Đang tải... (xem toàn văn)
Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 9654:2013 về tinh dầu - Phân tích bằng sắc ký khí trên cột mao quản chiral - Phương pháp chung quy định phương pháp chung để xác định số dư đối quang riêng hoặc sự phân bố của các chất đối quang chứa trong tinh dầu bằng phân tích sắc ký khí trên cột mao quản chiral.
TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 9654:2013 ISO 22972:2004 TINH DẦU - PHÂN TÍCH BẰNG SẮC KÝ KHÍ TRÊN CỘT MAO QUẢN CHIRAL - PHƯƠNG PHÁP CHUNG Essential oils - Analysis by gas chromatography on chiral capillary columns - General method Lời nói đầu TCVN 9654:2013 hồn tồn tương đương với ISO 22972:2004; TCVN 9654:2013 Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F2 Dầu mỡ động vật thực vật biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học Công nghệ công bố TINH DẦU - PHÂN TÍCH BẰNG SẮC KÝ KHÍ TRÊN CỘT MAO QUẢN CHIRAL - PHƯƠNG PHÁP CHUNG Essential oils - Analysis by gas chromatography on chiral capillary columns - General method Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn quy định phương pháp chung để xác định số dư đối quang riêng phân bố chất đối quang chứa tinh dầu phân tích sắc ký khí cột mao quản chiral Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn Đối với tài liệu viện dẫn ghi năm cơng bố áp dụng phiên nêu Đối với tài liệu viện dẫn khơng ghi năm cơng bố áp dụng phiên nhất, bao gồm sửa đổi, bổ sung (nếu có) TCVN 8443 (ISO 356), Tinh dầu - Chuẩn bị mẫu thử TCVN 9653:2013 (ISO 7609:1985), Tinh dầu - Phân tích sắc ký khí cột mao quản Phương pháp chung Nguyên tắc Tinh dầu phân tích sắc ký khí, điều kiện phân tích quy định, cột có đường kính chiều dài thích hợp, thành cột phủ trước, trực tiếp pha tĩnh chiral gắn kết chất pha tĩnh Các thành phần đối quang khác tinh dầu nhận biết chất chuẩn cần, cách đo số lưu chúng xác định tỷ lệ tương đối thành phần đồng phân đối quang Thuốc thử Trong trình phân tích, sử dụng thuốc thử loại tinh khiết phân tích, trừ có quy định khác 4.1 Khí 4.1.1 Khí mang: hydro, heli nitơ loại khí khác, phụ thuộc vào kiểu loại detector sử dụng Nếu sử dụng detector có u cầu khí mang khác loại khí nêu phải có quy định cho loại khí báo cáo thử nghiệm 4.1.2 Khí phụ trợ: tất loại khí thích hợp phụ thuộc vào detector sử dụng: - detector ion hóa lửa khơng khí hydro phải có độ tinh khiết cao; - detector phổ khối lượng khí heli phải có độ tinh khiết cao 4.2 Chất chuẩn, tương ứng với độ tinh khiết hỗn hợp đồng phân đối quang cần phát Thiết bị, dụng cụ 5.1 Máy sắc ký, gắn hệ thống bơm có detecor thích hợp cài đặt chương trình nhiệt độ Hệ thống bơm detector phải phù hợp với phận để kiểm soát độc lập nhiệt độ tương ứng chúng 5.2 Cột mao quản, làm vật liệu trơ, có đường kính từ 10 m đến 60 m 0,53 mm có chiều dài CHÚ THÍCH Pha tĩnh chiral thường dựa -cyclodextrin thay (ví dụ: 1,3,6-permetylat cyclodextrin 10 % OV 101 ) 5.3 Bộ ghi tích phân điện Chuẩn bị mẫu thử Xem TCVN 8443 (ISO 356) Mẫu thử phải chuẩn bị sau: - chuyển đổi có chọn lọc thành phần có liên quan (ví dụ: sắc ký hai chiều nội dòng bẫy); - tạo dẫn xuất trước bơm Nếu chuẩn bị mẫu theo trường hợp đề cập tiêu chuẩn tinh dầu tương ứng Điều kiện vận hành 7.1 Nhiệt độ lò Nhiệt độ lò phải điều chỉnh cho thu hiệu cần thiết (xem 8.1) 7.2 Tốc độ dòng khí mang Tốc độ dòng khí phải điều chỉnh cho thu hiệu cần thiết (xem 8.1) 7.3 Tốc độ dòng khí phụ trợ detector Theo hướng dẫn sử dụng nhà sản xuất để thu độ nhạy tối ưu từ detector 8.Tính cột 8.1 Hiệu cột Xác định hiệu cột đồng phân đối quang lưu giữ chất chuẩn chọn (xem 4.2), phù hợp với phương pháp TCVN 9653 (ISO 7609) Hiệu 25 000 đĩa lý thuyết CHÚ THÍCH Khi sử dụng hệ thống sắc ký hai chiều điều kiện chương trình nhiệt độ tối ưu hóa thành phần cần xác định (hoặc họ hóa chất) cho đáp ứng yêu cầu độ phân giải với thời gian phân tích giảm dần Trong trường hợp này, hiệu thấp 25 000 đĩa lý thuyết 8.2 Độ phân giải độ tách Xác định độ phân giải cách bơm lượng chất chuẩn chọn (xem 4.2) điều kiện thử nghiệm Tiến hành phép tính theo 8.3.1 8.3.2 TCVN 9653:2013 (ISO 7609:1985) Bơm chất chuẩn điều kiện phân tích phải khơng gây sai lệch đồng phân đối quang thay đổi tỷ lệ chúng Xác định số lưu Xem TCVN 9653 (ISO 7609) CHÚ THÍCH Khi sử dụng hệ thống sắc ký hai chiều phép xác định số lưu đạt tối ưu điều kiện phân tích sắc ký độ phân giải đồng phân đối quang giống với điều kiện phân tích chất chuẩn, giới hạn chênh lệch ngẫu nhiên 10 Phép xác định số dư đối quang phân bố đối quang Sử dụng nhiệt độ tốc độ dòng chấp nhận cho phép thử hiệu cột (xem 8.1) Sau nhiệt độ cột ổn định, bơm lượng thích hợp mẫu thử Kiểm tra sắc phổ tinh dầu thu được, sử dụng chất thị cho theo máy tích phân, phù hợp với giới hạn cố định chất chuẩn đặc trưng với tinh dầu tương ứng Đặc biệt trường hợp sử dụng hệ thống sắc ký chiều, nên kiểm tra thiết bị thích hợp (ví dụ: detector phổ khối lượng) khơng có chất đồng rửa giải chất cần xác định 11 Biểu thị kết 11.1 Yêu cầu chung Biểu thị kết theo số dư đối quang theo phân bố đối quang phù hợp với yêu cầu chất chuẩn đặc trưng theo tinh dầu tương ứng 11.2 Số dư đối quang: E Xác định số dư đối quang, E, từ diện tích pic đồng phân đối quang: Ex ( Amax Amax Amin ) 100 Amin Trong x = (R) Amax dùng cho đồng phân đối quang (R); x = (S) Amin dùng cho đồng phân đối quang (S); Amax diện tích pic có bề mặt lớn nhất; Amin diện tích pic có bề mặt nhỏ 11.3 Phân bố đối quang (R )% (S )% A(R ) 100 A(R ) A(S ) A(S ) 100 A(R ) A(S ) Trong đó: A(R) diện tích pic đồng phân đối quang (R); A(S) diện tích pic đồng phân đối quang (S) Trong trường hợp số dư đối quang phân bố đối quang tương ứng lớn 95 % 97,5 % nên ý đặc biệt lựa chọn thơng số tích phân, để giảm thiểu sai số đồng phân đối quang dư nhỏ Sau xác định điều kiện phân tích sắc ký chấp nhận nhanh tốt 12 Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm theo TCVN 9653 (ISO 7609) ... điện Chuẩn bị mẫu thử Xem TCVN 8443 (ISO 356) Mẫu thử phải chuẩn bị sau: - chuyển đổi có chọn lọc thành phần có liên quan (ví dụ: sắc ký hai chiều nội dòng bẫy); - tạo dẫn xuất trước bơm Nếu chuẩn. .. tính theo 8.3.1 8.3.2 TCVN 9653:2013 (ISO 7609:1985) Bơm chất chuẩn điều kiện phân tích phải khơng gây sai lệch đồng phân đối quang thay đổi tỷ lệ chúng Xác định số lưu Xem TCVN 9653 (ISO 7609)... 8.Tính cột 8.1 Hiệu cột Xác định hiệu cột đồng phân đối quang lưu giữ chất chuẩn chọn (xem 4.2), phù hợp với phương pháp TCVN 9653 (ISO 7609) Hiệu 25 000 đĩa lý thuyết CHÚ THÍCH Khi sử dụng hệ thống