BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP XÁC ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP TINH SẠCH NPV (NUCLEAR POLYHEDROSIS VIRUS) Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : TS Nguyễn Thị Hai Sinh viên thực MSSV: 1151110260 : Trương Hùng Phong Lớp: 11DSH04 TP Hồ Chí Minh, 2015 i ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP LỜI CAM ĐOAN - - - - - - - - -- - - - - - - - - Tôi tên: Trương Hùng Phong Sinh ngày 17 tháng 09 năm 1993 Sinh viên lớp 11DSH04 - Công Nghệ Sinh Học - Trường ĐH Kỹ Công Nghệ TP Hồ Chí Minh Tơi xin cam đoan : Đề tài "Xác định phương pháp tinh NPV (Nuclera Polyhedrosis Virus)" Tiến sĩ Nguyễn Thị Hai hướng dẫn đề tài riêng Các số liệu, kết luận văn tốt nghiệp trung thực chưa cơng bố cơng trình luận văn trước Những thơng tin tham khảo khóa luận trích dẫn cụ thể nguồn sử dụng Tất nội dung đồ án nội dung đề tài yêu cầu giáo viên hướng dẫn Nếu có sai sót tơi xin chịu trách nhiệm trước hội đồng Sinh viên thực Trương Hùng Phong i ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP LỜI CẢM ƠN - - - - - - - - -- - - - - - - - Để hoàn thành đề tài ngoại nổ lực, cố gắng thân, em nhận hỗ trợ nhiều từ nhiều người, chân thành gửi lời "CẢM ƠN" tới : Con xin kính dâng lời cảm ơn chân thành sâu sắc đến Ba Mẹ tất người thân gia đình ni khơn lớn nên người tận tâm lo lắng, tạo điều kiện cho học tập ngày hôm Ngôi trường Đại học Kỹ Thuật Công Nghệ Tp Hồ Chí Minh, nơi em gắn bó suốt bốn năm học qua, giúp em tiếp cận điều bổ ích, kinh nghiệm sống Ban chủ nhiệm khoa Môi Trường Công Nghệ Sinh Học, thầy cô môn Công Nghệ Sinh Học, Trường Đại Học Kỹ Thuật Công Nghệ TP HCM trang bị cho em kiến thức bản, làm móng để tơi thực đề tài làm tốt công việc sau Tiến sĩ Nguyễn Thị Hai, tận tình hướng dẫn, cung cấp tư liệu quý giá truyền đạt kinh nghiệm động viên tinh thần để em hồn thành đồ án Thầy Huỳnh Văn Thành, thầy Nguyễn Trung Dũng phòng thí nghiệm khoa Mơi Trường Cơng Nghệ Sinh Học, Trường Đại Học Kỹ Thuật Công Nghệ TP HCM quan tâm, giúp đỡ em trình thực đề tài Các bạn tập thể lớp 11DSH04 tập thể bạn thực phòng thí nghiệm Cơng nghệ Sinh Học trường Đại học Kỹ Thuật Cơng nghệ Tp.Hồ Chí Minh, bạn ln quan tâm, ủng hộ động viên tinh thần giúp em vượt qua khó khăn q trình thực đồ án Em xin chân thành "CẢM ƠN" giúp đỡ ii ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP MỤC LỤC MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG vii DANH MỤC HÌNH ẢNH viii MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu chung sâu khoang (Spodoptera litura) 1.1.1 Phân bố 1.1.2 Ký chủ 1.1.3 Đặc điểm hình thái sinh học 1.1.4 Tập tính sống cách gây hại 1.1.5 Thiên địch biện pháp phòng trừ 1.2 Khái quát virus diệt côn trùng 11 1.2.1 Lịch sử nghiên cứu virus diệt côn trùng 11 1.2.2 Cơ sở khoa học sử dụng virus diệt côn trùng đấu tranh sinh học 11 1.2.3 Hình thái cấu trúc chung virus 12 1.2.4 Những nhóm virus gây bệnh trùng 14 1.2.4.1 Nhóm Baculovirus (Baculoviridae) 14 1.2.4.2 Nhóm Cytoplasmic polyhedrosis virus - CPV (Reoviridae) 16 1.2.4.3 Nhóm iridovirut (iridoviridae) 16 1.2.4.4 Nhóm Densevirut (Parvoviridae) 17 1.2.4.5 Nhóm virut RNA (picornaviridae) 17 1.2.4.6 Nhóm sigmavirut (Rhabdoviridae) 17 1.2.4.7 Nhóm ascoviridae 17 1.2.5 Giới thiệu virus NPV gây bệnh côn trùng 17 iii ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP 1.2.5.1 Cấu trúc 18 1.2.5.2 Cơ chế gây bệnh NPV 19 1.2.5.3 Phương thức lây truyền nguồn bệnh virus 21 1.2.5.4 Triệu chứng bệnh virus sâu khoang 21 1.3.2.1 Các yếu tố ảnh hưởng đến hiệu lực virus cách hạn chế sử dụng chế phẩm virus 23 1.2.5.5 Ưu nhược điểm việc sử dụng chế phẩm NPV phòng trừ dịch hại 24 1.3 Giới thiệu phương pháp ly tâm 25 CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 2.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 28 2.2 Vật liệu 28 2.2.1 Dụng cụ 28 2.2.2 Hóa chất 29 2.3 Phương pháp nghiên cứu 29 2.3.1 Thí nghiệm :Khảo sát ảnh hưởng nguồn dịch gốc tới chất lượng virus 29 2.3.1.1 Bố trí thí nghiệm 29 2.3.1.2 Tiến hành 30 2.3.2 Thí nghiệm 2: Xác định số vòng ly tâm phù hợp để loại bỏ xác sâu thể hòa tan 35 2.3.2.1 Bố trí thí nghiệm 35 2.3.2.2 Tiến hành 36 2.3.3 Thí nghiệm 3: Xác định số vòng ly tâm lần thứ để tinh NPV 39 2.3.3.1 Bố trí thí nghiệm 39 2.3.3.2 Tiến hành 39 2.3.4 Phương pháp xử lý số liệu 40 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 41 3.1 Ảnh hưởng dịch gốc đến hiệu nhân NPV sâu khoang 41 iv ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP 3.2 Xác định số vòng ly tâm phù hợp để loại bỏ xác sâu thể hòa tan 44 3.3 Xác định số vòng ly tâm lần để tinh virus NPV 52 3.4 Tối ưu hóa cơng thức ly tâm tinh NPV 59 CHƯƠNG 4:KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 62 4.1 Kết luận 62 4.2 Kiến nghị 62 TÀI LIỆU THAM KHẢO 63 v ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT NPV Virus đa diện nhân (Nuclear Polyhedrosis Virus) SENPV Spodoptera exigua Nuclear Polyhedrosis Virus BVTV Bảo vệ thực vật DDT Thuốc trừ sâu (Dichloro diphenyl trichlorothane) EPN Tuyến trùng ký sinh côn trùng (Entomopathogenic Nematodes) PPI Chất kiềm hãm sinh trưởng CT Công thức IPM Biện pháp phòng trừ dịch hại tổng hợp (Integrated Pest Management CPVs Virus đa diện tế bào chất (Cytoplasmic polyhedrosis viruses) IB Thể vùi (Inclusion Body) OB Thể vùi (Occlusion Body) PIB Thể vùi (Polyhedral inclusion body) DNP Deoxyribo Nucleo Protein PCA Plate Count Agar vi ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1: Thành phần công thức thức ăn nhân tạo 33 Bảng 3.1 Số sâu chết sau ngày phơi nhiễm dịch NPV (con) 42 Bảng 3.2 Hiệu lực diệt sâu (%) dịch NPV 43 Bảng 3.3 Tổng số vi sinh vật hiếu khí dịch virus 43 Bảng 3.4 Tổng vi sinh vật hiếu khí dịch NPV sau li tâm lần 45 Bảng 3.5 Số PIB dịch virus NPV chế độ li tâm 47 Bảng 3.6 Hiệu lực diệt sâu (%) dịch NPV 50 Bảng 3.7 Hiệu lực diệt sâu, số PIB tổng vi sinh vật hiếu khí dịch virus cơng thức ly tâm 51 Bảng 3.8 Tổng vi sinh vật hiếu khí dịch NPV sau li tâm lần 53 Bảng 3.9 Số PIB dịch virus NPV chế độ li tâm 54 Bảng 3.10 Hiệu lực diệt sâu (%) công thức ngày sau nhiễm 56 Bảng 3.11 Hiệu lực diệt sâu, tổng số vi sinh vật hiếu khí số PIB CT chế độ ly tâm lần 58 Bảng 3.12 Hiệu lực diệt sâu, số PIB tổng vi sinh vật hiếu khí dịch virus 60 vii ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình1.1: Vòng đời sâu khoang Hình1.2: Trứng sâu khoang Hình1.3: Ấu trùng sâu khoang Hình1.4: Nhộng sâu khoang Hình1.5: Bướm sâu khoang Hình1.6: Một số hình dạng virus 13 Hình1.7: Cấu trúc virus 14 Hình1.8: Cấu trúc thể vùi (Kalmakoff et al,2003) 18 Hình1.9: Sâu khoang chết nhiễm virus 22 Hình 2.1: Các bước tiến hành phương pháp đổ đĩa 32 Hình 2.2: A: Hộp nhựa 20x12x7 cm; B: Sau cho thức ăn nhân tạo; C: Sâu nuôi thức ăn nhân tạo sau quét dịch virus 35 Hình 2.3: Buồng đếm hồng cầu 36 Hình 2.4: Cấu tạo buồng đếm hồng cầu 37 Hình 2.5: Quy tắc đếm buồng đếm hồng cầu 38 Hình 2.6: Hình dáng virus buồng đếm hồng cầu (vật kính 40X) 39 Hình 3.1: Diễn biến số sâu chết qua ngày phơi nhiễm 42 Hình 3.2: Biểu đồ thể tổng số vi sinh vật hiếu khí dịch virus NPV 46 Hình 3.3: Khuẩn lạc vi sinh vật hiếu khí mơi trường PCA 46 Hình 3.4: PIB virus buồng đếm hồng cầu (vật kính 40X) 48 Hình 3.5: Biểu đồ thể lượng PIB dịch virus CT ly tâm 48 Hình 3.6: Hiệu lực diệt sâu qua ngày phơi nhiễm 50 Hình 3.7: So sánh hiệu lực diệt sâu, số PIB tổng vi sinh vật hiếu khí công thức .52 Hình 3.8: Biểu đồ thể tổng số vi sinh vật hiếu khí dịch virus NPV 53 Hình 3.9: Biểu đồ thể lượng PIB dịch virus NPV 55 viii ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Hình 3.10: Sâu chết với dấu hiệu đặc trưng nhiễm virus 56 Hình 3.11: Diễn biến hiệu lực diệt sâu qua ngày phơi nhiễm 57 Hình 3.12: Diễn biến hiệu lực diệt sâu qua ngày phơi nhiễm 61 ix ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP TÀI LIỆU THAM KHẢO A TÀI LIỆU TIẾNG ANH [1] Baskaran R.K M., 2001 In vivo screening of optical brighteners as UV protectants and their efficacy in enhancing the virulence of Maduri isolate of NPV of Amascata albistriga (Walker).Lepidoptera: Arctiidae Journal of Biological Control.2 (1):169-174 [2] Burges, H D., G Croizier, J Huber (1980), “A review of safery tests on baculoviruses”, Entomophaga, 25: 329 - 339 [3] Bergold, G H., 1963a Fine structure of some insect viruses Journal Insect Pathology, 5: 111 – 128 [4] Bergold, G H., 1963b The molecular structure of some insect virus inclusion bodies Journal Ultrastructs Res., 8: 360 – 378 [5] Bud, H M and M D Kelly (1980), “Nuclear polyhedrosis virus DNA infectious”, Micro-biologycal, 3, 103 - 108 [6] Bud, H.M, 1977 The DNA contained by nuclear polyherosis virus isolated from four Spodoptera spp (Lepidoptera, Noctuidae): genome size and configuration assessed by electron microscopy, 135 – 143 [7] Burges, H D., G Croizier, J Huber (1980), “A review of safery tests on baculoviruses”, Entomophaga, 25: 329 - 339 [8] Crook, N E and Jarrett P (1991), “Viral and bacterial pathogens of insects” Socirty for Applied Bacteriology 20: 91-96 [9] Evans, H F (1986), “ The biology of Baculovirus” (eds Granados, R R and Federici, B A.), CRC Press, Boca Raton, Fl, vol II, pp 89 - 132 [10] Flavio et al (1997) Production of Nuclear Polyhedrosis Virus of Anticarsia gemmatalis Hübner (Lepidoptera:Noctuidae): Effect of Vírus Dosage, Host Density and Age 63 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP [11] Grzywacz D., Rabindra R J Brown M., Jones K.A 2011 The Helicoverpa armigera NPV production manual http://www.fao.org/docs/eims/upload/agrotech/2011/hanpvmanual-pt1.pdf [12] Harrap, K A., and B E Juniper 1966 The internal structure of an insect virus Virology 29:175-178 [13] Ignoffo, C M., Rice, W C and Mcintoch, A H (1989): Inactivation of non occluded and occluded baculovirus and baculovirus-DNA exposed to simulated sunlight Environmental Entomology.18(1)177-183 [14] Ignoffo, C.M (1992) Combination of environmental factor and simulated sunlight affect-ing inclusion bodies of the Heliothis (Lepidotera: Noctuidae) nucleopolyhedrosis virus Environmental entomology 21,210-213 Jayaraj (1985), “Symptoms and pathologies of insect diseases [15] inMicrobial control and integrated pest management”, Tamil Nadu Agricultural University, Coimbatorem, India, p 30 - 33 [16] (1982), Johnson D W., D B Boucias, C S Barfield, and G E Allen “A temperature dependent developmental model for a nucleopolyhedrosis virus of the velvetbean caterpillar, Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Noctuidae)”, J Invertebr Pathol 40, pp 292 - 298 [17] Kao Meher (2004) Optimization of Helicoverpa annigera NPV inoivo mass production and regulation ofmalodor associated with the process [18] Kelly, D C (1985), “Insect iridescent viruses”, Current Topics in Microbiology and Immunology, 116, 23 - 35 [19] Kobayashi M., S Inagaki and S Kawase (1981), “Effect of high temperature on the development of nuclear polyhedrovirus in the silkworm, Bombyx”, J Invertebr Pathol 38, pp 386 - 394 64 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP [20] Lansing M Prescott, john P Harley, Đonal A Klein, 2005 Microbiology Mc Graw Hill [21] Lawrence A Lacey, Hary K Kaya., 2007 Book: Field Manual of Techniques in Invertebrate Pathology - Application and Evaluation of Pathogens for Control of Insects and other Invertebrate Pests Springer, Second edition [22] M.A.Sorour, O.Khamiss, A.S.Abd El-Wahab, M.A.K.El-Sheikh and S.Abul-Ela( 2011) An Economically Modified Semi-Synthetic Diet for Mass Rearing the Egyptian Cotton Leaf Worm Spodoptera littolaris, Academic Journal of Entomology ( 3), 118- 120 [23] Mohammad et al, 2002 BIOLOGICAL CONTROL Field Efficacy of the Nucleopolyhedrovirus of Anticarsia gemmatalis Hübner (Lepidoptera: Noctuidae): Effect of Formulations, Water pH, Volume and Time of Application, and Type of Spray Nozzle [24] Monobrullah Md and Masao Nagata, 2000 Optimisation of Spodoptera litura Fab Nucleopolyhedrovirus Production in Homologous Host Larvae International Journal of Tropical Insect Science Science , Volume 20, Issue 02, pp 157-165 [25] Ravishankar B S and Venkatesha M G., 2010 Effectiveness of SlNPV of Spodoptera litura (Fab.) (Lepidoptera:Noctuidae) on different host plants Journal of Biopesticides (1 Special Issue): 167 – 171 [26] Sasumu Maeda et all (1990), Characteristically distinct isolates of nuclear polyhedrosis virus from Spodoptera litura (Fab) polyhedrosis virus using UV irradiation protectants [27] S Arivudainambi et al (2000), enhancing the efficacy and persistency of Spodoptera litura 65 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP [28] Shinoda, T., 2001 Spodoptera litura Fabricius In: Agriculture, Forestry and Fisheries Research Council (Ed.), The Pest of Vegetables Asociation of Agriculture and Forestry Staistics, Tokyo, pp 112 - 125 [29] Summers, M D., R Engler, L A Falcon and P V Vail (Eds) (1975) Baculoviruses for Insect Pest Control: Safety Considerration Amerrican Society of Microbiology, Washington [30] Tanada, Y and H K Kaya (1993), Insect pathology Academic press, IRC Harcount brace Jovanovich, publishrs, San Diego/ New Yourk/ Boston/ London/ Sydney/ Tokyo/ Toronto [31] Trang T.T.K., Chaudhari S and Gautam R.D., 2003 “A note on the spread of Spodoptera litura (Fab.) Nuclear polyhedrosis virrsu through Cotesia (Apanteles) angaleti Muesbeck (Hymenoptera: Braconidae)” Omonrice 11: 151-152 (2003) [32] Trang, T T K and Chaudhari, S., 2002 “Bioassay of nuclear polyhedrovirus (npv) and in combination with insecticide on Spodoptera litura (Fab)” Omonrice, 10: 45-53 B TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT [1] Chu Thị Thơm, Phan Thị Lài Nguyễn Văn Tó (2006), Tìm hiểu chế phẩm vi sinh vật dùng nông nghiệp, Tủ sách khuyến nông phục vụ người lao động, Nhà xuất lao động, Hà Nội [2] Hoàng Thị Việt et al., (2000), “Một số kết nghiên cứu NPV (Nuclear polyhedrosis virus) khả sử dụng phòng trừ sâu hại trồng”, Tuyển tập cơng trình nghiên cứu Bảo Vệ Thực Vật 2000-2002, Viện Bảo Vệ Thực vật, Nhà xuất Nông Nghiệp Hà Nội, Trang 110-130 66 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP [3] Ngô Trung Sơn (1999), Nghiên cứu sử dụng HaNPV phòng trừ tổng hợp sâu xanh hại Ninh Thuận Luận án tiến sỹ nông nghiệp, Viện Khoa học Kỹ thuật Nông nghiệp Việt Nam [4] Nguyễn Văn Huỳnh Lê Thị Sen (2004), Giáo trình Cơn trùng Nơng nghiệp, phần B: Cơn trùng gây hại trồng Đồng sơng Cửu Long, Tủ sách Đại Học Cần Thơ [5] Nguyễn Văn Tuất, 2004 Nghiên cứu sản xuất sử dụng thuốc sinh học đa chức cho số loại trồng kỹ thuật Công nghệ sinh học Báo cáo tổng kết đề tài Khoa học công nghệ Viện bảo vệ Thực vật [6] Phạm Hữu Nhượng ctv 2005 Nghiên cứu sử dụng chế phẩm NPV trừ sâu xanh da láng Tạp chí NNCNTP [7] Phạm Huỳnh Thanh Vân, Lê Thị Thuỳ Minh, 2001 Sâu Ăn Tạp (Spodoptera litura) số đặc điểm hình thái, sinh học thành phần thiên địch số loại rau màu vùng Đồng Bằng Sông Cửu Long Luận văn Tốt nghiệp Đại Học [8] Phạm Thị Thùy (2004), Công nghệ sinh học bảo vệ thực vật, Nhà xuất Đại học Quốc Gia Hà Nội [9] Phạm Văn Biên, Bùi Cách Tuyến Nguyễn Mạnh Chinh (2003), Cẩm nang sâu bệnh hại trồng (Quyển 1), Nhà xuất Nông Nghiệp, Tp Hồ Chí Minh [10] Phạm Văn Ty, Vũ Nguyên Thành (2007) Công nghệ sinh học, tập 5, Nxb Giáo dục, Hà Nội C TÀI LIỆU INTERNET [1] http://thuvienphapluat.vn/archive/TCVN-5165-1990-san-pham- thuc-pham-phuong-phap-xac-dinh-tong-so-vi-khuan-vb902237.aspx 67 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP [2] http://udkhcnbinhduong.vn [3] http://luanvan.co/luan-van/de-tai-nghien-cuu-san-xuat-su-dung- thuoc-sau-sinh-hoc-da-chuc-nang-cho-mot-so-loai-cay-trong-bang-ky-thuatcong-nghe-54104/ [4] http://d.violet.vn/uploads/previews/204/1403283/preview.swf [5] http://www.vinachem.com.vn/Desktop.aspx/Xuat-ban-pham/So- 92011/Thuoc_BVTV_co_nguon_goc_sinh_hoc_ung_dung_cua_Hoa_hoc_xanh _cho_nong_nghiep_ben_vung/ [6] http://www.fao.org/docs/eims/upload/agrotech/2011/hanpvmanual -pt1.pdf [7] http://www.moitruong.com.vn/Upload/48/Nam_2013/Thang_12/N gay_7/GTSuDungThuocBVTV_SVquanlydat.com.pdf [8] http://www.bvtvhcm.gov.vn/document.php?id=51&cid=6 [9] http://nnptntvinhphuc.gov.vn/index.php?action=details&&idmuc=SBHR21 [10] http://doan.edu.vn/do-an/de-tai-tim-hieu-ve-cac-thiet-bi-ly-tam- dung-trong-thuc-pham-25277/ 68 PHỤ LỤC A HÌNH ẢNH TRONG QUÁ TRÌNH THỰC HIỆN Hình 1: Sâu khoang ni thầu dầu để chuẩn bị nhiễm Hình 2: Thức ăn nhân tạo sau đổ hộp Hình 3: Sâu ni thức ăn nhân tạo sau nhiễm virus Hình 4: Sâu chết nhiễm virus Hình 4: Thao tác đỗ đĩa B BẢNG XỬ LÝ SỐ LIỆU THƠ BẰNG PHẦN MỀM STATGRAPHICS CENTURION XV * Thí nghiệm 1: Khảo Sát ảnh hưởng dịch gốc virus tới hiệu lực diệt sâu Hiệu lực diệt sâu sau ngày phơi nhiễm Summary Statistics for HLDIETSAUN8 CTHUC Count Average Standard deviation Coeff of variation CT1 95.0 5.0 5.26316% CT2 98.3333 2.88675 2.93568% KLT 60.0 10.0 16.6667% ANOVA Table for HLDIETSAUN8 by CTHUC Source Sum of Squares Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 2705.56 1352.78 30.44 0.0007 Multiple Range Tests for HLDIETSAUN8 by CTHU Method: 95.0 percent LSD CTHUC Count Mean Homogeneous Groups X KLT 60.0 X CT1 95.0 X CT2 98.3333 Tổng vi sinh vật hiếu khí CTHUC Count Average Standard deviation Coeff of variation CT1 1.34367E8 5.59527E7 41.6418% CT2 9.56E7 3.39575E7 35.5204% KLT 1.10333E9 4.04145E7 3.66295% ANOVA Table for TONGVSV by CTHUC Source Sum of Squares Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 1.95593E18 9.77963E17 495.83 0.0000 Multiple Range Tests for TONGVSV by CTHUC CTHUC Count Mean Homogeneous Groups CT2 CT1 KLT 3 9.56E7 1.34367E8 1.10333E9 X X X * Thí nghiệm ly tâm lần 1, loại bỏ xác sâu Tổng số vi sinh vật hiếu khí Summary Statistics for VSV CONGTHUC Count Average Standard deviation Coeff of variation CT1 CT2 CT3 CT4 DC 3 3 10.0989 9.55708 8.98226 8.86708 10.0457 0.0714921 0.292368 0.0770068 0.122017 0.130937 0.707922% 3.05918% 0.857322% 1.37607% 1.30341% ANOVA Table for VSV by CONGTHUC Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 3.9835 0.995875 38.73 CONGTHUC Count Mean Homogeneous Groups CT4 CT3 CT2 DC CT1 3 3 8.86708 8.98226 9.55708 10.0457 10.0989 X X P-Value 0.0000 X X X Khảo sát số PIB Summary Statistics for PIB CT Count Average Standard deviation Coeff of variation CT1 9.24711 0.00794017 0.0858666% CT2 9.24526 0.0502188 0.543184% CT3 9.18618 0.0227109 0.247229% CT4 9.11357 0.0220509 0.241957% DC 9.27744 0.171709 1.85082% Total 15 9.21391 0.0914237 0.992235% ANOVA Table for PIB by CONGTHUC Source Sum of Squares Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0.0508742 0.0127185 1.92 0.1831 Multiple Range Tests for PIB by CONGTHUC CONGTHUC Count Mean Homogeneous Groups CT4 9.11357 X CT3 CT2 CT1 DC 3 3 9.18618 9.24526 9.24711 9.27744 XX XX XX X 3.Hiệu lực diệt sâu sau 11 ngày phơi nhiễm Summary Statistics for HIEULUCDIETSAU CT CT1 CT2 CT3 CT4 DC Total Count 3 3 15 Average 88.3333 94.4467 97.2233 88.3333 87.7767 91.2227 Standard deviation 2.88675 3.85093 2.54551 7.63763 3.85093 5.54547 Coeff of variation 3.26802% 4.07736% 2.61821% 8.64637% 4.38719% 6.07905% ANOVA Table for HIEULUCDIETSAU by CONGTHUC Source Sum of Squares Mean Square F-Ratio Between groups 224.921 56.2302 2.73 P-Value 0.0897 Multiple Range Tests for HIEULUCDIETSAU by CONGTHUC CONGTHUC Count Mean Homogeneous Groups DC 87.7767 X CT1 88.3333 X CT4 88.3333 X CT2 94.4467 XX CT3 97.2233 X * Thí nghiệm ly tâm lần, loại bỏ vi sinh vật, thu nhận virus 1.Khảo sát tổng số vi sinh vật hiếu khí Summary Statistics for TONGVSVHIEUKHI CT Count Average Standard deviation Coeff of variation CT5 8.28252 0.232432 2.80629% CT6 CT7 3 8.5525 8.58051 0.238566 0.300379 2.78943% 3.50071% KLT 10.0457 0.130937 1.30341% ANOVA Table for TONGVSVHIEUKHI by CT Source Sum of Squares Mean Square F-Ratio Between groups 5.73593 1.91198 35.03 P-Value 0.0001 Multiple Range Tests for TONGVSVHIEUKHI by CT CT CT5 Count Mean 8.28252 Homogeneous Groups X CT6 8.5525 X CT7 KLT 3 8.58051 10.0457 X X 2.Khảo sát số PIB Summary Statistics for TONGSOPIB CT Count Average Standard deviation Coeff of variation CT5 9.13453 0.00976775 0.106932% CT6 9.17511 0.0355981 0.387986% CT7 9.219 0.0176619 0.191582% KLT 9.27744 0.171709 1.85082% ANOVA Table for TONGSOPIB by CT Source Sum of Squares Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0.0337652 0.0112551 1.44 0.3004 Multiple Range Tests for TONGSOPIB by CT Method: 95.0 percent LSD CT Count Mean Homogeneous Groups CT5 9.13453 X CT6 9.17511 X CT7 9.219 X KLT 9.27744 X Hiệu lực diệt sâu sau 11 ngày phơi nhiễm Summary Statistics for DIETSAU CT Count Average Standard deviation Coeff of variation CT5 97.2233 4.80933 CT6 91.11 8.39025 CT7 94.4433 9.62443 KLT 87.7767 10.7159 ANOVA Table for DIETSAU by CT Source Sum of Squares Mean Square 4.94668% 9.20892% 10.1907% 12.2081% F-Ratio P-Value Between groups 0.67 0.5951 150.756 50.2519 Multiple Range Tests for DIETSAU by CT Method: 95.0 percent LSD CT Count Mean Homogeneous Groups KLT 87.7767 X CT6 CT7 3 91.11 94.4433 X X CT5 97.2233 X * Thí nghiệm 3: Kiểm chứng CT dự đốn Summary Statistics for TPC CTHUC=KLT CTHUC=TN Count 10 10 Average 2.0036E9 6.468E7 Standard deviation 8.53219E8 1.50498E7 Coeff of variation 42.5843% 23.268% Comparison of Means for TPC t test to compare means Null hypothesis: mean1 = mean2 Alt hypothesis: mean1 NE mean2 assuming equal variances: t = 7.18508 P-value = 0.00000109263 Reject the null hypothesis for alpha = 0.05 Summary Statistics for PIB CTHUC=KLT CTHUC=TN Count 10 10 Average 1.87E9 1.13E9 Standard deviation 1.71917E8 1.75119E8 Coeff of variation 9.19344% 15.4973% Comparison of Means for PIB t test to compare means Null hypothesis: mean1 = mean2 Alt hypothesis: mean1 NE mean2 assuming equal variances: t = 9.53572 P-value = 1.84679E-8 Reject the null hypothesis for alpha = 0.05 Summary Statistics for %DIETSAU MAU=KLT MAU=TN Count 3 Average 78.1933 95.5533 Standard deviation 4.25789 3.85093 Coeff of variation 5.44534% 4.03013% Comparison of Means for %DIETSAU t test to compare means Null hypothesis: mean1 = mean2 Alt hypothesis: mean1 NE mean2 assuming equal variances: t = -5.23747 P-value = 0.00635114 Reject the null hypothesis for alpha = 0.05 ... ly tâm tinh NPV phục vụ cho sản xuất chế phẩm chưa quan tâm Xuất phát từ thực tiễn sinh viên tiến hành nghiên cứu thực đề tài “XÁC ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP TINH SẠCH NPV (Nuclear Polyhedrosis Virus) ... gốc đến hiệu nhân NPV sâu khoang 41 iv ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP 3.2 Xác định số vòng ly tâm phù hợp để loại bỏ xác sâu thể hòa tan 44 3.3 Xác định số vòng ly tâm lần để tinh virus NPV 52 3.4 Tối... Học - Trường ĐH Kỹ Công Nghệ TP Hồ Chí Minh Tơi xin cam đoan : Đề tài "Xác định phương pháp tinh NPV (Nuclera Polyhedrosis Virus)" Tiến sĩ Nguyễn Thị Hai hướng dẫn đề tài riêng Các số liệu, kết