Tiểu luận Cơng nghệ sinh học Quy trình cơng nghệ sản xuất Insulin LỜI NĨI ĐẦU Có thể nói kỉ 21 kỉ công nghệ sinh học, kỉ ứng dụng ngày nhiều khoa học công nghệ Nó khơng có ý nghĩa cách mạng hố phát triển sinh học, mà cịn tạo quyền lực to lớn cho người việc cải tạo sinh giới thân Cơng nghệ sinh học phát triển ứng dụng từ lâu Tuy nhiên công nghệ sinh học thực phát triển từ thập niên 70 kỉ XX, với đời hỗ trợ của ngành khoa học khác, đặc biệt công nghệ thơng tin.Từ cơng nghệ sinh học phát triển vũ bão xứng đáng mang danh cho kỉ mới: Thế kỉ công nghệ sinh học! Cơng nghệ sinh học gì? Cơng nghệ sinh học công nghệ sử dụng hệ thống sinh học, tế bào sinh vật, động vật, thực vật dẫn xuất chúng để tạo sản phẩm cải biến trình chun hóa phục vụ lợi ích người Cơng nghệ sinh học ngành khoa học quan trọng, phát triển sở kĩ thuật mẻ: kĩ thuật di truyền, kĩ thuật dung hợp tế bào; kĩ thuật nuôi cấy mô; kĩ thuật nuôi cấy tế bào; kĩ thuật cấy chuyển phôi….Những thành tựu chuẩn bị cho cách mạng sinh học ngành kinh tế-kĩ thuật Công nghệ vi sinh coi ngành mũi nhọn công nghệ sinh học, có tác động to lớn đến đời sống người việc sử dụng vi sinh vật để tạo hàng loạt sản phẩm rượu, bia, axit hữu cơ, axit amin, chất điều vị, dung môi hữu cơ, vitamin, kháng sinh, vacxin… Công nghệ vi sinh sử dụng để xử lý phế thải làm môi trường… Vi sinh vật trở thành công cụ chuyển gen lý tưởng mà giá trị cơng cụ tạo sản phẩm có chất lượng cao giá thành rẻ Công nghệ sản xuất Insulin công nghệ ứng dụng công nghệ sinh học vi sinh sản xuất hợp chất có hoạt tính sinh học cao Insulin dạng hoocmon điều chỉnh lượng đường máu người động vật, thiếu Insulin gây bệnh tiểu đường sau dẫn đến bệnh lý khác Cũng Insulin, chất có hoạt tính sinh học cao Interferon, hoocmon sinh trưởng GVHD: TS Trần Văn Lư -1- HVTH: Trần Thị Kim Phượng Tiểu luận Cơng nghệ sinh học Quy trình công nghệ sản xuất Insulin người( HGH), somatostatin …rất cần thiết cho việc phòng chống chữa bệnh cho người Thơng thường hợp chất có hoạt tính sinh học tổng hợp với lượng nhỏ tế bào thể người động vật bình thường Một số người thiếu hụt hợp chất gây bệnh lý cần điều trị bổ sung vào thể Ngày người ta sản xuất hợp chất có hoạt tính sinh học công nghệ di truyền với số lượng lớn, tinh có tính an tồn cao Ý nghĩa đó, cơng đầu ngành cơng nghệ sinh học nói chung, cơng nghệ vi sinh nói riêng Với lý đó, tơi chọn đề tài : “ Quy trình công nghệ sản xuất Insulin” để làm rõ vấn đề Vì thời gian có hạn nên chắn tiểu luận cịn nhiều thiếu sót, mong q thầy bạn góp ý để tiểu luận hồn thiện Tơi xin chân thành cảm ơn NỘI DUNG GVHD: TS Trần Văn Lư -2- HVTH: Trần Thị Kim Phượng Tiểu luận Công nghệ sinh học Quy trình cơng nghệ sản xuất Insulin INSULIN: 1.1 Sơ lược lịch sử phát Insulin Bệnh tiểu đường biết đến từ thời cổ đại Những tài liệu cổ người Ai Cập từ 1.500 năm trước Cơng ngun mơ tả bệnh suy mịn với tình trạng nước tiểu người bệnh có vị Từ năm 1850 trở đi, khám nghiệm tử thi bệnh nhân bị bệnh tiểu đường gợi ý, bệnh xuất tuyến tụy không bảo đảm chức bình thường Nhiều bác sĩ cho tế bào biệt hóa, gọi tiểu đảo Langerhan, sản sinh hóa chất giúp thể điều hòa nồng độ đường máu Bệnh tiểu đường xuất hóa chất khơng sản sinh H1 - Loại thuốc trị tiểu đường nhà sinh lý học người Canada Fred Banting Charles Best tìm năm 1922 Quá trình nghiên cứu sản xuất insulin có đóng góp quan trọng chó Năm 1922, Fred Banting Charles Best thuộc Đại học Tổng hợp Toronto (Canada) thông báo họ tìm insulin ứng dụng thành công chất điều trị bệnh tiểu đường người Vào thời điểm đó, người bị bệnh tiểu đường phải vật lộn với bệnh để tồn chưa có biện pháp điều trị hiệu Bệnh nhân nhanh chóng trở thành xương di động thường chết sớm bị sút cân nghiêm trọng Banting Best cắt bỏ tuyến tụy chó, hậu chúng bị tiểu đường (thử nghiệm nghe tàn nhẫn, giúp cứu sống hàng triệu người) Họ cố gắng tinh chế hc mơn hóa học từ tụy chiết xuất nhiều thành phần từ tiểu đảo Langerhan Sau đó, chất tiêm vào chó bị bệnh tiểu đường để thử nghiệm họ nhận thấy bệnh tiểu đường bị đẩy lùi Ban đầu, thuốc tiêm lẫn nhiều tạp chất thường gây tai biến nguy hiểm Một đội ngũ nhà khoa học phối hợp nghiên cứu tạo tinh GVHD: TS Trần Văn Lư -3- HVTH: Trần Thị Kim Phượng Tiểu luận Cơng nghệ sinh học Quy trình công nghệ sản xuất Insulin chất chiết xuất từ tiểu đảo Langerhan, bảo đảm đủ độ tinh khiết để thử nghiệm người bệnh Vào tháng năm 1922, Leonard Thompson, 14 tuổi, điều trị thành công Bệnh viện Toronto tinh chất (được gọi insulin) Năm 1928, Oskar Wintersteiner chứng minh insulin protein.Tin tức thành công Banting Best nhanh chóng lan rộng sau phịng thí nghiệm họ khơng thể đáp ứng đủ nhu cầu loại thần dược Quy trình sản xuất thương mại insulin bắt đầu việc chiết suất chất từ tụy bò lợn thịt (hiện nguồn insulin quan trọng y học) Q trình biến đổi hóa học làm cho insulin giống với hc mơn người tạo cho đặc tính thuận tiện cho việc sử dụng Ban đầu, insulin tiêm 3-4 lần/ngày trước bữa ăn Sau đó, loại insulin có tác dụng kéo dài đời, số lần tiêm giảm xuống Năm 1955, Frederick Sanger, người đoạt giải thưởng Nobel, tìm chuỗi axit amin insulin người Điều cho phép nhà khoa học tạo gene insulin, dùng để tạo chủng vi khuẩn biến đổi di truyền có khả sản sinh số lượng lớn insulin với độ tinh khiết cao Ngày nay, biết insulin giúp tế bào thể hấp thu đường từ thức ăn tiêu hóa Gan có vai trị đặc biệt quan trọng quy trình điều hòa nồng độ đường máu thể Insulin giúp cho gan tiếp nhận đường (glucose) sau bữa ăn lưu trữ dạng glycogen Glycogen sau chuyển hóa thành glucose trở lại máu nồng độ đường máu bắt đầu giảm 1965, người ta tổng hợp nhân tạo hai chuỗi polipepetit A B tạo Insulin nhân tạo giá thành đắt Năm 1978, lần Insulin tổng hợp nhờ vi khuẩn E.Coli công nghệ di truyền Người ta tạo dòng plasmic tái tổ hợp cách gắn đoạn gen tổng hợp chuỗi polipeptit A B vào vật chất di truyền tế bào E.Coli , sau gắn hai loại chuỗi polipeptit với tạo phân tử Insulin có hoạt tính dùng chữa bệnh Từ năm 1982, Insulin sản xuất công nghệ gen trở thành thương phẩm GVHD: TS Trần Văn Lư -4- HVTH: Trần Thị Kim Phượng Tiểu luận Công nghệ sinh học Quy trình cơng nghệ sản xuất Insulin 1.2 Cấu trúc Insulin: Insulin hoocmon protein tế bào tuyến tụy beta đảo Langerhans sinh Phân tử Insulin tương đối nhỏ, có khối lượng khỗng 6000 Dalton, cấu tạo hai chuỗi polipeptit A B Các chuỗi A B liên kết cầu nối disulfua, ngồi cịn có cầu nối disulfua nằm chuỗi A Ở hầu hết loài, chuỗi A gồm 21 axitamin chuỗi B gồm 30 axitamin Mặc dù trình tự aaxitamin khác lồi số đoạn định phân tử có tính bảo tồn cao, đoạn có chứa cầu nối disulfua, hai đầu chuỗi A nhánh bên đầu COOH chuỗi B Sự tương đồng tình tự axitamin dẫn đến cấu trúc chiều Insulin loài khác giống Insulin chiết rút từ động vật có hoạt tính sinh học cao lồi khác Các phân tử Insulin có xu hướng tạo thành dạng dime dung dịch hình thành liên kết H đầu COOH chuỗi B Ngoài ra, có mặt ion kẽm, dime insulin liên kết tạo thành hexame Các mối tương tác có ý nghĩa quan trọng điều trị Dạng monome dime dễ dàng khuếch tán vào máu, dạng hexame khuếch tán Do đó, hấp thụ thuốc chứa hàm lượng hexame cao thường bị chậm ngừng hẳn Vấn đề thúc đẩy đời số loại chất insulin giả tái tổ hợp Loại chất bán thị trường insulin lispro, phân tử chất có trật tự lisin prolin đầu COOH chuỗi B bị đảo ngược, làm giảm khả hình thành dạng dime hexame Insulin ban đầu tổng hợp dạng “preproinsulin” (tiền insulin) ribosome tế bào beta đảo Langerhans tuyến tụy Preproinsulin phân tử dạng thẳng bao gồm: peptide tín hiệu chứa 24 acid amin (SP), chuỗi B, peptide C với 31 acid amin (C) chuỗi A nối với theo thứ tự SPB-C-A Khi vận chuyển qua lưới nội chất, peptide tín hiệu bị phân cắt tạo proinsulin (B-C-A) Proinsulin hình thành cầu nối disulfur lưới nội chất, hình thành cấu trúc bậc ba Proinsulin bị phân cắt enzyme PC1/3 liên kết chuỗi B peptide C sau bị phân cắt enzyme PC2 vị trí liên kết chuỗi A peptide C Hai acid amin đầu N peptide nối với đầu C GVHD: TS Trần Văn Lư -5- HVTH: Trần Thị Kim Phượng Tiểu luận Công nghệ sinh học Quy trình cơng nghệ sản xuất Insulin chuỗi B bị phân cắt PC1/3 phân cắt khỏi chuỗi B enzyme carboxypeptidase H Kết cuối tạo thành insulin H.2 – Cấu trúc phân tử Insulin 1.3 Vai trò Insulin: Insulin hoocmon điều hòa nồng độ Glucose máu Chức cân nội môi lượng sinh học quan trọng Glucose nguồn ngun liệu hơ hấp tế bào nguồn khung Cacbon định cần cho tổng hợp chất hữu Cân trao đổi chất phụ thuộc vào việc trì Glucose máu gần điểm ổn định,khoãng 90mg/ml người ( Theo Campbell) 1.3.1 Insulin trao đổi Hidratcacbon: GVHD: TS Trần Văn Lư -6- HVTH: Trần Thị Kim Phượng Tiểu luận Cơng nghệ sinh học Quy trình cơng nghệ sản xuất Insulin Glucose giải phóng từ tinh bột, saccarose….nhờ thủy phân tiêu hóa thức ăn, sau hấp thụ vào máu ruột non Nồng độ Glucose cao máu kích hoạt giải phóng Insulin Insulin hoạt động tế bào khắp thể nhằm thscđẩy hấp thụ, sử dụng dự trữ Glucose Tác động Insulin lên trao đổi Glucose thay đổi tùy theo mơ đích Các phân tử Insulin tuần hồn theo dịng máu chúng gắn vào thụ thể chúng màng tế bào Khi đó, phức hợp thụ thể -Insulin khởi phát chuỗi truyền tín hiệumang thơng tin phát từ Insulin : chuyển glucose khỏi huyết tương H – Insulin gắn với thụ thể màng tế bào tuần hoàn máu Trong loạt đáp ứng tế bào hoạt hóa Insulin gây bước chìa khóa trao đổi chất Glucose GLUT4 glucose transporter Nhờ vận chuyển thuận lợi glucose vào tế bào, GLUT4 loại glucose khỏi dòng máu cách hiệu Những thay đổi kéo dài từ vài phút đến vài GLUT4 có mặt màng tế bào nhiều loại mô thể mô xương( đốt cháy Glucose làm lượng), mô mỡ ( chuyển glucose thành tryglyxerit để dự trữ) mô gan Insulin thúc đẩy gan dự trữ Glucose để hình thành Glycogen Phần lớn Glucose hấp thụ ruột non vào tế bào gan, chuyển hóa thành chất dự trữ glycogen Insulin có nhiều tác động gan thúc đẩy sinh tổng hợp glycogen Đầu tiên hoạt hóa enzym hexokinaza, chất photphorin hóa glucose, nhờ glucose bị bẩy vào tế bào Insulin ức chế hoạt động GVHD: TS Trần Văn Lư -7- HVTH: Trần Thị Kim Phượng Tiểu luận Cơng nghệ sinh học Quy trình cơng nghệ sản xuất Insulin Glucose-6-phosphatase Insulin hoạt hóa nhiều enzym liên quan trực tiếp đến sinh tổng hợp glycogen, bao gồm phosphofructokinase glucogen syntase Khi khơng có mặt Insulin, tổng hợp Glycogen gan dừng lại enzym chịu trách nhiệm phân hủy Glycogen hoạt động H.4 – Insulin điều hịa lượng glucose máu Vì Insulin ngăn cản mức độ tăng cao đường máu nên khơng phép có q nhiều Insulin Một bước kiểm soát mức độ Insulin enzym Insulinnase ( tìm thấy gan thận ) phân hủy Insulin tuần hoàn máu, làm cho hoocmon phân hủy với thời gian bán rã khoãng phút Quá trình bảo đảm mức độ Insulin lưu hành máu điều chỉnh mức độ glucose máu không giảm xuống thấp đến mức nguy hiểm 1.3.2 Insulin trao đổi lipit: Insulin có tác động quan trọng lên q trình trao đổi lipit Các tác động bao gồm: 1.3.2.1 Insulin thúc đẩy sinh tổng hợp axit béo gan: Khi lượng Glycogen tích tụ gan cao ( > 5% khối lượng thô gan) trình tổng hợp bị ức chế Khi gan bão hịa Glycogen lượng Glucose hấp thụ thêm vào tế bào gan phải chuyển sang đường tổng hợp axit béo, sau vận chuyển khỏi gan dạng lipoprotein Các lipoprotein GVHD: TS Trần Văn Lư -8- HVTH: Trần Thị Kim Phượng Tiểu luận Cơng nghệ sinh học Quy trình cơng nghệ sản xuất Insulin vào vịng tuần hồn, cung cấp axit béo tự cho mô, mô mỡ ( tế bào tạo mỡ) để tổng hợp triglyxerit 1.3.2.2 Insulin ức chế phân hủy chất béo mơ mỡ: Bằng cách ức chế q trình thủy phân triglyxerit thành glyxerol axit béo tự Enzim nhạy cảm với hoocmon trở nên hoạt động photphorin hóa Insulin ngăn cản q trình kết hợp với thụ thể màng tế bào, làm tăng tích tụ glyxerit tế bào mỡ 1.3.3 Insulin tác động khác: - Insulin làm tăng tính hấp thụ axitamin - Insulin làm tăng tính thấm tế bào ion Kali, Magie, photphat vô , tạo điều kiện thuận lợi cho q trình photphorin hóa sử dụng glucose H5-Insulin làm tăng tính thấm ion K, Mg photphat vơ 1.4 Tổng hợp tự nhiên Insulin thể: Insulin tổng hợp tế bào tuyến tụy beta Các tế bào beta xếp thành bó gọi đảo Langerhan tụy insulin tạo từ phần protein lớn để đảm bảo gấp nếp GVHD: TS Trần Văn Lư -9- HVTH: Trần Thị Kim Phượng Tiểu luận Công nghệ sinh học Quy trình cơng nghệ sản xuất Insulin H.6 - Tổng hợp Insulin thể ANRm tiến hành dịch mã protein gọi preproinsulin Preproinsulin bao gồm trình tự tín hiệu đầu amin giúp tiền chất hoocmon qua màng lưới nội chất tham gia vào trình sau dịch mã Tại trình sau dịch mã, trình tự tín hiệu đầu amin khơng cần thiết nên preproinsulin bị thủy phân tạo thành proinsulin Sau hình thành cầu nối disunfua số peptitdase phân cắt proinsulin tạo insulin hoàn chỉnh hoạt động Insulin đóng gói chứa hạt tiết, tích tụ tế bào chất kích hoạt để giải phóng GVHD: TS Trần Văn Lư Phượng - 10 - HVTH: Trần Thị Kim Tiểu luận Cơng nghệ sinh học Quy trình cơng nghệ sản xuất Insulin 3.2.1.2 Tạo vector tái tổ hợp: ► Vector tách dịng: phân tử AND có kích thước nhỏ, có khả gắn gen cần thiết, tự tái bản, tồn tế bào chủ đặc biệt phải mang tín hiệu nhận biết tế bào chủ mang vector tái tổ hợp Các loại vector tách dòng thường dùng :  Plasmid : phân tử AND dạng vịng, xoắn kép, có tế bào chất vi khuẩn  Phagơ : phần lớn phagơ Lamda, có hệ gen chứa vị trí thuận lợi cho cài gen khác nhau, giúp gen dễ dàng xâm nhập vào vi khuẩn có khả có khả chép nhanh  Virut tế bào nhân thực: virut SV40, adenovirut, retrovirut, virut herpes…được sử dụng tách dòng chuyển gen tế bào động vật, thực vật ► Enzym cắt giới hạn: enzym có khả nhận biết đoạn trình tự phân tử AND cắt AND điểm đặc hiệu Đồng thời cắt gen từ hệ gen đó, cắt vector tách dịng vector tái tổ hợp, tạo điều kiện gắn đoạn gen cần thiết Các loại enzym giới hạn thường dùng :  Enzym giới hạn cắt đầu so le ( đầu dính) enzym có khả nhận biết đoạn trình tự lại cắt vị trí lệch hai mạch đơn, tạo đầu dính, nối đoạn AND bị cắt lại với  Enzym giới hạn cắt đầu bằng: enzym nhận biết đoạn trình tự cắt vị trí giới hạn, tạo đầu chúng không tự nối lại được, cần sử dụng enzym nối để nối đoạn cắt lại với đoạn nối chuyên dụng cho loại enzym ► Enzym nối Ligasa: enzym quan trọng tế bào, chúng xúc tác hình thành liên kết photphodieste để nối đoạn axit nucleic với Có loại enzym nối quan trọng Công nghệ di truyền: enzym E.Coli AND tách chiết từ vi khuẩn E.Coli, enzym T4 AND enzym T4 ARN tách chiết từ phage T4 Ngồi ra, ngày người ta cịn sử dụng đoạn nối (đầu dính adaptor ) cho enzym đầu Adaptor xúc tác nối đoạn ADN GVHD: TS Trần Văn Lư Phượng - 18 - HVTH: Trần Thị Kim Tiểu luận Công nghệ sinh học Quy trình cơng nghệ sản xuất Insulin enzym cắt đầu từ tạo nên đầu sol Các adaptor đặc trưng riêng cho loại enzym Dùng enzym cắt hạn chế từ hai nguồn AND khác nhau, qua khâu nối trộn lẫn tạo sản phẩm AND tái tổ hợp 3.2.1.3 Biến nạp AND tái tổ hợp vào tế bào chủ nhân dòng gen: - Đưa AND tái tổ hợp vào tế bào chủ theo kỹ thuật biến nạp( chuyển trực tiếp AND tái tổ hợp vào tế bào chủ) – tế bào chủ vi khuẩn, tế bào động vật, tế bào thực vật; nhờ máy di truyền tế bào chủ nhân AND tái tổ hợp, tạo sinh khối lớn - Những tế bào chủ thường dùng:  Vi khuẩn E.Coli: dễ thao tác, tốn kém, sinh sản nhanh, tạo dòng AND tái tổ hợp nhanh  Tế bào nấm men, tế bào động vật, thực vật nuôi cấy Invitro; loại tế bào thường dùng vào mục đích cụ thể; nghiên cứu điều hòa hoạt động gen, đột biến gen… - Những phương pháp chủ yếu dùng để đưa AND tái tổ hợp vào tế bào nhận:  Kỹ thuật siêu âm: chuyển gen vào tế bào trần ( khơng có thành Xelulose) mơi trường thích hợp  Kỹ thuật xung điện: sử dụng dịng điện cao áp ( khoãng 500V/cm) tạo lỗ thủng nhỏ tế bào trần, tạo điều kiện gen xâm nhập vào hệ gen tế bào chủ  Kỹ thuật vi tiêm: tiêm lượng nhỏ AND vào tế bào chủ tế bào trứng thụ tinh giai đoạn phôi 4-8 tế bào  Kỹ thuật bắn gen: dùng thiết bị bắn vi đạn mang gen cần chuyển ( súng bắn gen) vào hệ gen tế bào chủ Vi đạn hạt Volfram vàng trộn với gen cần chuyển phụ gia, vi đạn bắn vào viên đạn lớn hơn, bắn, viên đạn lớn giữ lại, vi đạn bắn vào tế bào nhận với gia tốc lớn 3.2.1.4 Chọn lọc, tạo dòng biểu gen: GVHD: TS Trần Văn Lư Phượng - 19 - HVTH: Trần Thị Kim Tiểu luận Công nghệ sinh học Quy trình cơng nghệ sản xuất Insulin Việc chọn lọc dịng tế bào ý khơng đơn giản tốn nhiều công sức Khi xác nhận ADN tái tổ hợp xâm nhập vào tế bào mang gen cần thiết chúng sinh sản để tạo dòng tạo điều kiện cho gen biểu  Xác định dòng vi khuẩn chứa plasmit tái tổ hợp: sau biến nạp ADN vào tế bào nhận, tạo nhiều dòng tế bào vi khuẩn khác Chúng ni thành dịng khuẩn lạc vi khuẩn (gồm dịng tế bào vi khuẩn khơng nhận plasmit, dịng nhận plasmit khơng có gen lạ dịng nhận plasmit tái tổ hợp) Do muốn nhận tách dòng gen từ thư viện ADN, người ta sử dụng phương pháp: - Lai axit nucleic: làm tan chỗ khuẩn lạc vi khuẩn giấy lọc nitrocellulose ADN thoát gắn với mẫu thử axit nucleic có mang dấu phóng xạ với độ dài hàng trăm nu Nếu tượng bắt cặp bổ sung xảy có nghĩa gen chuyển vào tế bào nhận - Phát kiểu hình: địi hỏi dịng mục tiêu phải có biểu dạng protein dễ phát phép thử - Phản ứng miễn nhiễm: tế bào nhận plasmit có gắn đoạn ADN lạ tế bào vi khuẩn hoạt tính kháng tetracyclin, khuẩn lạc mọc mơi trường có ampicilin, khơng mọc mơi trường có tetrecyclin Đây dịng tế bào cần chọn  Sự biểu gen tạo dịng: nói chung gen lạ sau đưa vào tế bào nhận, muốn gen có biểu tổng hợp protein cần cấu tạo vector có đủ yếu tố phiên mã dịch mã phù hợp sở chế điều hòa biểu biểu gen Các vector gọi vector biểu 3.2.2 Ý nghĩa sử dụng công nghệ AND tái tổ hợp để sản xuất insulin: Trên thị trường có loại Insulin tổng hợp chủ yếu , phân loại theo thời gian bắt đầu hoạt động , thời điểm đạt cực đại thời gian kéo dài tác dụng thuốc Với vai trị cơng nghệ ADN tái tổ hợp lượng Insulin sản xuất vè đáp ứng nhu cầu Insulin bệnh nhân tiểu đường GVHD: TS Trần Văn Lư Phượng - 20 - HVTH: Trần Thị Kim ... lượng lớn tụy để sản xuất insulin)  Không thể sản xuất lượng lớn quy mô lớn  Giá thành cao 3.2 Quy trình sử dụng công nghệ AND tái tổ hợp để sản xuất Insulin: 3.2.1 Khái quát công nghệ AND tái... trùng QUY TRÌNH CƠNG NGHỆ SẢN XUẤT INSULIN: 3.1 Quy trình sản xuất Insulin trước đây: 3.1.1 Đặc điểm quy trình: Sau hai nhà khoa học người Canada ( Frederick G Bantingvà Charles H Best )phát insulin. .. Kim Phượng Tiểu luận Công nghệ sinh học Quy trình cơng nghệ sản xuất Insulin H.6 - Tổng hợp Insulin thể ANRm tiến hành dịch mã protein gọi preproinsulin Preproinsulin bao gồm trình tự tín hiệu đầu