Đang tải... (xem toàn văn)
Luận văn xác định tỷ lệ kiểu gen và alen của 2 điểm đa hình gen TNF-α – 308, TGF-β1-509 ở bệnh nhân UTBMTBG có HBsAg (+). Phân tích mối liên quan của đa hình gen TNF-α – 308, TGF-β1- 509 với nguy cơ UTBMTBG và một số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng của bệnh nhân UTBMTBG có HBsAg (+).
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHỊNG HỌC VIỆN QN Y PHAN THỊ HIỀN LƯƠNG NGHIÊN CỨU ĐA HÌNH GEN TNF α – 308 VÀ TGF β 509 Ở BỆNH NHÂN UNG THƯ BIỂU MƠ TẾ BÀO GAN CĨ HBsAg DƯƠNG TÍNH Chun ngành: Nội khoa Mã số: 9 72 01 07 TĨM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI 2020 CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HỒN THÀNH TẠI HỌC VIỆN QN Y Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS. Nguyễn Bá Vượng PGS.TS. Trần Việt Tú Phản biện 1: PGS. TS Vũ Văn Khiên Phản biện 2: GS. TS Nơng Văn Hải Phản biện 3: PGS. TS Hồng Thanh Tuyền Luận án sẽ được bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án cấp trường họp tại Học viện Qn y vào hồi: giờ ngày tháng năm Có thể tìm hiểu luận án tại: Thư viện Quốc Gia Thư viện Học viện Quân Y ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư biểu mơ tế bào gan (UTBMTBG) là bệnh lý ác tính hay gặp có ngun nhân chính do nhiễm viêm gan virus B (HBV) mạn. Đây là loại ung thư có tiên lượng xấu với thời gian sống thêm ngắn, liên quan đến chẩn đốn sớm cịn nhiều hạn chế. Đa hình gen (SNP: Single nucleotide polymorphism) của vật chủ đóng vai trị quan trọng, quyết định đáp ứng miễn dịch của cơ thể nhiễm HBV, ảnh hưởng đến trình hình thành UTBMTBG Nghiên cứu đa hình gen giúp phân tầng đối tượng nguy cơ, cải thiện phát sớm, tăng quả điều trị. Gần đây, nhiều nghiên cứu cho thấy điểm đa hình TNF α 308 G>A và TGF–β1509 C>T liên quan đến tăng nguy bị UTBMTBG. Người mang alen A của TNF α – 308 G>A, alen T của TGF–β1 509 C>T tăng nguy cơ bị UTBMTBG cao hơn người mang alen cịn lại. Các điểm đa hình trên ảnh hưởng đến tiến triển UTBMTBG thơng qua việc kiểm sốt nồng độ các cytokine tương ứng Trong vi mơi trường sinh u các cytokine này tương tác, hỗ trợ, tăng cường tác dụng của nhau. Việt Nam là quốc gia có tỷ lệ nhiễm HBV và mắc UTBMTBG cao với những hậu quả vơ cùng nặng nề. Tuy nhiên, cho đến nay chưa có nghiên cứu nào đánh giá ảnh hưởng của 2 điểm đa hình trên với nguy cơ UTBMTBG. Vì vậy, đề tài “Nghiên cứu đa hình gen TNFα 308 G>A và TGFβ 1509C>T ở bệnh nhân UTBMTBG có HBsAg dương tính” được tiến hành với 2 mục tiêu: Xác định tỷ lệ kiểu gen và alen của 2 điểm đa hình gen TNF α – 308, TGFβ1509 ở bệnh nhân UTBMTBG có HBsAg (+) Phân tích mối liên quan của đa hình gen TNFα – 308, TGF β1 509 với nguy cơ UTBMTBG và một số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng của bệnh nhân UTBMTBG có HBsAg (+) * Những đóng góp mới của luận án Là cơng trình đầu tiên tại Việt Nam nghiên cứu về tỷ lệ kiểu gen, alen của TNFα – 308 G>A, TGF–β1 509 C>T trên người khỏe mạnh, viêm gan B mạn và UTBMTBG có HBsAg (+) * TNFα – 308 G>A + Kiểu gen AA chỉ xuất hiện ở nhóm UTBMTBG là 0,98%, tỷ lệ alen của A TNF α – 308 thấp ở người khỏe mạnh chiếm 5,4%, có sự tương đồng với quần thể người châu Á + Tỷ lệ alen A ở nhóm khỏe mạnh, VGBM và UTBMTBG lần lượt là 5,4%, 5,83% và 13,2%. Có sự khác biệt về tỷ lệ kiểu gen GG, GA, kiểu alen giữa các nhóm UTBMTB so với khỏe mạnh, VGMT * TGF–β1 509 C>T + Tỷ lệ alen T ở nhóm khỏe mạnh, VGBM và UTBMTBG lần lượt là 52,9%; 61,67%; 63,24%. Có sự khác biệt về tỷ lệ alen ở nhóm UTBMTBG và khỏe mạnh Đê tai đa chi ra ̀ ̀ ̃ ̉ alen A, kiểu gen chứa alen A của TNF α 308 tăng nguy cơ bị UTBMTBG so với alen G và kiểu gen chứa alen G Alen T, kiểu gen chứa alen T TGFβ1509 tăng nguy cơ bị UTBMTBG so với alen C và kiểu gen chứa alen C Hai điểm đa hình gen tương tác hiệp đồng gây tăng nguy cơ bị UTBMTBG * Bố cục của luận án Luận án gồm 113 trang (chưa kể tài liệu tham khảo và phụ lục) trong đó: Đặt vấn đề 02 trang; Chương 1 Tổng quan 31 trang; Chương Đối tượng phương pháp nghiên cứu 17 trang; Chương 3 Kết quả nghiên cứu 30 trang; Chương 4 Bàn luận 30 trang; Kết luận 02 trang; Kiến nghị 01 trang. Luận án có 46 bảng, 23 hình và 125 tài liệu tham khảo (14 tài liệu tiếng Việt và 111 tài liệu tiếng Anh) CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đại cương ung thư biểu mơ tế bào gan UTBMTBG là loại ung thư đứng hàng thứ 6 trong 10 loại ung thư phổ biến trên tồn cầu. Nằm trong khu vực Đơng Nam Á, điểm nóng của thế giới về UTBMTBG, Việt Nam có tỷ lệ mắc bệnh cao Tương ứng với tỷ lệ mắc và tử vong cao UTBMTBG, thực trạng nhiễm HBV cũng rất đáng lo ngại, theo Robert G.G và cs (2011) Việt Nam là một trong những quốc gia có tỷ lệ nhiễm HBV cao nhất thế giới với gần 12% người có HBsAg (+), khoảng 10 triệu người chung sống với HBV mạn. Năm 2018, GLOBOCAN công bố tỷ lệ mắc UTBMTBG chuẩn theo tuổi (ASRI) tính chung cho hai giới tại Việt Nam là 23,2 xếp thứ 4 tồn cầu. UTBMTBG có mối liên quan chặt chẽ với nhiễm HBV Tuy nhiên, trên thực tế khơng phải bệnh nhân nhiễm HBV nào cũng phát triển thành UTBMTBG. Do đó, cả HBV và cơ thể vật chủ đều có vai trị quan trọng, tương tác với nhau gây nên bệnh cảnh cuối 1.2. Khái niệm đa hình nucleotide đơn (SNP) Bộ gen người, phần lớn được bảo tồn trong q trình tiến hóa, ít nhất 99,5% số gen giữa hai cá thể bất kỳ sẽ giống hệt nhau, như vậy sự khác biệt chỉ chiếm 0,1% 0,5%. Đây là điểm mấu chốt tạo ra mỗi cá thể là duy nhất do có các đặc điểm, tính trạng khác nhau (hình dạng, bệnh di truyền …). Nhiều yếu tố trong hệ gen góp phần tạo nên khác biệt trên, trong đó SNP đóng vai trị quan trọng. SNP được định nghĩa là sự thay đổi base đơn lẻ trên một chuỗi trình tự DNA, thay đổi này chiếm tỉ lệ ≥ 1% trong cộng đồng lớn và được tiếp tục di truyền. SNP có thể nằm ở các vùng khác nhau của gen, tại vùng khởi động gen (promoter), đóng vai trị quan trọng giúp kiểm sốt sự bắt đầu và mức độ sao chép gen Gen TNFα – 308 G>A Gen TNFα (Tumor necrosis factor alpha) nằm ở locus 21.3 của nhánh ngắn NST 6 (6p21.3), gen TNFα có nhiều điểm đa hình. Trong đó, điểm đa hình tại vị trí 308 tại vùng khởi động có vai trị quan trọng. SNP này có 2 alen: alen G và alen A, trong đó alen A chiếm tỷ lệ thấp hơn. Tỷ lệ kiểu gen và alen của đa hình đơn TNFα 308G>A đa dạng ở các quần thể khác nhau Gen TGFβ1 509C>T Gen TGFβ1 (Transforming Growth Factor, Beta 1) nằm trên nhánh dài của NST số 19 (19q13.113.3). Nhiều điểm đa hình đơn đã được xác định trên gen TGFβ1, trong đó SNP tại vị trí C509T thuộc vùng khởi động của gen là điểm đa hình quan trọng liên quan đến khả năng sao chép gen, sản xuất TGF β huyết tương. Tỷ lệ kiểu alen và gen của TGFβ1 – 509 C>T khá đa dạng các quần thể khác nhau. 1.3. TNFα 308G>A, TGFβ1509C>T và nguy cơ ung thư biểu mơ tế bào gan Gần đây hàng loạt nghiên cứu trên thế giới đã tiến hành cho thấy ảnh hưởng đa hình gen TNFα 308 G/A, TGFβ1509 C>T với nguy cơ viêm gan mạn và UTBMTBG do virus viêm gan, các tác giả cho đa hình gen ảnh hưởng tới nguy cơ UTBMTBG thơng qua việc kiểm sốt nồng độ TNFα, TGFβ huyết tương Gen TNFα 308 G/A Teixeira A.C. và cs (2013) nghiên cứu liên quan đa hình TNFα 308 G/A với nguy cơ bị UTBMTBG tại Brazil trên 120 bệnh nhân ung thư 202 người khỏe mạnh Kết tăng nguy cơ UTBMTBG người mang alen A, gen GA của TNF– α – 308 so với alen G và gen GG là (OR = 1,82; 95%CI = 1,073,08; p=0.0351), (OR = 2,51, 95%CI = 1,394,51; p = 0,0031) Tsai J. F. và cs (2017) tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng của TNF – α – 308 G/A với nguy cơ UTBMTBG có liên quan HBV trên 200 UTBMTBG nhiễm HBV và 200 BN xơ gan nhiễm HBV thấy người mang gen GA so với người mang gen GG tăng nguy cơ UTBMTBG với OR = 2,34; 95% CI (1,29 – 4,25); p = 0,004 Gen TGFβ1509C>T Ma J. (2015) nghiên cứu trên 393 BN viêm gan C thấy nguy cơ UTBMTBG cao hơn bệnh nhân mang gen TT so CC với OR= 1,820, p = 0.036 hay những người chỉ mang 1 alen T so alen C tăng nguy cơ ung thư là 1,383, p = 0,028. Phối hợp TNFα308G>A, TGFβ1509C>T UTBMTBG là bệnh phức tạp chịu tác động của nhiều yếu tố, trong đó vai trị của gen là rất quan trọng, nhưng trên thực tế khơng một SNP nào có thể lý giải đầy đủ cơ chế phức tạp của bệnh, mỗi SNP chỉ đóng một vai trị rất nhỏ trong diễn biến hình thành, phát triển bệnh. Vì vậy, xu hướng mới là nghiên cứu tổ hợp kiểu gen, kiểu alen của các SNP khác nhau với nguy cơ mắc bệnh, giúp phân tầng đối tượng nguy cơ, cải thiện phát hiện sớm và hiệu quả điều trị. Bei C.H. và cs (2014) đánh giá tác dụng 6 điểm SNP các gen IL2, IFNγ, IL1β, IL6 và IL10 với nguy cơ UTBMTBG tại Trung Quốc trên 720 BN ung thư và 784 người khỏe mạnh đã kết luận: mặc dù khơng một SNP gây tăng nguy cơ ung thư, nhưng phân tích phối hợp 6 điểm SNP thấy có tăng nguy cơ ung thư với OR = 1,821; 95%CI = 1,078 3,075. Tác giả kết luận có sự tương tác giữa các SNP trên làm tăng nguy cơ UTBMTBG El Din N.G. và cs (2017) đánh giá ảnh hưởng của TNFα 308 TGF–β1–509 đối với tiến triển xơ gan do HCV thấy kết hợp TNFα308 AA và TGFβ1509 TT so với kiểu TNF GG + TGF CC tăng nguy cơ xơ gan, OR = 6,4; 95%CI = 1,490 – 27,641; p = 0,013 Kết quả thấy có ảnh hưởng hiệp đồng của 2 gen vì riêng TNFα tăng nguy cơ xơ gan 2,8 lần, riêng TGFβ1 tăng nguy cơ xơ gan 2,9 lần. 1.4. Tình hình nghiên cứu đa hình gen TNFα – 308 G>A và TGF β 1 509 C>T tại Việt Nam Gần đây, vai trị của các điểm đa hình gen đối với UTBMTBG bắt đầu được nghiên cứu tại Việt Nam. Tuy nhiên, tính đến nay theo chúng tơi được biết chưa có một nghiên cứu nào về 2 điểm đa hình TNF α 308 và TGFβ 509 trên bệnh nhân UTBMTBG. Dunstan S.J. và cs (2012) đã nghiên cứu 2350 người Việt Nam khỏe mạnh thấy tỷ lệ alen A TNFα308 chiếm 7%. Trần Đình Trí (2017) nghiên cứu gen TNFα – 308 G>A ở BN ung thư dạ dày thấy tỷ lệ alen A là 17,1%. Như vậy, tỷ lệ alen A của TNFα – 308 ở quần thể người Việt Nam thấp, tương đồng với các nước vùng châu Á. Điểm đa hình TGFβ1 509 C>T nghiên cứu khá nhiều trên thế giới với những vai trị nhất định trong nhiều bệnh Tuy nhiên, trên quần thể người Việt Nam, mặc dù chúng tơi đã cố gắng tìm kiếm nhưng chưa thấy nghiên cứu nào về điểm đa hình này được cơng bố. CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1. Đối tượng nghiên cứu 102 BN UTBMTBG, 60 BN VGBM, 102 người khỏe mạnh 2.1.1. Nhóm bệnh Tiêu chuẩn chọn Chẩn đốn xác định UTBMTBG theo hướng dẫn của Bộ Y tế Việt Nam năm 2012, có 1 trong 2 tiêu chuẩn sau [20] + Bằng chứng giải phẫu bệnh lý mơ bệnh học hoặc tế bào học + Hình ảnh điển hình trên CT ổ bụng có cản quang hoặc MRI ổ bụng có cản từ + αFP ≥ 400 ng/ml Bệnh nhân có HBsAg (+) Bệnh nhân lần đầu tiên được chẩn đốn UTBMTBG Tiêu chuẩn loại trừ Bệnh nhân nhiễm HIV Bệnh nhân nhiễm HCV Bệnh nhân nghiện rượu Bệnh nhiễm độc gan do thuốc, do hóa chất Ung thư gan di căn từ các cơ quan khác Bệnh nhân cần sinh thiết gan để chẩn đốn có chống chỉ định sinh thiết gan (TCA với một số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng như tuổi, đặc điểm khối u, tiểu cầu, αFP, HBV DNA, huyết khối TMC, di căn, giai đoạn UTBMTBG 4.3. Đa hình gen TGFβ 1509 C>T 4.3.1. Tỷ lệ kiểu gen, alen của TGFβ 1509 C>T Kiểu gen CT chiếm ưu nhóm nhóm UTBMTBG, VGBM và người khỏe mạnh. Alen T nhóm ung thư (63,24%), nhóm VGBM (61,67%), nhóm khỏe mạnh (52,94%). Có khác biệt có ý nghĩa tỷ lệ alen nhóm UTBMTBG và người khỏe mạnh với p = 0,035 4.3.2. Đa hình gen TGFβ 1509 C>T và UTBMTBG 4.3.2.1.Đa hình gen TGFβ 1509 C>T và nguy cơ UTBMTBG Bảng 3.23. TGFβ 1509 C> T và nguy cơ UTBMTBG với nhóm chứng là người khỏe mạnh Kiểu UTBMTBG Khỏe gen, n= 102 mạnh alen OR (95%CI) p n= 102 Kiểu gen (n) CC 14 23 Ref CT 47 50 1,544 (0,712 – 3,351) 0,270 TT 41 29 2,323 (1,026 – 5,258) 0,041 CC 14 23 TT + CT 88 79 CT + CC 61 73 TT 41 29 Ref 1,830 (0,881 – 3,799) 0,102 Ref 1,692 (0,943 – 3,036) 0,077 Kiểu alen (2n) Alen C 75 Alen T 129 96 108 Ref 1,529 (1,029 – 2,271) 0,035 15 Kiểu gen TT so với gen CC tăng khả năng mắc UTBMTBG với OR = 2,323; 95% CI (1,026 – 5,258); p = 0,041 Kiểu alen T so với alen C tăng khả năng mắc UTBMTBG với OR = 1,529; 95% CI (1,029 – 2,271); p = 0,035 Bảng 3.24 và 3.25: kiểu gen và alen của TGFβ1509 không thấy ảnh hưởng đến nguy cơ bị UTBMTBG, khi dùng nhóm chứng là người khơng UTBMTBG, VGBM 4.3.2.2 Đa hình gen TGFβ 1509 C>T và triệu chứng lâm sàng, cận lâm sàng và giai đoạn của UTBMTBG Theo bảng 3.26, 3.27, 3.28, 3.29 và 3.30 khơng có sự khác biệt giữa các kiểu đa hình gen TGFβ1509 C>T với một số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng như tuổi, đặc điểm khối u, tiểu cầu, αFP, HBV DNA, huyết khối TMC, di căn, giai đoạn UTBMTBG 4.4. Kết hợp đa hình gen TNFα 308 G>A, TGFβ 1509 C>T Nhận thấy kiểu gen GG của TNFα308 G>A và kiểu gen CC TGFβ1 509 C>T xuất hiện nhiều hơn, có ý nghĩa nhóm khơng ung thư so với nhóm ung thư. Kiểu gen chứa alen A của TNFα – 308 và kiểu gen chứa alen T của TGFβ1 509 tăng nguy UTBMTBG so với các kiểu gen cịn lại. Do vậy chúng tơi xét GG là kiểu gen tốt so với gen AA, CC là kiểu gen tốt so với TT, chúng tơi chia sự xuất hiện phối hợp hai gen như sau: Kiểu phối hợp tốt: 2 gen tốt đồng hợp tử GG và CC Kiểu phối hợp trung bình: 1 gen tốt đồng hợp tử GG hoặc CC Kiểu phối hợp xấu: khơng có gen tốt nào đồng hợp tử 4.4.1. Mối liên quan giữa đa hình gen TNFα 308 G>A và TGF β 1509 C>T và nguy cơ UTBMTBG Nhóm chứng là người khỏe mạnh Bảng 3.31. Đa hình 2 gen TNFα – 308 G>A, TGFβ1509 C> T và 16 nguy cơ UTBMTBG với nhóm chứng là người khỏe mạnh Kiểu gen, alen UTBMTBG n= 102 Khỏe mạnh n= 102 OR (95%CI) T ốt 23 Ref TB 72 68 2,706 (1,169 – 6,261) 0,017 Xấu 21 11 4,879 (1,688 – 14,098) 0,003 p Nhóm chứng là người khỏe mạnh Kiểu phối hợp TB, xấu tăng nguy cơ UTBMTGB so với kiểu phối hợp tốt, OR = 2,706; 95%CI (1,169 – 6,261); p = 0,017 và OR = 4,879; 95%CI (1,688 – 14,098); p = 0,003 Nhóm chứng là người khơng UTBMTBG (VGBM + khỏe mạnh) Bảng 3.32. Đa hình hai gen TNFα 308 G>A, TGFβ 1509 C> T và nguy cơ UTBMTBG với nhóm chứng là người khơng ung thư Kiểu gen, alen UTBMTBG n= 102 Không ung thư (n= 162) OR (95%CI) Tốt 32 Ref TB 72 112 2,286 (1,031 – 5,070) 0,038 Xấu 21 18 4,148 (1,571– 10,956) 0,003 p Kiểu phối hợp trung bình, xấu có khả năng mắc UTBMTGB cao phối hợp tốt với OR = 2,286; 95% CI (1,031 – 5,070); p = 0,038 và OR = 4,148; 95% CI (1,571 – 10,956); p = 0,003 Nhóm ch ứ ng là BN VGBM, khơng th ấ y liên quan nguy c m ắ c UTBMTBG khi so sánh các ki ể u ph ố i h ợ p gen, alen 4.4.2. Liên quan đa hình gen và một số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng, giai đoạn của UTBMTBG. Theo bảng 3.34, 3.35, 3.36, 3.37, 3.38 khơng thấy ảnh hưởng phối hợp 2 điểm đa hình với một số đặc điểm lâm sàng, 17 cận lâm sàng tuổi, đặc điểm khối u, tiểu cầu, αFP, HBV DNA, huyết khối TMC, di căn, giai đoạn UTBMTBG. CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 4.1 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng bệnh nhân UTBMTBG Bệnh nhân UTBMTBG có tuổi trung bình là 57,4 ± 9,7. Người trẻ nhất là 37 tuổi, người lớn tuổi nhất là 80 tuổi. Đa số bệnh nhân ở độ tuổi 5170, chiếm 67,2%. Tỷ lệ nam/nữ: 11,8/1 Tại thời điểm chẩn đốn số bệnh nhân khơng có triệu chứng chiếm 13,7%. Kích thước trung bình tổng u: 10,80 ± 12,02 cm, u < 5 cm có tỷ lệ thấp (29,4%), u > 10 cm có tỷ lệ cao (37,3%), huyết khối TMC (22.5%), di căn khác (19,6%). Các chỉ số cận lâm sàng dao động, αFP A 4.2.1. Tỷ lệ kiểu gen, alen của TNFα308 G>A Tỷ lệ kiểu gen GG ưu thế ở tất cả các nhóm, cao nhất ở nhóm khỏe mạnh, kiểu gen GA xuất hiện cao nhất ở nhóm UTBMTBG. Có khác biệt tỷ lệ kiểu gen GG GA nhóm UTBMTBG với nhóm khỏe mạnh và VGBM (p T Kiểu gen CT chiếm ưu thế ở tất cả các nhóm. Khơng có sự khác biệt khi so sánh tỷ lệ kiểu gen CC, CT, TT ở các nhóm nghiên u Tỷ lệ alen T nhóm khỏe mạnh, VGBM và UTBMTBG lần lượt là 52,94%; 61,67%; 63,24%. Có sự khác biệt về tỷ lệ alen T giữa nhóm UTBMTBG và khỏe mạnh, với p T liên quan đến UTBMTBG Nhóm chứng là người khỏe mạnh: Kiểu gen TT có khả năng mắc UTBMTBG cao hơn kiểu gen CC với OR = 2,323; 95% CI (1,026 – 5,258); p = 0,041.Người mang alen T có khả năng mắc UTBMTBG cao hơn người mang alen C với OR = 1,529; 95% CI (1,029 – 2,271); p = 0,035 Một số nghiên cứu thấy kiểu gen TT và alen T liên quan tăng nồng độ TGFβ, tăng nguy cơ UTBMTBG như các tác giả Radwan. M.I (2012), Ma J (2015), nhiên theo nghiên cứu Qi P (2009) tại Trung Quốc thấy kiểu gen CC và alen C mới đóng vai trị Guo.Y và cs (2013) tiến hành phân tích gộp dựa trên 8 nghiên cứu gồm 2030 BN UTBMTBG và 3416 người nhóm chứng thấy kiểu gen TT và alen T tăng nguy cơ UTBMTBG. Kiểu gen TT so với CC tăng nguy cơ UTBMTBG với OR = 1,61, 95% CI= 1,21 – 2,14, p= 0,0001. Kiểu gen CT tăng nguy cơ UTBMTG khi so với kiểu gen CC (OR=1,28, 95% CI = 1,09 – 1,50, p = 0,003). TT+ CT tăng nguy cơ UTBMTBG so với kiểu gen CC (OR = 1,4, 95% CI= 1,15 – 1,70, p= 0,0007). Đây thực sự là một bằng chứng có giá trị ghi nhận vai trị của điểm đa hình gen TGFβ1509 với nguy cơ UTBMTBG Trong tiến trình hình thành UTBMTBG từ viêm gan mạn, xơ gan, UTBMTBG, TGFβ1 được xem như là một tác nhân gây tổn 22 thương trực tiếp. Thực nghiệm gây phá vỡ sự tổng hợp TGFβ1 và/hoặc con đường truyền tín hiệu của TGFβ có tác dụng làm giảm đáng kể xơ hóa. Fatlleti. E (2008) nghiên cứu ảnh hưởng gen TGFβ1 và nguy cơ bệnh gan cho thấy có khác biệt về tỷ lệ các kiểu gen của các điểm đa hình TGFβ1 giữa những BN bệnh gan giai đoạn cuối và người bình thường. Tác giả ghi nhận alen T của TGFβ1 gây tăng sản xuất TGFβ huyết ở BN xơ gan. Nghiên cứu cho rằng các điểm đa hình gen TGFβ, chủ yếu ở vùng khởi động liên quan đến q trình xơ gan. Lu W.Q. và cs (2016) đã tiến hành phân tích gộp gồm 2809 BN UTBMTBG và 4802 người khơng ung thư, phân tích dưới nhóm áp dụng cho những nghiên cứu chọn BN ở quần thể chung thấy kiểu gen TT so với gen CC tăng nguy cơ UTBMTBG (OR, 95%CI, p: 1,74, 1,082,8, 0,023) Gen (TT+TC) so với CC tăng nguy cơ UTBMTBG (OR, 95%CI, p: 1,48, 1,012,17, 0,047), alen T so alen C tăng nguy cơ UTBMTBG (OR, 95%CI, p: 1,35, 1,051,74, 0,021 4.4. Kết hợp đa hình gen TNFα 308 G>A, TGFβ 1509 C>T 4.4.1. Mối liên quan giữa đa hình kiểu gen TNFα308 G>A và TGFβ 1509 C>T và nguy cơ bị UTBMTBG Nhóm chứng là người khỏe mạnh Kiểu phối hợp xấu, trung bình tăng nguy cơ UTBMTGB so với kiểu phối hợp tốt, OR = 4,879; 95%CI (1,688 – 14,098); p = 0,003 và OR = 2,706; 95%CI (1,169 6,261); p = 0,017. Nhóm chứng là người khơng UTBMTBG (VGBM + khỏe mạnh) Kiểu phối hợp 2 gen xấu, trung bình có nguy cơ UTBMTGB cao kiểu phối hợp tốt, với OR = 4,148; 95% CI (1,571 – 10,956); p = 0,003 và OR = 2,286; 95% CI (1,031 – 5,070); p = 0,038. Như vậy, hai điểm đa hình gen tác dụng hiệp đồng gây tăng nguy cơ UTBMTBG khi phối hợp các kiểu gen và alen trung bình xấu so với kiểu phối hợp tốt (chứng người khỏe mạnh; 23 người khơng UTBMTBG) với: OR = 2,286; 95%CI (1,031 – 5,070); p = 0,038 đến OR= 4,879; 95%CI(1,688 – 14,098); p = 0,003 Các kết quả trên cho thấy có sự tương tác tăng cường hiệu quả khi phối hợp hai gen so với từng gen riêng lẻ. Cụ thể những cá thể mang kiểu phối hợp 2 gen xấu tăng nguy cơ UTBMTBG gấp 4 5 lần so với kiểu gen tốt khi so sánh với nhóm chứng là người khỏe mạnh, người khơng ung thư. OR tổng lớn hơn nhiều so với nguy cơ được tính riêng cho từng điểm đa hình. Điều này phù hợp với kết quả của các nghiên cứu thực nghiệm được tổng kết bởi Liongue C. (2015) thấy TGFβ tác dụng hiệp đồng với TNFα kích thích tăng sinh xơ, thúc đẩy q trình ECM (chuyển biểu mơ thành trung mơ), các cytokine này tương hỗ nhau thúc đẩy hình thành UTBMTBG và di căn. Trước đó, El Din N.G. (2017) đã kết luận 2 điểm đa hình gen trên có tác dụng hiệp đồng ảnh hưởng đến tiến triển xơ gan 4.4.2. Liên quan đa hình gen và một số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng, của bệnh nhân UTBMTBG. Mặc dù có liên quan về đa hình từng gen và phối hợp của 2 gen trên nguy UTBMTBG với mức độ khác nhau, nhưng chúng tơi đã khơng phát hiện thấy sự khác biệt có ý nghĩa giữa từng điểm đa hình và phối hợp 2 điểm đa hình TNFα308 G>A và TGFβ1509 C>T với một số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng như đặc điểm khối u như số lượng, độ biệt hóa và các xét nghiệm như tiểu cầu, nồng độ αFP, HBV DNA, huyết khối TMC,di căn, và giai đoạn UTBMTBG. Trên thực tế, UTBMTBG là bệnh lý phức tạp, có sự đóng góp của nhiều yếu tố, mặc dù kết quả từ nhiều nghiên cứu thấy vai trị quan trọng của yếu tố gen đối với nguy cơ UTBMTBG, nhưng vài điểm đa hình gen là q nhỏ để ảnh hưởng đến lâm sàng bệnh. Thật vậy, cho đến nay đã có rất nhiều nghiên cứu cho thấy các điểm đa hình khác của gen TNFα, TGFβ, hay rất nhiều các gen 24 khác cũng có ảnh hưởng đến nguy cơ phát triển UTBMTBG như gen TP53, MDM2, IFNAR1 Ngồi ra, đặc điểm khối u, αFP, HBV DNA chịu ảnh hưởng lớn bởi thời điểm chẩn đốn sớm hay muộn, tình trạng điều trị trước đó UTBMTBG có độ ác tính cao, diễn biến âm thầm, tốc độ phát triển nhanh, trong khi đó đa hình gen là yếu tố di truyền có tính ổn định cao hơn, vì vậy khó có thể có mối liên quan có ý nghĩa là hợp lý. Với mơ hình nghiên cứu tương tự đánh giá phối hợp ảnh hưởng 2 điểm đa hình TNFα – 308 G>A và TGFβ1 – 509 C>T với các đặc điểm u gan, di căn Radwan M.I. (2012) cũng có nhận định tương tự với chúng tơi. Đây là nghiên cứu đầu tiên tại Việt Nam đánh giá ảnh hưởng điểm đa hình TNFα – 308, TGFβ1 509 với nguy cơ UTBMTBG. Kết quả cho thấy alen A, kiểu gen chứa A của gen TNFα – 308 và alen T, kiểu gen chứa T của gen TGFβ1 – 509 đều có liên quan đến tăng nguy cơ UTBMTBG. Đặc biệt, 2 điểm đa hình có tương tác hiệp đồng với gây tăng nguy cơ UTBMTBG khi phối hợp các kiểu gen khơng tốt. Tuy nhiên, dù đã cố gắng lựa chọn được sự tương đồng về giới, chúng tơi cũng chưa lựa chọn được nhóm chứng có độ tuổi tương tự như nhóm bệnh. Hơn nữa, nghiên cứu của chúng tơi là một nghiên cứu bệnh chứng với tất cả bệnh nhân UTBMTBG được lựa chọn tại bệnh viện, do đó kết quả khó đại diện cho các bệnh nhân UTBMTBG trong quần thể người Việt Nam. Vì vậy, kết quả nghiên cứu nên được khẳng định thêm ở những nghiên cứu sau với số lượng bệnh nhân lớn hơn, đạt sự tương đồng về tuổi với nhóm chứng. Bên cạnh đó, đối tượng nghiên cứu nên được lựa chọn từ nhiều bệnh viện cũng như trong quần thể dân cư KẾT LUẬN 25 Nghiên cứu 102 bệnh nhân UTBMTBG nhiễm H BsAg, 60 bệnh nhân viêm gan B mạn tính và 102 người khỏe mạnh, chúng tơi có kết luận: Tỷ lệ kiểu alen, gen của TNFα 308 G>A, TGFβ 1 509 C>T 1.1. TNFα – 308 G>A Kiểu gen GG chiếm ưu thế tất cả các nhóm, cao nhất ở nhóm khỏe mạnh, kiểu gen GA cao nhất ở nhóm UTBMTBG. Có khác biệt về tỷ lệ kiểu gen GG và GA giữa nhóm UTBMTBG với nhóm khỏe mạnh, VGBM (p T với ung thư biểu mơ tế bào gan 2.1. Liên quan TNFα308 G>A, TGF β 1509 C>T với nguy cơ ung thư biểu mô tế bào gan Alen A và các kiểu gen chứa alen A của TNF α 308 đều tăng nguy cơ bị UTBMTBG so với alen G và kiểu gen chứa alen G, khi sử dụng nhóm chứng người khỏe mạnh, người không UTBMTBG VGBM với: OR= 2,46; 95% CI(1,0385,843); p=0,036 đến OR= 2,83; CI(1,313 – 6,100); p = 0,006 26 Alen T và kiểu gen chứa alen T của TGFβ1509 tăng nguy cơ bị UTBMTBG so với alen C và kiểu gen chứa alen C, khi sử dụng nhóm chứng là người khỏe mạnh, với: OR=1,529; 95% CI(1,029 – 2,271); p = 0,035 đến OR = 2,323; CI (1,026 – 5,258); p = 0,041 Hai điểm đa hình gen có tương tác hiệp đồng gây tăng nguy UTBMTBG Kiểu phối hợp trung bình, xấu tăng nguy cơ UTBMTBG so với kiểu phối hợp tốt khi sử dụng nhóm chứng là người khỏe mạnh và người khơng UTBMTBG, với OR = 2,286; 95%CI (1,031 – 5,070); p = 0,038 đến OR= 4,879; 95%CI(1,688 – 14,098); p = 0,003 2.2. Liên quan giữa TNFα308 G>A, TGF β 1509 C>T với một số đặc điểm lâm sàng cận lâm sàng bệnh nhân UTBMTBG Khơng có mối liên quan giữa từng điểm đa hình và phối hợp 2 điểm đa hình TNFα308 G>A và TGFβ1509 C>T với một số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và giai đoạn UTBMTBG KIẾN NGHỊ Tiến hành các nghiên cứu kiểu gen TNFα308 G>A, TGFβ1 509 C>T trên với nguy cơ bị UTBMTBG trong mơ hình tiến cứu Đánh giá ảnh hưởng gen TNFα308 G>A, TGFβ1 509C>T tương tác với các yếu tố nguy cơ từ mơi trường như thói quen sinh hoạt, bệnh lý phối hợp kèm theo đối với q trình phát sinh, phát triển UTBMTBG 27 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI LUẬN ÁN 1. Phan Thi Hien Luong, Nguyen Ba Vuong, Tran Viet Tu, Luong Thi Lan Anh (2019) The effect of TNFα308 G>A polymorphism alters the risk of hepatocellular carcinoma. Tạp chí Y – Dược học Quân sự, 44(5):170176 Nguyễn Bá Vượng, Phan Thị Hiền Lương, Trần Việt Tú, Lương Thị Lan Anh (2019) Liên quan điểm đa hình gen TGFβ1509 và nguy cơ ung thư biểu mơ tế bào gan Tạp chí Y – Dược học Qn sự, 44(5):51 – 57 Phan Thị Hiền Lương, Lương Thị Lan Anh, Nguyễn Hải Linh, Hồng Hà (2019). Phát hiện đa hình 308 G/A gen TNF α và 509 C/T gen TGFβ1 bằng kỹ thuật giải trình tự gen ở bệnh nhân ung thư gan nguyên phát. Tạp chí Y học Việt Nam, 483(số chuyên đề):131139 ... 308G>A, TGFβ1509C>T? ?và? ?nguy cơ ? ?ung? ?thư ? ?biểu mơ? ?tế? ?bào? ?gan Gần đ? ?y? ?hàng loạt? ?nghiên? ?cứu? ?trên thế giới đã? ?tiến? ?hành cho th? ?y? ? ảnh hưởng? ?đa? ?hình? ?gen TNFα 308 G/A, TGFβ1509 C>T với nguy cơ viêm? ?gan? ?mạn? ?và? ?UTBMTBG do virus viêm? ?gan, các ... 2. Liên quan giữa kiểu alen? ?và? ?gen? ?của TNFα 308 G>A, TGF β 1509 C>T với? ?ung? ?thư? ?biểu? ?mô? ?tế? ?bào? ?gan? ? 2.1. Liên quan TNFα308 G>A, TGF β 1509 C>T với nguy cơ ung? ?thư? ?biểu? ?mô? ?tế? ?bào? ?gan? ? Alen A? ?và? ?các kiểu? ?gen? ?chứa alen A của ... với nguy cơ UTBMTBG. Vì v? ?y, đề tài ? ?Nghiên? ?cứu? ?đa? ?hình? ?gen TNFα 308 G>A? ?và? ?TGFβ 1509C>T? ?ở? ?bệnh? ?nhân? ?UTBMTBG? ?có HBsAg? ?dương? ?tính? ?? được? ?tiến? ?hành với 2 mục tiêu: Xác định tỷ lệ kiểu? ?gen? ?và? ?alen của 2 điểm? ?đa? ?hình? ?gen