Đang tải... (xem toàn văn)
Nguyên lý: một đoạn gen mong muốn được khai thác, sau đó chúng được tháo tác các yếu tố cần thiết để chuyển vào hệ gen nhân của tế bào nhận. Gen chuyển có khả năng biểu hiện và di truyền ổn định ở thế hệ sau, đó là nguyên lý của công nghệ này. ADN gen chuyển được tạo ra bằng cách sử dụng các enzyme cắt giới hạn và ligase, gen từ những loại khác nhau có thể được kết hợp lại trong ống nghiệm để tạo thành cấu trúc gen chuyển. Cấu trúc gen chuyển
TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TPHCM KHOA SINH HỌC KĨ THUẬT CHUYỂN GEN Cô Nguyễn Thị Hằng Kĩ Thuật Di Truyền Nhóm NHĨM Lê Thị Trinh Huỳnh Thị Anh Thơ Dương Thị Đào Nguyễn Thị Hương Lài Nguyễn Ngọc Như NỘI DUNG A NHỮNG KHÁI NIỆM CƠ BẢN VỀ KĨ THUẬT CHUYỂN GEN A NHỮNG KHÁI NIỆM CƠ BẢN VỀ KĨ THUẬT CHUYỂN GEN B CÁC BƯỚC TRONG KĨ THUẬT CHUYỂN GEN B CÁC BƯỚC TRONG KĨ THUẬT CHUYỂN GEN II ĐƯA ADN TÁI TỔ III KIỂM TRA SỰ SÁT V ỨNG DỤNG CỦA KĨ I TẠO ADN TÁI TỔ HỢP VÀO TẾ BÀO NHẬP VÀ BIỂU HIỆN CỦA THUẬT CHUYỂN GEN HỢP NHẬN GEN CHUYỂN C VECTOR VÀ ENZYME GIỚI HẠN SỬ DỤNG TRONG KĨ THUẬT CHUYỂN GEN C VECTOR VÀ ENZYME GIỚI HẠN SỬ DỤNG TRONG KĨ THUẬT CHUYỂN GEN D BÀI BÁO “CHUYỂN GEN TÍCH LŨY SẮT TỪ CÂY ĐẬU TƯƠNG SANG CÂY DỨA NHỜ VECTOR VI KHUẨN AGROBACTERIUM” D BÀI BÁO “CHUYỂN GEN TÍCH LŨY SẮT TỪ CÂY ĐẬU TƯƠNG SANG CÂY DỨA NHỜ VECTOR VI KHUẨN AGROBACTERIUM” A NHỮNG KHÁI NIỆM CƠ BẢN TRONG KĨ THUẬT CHUYỂN GEN II Các nguyên lí sinh I Kĩ thuật học chuyển gen gì? I KĨ THUẬT CHUYỂN GEN LÀ GÌ? •Kỹ thuật chuyển gen (ghép gen) kỹ thuật đưa gen lạ vào tế bào chủ, làm cho gen lạ tồn plasmid gắn vào gen tế bào chủ, tồn tái với gen tế bào chủ nhằm tạo giống sinh vật GMO- Genetically modified organism (Sinh vật biến đổi gen) GMF- Genetically modified food Các sinh vật có gen bị biến đổi ( Thực phẩm biến đổi gen) GMO GMF gì?? tiếp nhận gen từ sinh vật khác nhờ tác động người Thực phẩm có nguồn gốc phần toàn từ sinh vật biến đổi gen Một số sản phẩm biến đổi gen tiêu biểu Quy trình Kĩ thuật chuyển gen gồm bước sau: Tạo ADN tái tổ hợp Đưa ADN tái tổ hợp vào tế bào nhận Kiểm tra sát nhập gen biểu gen *Quy trình kĩ thuật chuyển gen giống với tạo dòng có mục đích khác Kĩ thuật chuyển gen nhằm tạo giống sinh vật Nguyên lí Một đoạn gen mong muốn khai thác, sau chúng thao tác yếu tố cần thiết để chuyển vào hệ gen nhân tế bào nhận Gen chuyển có khả biểu di truyền ổn định hệ sau Khái niệm đặc tính • a) Khái niệm • Enzyme giới hạn (restriction enzyme, RE) enzyme endonuclease có vị trí nhận biết điểm cắt ADN đặc hiệu thành đoạn ngắn • Những enzyme phân huỷ liên kết phosphodiester khung ADN mạch đôi mà khơng gây tổn hại đến bases • Hae III cắt ADN cặp nucleotid: GG|CC C|C GG • Sma I cắt ADN cặp nucleotid: CCC|CCC GGG|GGG • EcoR I cắt ADN lệch cặp nucleotid: G|AATTC CTTAA|G Phân loại enzyme giới hạn • loại (dựa vào khả nhận biết cắt trình tự xác định phân tử ADN): Vị trí điểm cắt • Enzyme giới hạn cắt trình tự lặp đối xứng đọc theo chiều 5´-3´ mạch ADN (palindrome) dài khoảng 4-6 nucleotide gọi trình tự nhận biết • Vị trí điểm cắt enzyme giới hạn nằm ngồi trình tự nhận biết • Các RE khác có trình tự nhận biết gọi isoschisomers • Một số enzyme tạo vết cắt mạch đối diện tức thời, tạo đoạn ADN "đầu (blunt)" Kiểu cắt enzym RE loại II: Cắt tạo đầu (blunt ends) khơng có khả tự kết hợp lại Để nối phải dùng enzym T4 ADN ligase • Hầu hết enzyme tạo vết cắt chéo nhau, tạo đầu so le hay đầu dính (cohesive ends): thể tự nối lại không cần ADN ligase Các đầu so le có Đoạn bổ sung đoạn nối • Tính bổ sung phần nhơ trình tự bổ sung cho phép hai phân đoạn nhập lại với hay "splice" ADN ligase • Phân đoạn có đầu dính gắn không với phân đoạn lúc bị cắt đầu tiên, mà với phân đoạn mà có đầu dính thích hợp Ứng dụng kĩ thuật chuyển gen Tạo vi sinh vật có khả phân hủy chất độc hóa học chất làm ô nhiễm VI Tạo chủng vi sinh vật có khả sản xuất nhiều loại KHUẨN sản phẩm sinh học Vi sinh có khả làm tái sinh lượng Ananda Chakrabarty Pseudomonas thiết kế chủng sp tổng hợp tập hợp khả phân hủy hợp chất hydrocacbon từ vài chủng Pseudomonas, đặc biệt khả phân hủy dầu mỏ Pseudomonas sp Có khả phân hủy dầu mỏ Chuyển gen kháng sâu Chuyển gen kháng thuốc diệt cỏ THỰC Chuyển gen tạo kháng virus gây bệnh Chuyển gen tạo sản xuất protein động vật VẬT Chuyển gen thay đổi hàm lượng chất lượng chất dinh dưỡng Chuyển gen tạo giống hoa có nhiều màu sắc Chuyển gen làm nhiệm vụ tiết nọc độc bò cạp vào bắp cải Bắp cải chuyển gen có khả sản xuất nọc độc giống lồi bò cạp, tiêu diệt loại sâu ăn bắp cải lại không gây nguy hiểm cho người, môi trường loại động vật khác ăn vào Bắp cải tiết nọc đôc Gạo hạt vàng tạo cách chuyển đổi hai gen sinh tổng hợp betacarotene: •1-psy (phytoene synthase) từ hoa thủy tiên ( pseudonarcissus) •2-CRTL từ vi khuẩn đất Erwinia uredovora Gạo bổ sung tiền chất vitamin A hạt gạo Y học ĐỘNG VẬT Nuôi trồng thủy sản Chăn nuôi Giảm ô nhiễm môi trường Lợn Enviropig Bổ sung loại khuẩn E.coli ADN chuột vào phôi bào lợn Quá trình chuyển gen làm cho lợn xử lý phốt tốt q trình tiêu hóa nên giảm tới 75% phốt thải qua đường phân nước tiểu Cảm ơn cô bạn lắng nghe! ... BẢN TRONG KĨ THUẬT CHUYỂN GEN II Các nguyên lí sinh I Kĩ thuật học chuyển gen gì? I KĨ THUẬT CHUYỂN GEN LÀ GÌ? •Kỹ thuật chuyển gen (ghép gen) kỹ thuật đưa gen lạ vào tế bào chủ, làm cho gen lạ... NHỮNG KHÁI NIỆM CƠ BẢN VỀ KĨ THUẬT CHUYỂN GEN A NHỮNG KHÁI NIỆM CƠ BẢN VỀ KĨ THUẬT CHUYỂN GEN B CÁC BƯỚC TRONG KĨ THUẬT CHUYỂN GEN B CÁC BƯỚC TRONG KĨ THUẬT CHUYỂN GEN II ĐƯA ADN TÁI TỔ III KIỂM... tố lạ (gen chuyển) , tránh thải loại loại Gen chuyển phải vào Gen chuyển phải vào tế bào nhận phải diễn tế bào nhận phải diễn dung hợp gen tế bào vào gen dung hợp gen tế bào vào gen chuyển chuyển