BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT ẢNH HƢỞNG CỦA DUNG MÔI TÁCH CHIẾT ĐẾN HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA CAO CHIẾT TỪ CÂY XIDI KLUNG TẠI VƢỜN QUỐC GIA BIDOUP – NÚI BÀ, TỈNH LÂM ĐỒNG Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hƣớng dẫn : ThS Phạm Minh Nhựt Sinh viên thực Nguyễn Thị Thanh Phƣớc MSSV: 1211100297 : Lớp: 12DSH02 TP Hồ Chí Minh, 2016 Đồ án tốt nghiệp LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đồ án nghiên cứu riêng đƣợc thực sở lý thuyết, tiến hành nghiên cứu thực tiễn dƣới hƣớng dẫn ThS Phạm Minh Nhựt Các số liệu, kết nêu đồ án trung thực chƣa đƣợc công bố cơng trình nghiên cứu khác Tơi xin chịu trách nhiệm lời cam đoan Tp.Hồ Chí Minh, ngày… tháng… năm… Sinh viên Nguyễn Thị Thanh Phƣớc Đồ án tốt nghiệp LỜI CẢM ƠN Trƣớc hết, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Ban Giám Hiệu Trƣờng Đại học Cơng Nghệ Tp Hồ Chí Minh, quý thầy cô giảng dạy Khoa Công nghệ sinh học - Thực phẩm - Môi trƣờng tất thầy cô truyền dạy kiến thức quý báu cho em suốt năm học vừa qua Qua em xin đƣợc bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến thầy Phạm Minh Nhựt, ngƣời định hƣớng nghiên cứu, quan tâm, tận tình hƣớng dẫn giúp đỡ em suốt thời gian làm khoá luận tốt nghiệp Bên cạnh em xin cảm ơn thầy Phịng Thí nghiệm Khoa Cơng nghệ sinh học - Thực phẩm - Môi trƣờng anh chị, bạn bè nhiệt tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi để em hoàn thành tốt đề tài Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn đến gia đình ln bên cạnh, động viên lúc khó khăn, nản lịng suốt thời gian học tập, nghiên cứu nhƣ sống Tp Hồ Chí Minh, ngày tháng năm Sinh viên Nguyễn Thị Thanh Phƣớc Đồ án tốt nghiệp MỤC LỤC MỤC LỤC i DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT v DANH MỤC CÁC BẢNG vi DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH .vii MỞ ĐẦU CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Vai trò thuốc dân gian đời sống 1.1.1 Sơ lƣợc nguồn tài nguyên thuốc 1.1.2 Vai trò thuốc dân gian 1.1.3 Hoạt tính sinh học thuốc 1.2 Các thành phần hóa học từ thực vật 1.2.1 Carbohydrate 1.2.2 Alkaloid 1.2.3 Glycoside 10 1.2.4 Tannin 16 1.2.5 Steroid 16 1.2.6 Amino acid 17 1.2.7 Isoprenoid (terpene) 19 1.3 Tổng quan chế kháng khuẩn hợp chất có nguồn gốc từ thực vật.19 1.3.1 Khái niệm hoạt tính kháng khuẩn 19 1.3.2 Cơ chế kháng khuẩn 20 1.3.3 Một số hợp chất có khả kháng khuẩn từ thực vật 22 1.3.4 Tình hình nghiên cứu kháng khuẩn thực vật giới Việt Nam 28 1.3.5 Nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) 31 1.4 Ảnh hƣởng dung môi đến khả tách chiết cao từ thực vật 32 1.5 Tổng quan số nhóm vi khuẩn gây bệnh 33 1.5.1 Nhóm vi khuẩn Escherichia coli 33 i Đồ án tốt nghiệp 1.5.2 Nhóm vi khuẩn Salmonella spp 35 1.5.3 Nhóm vi khuẩn Shigella spp 36 1.5.4 Nhóm vi khuẩn Listeria spp 37 1.5.5 Nhóm vi khuẩn Vibrio spp 38 1.5.6 Nhóm vi khuẩn thuộc dịng Pseudomonas spp 40 1.5.7 Nhóm vi khuẩn thuộc dòng Enterococcus spp 41 1.5.8 Nhóm vi khuẩn Staphylococcus aureus 42 CHƢƠNG 2: NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 44 2.1 Địa điểm thời gian 44 2.1.1 Địa điểm nghiên cứu 44 2.1.2 Thời gian nghiên cứu 44 2.2 Vật liệu nghiên cứu 44 2.2.1 Nguồn mẫu 44 2.2.2 Vi khuẩn thị 44 2.2.3 Hóa chất, dung mơi 44 2.2.4 Dụng cụ thiết bị 45 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 46 2.3.1 Phƣơng pháp thu xử lý nguồn mẫu 46 2.3.2 Phƣơng pháp tách chiết thu nhận cao thực vật 46 2.3.3 Phƣơng pháp bảo quản giữ giống vi sinh vật 47 2.3.4 Phƣơng pháp tăng sinh, xác định mật độ tế bào vi sinh vật thị 48 2.3.5 Phƣơng pháp pha loãng mẫu 49 2.3.6 Phƣơng pháp đánh giá hoạt tính kháng khuẩn 49 2.3.7 Phƣơng pháp xác định nồng độ ức chế tối thiểu MIC 51 2.3.8 Phƣơng pháp xác định thành phần hóa học có cao chiết 51 2.3.9 Phƣơng pháp xử lý số liệu 54 2.4 Bố trí thí nghiệm 55 2.4.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hƣởng dung môi tách chiết đến hiệu suất thu hồi cao chiết từ Xidi Klung 56 ii Đồ án tốt nghiệp 2.4.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hƣởng loại dung mơi tách chiết đến hoạt tính kháng khuẩn cao chiết 59 2.4.3 Thí nghiệm 3: Xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) cao chiết ethanol 70% từ Xidi Klung chủng vi khuẩn gây bệnh 62 2.4.4 Thí nghiệm 4: Định tính số thành phần hóa học cao chiết ethanol 70% từ Xidi Klung 65 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 68 3.1 Kết đánh giá hiệu suất thu hồi cao chiết Xidi Klung từ dung môi tách chiết khác 68 3.2 Kết khảo sát hoạt tính kháng khuẩn cao chiết Xidi Klung với loại dung môi tách chiết khác chủng vi khuẩn gây bệnh 69 3.2.1 Kết hoạt tính kháng khuẩn loại cao chiết nhóm vi khuẩn Escherichia coli 70 3.2.2 Kết hoạt tính kháng khuẩn loại cao chiết nhóm vi khuẩn Listeria spp 71 3.2.3 Kết hoạt tính kháng khuẩn loại cao chiết nhóm vi khuẩn Salmonella spp 73 3.2.4 Kết hoạt tính kháng khuẩn loại cao chiết nhóm vi khuẩn Shigella spp 75 3.2.5 Kết hoạt tính kháng khuẩn loại cao chiết nhóm vi khuẩn Vibrio spp 77 3.2.6 Kết hoạt tính kháng khuẩn loại cao chiết nhóm vi khuẩn gây bệnh hội da 78 3.2.7 Tổng hợp kết hoạt tính kháng khuẩn loại cao chiết 20 vi khuẩn gây bệnh 80 3.3 Kết xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) cao chiết Xidi Klung từ ethanol 70% chủng vi khuẩn gây bệnh 84 3.4 Kết định tính số thành phần hóa học cao chiết Xidi Klung từ ethanol 70% 87 iii Đồ án tốt nghiệp CHƢƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 91 4.1 Kết luận 91 4.2 Đề nghị 91 TÀI LIỆU THAM KHẢO 92 iv Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT DMSO: Dimethyl sulfoxide DNA: Deoxyribonucleic acid MIC: Minimum Inhibition Concentration: Nồng độ ức chế tối thiểu RNA: Ribonucleic acid TSA: Trypton Soya Agar TSB: Trypton Soya Broth v Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Chức sinh lý số amino acid trình trao đổi chất 18 Bảng 1.2 Những nhóm hợp chất tự nhiên có hoạt tính kháng khuẩn (theo Cowan, 1999) 21 Bảng 3.1 Kết đƣờng kính vịng ức chế (mm) cao chiết Xidi Klung từ loại dung môi khác 20 chủng vi khuẩn gây bệnh 81 Bảng 3.2 Nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) cao chiết Xidi Klung từ ethanol 70% 20 chủng vi khuẩn gây bệnh 85 Bảng 3.3 Kết định tính số thành phần hóa học cao chiêt Xidi Klung từ ethanol 70% .88 vi Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Sơ đồ phân loại nhóm carbohydrate Hình 1.2 Cấu trúc hóa học số chất thuộc nhóm alkaloid Hình 1.3 Sơ đồ phân loại glycoside 10 Hình 1.4 Sơ đồ phân loại nhóm saponin 11 Hình 1.5 Cấu trúc hóa học flavonoid (A) dạng flavonoid 14 (B) Euflavonoid, (C) Isoflavonoid, (D) Neoflavonoid 14 Hình 1.6 Caffeic acid .15 Hình 1.7 Phân loại nhóm phenolics theo cấu trúc hóa học 15 Hình 1.8 Những vị trí vi khuẩn bị tác động hợp chất thực vật (Burt, 2004) 20 Hình 1.9 Cấu trúc hóa học phân tử quinone, anthraquinone hypericin 23 Hình 1.10 Cấu trúc hóa học catechine .24 Hình 1.11 Cấu trúc hóa học coumarine .25 Hình 1.12 Cấu trúc hóa học phân tử Solamargine 26 Hình 1.13 Cấu trúc hóa học berberine .27 Hình 1.14 E.coli quan sát dƣới kính hiển vi với kích thƣớc µm (Bact, 2005) 34 Hình 1.15 Hình thái vi khuẩn Salmonella spp (Taragui, 2005) 35 Hình 1.16 Hình thái vi khuẩn Shigella spp (Reynolds, 2011) 37 Hình 1.17 Vi khuẩn Listeria spp 38 Hình 1.18 Hình thái vi khuẩn Vibrio spp (Microscopy, 2004) .39 Hình 1.19 Vi khuẩn Pseudomonas 40 Hình 1.20 Vi khuẩn Enterococcus 41 vii Đồ án tốt nghiệp Bảng Multiple range test Method: 95.0 percent Tukey HSD ETEC MeOH EtOH90 EtOH50 NUOC EtOH70 CIP Count 3 3 3 Mean 9.5 10.1667 10.6667 11.1667 11.6667 31.0 Homogeneous Groups X XX XX XX X X C.2 Kết xử lý số liệu thống kê khảo sát hoạt tính kháng khuẩn loại cao chiết từ Xidi Klung nhóm vi khuẩn Listeria spp C.2.1 L innocua Bảng one way ANOVA Source Sum of Df Squares Between groups 10.0694 Within groups 3.16667 12 Total (Corr.) 13.2361 17 Bảng Multiple range test Mean F-Ratio P-Value Square 2.01389 7.63 0.0019 0.263889 Method: 95.0 percent Tukey HSD LISINNO Count Mean NUOC 10.0 EtOH50 11.3333 EtOH90 11.3333 EtOH70 11.8333 CIP 12.0 MeOH 12.3333 C.2.2 L Monocytogene Homogeneous Groups X XX XX X X X Bảng one way ANOVA Source Sum of Squares Between groups 303.903 Within groups 8.5 Total (Corr.) 312.403 Df 12 17 Mean F-Ratio P-Value Square 60.7806 85.81 0.0000 0.708333 Đồ án tốt nghiệp Bảng Multiple range test Method: 95.0 percent Tukey HSD LISMONO NUOC MeOH EtOH50 EtOH90 EtOH70 CIP Count 3 3 3 Mean 0.0 8.83333 10.0 10.5 11.6667 12.1667 Homogeneous Groups X X XX XX X X C.3 Kết xử lý số liệu thống kê khảo sát hoạt tính kháng khuẩn loại cao chiết từ Xidi Klung nhóm vi khuẩn Salmonella spp C.3.1 S dublin Bảng one way ANOVA Source Sum of Df Squares Between groups 468.069 Within groups 2.33333 12 Total (Corr.) 470.403 17 Bảng Multiple range test Mean Square 93.6139 0.194444 Method: 95.0 percent Tukey HSD SDUBLIN Count Mean MeOH NUOC EtOH70 EtOH90 EtOH50 CIP 3 3 3 0.0 0.0 10.0 10.0 10.6667 12.1667 Homogeneous Groups X X X X X X F-Ratio 481.44 P-Value 0.0000 Đồ án tốt nghiệp C.3.2 S enteritidis Bảng one way ANOVA Source Sum of Squares Between groups 330.111 Within groups 2.66667 Total (Corr.) 332.778 Bảng Multiple range test Df 12 17 Mean F-Ratio P-Value Square 66.0222 297.10 0.0000 0.222222 Method: 95.0 percent Tukey HSD SENTER NUOC MeOH EtOH90 EtOH50 EtOH70 CIP Count 3 3 3 Mean 0.0 10.0 10.3333 11.6667 12.1667 12.1667 Homogeneous Groups X X X X X X C.3.3 S typhii Bảng one way ANOVA Source Sum of Df Mean Square F-Ratio P-Value Squares Between groups 19.7361 3.94722 25.84 0.0000 Within groups 1.83333 12 0.152778 Total (Corr.) 21.5694 17 Bảng Multiple range test Method: 95.0 percent Tukey HSD STYPHII MeOH EtOH50 EtOH90 EtOH70 NUOC CIP Count 3 3 3 Mean Homogeneous Groups 9.0 X 10.3333 X 10.3333 X 11.0 X 11.0 X 12.5 X Đồ án tốt nghiệp C.3.4 S typhimurium Bảng one way ANOVA Source Sum of Squares Between groups 4.66667 Within groups 2.83333 Total (Corr.) 7.5 Bảng Multiple range test Df 12 17 Mean Square 0.933333 0.236111 F-Ratio P-Value 3.95 0.0237 Method: 95.0 percent Tukey HSD STYPHIMURIUM EtOH70 EtOH50 CIP MeOH EtOH90 NUOC Count 3 3 3 Mean 9.83333 10.6667 11.0 11.0 11.0 11.5 Homogeneous Groups X XX XX XX XX X C.4 Kết xử lý số liệu thống kê khảo sát hoạt tính kháng khuẩn loại cao chiết từ Xidi Klung nhóm vi khuẩn Shigella spp C.4.1 S boydii Bảng one way ANOVA Source Sum of Squares Between groups 380.611 Within groups 1.83333 Total (Corr.) 382.444 Bảng Multiple range test Df 12 17 Mean Square 76.1222 0.152778 F-Ratio P-Value 498.25 Method: 95.0 percent Tukey HSD SHIBOYDII NUOC CIP MeOH EtOH90 EtOH50 EtOH70 Count 3 3 3 Mean 0.0 0.0 8.83333 9.0 10.3333 10.5 Homogeneous Groups X X X X X X 10 0.0000 Đồ án tốt nghiệp C.4.2 S flexneri Bảng one way ANOVA Source Sum of Squares Between groups 40.4583 Within groups 4.16667 Total (Corr.) 44.625 Bảng Multiple range test Df Mean F-Ratio Square 8.09167 23.30 12 0.347222 17 P-Value 0.0000 Method: 95.0 percent Tukey HSD SHIFLEXNERI MeOH NUOC EtOH90 EtOH50 EtOH70 CIP Count 3 3 3 Mean 8.66667 9.33333 10.5 11.0 11.8333 13.1667 Homogeneous Groups X XX XX X XX X C.4.3 S sonnei Bảng one way ANOVA Source Sum of Df Mean Squares Square Between groups 1342.57 268.514 Within groups 3.16667 12 0.263889 Total (Corr.) 1345.74 17 Bảng Multiple range test F-Ratio 1017.53 Method: 95.0 percent Tukey HSD SHISONNEI NUOC MeOH EtOH90 EtOH70 EtOH50 CIP Count 3 3 3 Mean 8.5 8.5 9.66667 11.5 13.0 33.0 Homogeneous Groups X X X X X X 11 P-Value 0.0000 Đồ án tốt nghiệp C.5 Kết xử lý số liệu thống kê khảo sát hoạt tính kháng khuẩn loại cao chiết từ Xidi Klung nhóm vi khuẩn Vibrio spp C.5.1 V algino Bảng one way ANOVA Source Sum of Df Mean Squares Square Between groups 449.569 89.9139 Within groups 55.1667 12 4.59722 Total (Corr.) 504.736 17 Bảng Multiple range test F-Ratio 19.56 P-Value 0.0000 Method: 95.0 percent Tukey HSD VALGINO NUOC MeOH EtOH70 EtOH90 EtOH50 CIP Count 3 3 3 Mean 0.0 6.0 10.5 10.5 11.0 16.1667 Homogeneous Groups X X XX XX XX X C.5.2.V cholerea Bảng one way ANOVA Source Sum of Df Mean Squares Square Between groups 364.736 72.9472 Within groups 3.66667 12 0.305556 Total (Corr.) 368.403 17 Bảng Multiple range test F-Ratio 238.74 Method: 95.0 percent Tukey HSD VCHOLEREA NUOC EtOH90 MeOH EtOH70 EtOH50 CIP Count 3 3 3 Mean 0.0 10.6667 10.8333 12.0 12.3333 13.3333 Homogeneous Groups X X XX XXX XX X 12 P-Value 0.0000 Đồ án tốt nghiệp C.5.3 V Harveyi Bảng one way ANOVA Source Sum of Df Mean Squares Square Between groups 493.667 98.7333 Within groups 1.83333 12 0.152778 Total (Corr.) 495.5 17 Bảng Multiple range test F-Ratio 646.25 P-Value 0.0000 Method: 95.0 percent Tukey HSD VHARVEYI NUOC EtOH90 EtOH70 MeOH EtOH50 CIP Count 3 3 3 Mean Homogeneous Groups 0.0 X 9.83333 X 10.0 X 10.5 X 10.6667 X 18.0 X C.5.4.V.para Bảng one way ANOVA Source Sum of Squares Between groups 281.736 Within groups 5.33333 Total (Corr.) 287.069 Bảng Multiple range test Df 12 17 Mean Square 56.3472 0.444444 F-Ratio 126.78 Method: 95.0 percent Tukey HSD VPARA NUOC MeOH EtOH90 EtOH70 EtOH50 CIP Count 3 3 3 Mean 0.0 9.33333 9.83333 10.3333 11.3333 11.3333 Homogeneous Groups X X XX XX X X 13 P-Value 0.0000 Đồ án tốt nghiệp C.6 Kết xử lý số liệu thống kê khảo sát hoạt tính kháng khuẩn loại cao chiết từ Xidi Klung nhóm vi khuẩn gây bệnh hội da C.6.1 P aeruginosa Bảng one way ANOVA Source Sum of Df Mean Squares Square Between groups 319.333 63.8667 Within groups 2.66667 12 0.222222 Total (Corr.) 322.0 17 Bảng Multiple range test F-Ratio 287.40 P-Value 0.0000 Method: 95.0 percent Tukey HSD PSEU NUOC EtOH90 MeOH EtOH70 EtOH50 CIP Count 3 3 3 Mean 0.0 9.66667 9.83333 11.3333 12.0 12.1667 Homogeneous Groups X X X X X X C.6.2 S aureus Bảng one way ANOVA Source Sum of Df Mean Squares Square Between groups 328.167 65.6333 Within groups 3.33333 12 0.277778 Total (Corr.) 331.5 17 Bảng Multiple range test F-Ratio P-Value 236.28 Method: 95.0 percent Tukey HSD SAUREUS NUOC MeOH EtOH90 EtOH70 EtOH50 CIP Count 3 3 3 Mean Homogeneous Groups 0.0 X 9.33333 X 11.1667 X 11.6667 X 11.6667 X 12.1667 X 14 0.0000 Đồ án tốt nghiệp C.6.3 E.feacalis Bảng one way ANOVA Source Sum of Df Mean Squares Square Between groups 286.944 57.3889 Within groups 3.0 12 0.25 Total (Corr.) 289.944 17 Bảng Multiple range test F-Ratio 229.56 Method: 95.0 percent Tukey HSD EFEACALIS NUOC MeOH EtOH90 EtOH50 EtOH70 CIP Count 3 3 3 Mean 0.0 8.5 9.33333 10.3333 11.1667 12.0 Homogeneous Groups X X XX XX XX X 15 P-Value 0.0000 Đồ án tốt nghiệp PHỤ LỤC D CÁCH PHA CÁC LOẠI THUỐC THỬ D.1 Thuốc thử Molisch Hòa tan 5g α- napthol vào ethanol 95% pha loãng thành 100 ml D.2 Thuốc thử Fehling * Thuốc thử Fehling A: 34,6 g CuSO4.5H2O đƣợc hòa tan hồn tồn vào nƣớc cất, sau tiếp tục định mức đến 500ml * Thuốc thử Fehling B: Hòa tan 125g KOH 173g Kali Natri tartrate.7H2O vào nƣớc cất định mức 500ml D.3 Thuốc thử Barfoed Cân 66,5g Copper (II) acetate monohydrate hòa tan vào dung dịch gồm 10 ml acid acetic glacial 1000ml nƣớc cất Hỗn hợp đƣợc mang đun khuấy đến tan hoàn toàn D.4.Thuốc thử Mayer: Hòa tan 1,358g HgCl2 60ml nƣớc cất Tiếp tục cân 5g KI hòa tan 10ml nƣớc cất Sau tiến hành trộn dung dịch lại với định mức nƣớc cất đến100 ml D.5 Thuốc thử Dragendroff: Gồm dung dịch: -Dung dịch A: hòa tan 0,5 g Bismuth nitrate (Bi(NO3)3.5H2O) 20 ml acid acetic 20% -Dung dịch B: dung dịch KI 40% hòa tan nƣớc cất Khi sử dụng, trộn 20 ml dung dịch A với ml dung dịch B 70ml nƣớc cất D.6 Thuốc thử Hager Hòa tan g acid picric vào 100ml nƣớc cất, sau lọc dung dịch thu dịch lọc D.7 Thuốc thử Wagner Hòa tan 2g I2 6g KI vào nƣớc cất định mức đến 100ml Thuốc thử dung dịch tan hoàn toàn, tránh tiếp xúc ánh sáng D.8 Natri nitro prusside Hòa tan 1g Natri nitroferricyanide vào 10 ml nƣớc cất 16 Đồ án tốt nghiệp D.9 Thuốc thử Resazurin Resazurin có dạng viên nén, nghiền nhuyễn viên Resazurin hòa tan với 100 ml nƣớc cất vô trùng, bảo quản tủ lạnh 17 Đồ án tốt nghiệp PHỤ LỤC E KẾT QUẢ HÌNH ẢNH XÁC ĐỊNH MỘT SỐ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CAO CHIẾT TỪ XIDI KLUNG TỪ ETHANOL 70% E.1 Kết dƣơng tính thử nghiệm định tính Carbohydrate A C B A Thử nghiệm Molisch; B Thử nghiệm Fehling; C Thử nghiệm Benedict E.2 Kết dƣơng tính thử nghiệm định tính Saponin Thử nghiệm Foam 18 Đồ án tốt nghiệp E.3 Kết dƣơng tính thử nghiệm định tính Alkaloids A B D C A Thử nghiệm Mayer; B Thử nghiệm Dragendroff C Thử nghiệm Hager; D Thử nghiệm Wagner E.4 Kết dƣơng tính thử nghiệm định tính Cardiac Glycosides A B A Thử nghiệm Legal; B Thử nghiệm Keller Killiani 19 Đồ án tốt nghiệp E.5 Kết dƣơng tính thử nghiệm định tính Flavonoids A Thử nghiệm Alkaline a) trƣớc cho HCl vào; b) sau cho HCl vào; B Thử nghiệm Shinoda; C Thử nghiệm Ferric chloride E.6 Kết dƣơng tính thử nghiệm định tính hợp chất Phenolic A B A Thử nghiệm Lead Acetate; B Thử nghiệm Gelatin 20 Đồ án tốt nghiệp E.7 Kết dƣơng tính thử nghiệm định tính Tannin A Thử nghiệm Ferric chloride; B Thử nghiệm Lead acetate E.8 Kết dƣơng tính thử nghiệm định tính Steroid Thử nghiệm Libermann Burchard 21 ... tiễn trên, tiến hành thực đề tài: ? ?Khảo sát ảnh hƣởng dung mơi tách chiết đến hoạt tính kháng khuẩn cao chiết từ Xidi Klung vƣờn Quốc gia Bidoup – Núi Bà, tỉnh Lâm Đồng” Đề tài đƣợc thực Phịng... (MIC) cao chiết Xidi Klung - Khảo sát sơ thành phần hóa học cao chiết từ Xidi Klung Nội dung nghiên cứu - Đánh giá ảnh hƣởng loại dung môi đến hiệu suất thu hồi cao chiết từ Xidi Klung với dung môi. .. 68 3.2 Kết khảo sát hoạt tính kháng khuẩn cao chiết Xidi Klung với loại dung môi tách chiết khác chủng vi khuẩn gây bệnh 69 3.2.1 Kết hoạt tính kháng khuẩn loại cao chiết nhóm vi khuẩn Escherichia