Đang tải... (xem toàn văn)
Acid salicylic là một trong những hoạt chất được người ta tìm ra từ rất sớm. Acid salicylic gây kích ứng mạnh niêm mạc đường tiêu hoá và các mô.
Bộ quốc phòng Học viện quân y ********* Hoàng việt dịng Nghiªn cøu sù hÊp thu acid salicylic trªn Thá gây bỏng thực nghiệm Có sử dụng thuốc mỡ acid salicylic 40% ( khoá luận tốt nghiệp dược sĩ đại học khoá 1999 - 2005) Cán hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Lộc Nơi thực hiện: Bộ môn Dược Học Quân Sự Bộ môn Sinh lý bệnh Thời gian thực hiện: 8/2005 đặt vấn đề Acid salicylic hoạt chất người ta tìm từ sớm Acid salicylic gây kích ứng mạnh niêm mạc đường tiêu hoá mô Trong chuyªn khoa báng, ngêi ta sư dơng chÕ phÈm thc mỡ acid salicylic 40% để làm bong lớp da hoại tử khô Tuy nhiên, bệnh nhân sử dụng thuốc mỡ bị ngộ độc Vì thế, tiến hành nghiên cứu đề tài: Nghiên cứu hấp thu acid salicylic thỏ gây bỏng thực nghiƯm cã sư dơng thc mì acid salicylic 40%” nhằm mục tiêu: Nghiên cứu phương pháp định lượng acid salicylic huyÕt thá Nghiªn cøu sù hấp thu acid salicylic thỏ gây bỏng thực nghiệm Chương Tổng quan tài liệu 1.1 Các yếu tố ảnh hưởng đến hấp thu thuốc mỡ a) Yếu tố sinh lý - Loại da: da khô nghèo mỡ nước; da trơn, nhờn - Lứa tuổi: khác bề dầy lớp sừng, diện tích da - Tình trạng da: nguyên vẹn tổn thương - Nhiệt độ bề mặt da - Mức độ hydrat hoá lớp sừng b) Các yếu tố công thức, kỹ thuật - Dược chất: độ tan, hệ số phân bố, hệ số khuyếch tán, mức độ ion hoá, nồng độ dược chất - Tá dược: tá dược ảnh hưởng đến trình hydrat hoá lớp sừng, nhiệt độ bề mặt da, độ bám dính thuốc da - Chất làm tăng hấp thu: chất diện hoạt, alkyl methyl sulfoxid - Kü thuËt bµo chÕ 1.2/ Acid salicylic - Công thức phân tử: C7H6O3 - Công thức cấu tạo: COOH OH Hình 1: Công thức cấu tạo acid salicylic Tªn khoa häc: acid - hydroxy benzoic TLPT: 138,12 1.3/ Thuốc mỡ acid salicylic a) Chỉ định: Acid salicylic dùng chỗ dạng đơn chất phối hợp với thuốc khác để điều trị triệu chứng trường hợp sau: + Các trường hợp bệnh da tróc vẩy + Loại bỏ mụn cơm + Chứng tăng sừng khu trú gan bàn tay bàn chân + Loại bỏ da hoại tử chuyên khoa bỏng b) Tác dụng không mong muốn Lú lẫn, chóng mặt, đau đầu, thở nhanh, ù tai, giÃn mạch, toát mồ hôi 1.4/ Phương pháp định lượng a) Phương pháp trung hoà acid base b) Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) c) Phương pháp quang phổ hấp thụ tử ngoại-khả kiến - Nguyên tắc: Dựa sở định luật Lambert Beer: A=D=E= k.C.l khoảng nồng độ định, mật độ quang tuyến tính bậc với nồng độ acid salicylic Phần Đối tượng phương pháp nghiên cứu 2.1/ Đối tượng nghiên cứu - Huyết thỏ - Thỏ trưởng thành khoẻ mạnh 2.2/ Phương pháp nghiên cứu 2.2.1/ Khảo sát cực đại hấp thụ acid salicylic CHCl3 50 mg A.S chuẩn Hoà tan / CHCl3 Bđm 100 ml dd 500 mcg/ml LÊy cx 2ml + CHCl3 v® B®m 50 ml dd 20 mcg/ml Ghi phỉ ë 230-330 nm Xác định cực đại hấp thụ 1% 2.2.2/ Xác định giá trị E 1cm acid salicylic CHCl3 50 mg A.S chuẩn Hoà tan/CHCl3 Bđm 100 ml dd 500 mcg/ml LÊy cx 1, 2, 3, ml + CHCl3 vđ Bđm 50 ml dd 10, 20, 30, 40 mcg/ml Đo mật độ quang Xác định E 1% , E 1% 1cm 1cm Xây dựng đường chuẩn huẩn định lượng acid salicylic huyết pháp QPHTTNKK Hut thá dd A.S 1500mcg/ml níc Hoµ tan dd A.S nồng độ: 30, 45, 60, 75 mcg/ml Cho vào bình nón ml dd nồng độ HCl 1N (pH=2) ml CHCl3 Lắc 20 Dịch chiết Na2SO4 khan Dịch Đo mật độ quang Xây dựng đường chuẩn 2.2.5/ Nghiên cứu hấp thu hoạt chất từ thuốc mỡ acid salicylic 40% thỏ g©y báng thùc nghiƯm G©y báng thùc nghiƯm cho thỏ Bôi thuốc mỡ A.S 40% Lấy máu thời điểm nghiên cứu Xử lý mẫu máu Đo mật độ quang Vẽ đồ thị Phần Kết bàn luận 3.1/ Khảo sát cực đại hấp thụ acid salicylic CHCl3 2.0 Abs 1.5 239.6 1.0 308.3 0.5 0.0 240.0 260.0 Quang Pho 280.0 300.0 320.0 340.0 H×nh 1: Phỉ cđa acid salicylic CHCl3 360.0 380.0 400.0 nm 1% acid salicylic CHCl3 E1cm 1% E1cm Öm cña acid salicylic CHCl3 (n=5): 10 20 30 40 0,2778 0,5569 0,8307 1,195 0,2803 0,5617 0,8366 0,0987 0,2714 0,5512 0,8495 1,143 0,2818 0,5602 0,8441 1,162 0,2783 0,5541 0,8416 1,023 X 0,2779 0,5568 0,8405 1,112 RSD 1,44 0,77 0,86 0,89 1% E1cm 277,9 278,4 280,2 278,1 C(mcg/ml) E 1% E1cm 279 r = 0,9994 ình biểu diễn tương quan E C nh sau: E = 0,02786.C + 0,00030 E 1.2 E = 0,02786.C + 0,00030 0.8 0.6 0.4 0.2 0 10 20 30 40 50 C(mcg/ml) H×nh 2: Đồ thị biểu diễn tương quan nồng độ acid salicylic CHCl3 mật độ quang bước sóng 308 nm 3.3/ Nghiên cứu ảnh hưởng pH đến hệ số phân bố hiệu suất chiết acid salicylic hai pha CHCl3 / H2O Bảng 2: pH ảnh hưởng đến K H (n=5): pH 0,0562 0,0917 0,2062 0,3615 0,5516 0,0585 0,0954 0,2269 0,3793 0,5397 0,0527 0,0948 0,2291 0,3745 0,5644 0,0538 0,0934 0,2225 0,3701 0,5738 0,0543 0,0998 0,1928 0,3629 0,5450 X 0,0551 0,0952 0,2215 0,3747 0,5569 RSD 4,25 3,15 2,35 2,03 2,55 C(mcg/ml) 1,97 3,41 7,94 13,43 19,96 K 0,07 0,17 0,36 0,81 1,98 H 6,58 11,37 26,47 44,77 66,54 E K 2.5 1.98 1.5 0.81 0.5 0.36 0.17 0.07 pH Hình 3: ảnh hưởng pH đến hệ số phân bố acid salicylic hai pha CHCl3 /H2O H 70 66.54 60 50 44.77 40 30 26.47 20 11.37 10 6.58 pH Hình 4: ảnh hưởng pH đến hiệu suất chiết acid salicylic hai pha CHCl3 /H2O 3.4/ Xây dựng đường chuẩn định lượng acid salicylic huyết thỏ phương pháp QPHTTNKK Bảng 3:Tương quan nồng độ acid salicylic mËt ®é quang (n=5): C(mcg/ml) 30 45 60 75 0,1553 0,2260 0,3201 0,3713 0,1682 0,2192 0,3173 0,3877 0,1625 0,2138 0,3039 0,3943 0,1499 0,2302 0,3147 0,3784 0,1565 0,2119 0,2988 0,3798 X 0,1585 0,2202 0,3114 0,3821 RSD 4,41 3,55 3,11 2,56 E r = 0,997 èi mèi tương quan tuyến tính E C sau: E = 0,0051.C + 0,0019 E 0.45 0.4 0.35 0.3 0.25 0.2 0.15 0.1 0.05 E = 0,0051.C + 0,0019 15 30 45 60 75 90 C(mcg/ml) H×nh 5: Đồ thị biểu diễn tương quan nồng ®é acid salicylic huyÕt thá vµ mËt ®é quang 3.5/ Nghiên cứu hấp thu hoạt chất từ thuốc mỡ acid salicylic 40% thỏ gây bỏng thực nghiệm Bảng 4: Nồng độ acid salicylic máu thỏ thời điểm nghiên cứu (n=5): t 4h 8h 12h 16h 20h 28h 0,2517 0,3696 0,4337 0,2587 0,1523 0,0166 0,2405 0,3738 0,4415 0,2453 0,1637 0,0155 0,1743 0,3021 0,3765 0,2048 0,0987 0,0602 0,1992 0,3543 0,3782 0,1962 0,1291 0,0690 0,1838 0,3287 0,3991 0,2165 0,1012 0,0317 X 0,2099 0,3457 0,4058 0,2243 0,1290 0,0386 C(mcg/ml) 40,79 67,41 79,19 43,60 24,92 7,19 SD 6,37 5,53 5,62 4,86 5,37 4,49 Thá C(mcg/ml) 90 80 70 60 50 40 30 20 10 79.19 : ®é lƯch chn 67.41 43.6 40.97 24.92 7.19 0 12 16 20 24 28 32 t(h) Hình 6: Sự biến đổi nồng độ acid salicylic máu thỏ theo thời gian Phần Kết luận Nghiên cứu phương pháp định lượng acid salicylic kết sau: - Trong khoảng bước sóng 230 330 nm, có hai đỉnh cực đại hấp thụ 239,6 308,3 nm Chọn bước sóng 308 nm để khảo sát nghiên cứu 1% - Giá trị E 1cm = 279 - pH = 2, K H acid salicylic hai pha CHCl3 / H2O cao - Phương trình đường chuẩn biểu thị tương quan E C là: E = 0,0051.C + 0,0019 Kết nghiên cứu hấp thu hoạt chất từ thuốc mỡ acid salicylic 40% thỏ gây bỏng thực nghiệm nh sau: - Acid salicylic hÊp thu m¹nh qua da thỏ gây bỏng thực nghiệm - Acid salicylic máu thỏ đạt nồng độ đỉnh thời điểm 12 sau bôi thuốc - pha thải trừ, acid salicylic đào thải nhanh khỏi thể ... nhiên, bệnh nhân sử dụng thuốc mỡ bị ngộ độc Vì thế, tiến hành nghiên cứu đề tài: “ Nghiªn cøu sù hÊp thu acid salicylic trªn thá gây bỏng thực nghiệm có sử dụng thuốc mỡ acid salicylic 40%? ?? nh»m... ®é acid salicylic huyÕt thá vµ mËt ®é quang 3.5/ Nghiên cứu hấp thu hoạt chất từ thuốc mỡ acid salicylic 40% thỏ gây bỏng thực nghiệm Bảng 4: Nồng độ acid salicylic máu thỏ thời điểm nghiên cứu. .. tõ thc mì acid salicylic 40% thỏ gây bỏng thực nghiệm sau: - Acid salicylic hấp thu mạnh qua da thỏ gây bỏng thực nghiệm - Acid salicylic máu thỏ đạt nồng độ đỉnh thời điểm 12 sau bôi thuốc - pha