Đang tải... (xem toàn văn)
Bài viết trình bày việc xác định sự tương hợp giữa triệu chứng lâm sàng với nồng độ các cytokine trong Sốt xuất huyết Dengue (SXHD).
Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 22 * Số * 2018 KHẢO SÁT MỐI TƯƠNG QUAN GIỮA ĐẶC ĐIỂM LÂM SÀNG VỚI NỒNG ĐỘ CYTOKIN TRONG SỐT XUẤT HUYẾT DENGUE Ở TRẺ EM Trần Thanh Hải*, Tạ Văn Trầm** TÓM TẮT Mục tiêu: Xác định tương hợp triệu chứng lâm sàng với nồng độ cytokine Sốt xuất huyết Dengue (SXHD) Phương pháp nghiên cứu: Mơ tả dọc đồn hệ tiến cứu Kết quả: Có 234 bệnh nhân đưa vào nghiên cứu kết ghi nhận: Nồng độ IL-6 cao làm tăng khả xuất triệu chứng đau bụng bệnh nhân SXHD Nồng độ IL-2, IL-4 IL-13 cao làm tăng khả xuất triệu chứng gan to bệnh nhân SXHD Nồng độ IL-5,IL-10, IL-12 cao làm tăng nhiệt độ bệnh nhân SXHD Khơng tìm thấy mối tương quan nồng độ cytokin khảo sát với triệu chứng nơn ói, xuất huyết niêm mạc, xuất huyết da bệnh nhân SXHD Kết luận: Có tương hợp thay đổi nồng độ cytokin triệu chứng lâm sàng bệnh nhân SXHD Từ khóa: Sốt xuất huyết Dengue (SXHD), cytokin ABSTRACT INTERACTION BETWEEN CLINICAL SYMPTOMS WITH CONCENTRATION OF CYTOKINES IN DENGUE HEMORRHAGIC FEVER IN CHILDREN Tran Thanh Hai, Ta Van Tram * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Vol 22 - No 4- 2018: 134 – 139 Objective: To determine the correlation between cytokines and clinical symptoms in DHF Methods: Prospective cohort Results: 234 patients were studied and the results as: High levels of IL-6 increase the likelihood of occurring symptoms of abdominal pain in DHF patients High levels of IL-2, IL-4 and IL-13 increase the occurrence of liver enlargementsymptom in DHF patients High levels of IL-5, IL-10, IL-12 increase the temperature of DHF patients No correlation was found between the concentrations of cytokines with symptoms of vomiting, mucosal hemorrhage, subcutaneous hemorrhage of DHF patients Conclusion: There is a correlation between change in cytokine concentrations and clinical symptoms in DHF patients Keywords: Dengue hemorrhagic fever (DHF), cytokine người nhiễm dengue dẫn đến khoảng 24.000 ĐẶT VẤN ĐỀ trường hợp tử vong Chẩn đoán lâm sàng Bệnh sốt xuất huyết Dengue (SXHD) điều trị SXHD TCYTTG chuẩn hóa vấn đề y tế quan trọng nước nhiệt đới, hoàn thiện dần phác đồ Tuy nhiên có Việt Nam Theo Tổ chức Y tế Thế nhiều trường hợp SXHD tử vong(7) Một giới (TCYTTG), có khoảng 2,5 – tỷ người chế miễn dịch bệnh sinh khác cho nhiễm virus thuộc 100 quốc gia có nguy nhiễm Dengue đề cập thời gian sau virus Dengue Hằng năm, có khoảng 20 triệu nhà nghiên cứu tìm cách chứng * Trường Cao đẳng Y tế Tiền Giang, **Bệnh viện Đa khoa Tiền Giang ĐT: 0913771779 Email: tavantram@gmail.com Tác giả liên lạc: PGS TS BS Tạ Văn Trầm 134 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 22 * Số * 2018 minh nhiễm vi rút Dengue gây đáp ứng lệch lạc hệ miễn dịch Điều không làm suy yếu đáp ứng miễn dịch thải trừ virus mà tạo mức cytokin Nhiều nghiên cứu đáp ứng miễn dịch ký chủ đóng vai trò phát triển SXHD sốc SXHD, bao gồm đáp ứng miễn dịch qua trung gian tế bào, sản phẩm cytokin tế bào khác nhau, hoạt hóa lympho T dẫn đến hoạt hóa bổ thể sản xuất nhiều cytokin khác với hoạt hóa lympho T mức dẫn đến đáp ứng cytokin bệnh lý có liên quan đến bệnh nặng Nồng độ cytokin thụ thể hòa tan chúng bệnh nhân SXHD cao bệnh nhân sốt Dengue gợi ý vai trò số cytokin độ nặng bệnh Trong nhiễm vi rút Dengue, nồng độ cytokin IL2, IL6, IL8, IL10, IFN, αTNF tăng lên(6,2,4) Sự gia tăng cytokin xem dấu hiệu điểm bệnh nhân bị SXHD nặng Nhiều nghiên cứu ghi nhận vai trò cytokin q trình gia tăng tính thấm thành mạch xuất huyết(1,5,3) Từ nghiên cứu cho thấy dấu sinh học, đặc biệt cytokin cần nghiên cứu hữu ích cho lâm sàng tiến triển từ nhiễm Dengue đến SXHD sốc SXHD chưa thể dự đốn trước Vì vậy, xác định tương hợp thay đổi nồng độ cytokin với biểu lâm sàng bệnh nhân SXHD vấn đề mới, quan trọng lĩnh vực chẩn đốn, xử trí tiên lượng bệnh có khả gây tử vong Mục tiêu nghiên cứu Xác định tương hợp triệu chứng lâm sàng với nồng độ cytokine Sốt xuất huyết Dengue (SXHD) ĐỐITƯỢNG-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU Thiết kế nghiên cứu Mô tả dọc tiến cứu Nghiên cứu Y học Dân số nghiên cứu Tất trẻ em chẩn đoán SXHD nhập Khoa Nhi – Bệnh viện Đa khoa Tiền Giang Tiêu chí chọn bệnh Bệnh nhân nhập Khoa Nhi Bệnh viện Đa khoa Tiền Giang đồng ý gia đình việc tham gia nghiên cứu, có tiền sử sốt 72 bác sĩ điều trị nghĩ nhiều bệnh SXHD với tiêu chuẩn theo Tổ chức Y tế Thế giới (2009) Hướng dẫn chẩn đoán điều trị SXHD Bộ Y tế (2011)(7) Tiêu chí loại trừ Các trẻ bị SXHD có kèm theo bệnh lý khác suy gan, suy thận, hội chứng thận hư, suy tim, tim bẩm sinh… khơng đồng ý gia đình bệnh nhân Cỡ mẫu Được xác định theo công thức ước lượng tỉ lệ: Trong đó: Z: khoảng tin cậy = 97%; d: sai số chuẩn = 0,05; Z 1-α/2= 1,96; p: tần suất lý thuyết Theo nghiên cứu M Juffrie (6) từ mẫu huyết tương lúc nhập viện bệnh nhân SXHD, nồng độ IL-8 tăng cao 16,9% trường hợp (với nồng độ dao động 20-482 pg/ml trung bình 30 pg/ml), p=0,169 n = 1,962 x 0,169.0,831/0,0025 = 216 người Các bước thực Mỗi bệnh nhân có mẫu máu tĩnh mạch rút vào ngày nhập viện để xét nghiệm huyết học IgM/IgG ELISA (bằng thử nghiệm anti-DENVIgM/IgGELISA), RT-PCR NS1 ELISA sử dụng để xác nhận tất trường hợp nhiễm bệnh SXHD Các trường hợp sau đo nồng độ cytokines Phát cytokine multiplex micro-bead immunoassay: xét nghiệm phát 10 loại cytokines: IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12p70, IL-13, IFNγ TNFα Các triệu 135 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 22 * Số * 2018 Nghiên cứu Y học chứng lâm sàng theo dõi ghi nhận ngày xuất viện Sự tương hợp nồng độ cytokin với triệu chứng nơn ói Phân tích liệu Bảng 2.Mối liên quan nồng độ cytokin triệu chứng nơn ói Phần mềm SPSS 18.0 Loại cytokin KẾT QUẢ Đặc điểm lâm sàng bệnh nhân Bảng1 Đặc điểm lâm sàng bệnh nhân (N=234) Ngày sốt bệnh nhân nhập viện Nơn ói Đau bụng Xuất huyết da Xuất huyết niêm mạc Gan to Đặc điểm Ngày Ngày Ngày Không nôn ói Có nôn ói - Ngày - Ngày - Ngày - Ngày - Ngày Không đau bụng Có đau bụng - Ngày - Ngày - Ngày - Ngày - Ngày Khơng xuất huyết da Có xuất huyết da - Ngày - Ngày - Ngày - Ngày - Ngày Không xuất huyết niêm mạc Có xuất huyết niêm mạc - Ngày - Ngày - Ngày - Ngày - Ngày Khơng có Có gan to - Ngày - Ngày - Ngày - Ngày Cao Nhiệt độ 136 Ngày nhiệt độ cao - Ngày - Ngày - Ngày - Ngày - Ngày - Ngày n 18 97 119 145 89 13 27 46 156 78 16 22 26 54 180 31 87 41 14 % 7,69 41,45 50,85 62 38 5,6 11,5 19,7 0,9 0,4 66,7 33,3 6,8 9,4 11,1 3,8 2,1 23,1 76,9 13,2 37,2 17,5 6,0 3,0 52 22,2 182 37 92 31 14 194 40 19 13 38,97 ± 0,38 77,8 15,8 39,3 13,2 6,0 3,4 82,9 17,1 1,7 8,1 5,6 1,7 62 104 41 14 3,4 26,5 44,4 17,5 6,0 2,1 IL-1 IL-2 IL-4 IL-5 IL-6 IL-10 IL-12 IL-13 TNF-α INF-γ Nơn ói n Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng 89 145 89 145 89 145 89 145 89 145 89 145 89 145 89 145 89 145 89 145 Trung bình Độ lệch chuẩn p (pg/ml) (pg/ml) 1,4636 1,5259 12,5210 12,0637 1,2387 1,3916 7,4104 6,3399 33,5143 32,5366 20,0806 30,0464 2,3170 2,7192 10,6163 10,3781 28,7267 26,9544 1,2396 1,2410 1,25424 3,09328 16,30352 15,12316 1,28165 1,96649 19,12326 17,64901 39,10513 61,07768 35,30743 84,65489 2,18211 5,42744 13,02370 12,08852 69,05495 64,91652 0,89164 1,22373 0,86 0,83 0,51 0,67 0,89 0,21 0,51 0,88 0,84 0,99 Sự tương hợp nồng độ cytokin với triệu chứng đau bụng Bảng Mối liên quan nồng độ cytokin triệu chứng đau bụng Loại cytokin IL-1 IL-2 IL-4 IL-5 IL-6 IL-10 IL-12 IL-13 TNF-α INF-γ Đau bụng n Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng 78 156 78 156 78 156 78 156 78 156 78 156 78 156 78 156 78 156 78 156 Trung bình Độ lệch chuẩn (pg/ml) (pg/ml) 1,9399 1,2834 13,4987 11,6071 1,5772 1,2115 5,7241 7,2586 48,0391 25,3431 28,9269 24,9205 2,4046 2,6470 11,4703 9,9679 29,0199 26,9328 1,4427 1,1393 4,17646 0,98696 17,65996 14,39897 2,51690 1,15834 12,90395 20,34462 79,95276 31,39849 56,36809 76,27018 2,33387 5,23468 14,21293 11,44427 55,99871 71,16358 1,60735 0,72682 p 0,18 0,38 0,23 0,54 0,01 0,68 0,69 0,38 0,82 0,19 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 22 * Số * 2018 Sự tương hợp nồng độ cytokin với triệu chứng xuất huyết niêm mạc Bảng Mối liên quan nồng độ cytokin triệu chứng xuất huyết niêm mạc Loại cytokin IL-1 IL-2 IL-4 IL-5 IL-6 IL-10 IL-12 IL-13 TNF-α INF-γ XHNM n Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng 182 52 182 52 182 52 182 52 182 52 182 52 182 52 182 52 182 52 182 52 Trung bình Độ lệch chuẩn p (pg/ml) (pg/ml) 1,3695 1,9667 12,2624 12,1508 1,2666 1,5673 6,9298 6,1075 31,4230 38,1077 28,2443 19,2969 2,6158 2,3927 10,5342 10,2396 29,9657 19,4485 1,2159 1,3262 1,09382 5,02057 15,45178 16,03974 1,13620 3,02080 19,24285 14,03748 54,11331 52,39224 76,82974 38,47643 4,88701 2,60073 12,38257 12,69288 72,55377 36,88362 0,85264 1,73502 0,39 0,96 Nghiên cứu Y học XHDD: xuất huyết da Sự tương hợp nồng độ cytokin với triệu chứng gan to Bảng Mối liên quan nồng độ cytokin triệu chứng gan to Loại Gan to n cytokin IL-1 0,49 IL-2 0,77 0,43 0,42 IL-4 IL-5 0,75 0,88 0,32 0,53 IL-6 IL-10 IL-12 XHNM: xuất huyết niêm mạc Sự tương hợp nồng độ cytokin với triệu chứng xuất huyết da IL-13 Bảng Mối liên quan nồng độ cytokin triệu chứng xuất huyết da TNF-α Loại cytokin IL-1 IL-2 IL-4 IL-5 IL-6 IL-10 IL-12 IL-13 TNF-α INF-γ XHDD n Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng Có Khơng 180 54 180 54 180 54 180 54 180 54 180 54 180 54 180 54 180 54 180 54 Trung bình Độ lệch chuẩn (pg/ml) (pg/ml) 1,3271 2,0859 11,4306 14,9278 1,2012 1,7743 6,8739 6,3244 31,9513 36,0989 28,3989 19,1130 2,5670 2,5635 9,8599 12,4981 30,7691 17,1600 1,1894 1,4104 1,07063 4,92854 14,71122 17,95662 1,09879 2,98723 19,41482 13,46902 55,25167 48,49754 77,18241 38,17568 4,91771 2,53595 11,71030 14,49584 73,58584 30,61974 0,84407 1,71590 p 0,27 0,19 0,17 0,84 0,62 0,39 0,99 0,22 0,18 0,36 INF-γ Có Trung bình Độ lệch chuẩn (pg/ml) (pg/ml) 40 1,7645 0,98207 Không 194 1,4481 2,76503 40 18,9725 18,81621 Không 194 10,8490 14,45740 40 1,8400 1,35187 Không 194 1,2290 1,79095 40 7,2715 12,58712 Không 194 6,6390 19,16748 40 48,4337 91,52029 Không 194 29,7074 41,57028 40 33,7300 62,73495 Không 194 24,7149 71,65555 40 2,9270 2,00741 Không 194 2,4918 4,83206 40 15,4477 14,01734 Không 194 9,4421 11,85260 40 29,9150 53,82912 Không 194 27,1571 68,79381 40 1,3515 0,64682 Không 194 1,2175 1,17991 Có Có Có Có Có Có Có Có Có p 0,47 0,01 0,04 0,84 0,21 0,46 0,57 0,01 0,81 0,48 Sự tương hợp nồng độ cytokin với nhiệt độ Bảng Tổng hợp thông số phân tích hồi quy tuyến tính đơn biến liên quan nồng độ cytokin với nhiệt độ (N=234) Các cytokin Β βs R R p IL-1 -0,006 -0,25 0,025 0,001 0,71 IL-2 0,003 0,93 0,93 0,009 0,16 IL-4 0,008 0,25 0,25 0,001 0,71 IL-5 -0,002 -0,076 0,076 0,006 0,25 IL-6 0,000 -0,015 0,015 0,000 0,82 IL-10 -0,001 -0,141 0,141 0,020 0,03 IL-12 0,009 0,066 0,066 0,004 0,32 IL-13 0,005 0,105 0,105 0,011 0,10 TNF-α 0,000 0,027 0,027 0,001 0,67 INF-γ 0,012 0,022 0,022 0,001 0,73 137 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 22 * Số * 2018 Nghiên cứu Y học Bảng Tổng hợp thơng số phân tích hồi quy tuyến tính đa biến liên quan nồng độ cytokin với nhiệt độ (N=234) Các cytokin Β βs R R p IL-1 IL-2 IL-4 IL-5 IL-6 IL-10 IL-12 IL-13 TNF-α INF-γ -0,052 -0,012 -0,01 -0,008 0,001 -0,001 0,028 0,019 0,001 0,100 -0,226 -0,332 -0,031 -0,253 0,054 -0,168 0,212 0,398 0,073 0,190 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,078 0,078 0,078 0,078 0,078 0,078 0,078 0,078 0,078 0,078 0,35 0,25 0,91 0,01 0,46 0,03 0,03 0,14 0,30 0,20 BÀN LUẬN Đặc điểm lâm sàng bệnh nhân Phân nửa bệnh nhân nhập viện vào ngày thứ bệnh (50,85%), có 7,69% bệnh nhân nhập viện sớm (vào ngày thứ bệnh) 38% bệnh nhân có triệu chứng nơn ói; xuất nhiều vào thứ bệnh; có 0,4% bệnh nhân bắt đầu xuất nơn ói vào ngày thứ bệnh 33,3% bệnh nhân SXHD có triệu chứng đau bụng; nhóm triệu chứng xuất từ ngày thứ đến ngày thứ bệnh, cao xuất vào ngày thứ bệnh với 11,1% Đa số bệnh nhân SXHD có dấu hiệu xuất huyết da (76,9%), có 23,1% bệnh nhân khơng có triệu chứng Ngày thứ bệnh thời điểm có nhiều bệnh nhân xuất huyết xuất huyết da (37,2%) 77,8% bệnh nhân có xuất huyết niêm mạc, triệu chứng xuất từ ngày thứ đến ngày thứ sáu bệnh Trong đó, nhiều 39,2% bệnh nhân bắt đầu có xuất huyết niêm mạc từ ngày thứ bệnh Chỉ có 17,1% bệnh nhân SXHD nghiên cứu có triệu chứng gan to, cao (8,1%) bệnh nhân xuất triệu chứng gan to vào ngày thứ bệnh Nhiệt độ cao trung bình bệnh nhân SXHD 38,97±0,38oC Trong đó, chiếm đa số với 138 44,4% bệnh nhân SXHD có thân nhiệt cao rơi vào ngày thứ 4; có 26,5% bệnh nhân có thân nhiệt cao rơi vào ngày thứ Thấp có 2,1% bệnh nhân SXHD có thân nhiệt cao rơi vào ngày thứ bệnh Sự tương hợp nồng độ cytokin với triệu chứng nơn ói Kết phân tích ghi nhận khơng tìm thấy mối liên nồng độ cytokin khảo sát với triệu chứng nơn ói bệnh nhân SXHD (với p>0,05) Sự tương hợp nồng độ cytokin với triệu chứng đau bụng Nồng độ IL-6 nhóm bệnh nhân SXHD có đau bụng cao có ý nghĩa thống kê so với nhóm bệnh nhân khơng có triệu chứng đau bụng (p=0,01) Khơng tìm thấy mối liên nồng độ cytokin khác khảo sát với triệu chứng đau bụng bệnh nhân SXHD Sự tương hợp nồng độ cytokin với triệu chứng xuất huyết niêm mạc Khơng tìm thấy mối liên nồng độ cytokin khảo sát với triệu chứng xuất huyết niêm mạc bệnh nhân SXHD với p>0,05 Sự tương hợp nồng độ cytokin với triệu chứng xuất huyết da Khơng tìm thấy mối liên nồng độ cytokin khảo sát với triệu chứng xuất huyết da bệnh nhân SXHD (p>0,05) Sự tương hợp nồng độ cytokin với triệu chứng gan to Nồng độ IL-2, IL-4 IL-13 nhóm bệnh nhân SXHD có gan to cao có ý nghĩa thống kê so với nhóm bệnh nhân khơng có gan to với p 0,01; 0,04 0,01 Khơng tìm thấy mối liên nồng độ cytokin khác khảo sát với triệu chứng gan to bệnh nhân SXHD Sự tương hợp nồng độ cytokin với nhiệt độ Nhìn vào bảng phân tích đơn biến ta thấy, hệ số tương quan R IL-10 cao Như IL- Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 22 * Số * 2018 Nghiên cứu Y học 10 có ảnh hưởng nhiều đến nhiệt độ bệnh nhân SXHD (p=0,03) Sự thay đổi nồng độ IL-10 giải thích 2% thay đổi nhiệt độ bệnh nhân SXHD (R2=0,020) TÀI LIỆU THAM KHẢO Kết phân tích đa biến cho thấy: hệ số tương quan chung R=0,28 tất 10 yếu tố cytokin giải thích gần 7,8% (R2=0,078) thay đổi nhiệt độ bệnh nhân; có IL-5,IL10, IL-12 có ý nghĩa độc lập giải thích thay đổi nhiệt độ bệnh nhân SXHD KẾT LUẬN Nồng độ IL-6 cao làm tăng khả xuất triệu chứng đau bụng bệnh nhân SXHD Nồng độ IL-2, IL-4 IL-13 cao làm tăng khả xuất triệu chứng gan to bệnh nhân SXHD Nồng độ IL-5 ,IL-10, IL-12 cao làm tăng nhiệt độ bệnh nhân SXHD Khơng tìm thấy mối tương quan nồng độ cytokine khảo sát với triệu chứng nơn ói, xuất huyết niêm mạc, xuất huyết da, nồng độ ALT bệnh nhân SXHD Bozza FA, Cruz OG, Zagne SM (2009) Multiplex cytokine profile from dengue patients: MIP-1beta and IFN-gamma as predictive factors for severity Journal of Virology, 76(23): pp.1242–1249 Houghton-Triviđo, Rodríguez S, (2010) Levels of soluble ST2 in serum associated with severity of dengue due to tumour necrosis factor alpha stimulation Journal of General Virology, 91(3): pp.697-706 Juffrie M, Hack CE (2000) Inflammatory Mediators in Dengue Virus Infection in Children: Interleukin-8 and Its Relationship to Neutrophil Degranulation Infection and Immunity, 68(2): pp.702707 Nguyễn Minh Tuấn, Lê Bích Liên, Lâm Thị Mỹ (2009) Đặc điểm sốt xuất huyết Dengue trẻ em theo týp virus Y học TP Hồ Chí Minh, 13(5): tr.41-48 Nguyễn Thanh Hùng (2004) Đặc điểm lâm sàng, miễn dịch điều trị sốt xuất huyết Dengue trẻ nhũ nhi Luận án tiến sĩ Y học, Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh, tr.32 Rathakrishnan A, Wang SM, Hu Y (2012) Cytokine Expression Profile of Dengue Patients at Different Phases of Illness PLoS One; 7(12): e52215 WHO (2009) Dengue hemorrhagic fever: diagnosis, treatment and control, Geneva Ngày nhận báo: Ngày phản biện nhận xét báo: Ngày báo đăng: 10/3/2018 11/5/2018 30/06/2018 139 ... liên nồng độ cytokin khác khảo sát với triệu chứng đau bụng bệnh nhân SXHD Sự tương hợp nồng độ cytokin với triệu chứng xuất huyết niêm mạc Khơng tìm thấy mối liên nồng độ cytokin khảo sát với triệu... triệu chứng xuất huyết niêm mạc bệnh nhân SXHD với p>0,05 Sự tương hợp nồng độ cytokin với triệu chứng xuất huyết da Khơng tìm thấy mối liên nồng độ cytokin khảo sát với triệu chứng xuất huyết da... IL-10 IL-12 XHNM: xuất huyết niêm mạc Sự tương hợp nồng độ cytokin với triệu chứng xuất huyết da IL-13 Bảng Mối liên quan nồng độ cytokin triệu chứng xuất huyết da TNF-α Loại cytokin IL-1 IL-2