [Type text]I. Sơ lược về vi khuẩn E.coli 41. Đặc điểm sinh học 41.1 Hình thái 41.2 Tính chất nuôi cấy 41.3 Tính chất hóa sinh 51.4 Kháng nguyên 61.5 Phân loại 62. Khả năng gây bệnh 73. Chẩn đoán vi sinh vật 123.1 Chẩn đoán trực tiếp 123.2 Chẩn đoán gián tiếp 124. Nguyên tắc điều trị và phòng bệnh .134.1 Điều trị .134.2 Phòng bệnh .13Chương II : Các phương pháp phát hiện E.coli 14I. Phương pháp truyền thống 141. Định lượng E.coli bằng phương pháp MPN 141.1 Nguyên tắc .141.2 Quy trình phân tích .141.3 Cách đọc kết quả 152. Định lượng E.coli bằng phương pháp đếm khuẩn lạc 152.1 Nguyên tắc .152.2 Môi trường và hóa chất 152.3 Quy hoạch phân tích .162.4 Cách tính kết quả 16[Type text] Page 2 [Type text] [Type text] [Type text]3. Phương pháp làm giàu vi khuẩn .173.1 Nguyên lý .173.2 Thiết bị và đồ thủy tinh 173.3 Môi trường và thuốc thử .173.4 Cách làm 17II. Phương pháp hiện đại 221. Phương pháp PCR .221.1 Nguyên tắc .221.2 Môi trường tăng sinh 221.3 Môi trường phân lập .221.4 Trích ly DNA .221.5 Qui trình multiplex-PCR 241.6 Ưu và nhược điểm của phương pháp PCR 242. Phương pháp ELISA .252.1 Nguyên tắc .252.2 Các phương pháp ELISA 262.3 Phát hiện E.coli O157:H7 bằng phương pháp Elisa 292.4 Ứng dụng của kháng thể đơn dòng trong xác định E.coli O157:H7 302.5 Ưu điểm của phương pháp E.lisa 303. Phát hiện E.coli bằng phức hợp kháng thể + hạt nano silica phát quang 30Kết Luận .34Phụ Lục 35Tài liệu tham khảo .47[Type text] Page 3 [Type text] [Type text] [Type text]Chương I: TỔNG QUAN VỀ VI KHUẨN ESCHERICHIA COLII. SƠ LƯỢC VỀ VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI (E.COLI)Escherichia coli do Theodore Escherich (1857-1911), một nhà vi khuẩn học người Áo, phát hiện lần đầu tiên năm 1885. Chi Escherichia thuộc họ vi khuẩn đường ruột. Trong các loài thuộc chi này, E.coli được chọn làm điển hình và có vai trò quan trọng nhất trong y học.E.coli là một trong những thành viên chính của hệ vi khuẩn bình thường ở ruột nhưng cũng là căn nguyên của nhiều bệnh nhiễm trùng, trong đó có những bệnh nó là căn nguyên đứng đầu.E.coli đã được sử dụng làm mô hình nghiên cứu về sinh học phân tử trong lĩnh vực vi sinh học nói riêng và sinh học nói chung. [Type text] Page 4Hình 1.1: Hình chụp vi khuẩn E.coli dưới kính hiển vi với kích thước 2 µm [Type text] [Type text] [Type text]E.coli K12 là vi khuẩn được sử dụng làm mô hình nghiên cứu nhiều nhất. nhiều thành tựu về di truyền học, hóa sinh học đã được thu trên cơ sở nghiên cứu vi khuẩn này. Ngày nay E.coli cũng được sử dụng nhiều trong công nghệ sinh học.Mặc dù E.coli là loài vi khuẩn được nghiên cứu sâu nhất, cho đến nay nó vẫn tiếp tục được quan tâm nghiên cứu, với rất nhiều phát hiện mới ở tầm phân tử, đặc biệt cơ chế bệnh sinh của các type gây bệnh (pathotype).1. Đặc điểm sinh học1.1 Hình tháiE.coli là trực khuẩn Gram âm. Kích thước trung bình từ 2 đến 3µm x 0,5µm; trong những điều kiện không thích hợp (ví dụ như trong môi trường có kháng sinh) vi khuẩn có thể rất dài như sợi chỉ. Rất ít chủng E.coli có vỏ, nhưng hầu hết có lông và có khả năng di động.1.2. Tính chất nuôi cấyE.coli phát triển dễ dàng trên các môi trường nuôi cấy thông thường. Một số có thể phát triển trên môi trường tổng hợp rất nghèo chất dinh dưỡng. Hiếu kỵ khí tùy ý. Có thể phát triển ở nhiệt độ từ 5-400C. Nhiệt độ thích hợp xung quanh 370C.Trong điều kiện thích hợp E.coli phát triển rất nhanh, thời gian thế hệ chỉ khoảng 20 đến 30 phút. Cấy vào môi trường lỏng (như canh thang) sau 3 đến 4 giờ đã làm đục nhẹ môi trường, sau 24 giờ làm đục đều; sau hai ngày trên mặt môi trường có váng mỏng. Những ngày sau, dưới đáy ống có thể thấy lắng cặn. E.coli không mọc trên canh thang Selenit.Trên môi trường thạch thường, sau khoảng 8 đến 10 giờ, dung kính lúp đã có thể quan sát được khuẩn lạc. Sau 24 giờ khuẩn lạc có kích thước khoảng 1,5mm. Hình thái khuẩn lạc điển hình dạng S, nhưng có thể gặp dạng R, hoặc M. Trên môi trường phân lập, tùy theo chất chỉ thị màu, E.coli có khuẩn lạc màu vàng (như trên thạch lactose) hoặc màu đỏ (như trên thạch MacConkey). Không mọc được trên môi trường SS.Một số loại E.coli có tính chất nuôi cấy riêng có giá trị trong sàng lọc nhanh, như EAEC tạo thành váng đặc trường khi nuôi cấy trên canh thang Muller-Hinton.1.3. Tính chất hóa sinhE.coli có khả năng lên men nhiều loại đường và có sinh hơi. Hầu hết E.coli đều lên men lactose và sinh hơi, trừ E.coli trơ (inactive) (trong đó có EIEC) không hoặc lên men rất chậm. Một số chi khác trong họ vi khuẩn đường ruột cũng có khả năng lên men nhanh lactose (như Klebsiella, Enterobacter, Serratia và Citrobacter) được gộp vào một nhóm vi khuẩn có tên chung là coliform.[Type text] Page 5 [Type text] [Type text] [Type text]E.coli có khả năng sinh indole. Không sinh H2S. Không sử dụng được nguồn carbon của citrate trong môi trường Simmons. Có decarboxylase, vì vậy có khả năng khử carboxyl của lysine, ornithin, arginin và acid glutamic. Betagalactosidase dương tính. Thử nghiệm VP (Voges Proskauer) sau 24 giờ âm tính, sau 48 giờ có thể dương tính.Bảng 1.1: Tính chất hóa sinh của một số loài thuộc chi EscherichiaThử nghiệmCác loàiE.coli (bình thường)E.coli (inactive)E.blattaeE.fergusoniiE.hermanniiE.vulnerisE.albertiiCNPG + T - T + + -Indole + T - + + - -Đỏ methyl + + + + + + ?Voges-Proskauer- - - - - - -Citrate (Simmons)- - T T - - -Lysine decarboxylaseT T + + - T +Arginine dihydrolaseT - - - - T -Ornithine decarboxylaseT T + + + - +Di động + - - + + + -D-Glucose acid+ + + + + + +D-Glucose sinh hơi+ - + + + + +Lactose + T - - T T -Sucrose T T - - T - -D-Mannitol + + - + + + +Adonitol - - - + - - -Cellobiose - - - + + + -D-Sorbitol + T - - - - -D-Arabitol - - - - - - -L-Ramnose T T + + + + +Sinh sắc tố vàng- - - - + T - ONPG: Ortho-nitrophenyl-beta-Dgalactopyranoside+: >90% dương tính -: < 10% dương tính.T: 10-90% dương tính1.4. Kháng nguyên[Type text] Page 6 [Type text] [Type text] [Type text]Kháng nguyên O: người ta đã biết tới gần 160 yếu tố kháng nguyên O của E.coli.Kháng nguyên K: Khoảng 100 yếu tố kháng nguyên K đã được xác định và được chia thành ba loại: A, B và L, trong đó A dưới dạng vỏ quan sát được bằng kính hiển vi quang học thông thường, B và L dưới dạng màng rất mỏng chỉ có thể quan sát được nhờ kính hiển vi điện tử.Kháng nguyên H: hơn 50 yếu tố kháng nguyên H đã được xác định.1.5 Phân loạiDựa vào cấu trúc kháng nguyên, E.coli được chia thành các type huyết thanh. Với sự tổ hợp của các yếu tố kháng nguyên O, K và H sẽ có rất nhiều type huyết thanh khác nhau. Mỗi type huyết thanh được ký hiệu bằng kháng nguyên O và K, ví dụ O86B7 (yếu tố kháng nguyên O số 86, yếu tố kháng nguyên K số 7 loại B).Dựa vào vị trí gây bệnh các E.coli có khả năng gây bệnh ở người được chia thành 2 nhóm: thứ nhất là nhóm gây bệnh đường ruột (IPEC-intestinal pathogenic E.coli) hay E.coli gây tiên chảy (DEC-Dierrheagenic E.coli), thứ hai là nhóm gây bệnh ngoài đường ruột (ExPEC-extraintestinal pathogenic E.coli).- Các loại E.coli gây bệnh đường ruột (IPEC) đã được biết gồm:EPEC (Enteropathogenic E.coli): E.coli gây bệnh đường ruộtETEC (Enterotoxigenic E.coli): E.coli sinh độc tố ruộtEIEC (Enteroinvasive E.coli): E.coli xâm nhập ruộtEAEC (Enteroaggregative E.coli): E.coli ngưng tập ruộtDAEC (Diffusely adherent E.coli): E.coli bám dính phân tánEHEC (Enterohaemorrhagic E.coli): E.coli gây xuất huyết ruột- Hai loại E.coli gây bệnh ngoài đường ruột quan trọng nhất là:MAEC (Meningitidis-associated E.coli): E.coli gây viêm màng nãoUPEC (Uropathogenic E.coli): E.coli gây nhiễm khuẩn đường tiết niệu2. Khả năng gây bệnhE.coli là thành viên thuộc nhóm vi hệ bình thường của đường tiêu hóa, chiếm tỷ lệ cao nhất trong số các vi khuẩn hiếu khí (khoảng 80%). Tuy nhiên, E.coli cũng là 1 vi khuẩn gây bệnh quan trọng, nó đứng đầu trong các vi khuẩn gây tiêu chảy, viêm đường tiết niệu, viêm đường mật; đứng hàng đầu trong các căn nguyên gây nhiễm khuẩn huyết. E.coli là căn nguyên thường gặp trong viêm màng não, viêm phổi ở trẻ [Type text] Page 7 [Type text] [Type text] [Type text]mới sinh. E.coli còn gặp trong nhiễm trùng ngoại khoa, nhiễm trùng trong bỏng. Theo báo cáo của chương trình quốc gia giám sát tính kháng thuốc của các vi khuẩn gây bệnh thường gặp (1988-1994) thì E.coli đứng thứ hai (sau S.aureus) về tỷ lệ phân lập được (tính chung tất cả các loại bệnh phẩm) ở nước ta.Những type huyết thanh có khả năng gây bệnh thường gặp trên lâm sàng là: O111B4, O86B7, O126B16, O55B5, O119B4, O127B8, O26B6, O25B15, O128B12.Cơ chế gây bệnh của E.coli khác nhau tùy loại: ETEC-E.coli sinh độc tố ruộtHai yếu tố động lực quyết định khả năng gây bệnh của ETEC là: khả năng bám dính vào niêm mac ruột và sản xuất độc tố. Khả năng bám dính và cư trú trên tế bào biểu mô ruột non là điều kiện đầu tiên để có thể gây bệnh. Khả năng này có vai trò của kháng nguyên CFA (clonisation factor antigen) đã được mã hóa bởi gen trên plasmid.Quyết định khả năng gây tiêu chảy của ETEC là độc tố ruột. Có hai loại độc tố ruột: loại không chịu nhiệt LT (heat labile toxin) và loại chịu nhiệt ST (heat stable toxin). Một chủng E.coli có thể sinh một trong hai hoặc cả hai độc tố đó.Độc tố ruột LT là ngoại độc tố, gồm hai loại LT I được mã hóa bởi gen trên plasmid và LT II được mã hóa bởi gen trên nhiễm sắc thể. LT I và LT II có cấu trúc và cơ chế tác động giống nhau và giống với độc tố ruột của vi khuẩn tả. Cấu tạo của LT gồm 1 tiểu phần A (active) với phân tử lượng 25.000 Dalton và năm tiển phần B (binding) với phân tử lượng 11.500 Dalton. LT bám vào thụ thể GM1 của tế bào biểu mô ruột non nhờ tiểu phần B. Tiều phần A được đẩy vào tế bào biểu mô hoạt hóa enzyme adenylate cyclase làm tăng AMP vòng (cAMP-cyclic adenosine monophosphate), dẫn đến làm giảm hấp thu Na+, tăng tiết Cl-. Hậu quả của quá trình này là áp lực thẩm thấu trong lòng ruột tăng, nước được kéo từ tế bào ra lòng ruột gây tiêu chảy.Độc tố chịu nhiệt ST có trọng lượng phân tử xấp xỉ 5000 Dalton. ST tác động lên ruột bằng sự hoạt hóa enzyme guanylate cyclase làm tăng GMP vòng (cGMP-cyclic guanosine monophosphate). GMP vòng gây rối loạn chuyển hóa nước và điện giải giống như AMP vòng. ST còn làm mất hoặc làm teo một phần nhung mao của tế bào biểu mô ruột. Người ta đã nói đến ST-I và ST-II. ST-I gồm ST-Ia và ST-Ib. Hầu hết các chủng sản xuất ra ST-Ib phân lập được từ người, còn ST-Ia thì hầu hết từ động vật hoặc các thức ăn có nguồn gốc động vật. Chưa gặp các chủng sinh ST-II gây tiêu chảy ở người.Tiêu chảy do ETEC thường khởi phát đột ngột, phân toàn nước không có nhày, máu. EIEC-Ecoli xâm nhập ruột[Type text] Page 8 [Type text] [Type text] [Type text]EIEC gây bệnh chủ yếu do khả năng xâm nhập vào niêm mạc đại tràng. Khả năng xâm nhập được mã hóa bởi gen trên plasmid 140MDa. Các gen trên plasmid này mã hóa cho các kháng nguyên xâm nhập (IpaA đến IpaD, Ipa-Invasion plasmid antigen). EIEC cho kết quả (+) tính trong thử nghiệm khả năng gây viêm kết giác mạc chuột lang (thử nghiệm Sereny). EIEC còn có khả năng sản xuất độc tố ruột giống một số Shigela. Gen mã hóa cho độc tố này có tên là sen (Shigella enterotoxin). Cơ chế gây bệnh giống vi khuẩn lỵ. Vì vậy trong y văn hiện nay viết căn nguyên gây bệnh lỵ trực khuẩn (bacillary dysentery) gồm Shigella và EIEC. EIEC xâm nhập vào trong tế bào biểu mô đại tràng, làm tiêu các túi thực bào và nhân lên trong bào tương, phá hủy tế bào rối mới xâm lấn sang các tế bào khác. Tổn thương nhất chính là viêm loét hoại tử niêm mạc đại tràng. Triệu chứng lâm sàng điển hình là đi ngoài phân ít, có lẫn nhày máu.EAEC-E.coli bám dính kết tập ruộtEAEC thường gây tiêu chảy kéo dài hoặc mạn tính, nhất là ở trẻ em. Nó cũng là một trong những căn nguyên quan trọng của nhiễm khuẩn đường tiêu hóa ở khách du lịch. Cơ chế bệnh sinh trong tiêu chảy do EAEC vẫn chưa được sáng tỏ hoàn toàn. Những yếu tố động lực chính của EAEC được nói đến gồm các diềm bám dính kết tập AAF (aggregative adhesion fimbriae), Yếu tố điều hòa bám dính kết tập aggR, protein Pet và độc tố EAST-1 (enteroaggregative heat-stable toxin-1). Diềm bám dính kết tập được cho là yếu tố quyết định độc lực. Ba loại AAF đã được nói đến là AAF/I, AAF/II và AFF/III, trong đó loại I và II có cấu trúc bó, loại III có dạng sợi riêng biệt. Các AFF tạo nên kiểu bám dính hình chồng gạch trên tế bào Hep-2. Yếu tố aggR có vai trò điều hòa sự biểu hiện của các AFF. Protein Pet được tiết qua màng ngoài vi khuẩn, gây tích tụ dịch và gây độc cho biểu mô tiêu hóa. EAST-1 có khả năng phá hủy tế bào biểu mô. Ngoài các yếu tố dộc lực nêu trên EAEC còn tiết ra 1 protein có khả năng làm tan máu và làm mất thăng bằng vận chuyển ion qua màng.Các yếu tố độc lực nêu trên của EAEC phần lớn được mã hóa bởi các gen nằm trên plasmid có phân tử lượng 60 MDa. Một số yếu tố độc lực đực mã hóa bởi các gen trên nhiễm sắc thể đang được nghiên cứu.Khi nuôi cấy trên canh thang Muller-Hinton, EAEC tạo thành váng đặc trưng. Tính chất này được dùng để sàng lọc nhanh các chủng E.coli thuộc loại EAEC.Bảng 1.2: Tóm tắt các đặc điểm liên quan đến khả năng gây bệnh của các E.coli gây bệnh đường ruộtLoại E.coliGen động lựchoặc yếu tố độc lựcCơ chế gây bệnhĐặc điểmlâm sàngEPEC Plasmid 50-70 MDa (EAF):Mã hóa BFP (bundle-forming pilus), Per (plasmid-encoded regulator) và Ler (LEE-encoded regulator. PAI nhiễm Bám dính tại chỗ nhờ BFPTổn thương mô A/ECác tổn thương A/E[Type text] Page 9 [Type text] [Type text] [Type text]sắc thể (LEE)TTSS gồm: intimin (eaeA), các protein tiết; Tir, EspA, EspB, EspD, EspF, EspG và MAP (mitochondria-associated protein)EAST-1CDT (Cytolethal distending toxin)Tiêu chảy cấpETECETECCác CFA mã hóa bởi plasmid: CFA-I (fimbriae cứng), CFA-III (tạo bó), CFA-II và CFA-IV (fimbriae mềm) và pili dài liên quan với type IVĐộc tố chịu nhiệt LT I và LT II (mã hóa bởi plasmid)Độc tố vững bền với nhiệt STa và STb (mã hóa bởi plasmid và transposon)Bám vào niêm mạc ruột non (CFA I-IV) và sản xuất các độc tố ruột LTI, LTII, STa, STbHoạt hóa adenylate cyclase- tăng cAMP – giảm hấp thu Na+/tăng tiết Cl- - tiêu chảyHoạt hóa guanylate cyclase- tăng cGMP – tiết chloride và/hoặc giảm hấp thu NaCl – tiêu chảyTiêu chảy cấp, phân thường toàn nước không có nhầy máuEIECCác gen trên plasmid 140 MDa mã hóa các kháng nguyên xâm nhập (invasion plasmid antigen) IPaA – IpaDVi khuẩn bám và xâm nhập vào biểu mô đại tràng, nhân lên gây viêm loét hoại tử niêm mạc đại tràngHội chứng lỵ trực khuẩnEAECĐiểm bám dính kết tập AAF (aggregative adhesion fimbriae)Yếu tố điều hòa bám dính kết tập aggrProtein petĐộc tố EAST-1 (enteroaggregative heat-stable toxin-1)Protein làm tan máu và mất thăng bằng vận chuyển ion qua màngAAF tạo nên kiểu bám dính hình chồng gạchaggR điều hòa sự biểu hiện của AAFgây tích tụ dịch và gây độc tố cho biểu mô tiêu hóaEAST-1 phá hủy tế bào biểu môProtein làm tan máu và làm mất thăng bằng vận chuyển ion qua màngTiêu chảy kéo dài[Type text] Page 10 [...]... phát hiện các vi sinh vật gây bệnh trong thực phẩm Nhược điểm: - Sự ức chế Taq DNA polymerase bởi thành phần của mẫu vật do mẫu thực phẩm thường có những thành phần phức tạp Tuy nhiên, việc chiết tách và tinh chế DNA từ thực phẩm hay môi trường khi thực hiện phương pháp PCR thường cho phép loại bỏ những hợp chất ức chế - Mật độ vi sinh vật gây bệnh hiện diện trong mẫu thực phẩm thường thấp, nên trong. .. viên vì E.coli là một trong các vi khuẩn gây bệnh cơ hội quan trọng Để phòng nhiễm khuẩn đường tiết niệu do E.coli: thực hiện vệ sinh vùng hậu môn và bộ phận sinh dục ngoài, thực hiện nghiêm túc nguyên tắc vô trùng khi phải tiến hành thăm dò hoặc đặt thông đường tiết niệu Điều trị loại trừ các yếu tố nguy cơ khác Chương II: CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÁT HIỆN E.COLI I Phương pháp truyền thống 1 Định lượng E.coli. .. nhân gây ra các vụ ngộ độc thực phẩm nhưng phần lớn các trường hợp có nguồn gốc từ vi sinh vật Ngộ độc thực phẩm thường xảy ra do nguyên liệu dùng chế biến hay thực phẩm bị nhiễm vi khuẩn và độc tố của vi khuẩn Một trong những loại ngộc độc thực phẩm gây ra bởi vi sinh vật thường gặp là ngộ độc thực phẩm do vi khuẩn E.coli Trong thực tế cuộc sống, theo dõi khảo sát đảm bảo vệ sinh an toàn thực phẩm để... Thử nghiệm VP (a): E.coli (+); (b): E.coli (-) Hình 2.7: Thử nghiệm MR (a): E.coli (+); (b): E.coli (-) [Type text] Page 22 [Type text] [Type text] [Type text] Hình2.8 : Thử nghiệm Citrate với vi khuẩn E.coli (a): E.coli (+) (b): E.coli (-) II Phương pháp hiện đại 1 Phương pháp PCR (polymerase Chain Reaction) 1.1 Nguyên tắc Phương pháp PCR (Polymerase Chain Reaction) là một phương pháp invitro để tổng... quai ruột, phương pháp thử nghiệm trên tế bào nuôi, phương pháp đồng ngưng kết, ELISA… Kỹ thuật khuếch đại gen PCR cũng đã được áp dụng trong chẩn đoán E.coli Ở nước ta hiện nay chủ yếu mới sử dụng PCR trong định danh khi vi khuẩn đã được phân lập thuần nhất Các kỹ thuật PCR xác định E.coli trực tiếp từ bệnh phẩm đang được nghiên cứu phát triển 3.2 Chẩn đoán gián tiếp Trên thực tế phương pháp huyết... kít chuẩn PCR Phương pháp phát hiện E.coli O157:H7 trong thực phẩm mang tính pháp lý ở Việt Nam là sử dụng kỹ thuật làm giầu, xác định khuẩn lạc nghi ngờ E.coli O157:H7 trên đĩa thạch SMAC sau khi ủ ấm ở 37oC trong 24 giờ Từ những khuẩn lạc nghi ngờ, tiến hành kiểm tra các tính chất sinh hóa và ngưng kết đặc hiệu để khẳng định là E.coli O157:H7 Tuy nhiên, tất cả các phương pháp nêu trên... nhân), giải quyết các cản trở trên đường tiết niệu, rút ống thông sớm nếu có thể được 4.2 Phòng bệnh Hiện nay chưa có phương pháp nào phòng bệnh đặc hiệu Để đề phòng nhiễm khuẩn đường tiêu hóa do E.coli, thực hiện các biện pháp phòng bệnh chung không đặc hiệu giống như đối với các vi khuẩn đường ruột khác [Type text] Page 13 [Type text] [Type text] [Type text] Thực hiện các biện pháp ngăn ngừa nhiễm... trên là ống nghiệm có E.coli (+) Thực hiện tương tự cho tất cả các ông nghiệm cho kết quả (+) trong môi [Type text] Page 15 [Type text] [Type text] [Type text] trường EC và tạo được khuẩn lạc E.coli giả định trên môi trường EMB Ghi nhận số lượng các ống nghiệm có E.coli (+) ở mỗi độ pha loãng của mẫu 1.3 Cách đọc kết quả Ở tất cả các trường hợp nêu trên, từ số lượng các ông nghiệm có E.coli (+) ở mỗi độ... chuẩn trong nghiên cứu phân tích và phòng thí nghiệm thử nghiệm lâm sàng chẩn đoán Một sử dụng rất phổ biến trong các khảo nghiệm miễn dịch liên kết enzyme ( ELISA), các cơ sở xét nghiệm chẩn đoán y tế hiện đại nhất ở người và động vật Hình2.9: Đĩa giếng (microplate) Elisa đã được sử dụng rộng rãi dưới dạng các bộ hóa chất (kit) Elisa có thể sử dụng phát hiện và định lượng vi sinh trong thực phẩm trong. .. phẩm để hạn chế sự ô nhiễm và tác hại của vi khuẩn trong quá trình thu hoạch các sản phẩm nông nghiệp, chăn nuôi, đánh bắt hải sản đến quá trình ‘bảo quản chế biến và nấu nướng tới tay người tiêu dùng thường rất phức tạp và gặp nhiều khó khăn Do đó các phương pháp phát hiện vi khuẩn E.coli có vai trò quan trọng trong nhiệm vụ đảm bảo vệ sinh an toàn thực phẩm nhằm làm giảm tỷ lệ ngộ độc do vi khuẩn gây . (Enteroinvasive E. coli) : E. coli xâm nhập ruộtEAEC (Enteroaggregative E. coli) : E. coli ngưng tập ruộtDAEC (Diffusely adherent E. coli) : E. coli bám dính phân tánEHEC (Enterohaemorrhagic. ruột (IPEC) đã được biết gồm:EPEC (Enteropathogenic E. coli) : E. coli gây bệnh đường ruộtETEC (Enterotoxigenic E. coli) : E. coli sinh độc tố ruộtEIEC (Enteroinvasive
