1 TÓM TẮT Thực tế sử dụng thuốc cho thấy, tình hình sử dụng kháng sinh giới nói chung riêng Việt Nam nước ta mức đáng báo động, số điển hình kháng sinh cefuroxim Cefuroxim kháng sinh sử dụng rộng rãi điều trị bệnh truyền nhiễm vi khuẩn gram dương vi khuẩn gram âm, kể chủng vi khuẩn sản sinh betalactamase gây cefuroxim thường định điều trị nhiễm khuẩn đường hô hấp (dưới trên), tiết niệu, sinh dục, da mô mềm Hiện thị trường dược phẩm giới có hàng trăm mẫu mã thuốc biệt dược khác tương đương sinh học (Bioequivalence) thuốc sở quan trọng vừa có ý nghĩa khoa học, vừa hành lang pháp lý công tác chuyên môn lựa chọn thay thuốc cần Hai thuốc gọi tương đương sinh học Cmax, Tmax, AUC hai thuốc có khác biệt không đáng kể Thuốc generic chứng minh tương đương sinh học với thuốc biệt dược gốc cũng có nghĩa đạt kiểm tra độ an tồn hiêu giống thuốc biệt dược vốn giới công nhận Đề tài “Nghiên cứu tổng quan phương pháp đánh giá tương đương sinh học viên nén bao phim cefuroxim 500 mg” tiến hành với nhiệm vụ tìm hiểu tổng quan ưu nhược điểm công tác đánh giá tương đương sinh học, tổng hợp phương pháp nghiên cứu xác định tương đương sinh học viên nén bao phim Cefuroxim 500 mg sản xuất nước so với nước Đề tài sử dụng phương pháp nghiên cứu tổng hợp, lược dịch tài liệu liên quan đến đánh giá tương đương sinh học Kết thu hai phương pháp nghiên cứu đánh giá tương đương sinh học viên nén bao phim Bifuroxime 500 mg, Oralfuxim 500 mg so với viên nén bao phim Zinnat tablets 500 mg MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN .i LỜI CAM ĐOAN ii TÓM TẮT iii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG .vii DANH MỤC CÁC HÌNH .viii CHƯƠNG MỞ ĐẦU CHƯƠNG LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 TỔNG QUAN VỀ CEFUROXIM 2.1.1 Tên chung quốc tế: Cefuroxim 2.1.2 Loại thuốc: Kháng sinh nhóm cephalosporin hệ .2 2.1.3 Dạng thuốc hàm lượng 2.1.4 Dược lý chế tác dụng 2.1.5 Phổ kháng khuẩn 2.1.6 Dược động học 2.1.7 Chỉ định .4 2.1.8 Chống định 2.1.9 Thận trọng 2.1.10 Tác dụng không mong muốn (ADR) 2.1.11 Hướng dẫn cách xử trí ADR .6 2.1.12 Liều lượng cách dùng 2.1.13 Tương tác thuốc .8 2.1.14 Ðộ ổn định bảo quản 2.1.15 Tương kỵ 2.1.16 Quá liều xử trí .8 2.1.17 Thông tin qui chế .9 2.2 Tổng quan đánh giá tương đương sinh học 2.2.1 Tổng quan số nghiên cứu tương đương sinh học giới .12 2.2.2 Tổng quan số nghiên cứu tương đương sinh học Việt Nam .14 CHƯƠNG PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 18 4.1 Kết tổng quan đánh giá tương đương sinh học 18 4.1.1 Khái niệm sinh khả dụng tương đương sinh học 18 4.1.2 Đánh giá sinh khả dụng tương đương sinh học 18 4.1.3 Quy định đánh giá sinh khả dụng tương đương sinh học 19 4.1.4 Qui định phương pháp thiết kế nghiên cứu .19 4.1.5 Qui định đối tượng thử (subjects) 19 4.1.6 Quy định chế phẩm thuốc đối chứng 20 4.1.7 Tiến hành thử sinh khả dụng invivo với hai thuốc thử nghiệm (generic) thuốc đối chiếu (biệt dược gốc) cách khoa học .20 4.1.8 Xử lý thống kê đúng quy cách trị số Cmax, Tmax, AUC để xác định độ tin cậy 20 4.1.9 Đảm bảo chất lượng nghiên cứu 21 4.2 Kết nghiên cứu tổng quan phương pháp đánh giá tương đương sinh học viên nén bao phim cefuroxim 500 mg 21 4.2.1 Phương pháp đánh giá tương đương sinh học viên nén bao phim Bifuroxime 500 mg so với viên nén bao phim Zinnat tablets 500 mg 21 4.2.2 Nghiên cứu phương pháp đánh giá tương đương sinh học viên nén bao phim Oralfuxim 500 mg so với viên nén bao phim Zinnat tablets 500 mg 31 4.3 Thảo luận 34 4.3.1 Thảo luận đánh giá tương đương sinh học viên nén bao phim Bifuroxime 500 mg so với viên nén bao phim Zinnat tablets 500 mg 34 4.3.2 Thảo luận đánh giá tương đương sinh học viên nén bao phim Oralfuxim 500 mg so với viên nén bao phim Zinnat tablets 500 mg 34 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .36 5.1 Kết luận .36 5.2 Đề nghị 36 TÀI LIỆU THAM KHẢO .37 DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT CI NTN SĐK (visa) GLP GMP GCP GSP TĐSH SKD ADR BMI ETC Tmax Cmax AUC LQC MQC HQC LLOQ HPLC US-FDA PIC/S-GMP EMEA - CPMP Khoản tin cậy Người tình nguyện Số đăng ký Thực hành tốt phòng thí nghiệm Thực hành tốt sản xuất thuốc Thực hành tốt lâm sàng Thực hành tốt bảo quản thuốc Tương đương sinh học Sinh khả dụng Tác dụng không mong muốn Chỉ số thể bình thường Đấu thầu sở bệnh viện Thời gian đạt nồng độ đỉnh Nồng độ tối đa Diện tích đường cong Nồng độ thấp Nồng độ trung bình Nồng độ cao Giới hạn định lượng Hệ thống sắc ký lỏng hiệu cao Cục quản lý thực phẩm dược phẩm Hoa Kỳ Công ước Thanh tra Dược Chương trình Hợp tác Thanh tra lĩnh vực Thực hành Tốt Sản xuất Thuốc Cộng đồng Châu Âu DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Bảng 4.1 Bảng 4.2 Bảng 4.3 Bảng 4.4 Bảng 4.5 Bảng 4.6 Bảng 4.7 Bảng 4.8 Bảng 4.9 Bảng 4.10 Tên Tóm tắt kết thẩm định phương pháp Kết ngẫu nhiên hóa bố trí thuốc uống Nồng độ thuốc huyết tương NTN sau uống thuốc thử Nồng độ thuốc huyết tương NTN sau uống thuốc chứng Nồng độ cefuroxim tối đa huyết tương (Cmax) Phân tích phương sai giá trị Cmax Diện tích đường cong AUC0-t Phân tích phương sai giá trị AUC0-t So sánh giá trị Tmax theo phương pháp thống kê phi tham số Một số thông số Dược động học khác Trang 24 26 27 28 29 29 30 30 31 32 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình Hình 4.1 Tên Đường cong nồng độ thuốc trung bình-thời gian 12 người tình nguyện Trang 26 CHƯƠNG MỞ ĐẦU Từ Alexander Flemming phát kháng sinh Penicillin đến có hàng trăm loại khác sinh khác phát minh đưa vào sử dụng có kháng sinh cefuroxim Sự đời kháng sinh đánh dấu kỷ nguyên y học điều trị bệnh nhiễm khuẩn (nhóm bệnh lý nằm số bệnh đứng hàng đầu tỷ lệ mắc bệnh tỷ lệ tử vong) Cefuroxim kháng sinh bán tổng hợp phổ rộng, thuộc nhóm cephalosporin Sau uống (dạng axetil), thuốc hấp thu qua đường tiêu hóa nhanh chóng bị thủy phân niêm mạc ruột máu để phóng thích cefuroxim (là dạng có tác dụng kháng khuẩn) vào hệ tuần hoàn Thuốc hấp thu tốt uống bữa ăn Khi uống viên nén 500 mg, nồng độ đỉnh huyết tương đạt khoảng 7-10 mg/ lít sau khoảng 2-3 Cefuroxim khơng bị chuyển hóa thải trừ dạng không biến đổi Thuốc thải trừ chủ yếu qua đường thận, lượng nhỏ qua đường mật Liều thường dùng cho người lớn 250-500 mg/lần, lần/ngày tùy theo tình trạng nhiễm khuẩn Đánh giá tương đương sinh học phương pháp phù hợp để thiết lập khả thay lẫn thuốc generic có tác dụng tồn thân, đánh giá tương đương sinh học dựa so sánh thông số dược động học dược chất có thuốc (còn gọi chất mẹ) hấp thu vào tuần hoàn chung Nếu sinh khả dụng chúng sau dùng mức liều điều kiện thử nghiệm tương đương dẫn đến hiệu điều trị chúng tương đương Giúp cho việc sử dụng thuốc hiệu mà giảm chi phí điều trị Vì vậy đề tài “Nghiên cứu tổng quan phương pháp đánh giá tương đương sinh học viên nén bao phim cefuroxim 500 mg” tiến hành với hai mục tiêu: - Tổng quan đánh giá tương đương sinh học - Tổng quan phương pháp đánh giá tương đương sinh học viên nén bao phim cefuroxim 500 mg CHƯƠNG LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 TỔNG QUAN VỀ CEFUROXIM 2.1.1 Tên chung quốc tế: Cefuroxim 2.1.2 Loại thuốc: Kháng sinh nhóm cephalosporin hệ 2.1.3 Dạng thuốc hàm lượng Cefuroxim axetil: Dạng thuốc uống, liều biểu thị theo số lượng tương đương cefuroxim Hỗn dịch uống 125 mg/5 ml; 250 mg/5 ml; viên nén: 125 mg, 250 mg, 500 mg Cefuroxim natri: Dạng thuốc tiêm, liều biểu thị theo số lượng tương đương cefuroxim Lọ 250 mg, 750 mg 1,5 g bột pha tiêm Dung môi pha tiêm bắp, tiêm tĩnh mạch: Nước cất pha tiêm Dung môi pha truyền tĩnh mạch liên tục: Thuốc tiêm natri clorid 0,9%, thuốc tiêm dextrose 5%, thuốc tiêm dextrose 10%, thuốc tiêm dextrose 5% natri clorid 0,9%, thuốc tiêm dextrose 5% natri clorid 0,45% thuốc tiêm natri lactat M/6 2.1.4 Dược lý chế tác dụng Cefuroxim kháng sinh bán tổng hợp phổ rộng, thuộc nhóm cephalosporin, thuốc tiêm dạng muối natri thuốc uống dạng axetil este Cefuroxim axetil tiền chất cefuroxim, chất có hoạt tính kháng khuẩn chưa bị thủy phân thành cefuroxim thể sau hấp thu Cefuroxim có hoạt tính kháng khuẩn ức chế tổng hợp vách tế bào vi khuẩn cách gắn vào protein đích thiết yếu (các protein gắn Penicilin) Nguyên nhân kháng thuốc vi khuẩn tiết enzym cephalosporinase, biến đổi protein gắn Penicilin Cefuroxim có hoạt tính kháng khuẩn hữu hiệu đặc trưng chống nhiều tác nhân gây bệnh thông thường, kể chủng tiết betalactamase/cephalosporinase vi khuẩn Gram dương Gram âm Cefuroxim đặc biệt bền với nhiều enzym beta-lactamase vi khuẩn Gram âm 2.1.5 Phổ kháng khuẩn Cefuroxim có hoạt tính kháng cầu khuẩn Gram dương Gram âm ưa khí kỵ khí, kể hầu hết chủng Staphylococcus tiết Penicilinase, có hoạt tính kháng vi khuẩn đường ruột Gram âm Cefuroxim có hoạt lực cao, vậy có nồng độ ức chế tối thiểu (MIC_ Minimal Inhibitory Concentration) thấp chủng Strepxococcus (nhóm A,B,C G), chủng Gonococcus neisseri Moraxella catarrhalis Ban đầu, cefuroxim vốn cũng có MIC thấp chủng Gonococcus neisseri, Moraxella catarrhalis, Haemophilus influenzae Klebsiella spp tiết Beta-lactamase Nhưng nay, Việt Nam nhiều vi khuẩn kháng cefuroxim, nên MIC thuốc chủng thay đổi Các chủng Enterobacter, Bacteroides fragilis Proteus indol dương tính giảm độ nhạy cảm với cefuroxim Các chủng Clostridium difficile, Pseudomonas spp., Campylobacter spp., Acinetobacter calcoaceticus, Legionella spp không nhạy cảm với cefuroxim Các chủng Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis kháng methicilin kháng cefuroxim Listeria monocytogenes đa số chủng Enterococcus cũng kháng cefuroxim Các số liệu báo cáo đơn vị giám sát độ nhạy cảm kháng sinh Việt Nam chương trình theo dõi kháng kháng sinh (ASTS) 1997, 1999 cho thấy cefuroxim có hoạt tính hữu hiệu chống Salmonella với tỷ lệ nhạy cảm 100% mẫu phân lập năm 1996 tại bệnh viện Trung Ương Huế Tình hình kháng cefuroxim vi khuẩn gây bệnh tăng sau: Shigella flexneri: 11% (1998), Proteus mirabilis: 28,6% (1997), Citrobacter freundii: 46,7% (1997), Staphylococcus aureus: 33% (1998), Escherichia coli: 33,5% (1998), Klebsiella spp: 57% (1997), Enterobacter: 59% (1998) Các nghiên cứu tình hình kháng thuốc Việt Nam cho thấy chủng Haemophilus influenzae phân lập trẻ em khỏe mạnh, kháng cefuroxim với tỷ lệ cao Mức độ kháng cefuroxim tất chủng Haemophilus influenzae trẻ khỏe mạnh 27% theo thơng báo số (1999) (ASTS) Tình hình thật nghiêm trọng cho thấy phải hạn chế sử dụng kháng sinh phổ rộng, dùng cho người bệnh bị nhiễm khuẩn nặng 2.1.6 Dược động học Sau uống, cefuroxim axetil hấp thu qua đường tiêu hóa nhanh chóng bị thủy phân niêm mạc ruột máu để phóng thích cefuroxim vào hệ tuần hoàn Thuốc hấp thu tốt uống bữa ăn Nồng độ đỉnh cefuroxim huyết tương thay đổi tùy theo dạng viên hay hỗn dịch Thuốc đạt nồng độ tối đa 4-6 mg/lít vào khoảng sau uống 250 mg hỗn dịch Nồng độ đỉnh huyết tương hỗn dịch uống đạt trung bình 75% nồng độ đỉnh huyết tương thuốc viên Do đó, thuốc viên hỗn dịch uống cefuroxim axetil thay theo tương quan mg/mg Muối natri dùng theo đường tiêm bắp tĩnh mạch Nồng độ đỉnh huyết tương khoảng 27 microgam/ml đạt vào khoảng 45 phút sau tiêm bắp 750 mg, nồng độ đỉnh huyết tương khoảng 50 microgam/ml đạt vào khoảng 15 phút sau tiêm tĩnh mạch 750 mg Sau liều tiêm khoảng giờ, đo nồng độ điều trị huyết Có tới 50% cefuroxim hệ tuần hoàn liên kết với protein huyết tương Nửa đời thuốc huyết tương khoảng 70 phút dài người suy thận trẻ sơ sinh Cefuroxim phân bố rộng khắp thể, kể dịch màng phổi, đờm, xương, hoạt dịch thủy dịch Thể tích phân bố biểu kiến người lớn khỏe mạnh nằm khoảng từ 9,3-15,8 lít/1,73 m² Cefuroxim qua hàng rào máu não màng-não bị viêm Thuốc qua thai có tiết qua sữa mẹ Cefuroxim khơng bị chuyển hóa thải trừ dạng không biến đổi, khoảng 50% qua lọc cầu thận khoảng 50% qua tiết ống thận Thuốc đạt nồng độ cao nước tiểu Sau tiêm, hầu hết liều sử dụng thải trừ vòng 24 giờ, phần lớn thải trừ vòng Probenecid ức chế thải trừ cefuroxim qua ống thận, làm cho nồng độ cefuroxim huyết tương tăng cao kéo dài Cefuroxim thải trừ qua mật với lượng nhỏ Nồng độ cefuroxim huyết bị giảm thẩm tách 2.1.7 Chỉ định Thuốc uống cefuroxim axetil dùng để điều trị nhiễm khuẩn thể nhẹ đến vừa đường hô hấp dưới, viêm tai viêm xoang tái phát, viêm amiđan viêm họng tái phát vi khuẩn nhạy cảm gây Tuy nhiên, cefuroxim thuốc lựa chọn hàng đầu để điều trị nhiễm khuẩn này, mà amoxicilin thuốc ưu tiên sử dụng hàng đầu an toàn Cefuroxim axetil cũng dùng để điều trị nhiễm khuẩn đường tiết niệu không biến chứng, nhiễm khuẩn da mô mềm vi khuẩn nhạy cảm gây Cefuroxim axetil uống cũng dùng để điều trị bệnh Lyme thời kỳ đầu biểu triệu chứng ban đỏ loang Borrelia burgdorferi Thuốc tiêm cefuroxim natri dùng để điều trị nhiễm khuẩn thể nặng đường hô hấp (kể viêm phổi), nhiễm khuẩn da mô mềm, nhiễm khuẩn xương khớp, nhiễm khuẩn thể nặng niệu-sinh dục, nhiễm khuẩn huyết viêm màng não vi khuẩn nhạy cảm gây Cefuroxim natri cũng tiêm để điều trị dự phòng nhiễm khuẩn phẫu thuật Lưu ý: Nên nuôi cấy vi khuẩn, làm kháng sinh đồ trước trình điều trị Cần phải tiến hành thử chức thận có định 2.1.8 Chống định Người bệnh có tiền sử dị ứng với kháng sinh nhóm cephalosporin 2.1.9 Thận trọng Trước bắt đầu điều trị cefuroxim, phải điều tra kỹ tiền sử dị ứng người bệnh với cephalosporin, Penicilin thuốc khác 26 Thời gian lấy mẫu: - Giai đoạn I: 28/12/2008 - Giai đoạn II: 04/01/2009 Tất người tình nguyện bình thường tham gia lấy mẫu đủ giai đoạn - Kết phân tích đánh giá tương đương sinh học Nồng độ cefuroxim huyết tương NTN xác định phương pháp phân tích thẩm định Tiến hành phân tích xác định nồng độ cefuroxim huyết tương sau kết thúc giai đoạn 2, từ ngày 07/01/2009 đến 13/01/2009 Đường cong nồng độ cefuroxim trung bình huyết tương theo thời gian trình hình Hình 4.1: Đường cong nồng độ thuốc trung bình-thời gian 12 người tình nguyện Các mẫu huyết tương NTN phân tích ngày, điều kiện Kết nồng độ thuốc huyết tương NTN ghi bảng 4.3 4.4 26 Bảng 4.3 Nồng độ thuốc huyết tương NTN sau uống thuốc thử Thời gian (giờ) AUC0-12 AUC0-∞ (µg.giờ/mL) (µg.giờ/mL) Nồng độ Cefuroxim (µg/mL) 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 6,0 8,0 12,0 1,107 2,513 4,381 5,169 5,006 4,070 3,095 2,235 0,631 - - 12,748 12,748 1,002 2,442 2,781 3,648 4,247 4,798 4,268 3,519 1,186 0,479 - 27,019 27,019 2,022 3,046 4,297 4,710 3,785 2,982 2,016 1,472 0,409 - - 14,563 14,563 0,676 2,026 4,013 5,160 5,223 4,610 4,173 3,329 1,176 0,390 - 24,515 24,515 0,581 2,419 2,271 2,287 2,326 2,281 2,059 1,828 1,638 0,787 - 18,801 18,801 3,371 4,146 3,461 2,736 2,053 1,809 1,138 0,941 0,373 - - 11,070 11,070 1,247 2,551 3,161 3,836 3,803 4,016 3,924 3,426 1,692 0,290 - 19,109 19,109 2,304 3,755 3,866 3,702 3,089 2,528 2,140 1,622 0,640 - - 17,596 17,596 2,007 3,673 5,921 6,398 6,050 5,880 5,357 4,093 1,344 0,480 - 26,436 26,436 2,878 3,793 3,832 4,352 4,189 3,832 2,941 2,157 0,653 - - 15,834 15,834 2,690 5,315 5,681 6,836 6,638 6,055 4,618 3,626 1,221 0,526 - 24,628 24,628 NTN 10 11 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 27 12 TB SD 0,00 0,00 + 1,261 2,704 3,757 4,319 3,986 3,206 2,352 1,779 0,620 0,291 - 13,682 13,682 1,822 3,261 3,913 4,362 4,126 3,818 3,180 2,526 0,996 0,295 0,000 18,833 18,833 1,822 3,261 1,100 1,386 1,417 1,415 1,347 1,083 0,475 0,268 + 5,587 5,587 28 Bảng 4.4 Nồng độ thuốc huyết tương NTN sau uống thuốc chứng 29 - Tính thông số dược động học đánh giá thống kê Kết phân tích xác định số thơng số dược động học quan trọng phân tích Thời Nồng độ Cefuroxim (µg/mL) AUC0gian AUC0-∞ 12 12, (giờ) (µg.giờ 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 6,0 8,0 (µg.giờ /mL) /mL) NTN 10 11 12 TB SD 0,0 00 0,0 00 0,0 00 0,0 00 0,0 00 0,0 00 0,0 00 0,0 00 0,0 00 0,0 00 0,0 00 0,0 00 0,0 00 + 3,3 4,5 75 35 3,1 09 0,6 1,1 88 21 1,2 2,8 75 44 0,9 56 0,5 2,3 80 71 0,6 2,1 19 09 0,9 2,9 63 79 1,8 2,8 26 25 3,2 4,1 90 46 2,0 4,1 90 57 1,7 3,3 85 73 1,3 2,8 74 77 1,1 1,1 36 25 3,6 94 5,7 55 2,0 61 5,0 86 1,4 80 3,9 01 3,5 06 3,4 23 3,5 21 4,2 36 6,1 32 4,1 47 3,9 12 1,3 42 3,3 25 7,1 41 3,1 79 6,5 99 2,3 51 3,6 42 4,0 73 41 90 3,7 34 3,8 96 6,7 34 3,8 20 4,3 90 1,5 49 2,5 88 7,2 02 3,5 34 6,7 37 2,9 67 2,6 18 4,0 17 4,2 42 6,1 45 4,0 18 6,1 63 3,1 51 4,4 49 1,6 67 1,9 34 6,7 76 3,2 86 5,6 04 3,3 85 2,0 02 3,7 03 3,7 89 7,3 58 3,3 83 5,1 50 2,5 32 4,0 75 1,7 74 1,5 13 5,5 10 3,9 55 4,6 64 3,7 37 1,6 65 3,1 38 3,5 63 6,1 98 2,4 52 4,2 23 2,2 12 3,5 69 1,4 65 1,1 85 4,4 68 3,0 67 3,7 31 3,1 66 1,3 20 3,1 50 2,8 54 4,6 53 1,6 99 3,2 54 1,6 58 2,8 50 1,1 64 0,3 92 1,2 95 0,9 09 1,1 73 2,6 12 0,5 16 1,5 75 0,7 50 1,5 85 0,5 00 1,0 86 0,5 50 1,0 78 0,6 36 - 0,0 00 12,748 12,748 0,3 66 - 27,019 27,019 - - 14,563 14,563 - 24,515 24,515 - 18,801 18,801 - 11,070 11,070 - 19,109 19,109 - 17,596 17,596 - 26,436 26,436 - - 15,834 15,834 0,3 55 - 24,628 24,628 - - 13,682 13,682 18,833 18,833 5,587 5,587 0,3 67 0,7 27 0,4 80 0,3 18 0,5 49 0,2 0,0 63 00 0,2 + 56 thống kê ghi bảng 5, 6, 7, 8, 9, 10 Bảng 4.5 Nồng độ cefuroxim tối đa huyết tương (Cmax) Mã số NTN 01 02 03 04 Thuốc thử Cmax (µg/ml) LnCmax 5,169 4,798 4,710 5,223 1,643 1,568 1,550 1,653 Thuốc chứng Cmax (µ/ml) LnCmax 4,535 7,202 3,955 6,737 1,512 1,974 1,375 1,908 30 05 06 07 08 09 10 11 12 TB SD 2,419 4,146 4,146 3,866 6,398 4,352 6,836 4,319 4,688 1,163 0,883 1,422 1,390 1,352 1,856 1,471 1,922 1,463 1,514 0,266 3,737 3,901 4,073 4,242 7,358 4,236 6,734 4,147 5,071 1,453 1,318 1,361 1,404 1,445 1,996 1,444 1,907 1,422 1,589 0,269 Bảng 4.6 Phân tích phương sai giá trị Cmax Nguồn biến thiên Tổng Trình tự thử Cá thể Thuốc Giai đoạn Sai số Sai số tồn dư Bậc tự Tổng bình (df) phương 23 1,6065 0,0309 10 1,3250 0,0332 0,0111 10 0,2063 0,14364 Trung bình bình phương 0,0309 0,1325 0,0332 0,0111 0,0206 F P 0,2331 6,4217 1,6084 0,5371 0,6396 0,0035 0,2334 0,4804 CV = 9,26% Khoảng tin cậy 90% tỷ lệ Cmax trung bình thuốc thử so với thuốc chứng, tính số liệu chuyển logarit: - Giới hạn dưới: 83,47% - Giới hạn trên: 103,24% Giá trị tính nằm giới hạn chấp nhận theo qui định US-FDA (80%125%) 12 Diện tích đường cong (AUC0-t) Bảng 4.7 Diện tích đường cong AUC0-t Thuốc thử Thuốc chứng Mã số NTT ACU0-t (µg.giờ/mL) LnAUC0-t AUC0-t (µg.giờ/mL) LnAUC0-t 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 16,727 19,801 14,088 20,623 15,035 11,297 19,804 14,000 26,886 16,910 27,468 15,130 2,817 2,986 2,645 3,026 2,710 2,423 2,986 2,639 3,292 2,828 3,313 2,717 12,748 27,019 14,563 24,515 18,801 11,070 19,109 17,596 26,436 15,834 24,628 13,682 2,545 3,297 2,678 3,199 2,934 2,404 2,950 2,868 3,275 2,762 3,204 2,616 31 TB SD 18,146 5.028 2,865 0,267 18,833 5,587 2,894 0,302 Bảng 4.8 Phân tích phương sai giá trị AUC0-t Nguồn biến thiên Bậc tự (df) Tổng bình phương Trung bình bình phương F P 23 1,7915 Tổng 0,0562 0,0562 0,3580 0,5629 Trình tự thử 10 1,5694 0,1569 10,4694 0,0005 Cá thể 0,0051 0,0051 0,3417 0,5718 Thuốc 0,0109 0,0109 0,7285 0,4133 Giai đoạn 10 0,1499 0,0150 Sai số 0,12243 CV = 4,25% Sai số tồn dư Khoảng tin cậy 90% tỷ lệ trung AUC0-t bình thuốc thử so với thuốc chứng tính số liệu chuyển logarit: - Giới hạn dứới: 88,71% - Giới hạn trên: 106,33% Giá trị tính nằm giới hạn chấp nhận theo qui định US-FDA (80%125%) Thời gian đạt nồng độ thuốc tối đa (Tmax) Bảng 4.9 So sánh giá trị Tmax theo phương pháp thống kê phi tham số Mã số NTN 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 TB SD Tổng Tmax(giờ) Thuốc thử Thuốc chứng 2,0 3,0 2,0 2,5 1,0 1,0 3,0 1,5 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 0,6 1,0 2,5 3,5 2,5 3,5 1,5 2,0 2,5 3,0 1,5 2,0 1,5 2,3 0,8 Chênh lệch (+) (-) Thứ tự (+) (-) 0,5 6,5 2,5 - 1,5 2,5 0,5 10 2,5 6,5 1 0,5 - 6,5 6,5 2,5 2,5 34,5 20,5 Giá trị tổng thứ tự xếp hạng dương giá trị tổng thứ tự xếp hạng âm lớn Giá trị biểu thị cho mức độ sai khác phương pháp với số cặp sai khác n=10; 32 P>0,05 cho thấy giá trị Tmax thuốc thử thuốc chứng khác khơng có ý nghĩa thống kê với độ tin cậy lớn 95% 33 Bảng 4.10 Một số thông số Dược động học khác NTN 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 TB SD Kel Thuốc thử Thuốc chứng -0,552 -0,479 -0,624 -0,486 -0,165 -0,495 -0,519 -0,414 -0,458 -0,499 -0,459 -0,476 -0,469 0,109 -0,495 -0,564 -0,594 -0,539 -0,130 -0,463 -0,354 -0,506 -0,528 -0,494 -0,508 -0,456 -0,469 0,123 T1/2 Thuốc thử Thuốc chứng 1,25 1,45 1,11 1,43 4,20 1,40 1,34 1,67 1,51 1,39 1,51 1,46 1,64 0,82 1,40 1,23 1,17 1,28 5,34 1,50 1,96 1,37 1,31 1,40 1,37 1,52 1,74 1,15 4.2.2 Nghiên cứu phương pháp đánh giá tương đương sinh học viên nén bao phim Oralfuxim 500 mg so với viên nén bao phim Zinnat tablets 500 mg 4.2.2.1 Phương pháp nghiên cứu Nghiên cứu chéo, đơn liều, ngẫu nhiên, thuốc, giai đoạn, uống thuốc điều kiện nhịn đói qua đêm Người tình nguyện uống thuốc giai đoạn nghiên cứu Trong giai đoạn lấy mẫu máu từ tĩnh mạch tay (6 ml) vào thời điểm: giờ; 0,5 giờ; 1,0 giờ; 1,5 giờ; 1,75 giờ; giờ; 2,25 giờ; 2,5 giờ; giờ; 3,5 giờ; giờ; giờ; sau uống thuốc (tổng cộng người tình nguyện lấy 28 mẫu máu) Tiến hành so sánh thông số dược động học AUC, Cmax, Tmax thuốc thử với thuốc đối chứng theo quy định USP-30 [8] 4.2.2.2 Đối tượng nghiên cứu Người tình nguyện khỏe mạnh, số lượng: 12 người, tuổi từ 18-45, số thể bình thường (BMI) từ 18-25 kg/m², có đủ tiêu chuẩn sau: - Khơng nghiện rượu, không nghiện thuốc lá, không sử dụng chất gây nghiện - Khơng có tiền sử bệnh, tại thời điểm nghiên cứu không mắc bệnh: tăng huyết áp, tiểu đường, bệnh hơ hấp, tiêu hóa, nhiễm trùng, di truyền - Không bị suy giảm chức gan thận, khơng có tiền sử dị ứng với thuốc nghiên cứu thuốc tương tự - Xét nghiệm HBsAg anti HCV âm tính - Phụ nữ khơng mang thai, không thời kỳ cho bú 34 4.2.2.3 Thuốc nghiên cứu Nội dung Tên thuốc Thuốc thử Oralfuxim 500 mg (Viên nén bao phim cefuroxim axetil tương đương 500mg cefuroxim) Số lô: 201C1 Hạn dùng: 05/12/2011 Thuốc chứng Zinnat tablets 500 mg (Viên nén bao phim cefuroxim axetil tương đương 500mg cefuroxim Số lô: C546498 Hạn dùng: 04/2012 Số đăng ký Số ĐK: VD-4595-07 Số ĐK: VN-10261-10 Nơi sản xuất, địa Xí nghiệp Dược phẩm 150 thuộc Cơng ty cổ phần ARMEPHACO (Bộ Quốc Phòng) Địa chỉ: Số 118, phố Vũ Xuân Thiều, Phường Phúc Lợi, Quận Long Biên, TP Hà Nội Viên nén thuôn màu trắng, bao phim, có kẻ ngang mặt, mặt có khắc “500” Đóng gói viên/ vỉ x 02 vỉ hộp carton Nhãn hộp ghi tên thuốc, hàm lượng, nơi sản xuất, số lô, ngày sản xuất hạn dùng Thuốc A Glaxo Operations UK Limited Địa : Harmire Road, Barnard Castle, Durham, United Kingdom Số lơ, hạn dùng Mơ tả Mã hóa Viên nén thn màu trắng, bao phim, có khắc “GX EG2” mặt, mặt trơn Đóng gói 10 viên/ vỉ x 01 vỉ hộp carton Nhãn hộp ghi tên thuốc, hàm lượng, nơi sản xuất, số lô, ngày sản xuất hạn dùng Thuốc B Thuốc thử thuốc đối chứng đánh giá theo hai giai đoạn Giai đoạn Viện Kiểm nghiệm thuốc thành phố Hồ Chí Minh đánh giá tương đương độ hòa tan in vitro theo USP-30 [8] theo Cục Quản lý dược phẩm thực phẩm Mỹ (FDA) [4] Giai đoạn kết đánh giá tương đương sinh học in vivo thuốc thử thuốc đối chứng nghiên cứu 35 4.2.2.4 Phương pháp phân tích Định lượng cefuroxim huyết tương người tình nguyện phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao đầu dò tử ngoại khả kiến thẩm định theo hướng dẫn FDA [6] Chất chuẩn nội cephalexin Giới hạn định lượng phương pháp 0,25 µg/ml Khoảng tuyến tính từ 0,125-25 µg/ml, R2 = 0,9992 Kết độ đúng độ xác ngày 98,83-115,82% 0,752,93% Độ đúng mức độ xác khác ngày 99,15-107,98% 1,34-5,45% Hiệu suất chiết từ 58,32-60,82% cefuroxim 96,61-99,44% Cephalexin 4.2.2.5 Phương pháp thống kê Phân tích phương sai ANOVA thông số Cmax, AUC0-t, AUC0-∞ Đánh giá khác biệt cá thể, thuốc, giai đoạn, trình tự So sánh thơng số Cmax, AUC0-t, AUC0-∞ thuốc thử thuốc đối chứng với khoảng tin cậy 90% Hai chế phẩm tương đương sinh học khoảng tin cậy 90% tỉ số Cmax, AUC0-t, AUC0-∞ hai chế phẩm chênh lệch không 80-125% chuyển sang dạng logarit So sánh khác biệt thông số Tmax theo phương pháp thống kê phi tham số (Wilcoxon Signed Rank Test) 4.2.2.6 Kết nghiên cứu - Kết định lượng thuốc huyết tương người tình nguyện Tiến hành phân tích mẫu huyết tương người tình nguyện theo quy trình thẩm định Phân tích dược động học dựa liệu 12 người tình nguyện - Thống kê thơng số dược động học Từ nồng độ cefuroxim huyết tương thời điểm, tính tốn thơng số dược động học cá thể dược động học trung bình - Đánh giá thống kê Khoảng tin cậy 90% tỷ số giá trị chung bình thuốc thử so với thuốc chứng, tính số liệu chuyển logarit: Cmax: 93,76%-112,94% AUC0-t: 95,76%-106,53% Phân tích thống kê phương pháp ANOVA thông số AUC0-t, AUC0-∞ Cmax khác trình tự thuốc, thuốc, giai đoạn khơng có ý nghĩa thống kê Giá trị Tmax thuốc thử thuốc đối chứng khác khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Giá trị Tmax khác khơng có ý nghĩa thống kê theo phương pháp thống kê phi tham số 36 Giá trị Tmax thuốc khác ý nghĩa thống kê với độ tin cậy lớn 95% 4.3 Thảo luận 4.3.1 Thảo luận đánh giá tương đương sinh học viên nén bao phim Bifuroxime 500 mg so với viên nén bao phim Zinnat tablets 500 mg Thử nghiệm đánh giá tương đương sinh học in vivo chế phẩm Bifuroxim 500 mg (Viên nén bao phim cefuroxim axetil tương đương 500mg cefuroxim), lô số 0408, ngày sản xuất 051208, hạn dùng 05/12/2010 so với Zinnat tablets 500mg (Viên nén bao phim cefuroxim axetil tương đương 500mg cefuroxim), lô số C358120, ngày sản xuất 170408, hạn dùng 04/2011do Công ty Glaxo Operations UK Limited (Harmire Road, Barnard Castle, Durham, United Kingdom, DL12 8DT) sản xuất 12 người Việt Nam tình nguyện khoẻ mạnh có kết sau: Các thông số dược động học trung bình, đánh giá tương đương sinh học: - Khoảng tin cậy 90% tỷ số giá trị trung bình thuốc thử so với thuốc chứng, tính số liệu chuyển logarit: Cmax: 83,47%-103,24% AUC0-t: 88,71%-106,33% - Giá trị Tmax thuốc khác khơng có ý nghĩa thống kê với độ tin cậy lớn 95% (phương pháp thống kê phi tham số) Hai chế phẩm cefuroxim 500 Zinnat tablets 500mg tương đương sinh học in vivo theo qui định US-FDA Các thông số dược động học trung bình Cmax, Tmax, T1/2 nghiên cứu tương tự với kết nghiên cứu công bố Đối với biệt dược khác dạng bào chế, chứa dược chất cefuroxim hàm lượng 500 mg (Bifuroxim 500mg) cho tương đương sinh học in vivo với thuốc đối chứng Zinnat® 500 mg (cefuroxim 500 mg) Công ty Glaxo Operations UK Limited (Harmire Road, Barnard Castle, Durham, United Kingdom, DL12 8DT) sản xuất 4.3.2 Thảo luận đánh giá tương đương sinh học viên nén bao phim Oralfuxim 500 mg so với viên nén bao phim Zinnat tablets 500 mg Thử nghiệm đánh giá tương đương sinh học in vivo chế phẩm chứa dược chất cefuroxim hàm lượng 500 mg có cơng thức bào chế chế phẩm thuốc thử Oralfuxim (Viên nén bao phim cefuroxim axetil tương đương 500mg cefuroxim), lô số 201C1, số đăng ký: VD-4595-07, hạn dùng 05/12/2011 so với Zinnat tablets 500mg (Viên nén bao phim cefuroxim axetil tương đương 500mg cefuroxim), lô số C546498, ngày, Số ĐK: VN-10261-10, hạn dùng 04/2012 Công ty Glaxo Operations UK Limited (Harmire Road, Barnard Castle, Durham, United Kingdom, DL12 8DT) sản xuất 12 người Việt Nam tình nguyện khoẻ mạnh có kết sau: 37 Kết cho thấy thuốc thử so với thuốc đối chứng có khoảng tin cậy 90% AUC0-t từ 95,76-106,53%, khoảng tin cậy 90% AUC0-t từ 93,71-105,75%, khoảng tin cậy 90% Cmax từ 93,76-112,94%, phân tích ANOVA thơng số, AUC0-t Cmax khác trình tự, thuốc, giai đoạn khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05), giá trị Tmax khác khơng có ý nghĩa thống kê theo phương pháp thống kê phi tham số Các thơng số dược động học trung bình Cmax, Tmax, T1/2 nghiên cứu tương tự với kết nghiên cứu công bố Đối với biệt dược khác dạng bào chế, chứa dược chất cefuroxim hàm lượng 500 mg có cơng thức bào chế chế phẩm thuốc thử Oralfuxim 500, sản xuất tại Xí nghiệp Dược phẩm 150 (Cơng ty cổ phần ARMEPHACO), theo quy định cho tương đương sinh học in vivo với thuốc đối chứng Zinnat® 500 mg (cefuroxim 500 mg) Công ty Glaxo Operations UK Limited (Harmire Road, Barnard Castle, Durham, United Kingdom, DL12 8DT) sản xuất 38 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Trong khuôn khổ tiểu luận này, qua trình tổng hợp nghiên cứu rút kết luận sau: - Đề tài tìm hiểu, tổng quan đánh giá tương đương sinh học - Đề tài tìm hai phương pháp đánh giá tương đương sinh học viên nén cefuroxim 500 mg: - Phương pháp đánh giá tương đương sinh học viên nén Bifuroxim 500 mg so với viên nén bao phim Zinnat tablets 500mg - Phương pháp đánh giá tương đương sinh học viên nén Oralfuxim 500 mg so viên nén bao phim Zinnat tablets 500mg 5.2 Đề nghị Tình hình dược phẩm Việt Nam cần quy hoạch bản, khơng tập trung vào dòng phổ thơng Chính sách quản lý cần điều chỉnh theo hướng phù hợp nhằm thúc đẩy ngành dược nội địa phát triển Nâng cấp nhà máy sản xuất lên tiêu chuẩn sở sản xuất thuốc đạt tiêu chuẩn quốc tế EU-GMP PIC/S-GMP để sản xuất thuốc generic chất lượng cao nhằm tăng khả trúng kênh đấu thầu sở bệnh viện (ETC) khai thông thị trường xuất Gia công thuốc sản xuất nhượng quyền đường ngắn hiệu để học hỏi theo kịp trình độ phát triển ngành dược giới Nâng cao sinh khả dụng tương đương sinh học, xây dựng hàng rào kỹ thuật hội nhập kinh tế tồn cầu khu vực góp phần đảm bảo cơng lợi ích cho người bệnh điều trị Phát huy tối đa hiệu lực chữa bệnh, tiện lợi sử dụng bảo quản ngành dược Việt Nam đổi trang thiết bị-công nghệ để đáp ứng yêu cầu phát triển hoạt động ngành, huy động vốn, kêu gọi nhà đầu tư chiến lược, phát hành cổ phiếu Đặc biệt có nhận thức đúng đắn GMP, thường xuyên cập nhật văn văn tài liệu hướng dẫn, bồi dưỡng, đào tạo thu hút nhân tài, quan tâm đến môi trường làm việc nhân viên TÀI LIỆU THAM KHẢO 39 Bộ Y tế (26/4/2010) Thông tư số 08/2010/TT-BYT việc hướng dẫn báo cáo số liệu nghiên cứu sinh khả dụng/tương đương sinh học đăng ký thuốc Bộ Y tế) (10/1/2012) Báo cáo kết đánh giá tương đương độ hòa tan in vitro, số 63/BE-11 Bộ Y tế (9/9/2017) Thông tư dự thảo 09/09/2017/TT-BYT việc qui định thử tương đương sinh học thuốc tại Việt Nam FDA (1997) Guidance for Industry Dissolution Testing of Immediate Release Solid Oral Dosage Forms FDA (2001) Guidance For Industry Bioanalytical Method Validation Marcel Dekker INC Peter G, Welling (1991) Pharmaceutical Bioequivalence Marcel Dekker INC Sanford Bolton (1997) Pharmaceutical Statistics Marcel Dekker INC United States Pharmacopeial Convention (2007) The United State Pharmacopoeia 30.pp 358-540 US Food and Drug Administration (5/2001) Bioanalytical method validation 10 US Food and Drug administration (5/2003) Bioavailability and Bioequivalence studies for oral administered drug products – General considerations 11 World Health Organization (2015) WHO guidelines for good clinical practice (GCP) for trials on pharmaceutical products ... lượng nghiên cứu 21 4.2 Kết nghiên cứu tổng quan phương pháp đánh giá tương đương sinh học viên nén bao phim cefuroxim 500 mg 21 4.2.1 Phương pháp đánh giá tương đương sinh học viên nén bao. .. tiêu: - Tổng quan đánh giá tương đương sinh học - Tổng quan phương pháp đánh giá tương đương sinh học viên nén bao phim cefuroxim 500 mg 2 CHƯƠNG LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 TỔNG QUAN VỀ CEFUROXIM. .. bao phim Bifuroxime 500 mg so với viên nén bao phim Zinnat tablets 500 mg 21 4.2.2 Nghiên cứu phương pháp đánh giá tương đương sinh học viên nén bao phim Oralfuxim 500 mg so với viên nén bao