TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN ====== NGUYỄN QUỲNH NGA NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG HẤP THỤ THUỐC CAPTOPRIL CỦA MÀNG CELLULOSE VI KHUẨN LÊN MEN TỪ MƠI TRƢỜNG NƢỚC VO GẠO KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Sinh lý học ngƣời động vật Ngƣời hƣớng dẫn khoa học ThS Hà Thị Minh Tâm HÀ NỘI, 2018 LỜI CẢM ƠN Lời e xin đƣợc bảy tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới Ban Giám hiệu Trƣờng ĐHSP Hà Nội 2, thầy, cô khoa Sinh kỹ thuật Nông nghiệp Viện Nghiên cứu Khoa học Ứng dụng Trƣờng ĐHSP Hà Nội tạo điều kiện giúp đỡ em hồn thành tốt khóa luận tốt nghiệp Đặc biệt, em xin đƣợc gửi lời biết ơn sâu sắc tới ThS Hà Thị Minh Tâm, ngƣời ln theo sát hƣớng dẫn tận tình giúp em hồn thành tốt khóa luận tốt nghiệp Đây bƣớc em nghiên cứu khoa học nên em chƣa có nhiều kinh nghiệm bỡ ngỡ Do khơng tránh khỏi thiếu sót, nên em mong nhận đƣợc đóng góp q báu thầy nhƣ bạn sinh viên để đề tài khóa luận tốt nghiệp em đƣợc hoàn thiện cách đầy đủ Em xin chân thành cảm ơn quý thầy cô! Hà Nội, Ngày 24 tháng 04 năm 2018 Sinh viên Nguyễn Quỳnh Nga LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan viết khóa luận thật Đây cơng trình nghiên cứu riêng tơi dƣới hƣớng dẫn khoa học ThS Hà Thị Minh Tâm Tất số liệu đề tài đƣợc thu thập từ thực nghiệm, qua xử lí thống kê, không chép hay bịa đặt, không trùng với kết đƣợc cơng bố Trong khóa luận tơi có sử dụng số tài liệu số tác giả, xin phép tác giả để bổ sung cho luận văn Nếu sai tơi xin hồn toàn chịu trách nhiệm Hà Nội, Ngày 24 tháng 04 năm 2018 Sinh viên Nguyễn Quỳnh Nga MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lí chọn đề tài Mục đích nghiên cứu Phạm vi nghiên cứu Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu chủng Acetobacter xylinum 1.1.1 Vị trí phân loại 1.1.2 Đặc điểm hình thái vi khuẩn A xylinum 1.1.3 Đặc điểm sinh lí sinh hóa A.xylinum 1.2 Giới thiệu màng Cellulose vi khuẩn (CVK) 1.2.1 Cấu trúc màng CVK 1.2.2 Đặc tính màng CVK 1.2.3 Sinh tổng hợp CVK 1.2.4 Chức sinh lí CVK 1.2.5 Môi trƣờng nuôi cấy A xylinum 1.3 Sơ lƣợc thuốc Captopril 1.3.1 Tên thuốc 1.3.2 Tính chất 1.3.3 Tác dụng thuốc 1.3.4 Đặc điểm dƣợc động học 1.3.5 Tác dụng phụ Captopril 1.4 Tình hình nghiên cứu ngồi nƣớc 1.4.1 Tình hình nghiên cứu giới 1.4.2 Tình hình nghiên cứu nƣớc 10 CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG - PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 11 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu 11 2.2 Vật liệu nghiên cứu 11 2.2.1 Giống vi khuẩn 11 2.2.2 Nguyên liệu hóa chất 11 2.2.3 Thiết bị dụng cụ sử dụng trình nghiên cứu 11 2.2.4 Môi trƣờng lên men thu màng CVK 12 2.3 Nội dung nghiên cứu 12 2.4 Phƣơng pháp nghiên cứu 12  2.4.1 Lên men thu màng CVK từ môi trƣờng nƣớc vo gạo 12  2.4.2 Xử lý màng trƣớc hấp thụ thuốc 13 2.4.3 Đánh giá độ tinh khiết màng 14 2.4.4 Quét phổ xây dựng đƣờng chuẩn thuốc Captopril 14 2.4.5 Xác định lƣợng Captopril vào màng CVK 17 2.4.6 Phƣơng pháp xử lí thống kê 18 2.5 Địa điểm nghiên cứu 18 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 19 3.1 Tạo màng CVK A xylinum môi trƣờng nƣớc vo gạo 19 3.2 Thu màng CVK thô từ môi trƣờng 20 3.3 Tinh chế màng CVK 21 3.4 Khảo sát khối lƣợng thuốc hấp thụ vào màng 22 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 27 Kết luận 27 Kiến nghị 27 Tài liệu tham khảo 28 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Acetobacter xylinum A xylinum CVK Cellulose vi khuẩn OD Optical denity UV – vis Ultraviolet visible Cs Cộng CT Công thức DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Thành phần dinh dƣỡng có nƣớc gạo 7,8 Bảng 2.1 Thành phần môi trƣờng lên men từ nƣớc vo gạo thu màng CVK 12 Bảng 2.2 Bƣớc sóng hấp thụ cực đại thuốc Captopril 14 Bảng 2.3 Bảng nồng độ Captopril giá trị OD 200nm (n=3) 16 Bảng 3.1 Giá trị OD dung dịch thuốc Captopril sau hấp thụ (n=3) 23 Bảng 3.2 Kết lƣợng thuốc Captopril hấp thụ vào màng CVK (Kích thƣớc d1,5cm) lên men từ môi trƣờng nƣớc vo gạo 24 DANH MỤC HÌNH ẢNH, SƠ ĐỒ Hình 1.1 Tế bào Acetobacter xylinum Hình 1.2 Cơng thức cấu tạo captopril Hình 2.1 Sơ đồ quy trình ni cấy thu nhận CVK 13 Hình 2.2 Phổ hấp thụ thuốc Captopril với dung môi nƣớc cất 15 Hình 2.3 Đồ thị đƣờng chuẩn Captopril OD 200nm 16 Hình 3.1 Màng CVK sau nuôi cấy tĩnh ngày thứ 19 Hình 3.2a Màng CVK ni cấy tĩnh ngày thứ 20 Hình 3.2b Màng CVK ni cấy tĩnh ngày thứ 12 21 Hình 3.3 Màng CVK sau đƣợc tinh chế 22 Hình 3.4 Hiệu suất hấp thụ thuốc Captopril độ dày màng điều kiện thƣờng 25 Hình 3.5 Hiệu suất hấp thụ thuốc Captopril độ dày màng điều kiện nhiệt độ 800C 25 MỞ ĐẦU Lí chọn đề tài Ƣớc tính vào năm 2016, có khoảng 48% ngƣời bị mắc bệnh tăng huyết áp Đáng lo ngại tăng huyết áp bệnh dễ dẫn đến biến chứng nguy hiểm nguyên nhân khiến cho triệu ngƣời Thế giới tử vong năm Đồng thời tăng huyết áp nguyên nhân gây suy tim đột quỵ não, nguyên nhân thứ hai dẫn đến nhồi máu tim Tỉ lệ ngƣời tăng huyết áp ngày tăng tuổi bị mắc ngày trẻ hóa Chính mà nhà khoa khọc nghiên cứu sản xuất thuốc captopril Captopril chất ức chế enzim chuyển dạng angiotensin I Tác dụng hạ huyết áp liên quan đến ức chế hệ ren- angiotensin- aldosteron Renin vào máu tác dụng chất globulin huyết tƣơng sản xuất angiotensin, chất decapeptid có hoạt tính Nhờ vai trò enzym chuyển dạng, angiotensin I chuyển hóa thành angiotensin II Chất sau làm co mạch nội sinh mạnh, đồng thời lại kích thích vỏ thƣợng thận tiết aldosteron, có tác dụng giữ natri nƣớc ngăn chặn hình thành angiotensin II Nhờ làm giãn động mạch, giảm huyết áp cải thiện hiệu bơm máu tim cải thiện hiệu suất tim bệnh nhân suy tim Tuy nhiên, khả hòa tan nƣớc captopril khơng cao làm giảm hiệu điều trị, sinh khả dụng đƣờng uống khoảng 65%, nửa đời sinh học huyết tƣơng khoảng Do cần thiết kế hệ thống vận tải phân phối thuốc captopril để giúp thuốc giải phóng cách kéo dài Uống đƣờng dễ dàng, đƣợc ƣa thích truyền thống để phân phối thuốc Khác với đƣờng tiêm, ƣu việt an tồn, khơng phức tạp, tiện lợi dễ có tuân thủ bệnh nhân nên làm tăng hiệu điều trị OD 1.103 Abs 1.000 0.500 0.000 -0.107 190.00 200.00 220.00 nm 240.00 250.00 Bƣớc sóng (nm) Hình 2.2 Phổ hấp thụ Captopril với dung môi nƣớc cất - Nguyên tắc xây dựng đƣờng chuẩn CAP Sử dụng máy đo quang phổ UV – 2450 để xác định mật độ quang phổ (OD) dung dịch chứa thuốc Captopril bƣớc sóng 200nm [12] + Pha thuốc Captopril nồng độ là: 10%, 20%, 40%, 60%, 80%, 100% + Dùng máy đo quang phổ tử ngoại UV – Vis 2450 để đo cƣờng độ quang phổ dung dịch pha bƣớc sóng 200nm dung dịch mẫu chuẩn + Dựng đồ thị đƣờng chuẩn lập phƣơng trình chuẩn phần mềm Excel 2010 + Để kết đo có độ xác cao ta tiền hành đo dung dịch chuẩn ba lần đo quang phổ ba lần, lấy giá trị trung bình để dựng đƣờng chuẩn Giá trị mật độ quang phổ dung dịch thuốc nồng độ khác đƣợc thể bảng 2.2 15 Bảng 2.3 Bảng nồng độ Captopril giá trị OD 200nm (n=3) Nồng độ Giá trị OD 200nm (n=3) STT Giá trị trung (mg/ml) Lần Lần Lần bình 0,1 0,114 0,115 0,117 0,115 ± 0,0045 0,2 0,227 0,224 0,229 0,227 ± 0,0049 0,4 0,458 0,460 0,395 0,438 ± 0,0083 0,6 0,666 0,584 0,624 0,625 ± 0,0078 0,8 0,887 0,782 0.816 0,828 ± 0,0089 1,08 1, 09 1,04 1,07 ± 0,0034 OD 200nm 1.2 Giá trị OD y = 1.0784x + 0.0148 R² = 0.9993 0.8 0.6 0.4 OD 200nm Linear (OD 200nm) 0.2 0 0.5 1.5 Nồng độ dung dịch Captopril Hình 2.3 Đồ thị đƣờng chuẩn Captopril OD 200nm Phƣơng trình đƣờng chuẩn: y= 1,0784x + 0,0148 (R2 = 0,9993) Trong đó: x : nồng độ Captopril (mg/ml) y : giá trị OD tƣơng ứng R2: hệ số tƣơng quan 16 2.4.5 Xác định lƣợng Captopril vào màng CVK Hai mẫu màng CVK đƣợc khảo sát có độ dày 0,5 cm cm nồng độ bão hòa 75mg/ml: Chuẩn bị 04 bình, bình chứa 25ml dung dịch Captopril (đƣợc hòa tan nƣớc cất hai lần) có nồng độ lần lƣợt 25, 50, 75 mg Captopril/ml Lấy 3,3µl dung dịch bình thí nghiệm (TN) pha lỗng dung dịch nƣớc cất với tỷ lệ hợp lý (dùng tỷ lệ nhƣ xây dựng đƣờng chuẩn), đo mật độ quang (OD1) - Chuẩn bị bình, bình chứa 25ml dung dịch Captopril, nồng độ 75mg/ml (dung môi nƣớc cất lần) Bình 1,2: Cho màng CVK có độ dày 0,5cm Bình 3,4: Cho màng CVK có độ dày 1cm - Sự hấp thụ thuốc Captopril màng CVK đƣợc tiến hành khảo sát hai điều kiện Bình 1,3: Khảo sát điều kiện thƣờng (nhiệt độ phòng) Bình 2,4 : Khảo sát điều kiện nhiệt độ 800C - Sau giờ; giờ, lấy 3,3µl dung dịch bình thí nghiệm pha lỗng dung dịch nƣớc cất với tỷ lệ hợp lý (dùng tỷ lệ nhƣ xây dựng đƣờng chuẩn), đo quang phổ để xác định lƣợng thuốc hấp thụ vào màng giá trị OD không đổi, lấy giá trị OD thay vào phƣơng trình đƣờng chuẩn, xử lý số liệu thu đƣợc khối lƣợng thuốc hấp thụ vào màng Tiến hành thực thí nghiệm lần lấy kết trung bình để tính tốn Khối lƣợng thuốc Captopril đƣợc hấp thụ vào màng CVK theo công thức 1: mht = m1 – m2 (mg) (1) Trong đó: mht: khối lƣợng thuốc đƣợc hấp thụ vào màng CVK m1 : khối lƣợng thuốc ban đầu dung dịch m2 : khối lƣợng thuốc có dung dịch sau khoảng thời gian 17 định màng hấp thu thuốc Tỉ lệ thuốc đƣợc hấp thụ vào màng CVK đƣợc tính theo công thức 2: EE (%) = mht/m1 x 100% (2) 2.4.6 Phương pháp xử lí thống kê Lặp lại thí nghiệm lần lấy giá trị trung bình để tính tốn, số liệu thí nghiệm thu đƣợc xác định hiệu suất nạp thuốc đƣợc phân tích phần mềm Microsofl Excel đƣợc biểu diễn dƣới dạng trung bình ± độ lệch chuẩn [16] Số trung bình cộng đƣợc dùng để tính giá trị trung bình lần lặp lại thí nghiệm Những khác biệt đƣợc coi có ý nghĩa thống kê giá trị p < 0,05 2.5 Địa điểm nghiên cứu Đƣợc nghiên cứu Viện Nghiên cứu Khoa học Ứng dụng trƣờng Đại học Sƣ Phạm Hà Nội 18 Chƣơng 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Tạo màng CVK A xylinum môi trƣờng nƣớc vo gạo Khi nuôi cấy tĩnh vi khuẩn A xylinum điều kiện phòng, chúng sử dụng chất dinh dƣỡng có môi trƣờng để sinh trƣởng phát triển Trong ngày khuẩn A xylinum bắt đầu làm quen với môi trƣờng, acid bắt đầu sinh làm cho pH môi trƣờng giảm nhẹ Sang tới ngày thứ 2, vi khuẩn bắt đầu sản sinh lớp màng CVK mỏng bề mặt môi trƣờng, màng xuất có màu trắng đục, chứa nhiều tạp chất, sang đến ngày màng dày lên sử dụng hết chất dinh dƣỡng môi trƣờng, ngày thứ 7- 10 vi khuẩn ngừng sinh trƣởng, màng đạt độ dày từ 0,5 – 1,0cm, độ dày màng tùy thuộc vào thời gian nuôi cấy Màng CVK nuôi cấy tĩnh môi trƣờng nƣớc vo gạo đến ngày thứ đƣợc thể 3.1: Hình 3.1 Màng CVK sau nuôi cấy tĩnh ngày thứ 19 3.2 Thu màng CVK thô từ môi trƣờng Tùy vào thời điểm thu màng mà độ dày màng CVK khác Thông thƣờng bƣớc sang ngày thứ màng đạt độ dày 0,4cm Sang ngày thứ 12 độ dày màng đạt từ 0,5 – 1,0cm Màng CVK thu đƣợc nuôi cấy môi trƣờng nƣớc vo gạo thƣờng có mà trắng đục, bề mặt phẳng, trơn, chứa nhiều nƣớc dẻo dai Trong q trình ni cấy vi khuẩn A xylinum thƣờng xuyên sử dụng chất dinh dƣỡng môi trƣờng để đáp ứng cho sinh trƣởng phát triển qua sản sinh CVK tích lũy dần bề mặt môi trƣờng tạo thành lớp màng CVK, đó độ dày màng CVK tùy thuộc vào thời gian nuôi cấy môi trƣờng dinh dƣỡng, thời gian nuôi cấy lâu môi trƣờng dinh dƣỡng nhiều độ dày màng liên tục tăng ngƣợc lại Khi môi trƣờng hết chất dinh dƣỡng vi khuẩn A xylinum ngừng sinh trƣởng độ dày màng ngừng tăng Hình ảnh màng CVK thu đƣợc ngày thứ thứ 12 đƣợc thể hình 3.2a 3.2b Hình 3.2a Màng CVK ni cấy tĩnh ngày thứ 20 Hình 3.2b Màng CVK nuôi cấy tĩnh ngày thứ 12 3.3 Tinh chế màng CVK Màng CVK thu đƣợc chứa lƣợng lớn tạp chất cần đƣợc tinh chế để loại bỏ tạp chất đồng thời phá hủy trung hòa độc tố vi khuẩn A xylinum Đây bƣớc quan trọng để giúp màng hấp thụ đƣợc lƣợng thuốc tối đa Màng CVK sau tách khỏi môi trƣờng nuôi cấy đƣợc rửa dƣới vòi nƣớc ngâm dung dịch NaOH 3%, sau 48h ngâm dung dịch có màu nâu, lấy màng CVK rửa nƣớc cất tiếp tục ngâm với HCl 3% 48h Sau 48h ta thu đƣợc màng CVK có màu trắng sáng nhƣ hình 3.3 21 Hình 3.3 Màng CVK sau đƣợc tinh chế 3.4 Khảo sát khối lƣợng thuốc hấp thụ vào màng Sau giờ, màng CVK bình chứa dung dịch thuốc Captopril khảo sát nhiệt độ phòng nhiệt độ 800C đƣợc lấy Sử dụng máy đo quang phổ tử ngoại (UV – Vis) để đo lƣợng thuốc hấp thụ vào màng thời điểm Kết đo đƣợc thể bảng 3.1: 22 Bảng 3.1 Giá trị OD dung dịch thuốc Captopril sau hấp thụ (n=3) Độ dày Thời màng gian (cm) hấp Điều kiện Giá trị OD 200nm dung dịch sau hấp thụ hấp thụ Lần Lần Lần Trung bình Thƣờng 0,999 0,997 0,995 0,997 ± 0,0043 Nhiệt độ 0,835 0,836 0,841 0,837 ±0,0057 Thƣờng 0,931 0,935 0,934 0,933 ± 0,0024 Nhiệt độ 0,78 0,788 0,784 0,784 ± 0,0027 Thƣờng 0,955 0,957 0,953 0,955 ±0,0032 Nhiệt độ 0,801 0,804 0,803 0,803 ±0,0026 Thƣờng 0,9 0,901 0,901 0,901 ± 0,0015 Nhiệt độ 0,73 0,735 0,73 0,732 ± 0,0020 thụ (giờ) 800C 0,5 800C 800C 800C Từ kết tính đƣợc bảng 3.1 ta thấy giá trị OD đo đƣợc gần nhƣ không giảm sau ngâm màng Điều chứng tỏ lƣợng thuốc hấp thụ vào đạt cực đại 23 Nhƣ lƣợng thuốc Captopril hấp thụ vào màng tăng theo thời gian đạt tối đa thời gian Dựa vào phƣơng trình đƣờng chuẩn Captopril áp dụng CT (1) (2) ta tính đƣợc khối lƣợng tỷ lệ thuốc Captopril đƣợc hấp thụ vào màng CVK Kết đƣợc thể bảng 3.2 Bảng 3.2 Kết lƣợng thuốc Captopril hấp thụ vào màng CVK (Kích thƣớc d1,5cm) lên men từ môi trƣờng nƣớc vo gạo sau Điều kiện Độ dày OD sau hấp hấp thụ màng thụ mht (mg) Hiệu suất (cm) 0,5 0,933 ± 0,0024 9,351 ± 0,0034 3,117 ± 0,0032 Thƣờng 0,901 ± 0,0015 11,39 ± 0,0041 3,797± 0,0023 Nhiệt độ 0,5 0,784 ± 0,0027 18,681±0,0021 6,227 ± 0,0024 800C 0,732 ± 0,0020 21,950±0.0031 7,317 ± 0,0027 24 Hình 3.4 Hiệu suất hấp thụ thuốc Captopril độ dày màng điều kiện thƣờng Hình 3.5 Hiệu suất hấp thụ thuốc Captopril độ dày màng điều kiện nhiệt độ 800C 25 Nhận xét: Từ kết bảng 3.2; hình 3.4 3.5 ta thấy rằng: - Trong hai điều kiện hấp thụ điều kiện thƣờng điều kiện nhiệt độ điều kiện nhiệt độ khả hấp thụ thuốc Captopril tốt + Ở điều kiện thƣờng hiệu suất hấp thụ màng 0,5 1,0cm lần lƣợt đạt 3.117% 3,797% nhƣng điều kiện nhiệt độ 800C hiệu suất đạt 6,227% 7,317% - Ở điều kiện nhiệt độ 800C khả hấp thụ thuốc màng 1cm cao sơ với màng 0,5cm Hiệu suất hấp thụ màng 0,5cm đạt 6,227% hiệu suất màng 1,0cm đạt 7,317% - Nhƣ ta kết luận điều kiện thƣờng điều kiện nhiệt độ màng CVK có độ dày 1,0cm đƣợc ni cấy mơi trƣờng nƣớc vo gạo hấp thụ thuốc tốt so với màng CVK có dày 0,5cm Sự hấp thụ thuốc Captopril màng CVK dày 1,0cm tốt đạt 7,317% điều kiện: nhiệt độ 800C, nồng độ thuốc 75mg/ml, thời gian hấp thụ thuốc 26 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Qua nghiên cứu đề tài, thu đƣợc số kết nhƣ sau; - Thu nhận đƣợc màng CVK từ vi khuẩn A xylinum đƣợc nuôi cấy môi trƣờng nƣớc vo gạo, thời gian từ – 12 ngày với độ dày 1,5 – 1,0cm - Đã xử lý thu đƣợc màng CVK tinh khiết Màng CVK thu đƣợc tinh khiết, khơng mùi, khơng bị biến tính nhiệt độ cao, chất lƣợng màng CVK phù hợp với nhu cầu làm thí nghiệm - Màng CVK dày 1,0cm có khẳ hấp thụ thuốc Captopril tốt màng CVK dày 0,5cm điều kiện nhiệt độ 800C Nhƣ ta kết luận đƣợc rằng, màng dày độ hấp thuốc Captopril cao Kiến nghị Tiếp tục nghiên cứu khả hấp thụ thuốc Captopril qua màng CVK đƣợc nuôi cấy từ chủng vi khuẩn A xylinum Tiến hành nuôi cấy A xylinum môi trƣờng nƣớc vo gạo nhƣng với nguồn dinh dƣỡng khác để tạo màng CVK có tính tốt 27 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Phạm Thị Hiền(2016), nghiên cứu vận tải phân phối thuốc berberin màng bacterial cellilose lên men từ nước vo gạo định hướng sử dụng qua đường uống Nguyễn Văn Thanh(2006), Nghiên cứu chế tạo màng cellulose trị bỏng từ Acetobacter xylinum, đề tài cấp bộ, Bộ Y tế Nguyễn Văn Mã, La Việt Hồng, Phương pháp nghiên cứu sinh lý học Thực vật – Nhà xuất Đại học Quốc gia Hà Nội Đinh Thị Kim Nhung, Nghiên cứu số đặc điểm sinh học vi khuẩn Acetobacter ứng dụng chúng lên men axetic theo phương pháp chìm, Luận án phó tiến sỹ khoa học sinh học, 1996 Nguyễn Thị Nguyệt Nghiên cứu vi khuẩn Acetobacter xylinum cho màng Bacterial [điều trị bỏng”, Tạp chí khoa học công nghệ 50 (4), 453 – 462 Hồ Đắc Trinh, Viện dƣợc liệu, chiết Berberin clorid vàng đắng dung dịch acid sulfuric lỗng, Tạp chí Dƣợc học, 1983 – Bộ Y tế xuất bản, tr 19 Tài liệu tiếng Anh Amin MCIM, Ahmad N, et al.(2012), “ Bacterial cellulose film coating as 1delivery: physicochemical, thermal and drung release properties”, Sain Malaysiana,41(5), 561- 8 Brown.E.Bacterial cellulose/Themoplastic polymer nanacomposites Master of sience in chemical engineering Waashington state university,2007 28 P.A Harris, IM Leigh and HA Navsaria (1998), “The future for cultured Skin Replacements Buns”, 24(7), 453 – 457 10 Hai – Peng Cheng, Pei – Ming – Wang, Jech – Wei Chen And Wen – Teng Wu (2012), “Cultivation of Acetobacter xylinum for bacterial cellulose production in a modifed airlift reactor”, Biotechnol Appl Biochem, (35), 125 – 132 11 Huang L et al (2013), „„Nano – celulose 3D – networks as controlled – release drug carriers”, J Mater Chem B, (23), 2976 – 2984 12 Trovatti E et al.(2011), “Biocellulose membranes as supports for dermal release of lidocaine”, Biomacromolecules, 12, 4162 – 4168 13 Embuscado M.E, Marks J.S, BeMiller J.N (1994), ” Bacterial cellulose I.Factors afecting the production of cellulose by Acetobacter xylinum”, Food Hydrocolloids, (5), 407- 481 14 Pandey M., Amin MCIM, Ahamd N et al (2013), “Rapid synthesis of superabsorbent acrylamide- based hydrogels for drug delivery”, Int J Polym Sci ID905471 15 Nguyen TX et al (2014), “Chitosan- coated nano- liposomes for the oral delivery of berberine hydrochloride”, J Mater Chem B, 2, 7149–7159 16 Schwartz J L et al (1995), “Novel oral medication delivery system for famotidine”, J Clin Pharmacol, 35(4), 362 – 367 17 Klemm D et al (2009), “Nanocellulose materials – different cellulose, different functionality”, Macromol Symp, 280, 60–71 29 ... captopril màng cellulose vi khuẩn lên men từ môi trường nước vo gạo Mục đích nghiên cứu - Tìm hiểu khả hấp thụ thuốc captopril màng Cellulose vi khuẩn lên men từ mơi trƣờng nƣớc vo gạo - Tìm... - PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu Khả hấp thụ thuốc captopril màng cellulose vi khuẩn lên men từ nƣớc vo gạo 2.2 Vật liệu nghiên cứu 2.2.1 Giống vi khuẩn Giống vi khuẩn A xylinum... khác 2.2.4 Mơi trường lên men thu màng CVK Môi trƣờng lên men từ nƣớc vo gạo thu màng CVK có thành phần đƣợc thể bảng 2.1 Bảng 2.1 Thành phần môi trƣờng lên men từ nƣớc vo gạo thu màng CVK Thành