TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 10031:2013 EN 1377:1996 THỰC PHẨM - XÁC ĐỊNH ACESULFAME K TRONG CÁC CHẾ PHẨM TẠO NGỌT - PHƯƠNG PHÁP ĐO PHỔ Foodstuffs - Determination of acesulfame K in table top sweetener preparations - Spectrometric method Lời nói đầu TCVN 10031:2013 hồn tồn tương đương với EN 1377:1996; TCVN 10031:2013 Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F13 Phương pháp phân tích lấy mẫu biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học Công nghệ công bố THỰC PHẨM - XÁC ĐỊNH ACESULFAME K TRONG CÁC CHẾ PHẨM TẠO NGỌT - PHƯƠNG PHÁP ĐO PHỔ Foodstuffs - Determination of acesulfame K in table top sweetener preparations Spectrometric method Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn quy định phương pháp đo phổ để xác định hàm lượng acesulfame K có chế phẩm tạo dạng rắn có chứa acesulfame K Phép thử liên phòng thử nghiệm tiến hành viên tạo [1] Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn Đối với tài liệu viện dẫn ghi năm cơng bố áp dụng phiên nêu Đối với tài liệu viện dẫn không ghi năm công bố áp dụng phiên nhất, bao gồm sửa đổi, bổ sung (nếu có) TCVN 4851 (ISO 3696), Nước dùng để phân tích phòng thí nghiệm - Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử Nguyên tắc Chuẩn bị dung dịch mẫu thử cách hòa tan chế phẩm tạo nước Đo quang phổ để xác định hàm lượng acesulfame K bước sóng có độ hấp thụ cực đại khoảng 227 nm Thuốc thử Chỉ sử dụng thuốc thử loại tinh khiết phân tích nước loại theo TCVN 4851 (ISO 3696), trừ có quy định khác 4.1 Chất chuẩn acesulfame K, có hàm lượng tối thiểu 99 % tính theo chất khơ CHÚ THÍCH: Để biết thêm thơng tin việc nhận biết độ tinh khiết, xem [2] 4.2 Dung dịch gốc acesulfame K, (C4H4NO4SK)  0,8 g/l1) Hòa tan khoảng 400,0 mg chất chuẩn acesulfame K (4.1), cân xác đến 0,1 mg, nước đựng bình định mức 500 ml, thêm nước đến vạch 4.3 Dung dịch chuẩn acesulfame K, (C4H4NO4SK)  mg/l 1)  nồng độ khối lượng Dùng pipet lấy 5,00 ml dung dịch gốc acesulfame K (4.2) cho vào bình định mức 500 ml, thêm nước đến vạch CHÚ THÍCH: Có thể sử dụng thêm dung dịch có nồng độ nằm dải tuyến tính để dựng đường chuẩn Thiết bị, dụng cụ Sử dụng thiết bị, dụng cụ thơng thường phòng thử nghiệm cụ thể sau: 5.1 Máy đo phổ, thích hợp để đo dải UV 5.2 Cuvet thạch anh, có chiều dài đường quang cm Cách tiến hành 6.1 Xác định khối lượng trung bình viên tạo Xác khối lượng 20 viên tạo ngọt, xác đến 0,1 mg, tính khối lượng trung bình (m2) viên CHÚ THÍCH: Để tăng độ xác, nên sử dụng 100 viên 6.2 Chuẩn bị dung dịch mẫu thử Hòa tan lượng chế phẩm tạo nghiền nhỏ (m0), tương đương với khoảng 400 mg acesulfame K tương ứng với 20 lần khối lượng trung bình viên tạo (6.1) nước bình định mức 500 ml, thêm nước đến vạch Để n thành phần khơng hòa tan lắng xuống, cần, lọc dung dịch, loại bỏ 100 ml dịch lọc Sau dùng pipet lấy 5,00 ml dịch lọc cho vào bình định mức 500 ml, thêm nước đến vạch 6.3 Xác định 6.3.1 Đo phổ hấp thụ dung dịch chuẩn acesulfame K bước sóng từ 200 nm đến 280 nm cuvet thạch anh (5.2), sử dụng nước làm dung dịch so sánh, xác định độ hấp thụ (A 1) bước sóng có độ hấp thụ cực đại (khoảng 227 nm) Kiểm tra dải tuyến tính dãy dung dịch có nồng độ thích hợp (đường chuẩn) 6.3.2 Đo phổ hấp thụ dung dịch mẫu thử theo quy định 6.3.1 xác định độ hấp thụ (A2) bước sóng có độ hấp thụ cực đại xác định 6.3.1 Nếu hình dạng đồ thị độ hấp thụ thu dung dịch mẫu thử (6.2) khác với hình dạng đồ thị dung dịch chuẩn có mặt chất gây nhiễu Khi đó, không áp dụng phương pháp Kiểm tra khả áp dụng phương pháp cách xác định độ hấp thụ bước sóng 12 nm 12 nm so với bước sóng có độ hấp thụ cực đại (khoảng 227 nm) Tỷ số độ hấp thụ giá trị so với độ hấp thụ cực đại không khác với giá trị thu sử dụng dung dịch chuẩn acesulfame K (4.3) Các ví dụ phổ hấp thụ acesulfame K nêu Phụ lục A Biểu thị kết 7.1 Tính phần khối lượng, w1, acesulfame K, miligam kilogam, theo Công thức (1): w1  A2 m1 F 10 A1 m0 Trong đó: A2 độ hấp thụ dung dịch mẫu thử (6.3.2); A1 độ hấp thụ dung dịch chuẩn acesulfame K (6.3.1); (1) m0 khối lượng mẫu ban đầu (6.2), tính miligam (mg); m1 khối lượng chất chuẩn acesulfame K 500 ml dung dịch chuẩn (4.3), tính miligam (mg) (trong trường hợp 4,0 mg); F hệ số pha loãng (trong trường hợp 100) 7.2 Tính phần khối lượng, w2, acesulfame K, miligam viên, theo Công thức (2): w2  A2 m2 F m1 A1 m0 (2) Trong đó: m2 khối lượng trung bình viên tạo (6.1), tính miligam (mg); A2, F, m1, A1, m0 xem Cơng thức (1) Nếu tính kết dựa vào đường chuẩn, dùng cách tính khác sử dụng đường hồi quy Kết làm tròn đến chữ số thập phân Độ chụm Chi tiết phép thử liên phòng thử nghiệm độ chụm phương pháp phù hợp với ISO 5725:1986 [3]2) nêu Phụ lục B Các giá trị thu từ phép thử liên phòng thử nghiệm không áp dụng cho dải nồng độ mẫu khác với giá trị nêu Phụ lục B 8.1 Độ lặp lại Chênh lệch tuyệt đối kết hai phép thử đơn lẻ, vật liệu thử giống hệt nhau, người thực hiện, sử dụng thiết bị, thực khoảng thời gian ngắn, không % trường hợp vượt giới hạn lặp lại r Giá trị là: r = 3,2 mg/100 mg viên acesulfame K có bán sẵn 8.2 Độ tái lập Chênh lệch tuyệt đối kết hai phép thử đơn lẻ, vật liệu thử giống hệt nhau, hai phòng thử nghiệm khác nhau, người phân tích khác thực hiện, sử dụng thiết bị khác nhau, không % trường hợp vượt giới hạn tái lập R Giá trị là: R = 3,7 mg/100 mg viên acesulfame K có bán sẵn Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải nêu rõ: - thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ mẫu thử; - phương pháp thử sử dụng, viện dẫn tiêu chuẩn này; - kết đơn vị tính; - kiểm tra độ lặp lại, nêu kết cuối thu được; - điểm bất thường quan sát trình thử nghiệm; - chi tiết thao tác khơng quy định tiêu chuẩn xem tùy chọn, với tình bất thường khác ảnh hưởng đến kết Phụ lục A ISO 5725:1986 hủy thay tiêu chuẩn ISO 5275 (gồm phần) chấp nhận thành tiêu chuẩn TCVN 6910 (gồm phần) 2) (Tham khảo) Ví dụ phổ hấp thụ dung dịch chuẩn acesulfame K Mẫu: Acesulfame K Dung môi: Nước Nồng độ: 8,0 mg/l Hàm số: Độ hấp thụ Dải bước sóng: Từ 200 nm đến 300 nm Giá trị tối đa cơng nhận: 1: Bước sóng = 228 nm Độ hấp thụ = 0,484833 Hình A.1 - Phổ hấp thụ dung dịch chuẩn acesulfame K nước Phụ lục B (Tham khảo) Dữ liệu độ chụm Các giá trị xác định phép thử liên phòng thử nghiệm phù hợp với ISO 5725:1986 [3] Các phép thử Viện Max von Pettenkofer thuộc sở Y tế Liên bang, Cục Hóa học Thực phẩm, Berlin, Đức [1] tổ chức thực Bảng B.1 - Dữ liệu độ chụm Mẫu Năm tiến hành phép thử liên phòng thử nghiệm Các viên acesulfame có bán sẵn 1986 Số lượng phòng thử nghiệm Số lượng mẫu Số lượng phòng thử nghiệm lại sau trừ ngoại lệ Số lượng phòng thử nghiệm ngoại lệ Số lượng kết chấp nhận 38 Giá trị trung bình, x 98,0 mg/100 mg Độ lệch chuẩn lặp lại, sr 1,1 mg/100 mg Độ lệch chuẩn tương đối lặp lại, RSDr 1,2 % Giới hạn lặp lại, r 3,2 mg/100 mg Độ lệch chuẩn tái lập, sR 1,3 mg/100 mg Độ lệch chuẩn tương đối tái lập, RSDR Giới hạn tái lập, R 1,3 % 3,7 mg/100 mg THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Untersuchung von Lebensmitteln: Bestimmung des Acesulflam-K-Gehaltes in acesulfame-Khaltigen Süstoff-Tabletten L 57.22.99-3, Mai 1989, (Food Analysis: Determination of acesulfamee K content in sweetener tablets containing it L 57.22.99-4, 1989-05) In: Amtiche Sammlung von Untersuchungsverfahren nach § 35 LMBG: Verfahren zur Probenahme und Bedarfsegenständen/Bundesgesundheitsamt (In: Collection of official methods under article 35 of the German Federal Foods Act; Methods of sampling and analysis of foods, tobacco products, cosmetics and commodity goods, Federal Healthy Office) Loseblattausgabe, Stand Mai 1994 Bd (Losse-leaf edition of 1994-05 Vol I.) Berlin, Köln: Beuth Verlag GmbH [2] FAO Food and Nutrition Paper 28 of the Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives, April 1981 [3] ISO 5725:1986, Precision of test methods - Determination of repeatability and reproducibility for a standard test method by inter-laboratory tests  ... sau: 5.1 Máy đo phổ, thích hợp để đo dải UV 5.2 Cuvet thạch anh, có chiều dài đường quang cm Cách tiến hành 6.1 Xác định khối lượng trung bình viên tạo Xác khối lượng 20 viên tạo ngọt, xác đến 0,1... đại không khác với giá trị thu sử dụng dung dịch chuẩn acesulfame K (4.3) Các ví dụ phổ hấp thụ acesulfame K nêu Phụ lục A Biểu thị k t 7.1 Tính phần khối lượng, w1, acesulfame K, miligam kilogam,... mặt chất gây nhiễu Khi đó, khơng áp dụng phương pháp Kiểm tra khả áp dụng phương pháp cách xác định độ hấp thụ bước sóng 12 nm 12 nm so với bước sóng có độ hấp thụ cực đại (khoảng 227 nm) Tỷ số