BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP Đề tài NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY MÔ ĐẾN KHẢ NĂNG SINH TRƯỞNG CỦA GIỐNG CÚC (Chrysanthemum sp.) IN VITRO Sinh viên thực hiện: NGUYỄN THỊ TƯỞNG Ngành: NÔNG HỌC Niên Khóa: 2008 – 2012 Tp Hồ Chí Minh, tháng 07/2012 NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY MÔ ĐẾN KHẢ NĂNG SINH TRƯỞNG CỦA GIỐNG HOA CÚC (Chrysanthemum sp.) IN VITRO Tác giả Nguyễn Thị Tưởng Khóa luận đệ trình để đáp ứng yêu cầu cấp Kỹ sư ngành Nông học Giáo viên hướng dẫn ThS Hồ Tấn Quốc Tp Hồ Chí Minh, tháng 07/2012 i LỜI CẢM ƠN Để hết quãng đường năm đại học hồn thành khóa luận này, khơng cố gắng thân tơi mà có dạy dỗ tận tình thầy cơ, giúp đỡ bạn bè công ơn nuôi dưỡng cha mẹ, động viên anh chị em gia đình Trước tiên, em xin bày tỏ lòng kính trọng biết ơn sâu sắc đến ThS Hồ Tấn Quốc, người thầy tận tình hướng dẫn, giúp đỡ bảo ban em suốt thời gian thực đề tài hồn thành khóa luận tốt nghiệp Cảm ơn chị Nguyễn Hồng Bảo Ngân chị phòng ni cấy mô giúp đỡ em nhiều từ lúc bỡ ngỡ bước chân vào phòng thí nghiệm hơm Tơi xin bày tỏ lòng cảm ơn ban lãnh đạo Trung tâm nghiên cứu Giống trồng tỉnh Gia Lai tạo điều kiện tốt để giúp đỡ cho thực đề tài Xin gửi lời cảm ơn đến thầy cô Bộ môn Di truyền - Giống trồng, thầy cô khoa Nông học trường Đại học Nông lâm TP Hồ Chí Minh truyền đạt, bổ sung kiến thức cho tơi suốt thời gian học tập, tích lũy tri thức trường hồn thành khóa luận tốt nghiệp Cảm ơn tới bạn phòng 214 KTX ln động viên, giúp đỡ chia sẻ với lúc khó khăn q trình thực đề tài Và lời cảm ơn chân thành, sâu sắc xin gởi đến ba mẹ, anh chị gia đình: “Cảm ơn người ln đồng hành ủng hộ để hồn thành tốt khóa luận đạt ước mơ mình” Xin chân thành cảm ơn! Tp Hồ Chí Minh, ngày 20 tháng 07/2012 Sinh viên Nguyễn Thị Tưởng ii TÓM TẮT Đề tài “Nghiên cứu ảnh hưởng số yếu tố môi trường nuôi cấy mô đến khả sinh trưởng giống hoa cúc (Chrysanthemum sp.) in vitro” tiến hành từ tháng 02 đến tháng 06 năm 2012, phòng ni cấy mơ, Trung tâm Nghiên cứu giống trồng – xã An Phú - Tp Pleiku – tỉnh Gia Lai Các thí nghiệm yếu tố bố trí theo kiểu hồn tồn ngẫu nhiên với lần lặp lại, nhằm xác định nồng độ Hypocloride calcium khử trùng mẫu thích hợp, xác định liều lượng BA thích hợp cho khả nhân nhanh chồi nồng độ NAA thích hợp cho tạo rễ giống hoa cúc in vitro Kết đạt sau: - Dung dịch khử trùng thích hợp cho mẫu cấy nụ hoa thân giống hoa cúc đại đóa vàng cúc thọ đỏ dung dịch Hypocloride calcium 15%, cho giống vàng hòe dung dịch Hypocloride Ca18lcium 20% - Môi trường MS + mg/l BA mơi trường thích hợp cho nhân chồi giống cúc in vitro thí nghiệm - Môi trường MS + 1,5 mg/l NAA cho tỷ lệ rễ cao, số rễ nhiều, rễ phân nhánh mạnh co nhiều lơng hút, thích hợp cho việc vườn ươm giống cúc đại đóa vàng vàng hòe Mơi trường MS + 0,5 mg/l thích hợp cho rễ giống cúc thọ đỏ iii MỤC LỤC Trang Trang tựa i Lời cảm ơn ii Tóm tắt iii Mục lục iv Danh sách từ viết tắt vii Danh sách bảng viii Danh sách hình ix Chương MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề .1 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Yêu cầu .2 1.4 Giới hạn đề tài Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Khái niệm nuôi cấy mô, sở khoa học ứng dụng nuôi cấy mô thực vật 2.2 Lịch sử phát triển nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.2.1 Lịch sử phát triển giới 2.2.2 Lịch sử phát triển Việt Nam .6 2.3 Các phương pháp nuôi cấy tế bào thực vật .7 2.3.1 Nuôi cấy đỉnh sinh trưởng 2.3.2 Nuôi cấy chồi bất định 2.3.3 Nuôi cấy protoplast 2.3.4 Nuôi cấy chồi nách .8 2.4 Các yếu tố ảnh hưởng đến nhân giống in vitro .8 2.4.1 Mẫu cấy 2.4.2 Môi trường nuôi cấy 2.4.3 Điều kiện nuôi cấy .9 2.4.3.1 Ánh sáng .9 2.4.3.2 Nhiệt độ iv 2.5 Những tồn thường gặp nhân giống in vitro 2.5.1 Tính bất định mặt di truyền 2.5.2 Sự nhiễm mẫu 10 2.5.3 Sự hóa nâu 10 2.5.4 Hiện tượng thủy tinh thể 10 2.6 Các chất điều hòa sinh trưởng thực vật ni cấy mô 11 2.6.1 Các Auxin 11 2.6.2 Cytokinin .12 2.7 Tình hình sản xuất hoa kiểng Việt Nam giới 13 2.7.1 Sản xuất hoa kiểng giới 13 2.7.2 Sản xuất tiêu thụ hoa cảnh Việt Nam khu vực Đông Nam Á 13 2.8 Giới thiệu hoa cúc .14 2.8.1 Vị trí phân loại 14 2.8.2 Đặc điểm thực vật học hoa cúc 14 2.8.2.1 Rễ 14 2.8.2.2 Thân 15 2.8.2.3 Lá 15 2.8.2.4 Hoa 15 2.8.3 Một số phương pháp nhân giống hoa cúc .16 2.8.3.1 Giâm cành .16 2.8.3.2 Tách giá mầm 16 2.8.3.3 Nuôi cấy tế bào 16 2.8.4 Tình hình sản xuất tiêu thụ hoa cúc 16 2.8.4.1 Thế giới 16 2.8.4.2 Việt Nam 17 2.9 Một số kết nghiên cứu nuôi cấy mô hoa cúc 18 Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Thời gian địa điểm thí nghiệm 20 3.2 Vật liệu thí nghiệm 20 3.2.1 Giống 20 3.2.2 Trang thiết bị dụng cụ 20 v 3.2.2.1 Phòng pha chế mơi trường 20 3.2.2.2 Phòng cấy 20 3.2.2.3 Phòng ni 21 3.2.3 Môi trường nuôi cấy 21 3.3 Điều kiện ni cấy phòng thí nghiệm 22 3.4 Phương pháp nghiên cứu 22 3.4.1 Thí nghiệm 22 3.4.2 Thí nghiệm 23 3.4.3 Thí nghiệm 24 3.5 Phương pháp tính tốn xử lý số liệu .25 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Xác định nồng độ Hypocloride calcium khử trùng thích hợp cho khả vào mẫu hoa thân giống cúc 26 4.2 Ảnh hưởng BA đến trình nhân nhanh chồi giống cúc in vitro 28 4.3 Ảnh hưởng NAA đến trình hình thành rễ giống cúc in vitro 35 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận 44 5.2 Đề nghị 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO 45 PHỤ LỤC 47 vi DANH SÁCH CÁC TỪ VIẾT TẮT Viết tắt Viết đầy đủ (nghĩa) ANOVA Analysis of Variance BA Benzyl adenine BAP 6- Benzyl aminopurin C Nồng độ Ctv Cộng tác viên CV Coefficient of Variance (Hệ số biến động) 2,4D 2,4 – Dichlorophenoxyacetic acid Đ/C Đối chứng ĐV Đóa vàng HC Hypocloride Calcium HSN Hệ số nhân IAA – Indolylacetic acid IBA – Indolebutyric acid LLL Lần lặp lại MS Murashige and Skoog, 1962 MT Môi trường MTN Môi trường NAA – Naphthalene acetic acid NSC Ngày sau cấy NT Nghiệm thức TĐ Thọ đỏ VH Vàng hòe vii DANH SÁCH CÁC BẢNG Trang Bảng 4.1 Ảnh hưởng nồng độ Hypocloride Calcium đến tỷ lệ mẫu chết, nhiễm, sống (%) giống cúc 10NSC .26 Bảng 4.2 Ảnh hưởng BA đến thời gian hình thành chồi giống cúc invitro 39 Bảng 4.3 Ảnh hưởng BA đến tỷ lệ đâm chồi giống cúc invitro .30 Bảng 4.4 Ảnh hưởng BA đến chiều cao chồi giống cúc invitro 40 NSC 31 Bảng 4.5 Ảnh hưởng BA đến hệ số nhân chồi giống cúc invitro 33 Bảng 4.6 Ảnh hưởng NAA đến thời gian hình thành rễ giống cúc invitro 36 Bảng 4.7 Ảnh hưởng NAA đến số rễ giống cúc invitro .37 Bảng 4.8 Ảnh hưởng NAA đến tỷ lệ rễ giống cúc invitro .38 Bảng 4.9 Ảnh hưởng NAA đến chiều cao giống cúc invitro 30 NSC 40 Bảng 4.10 Ảnh hưởng NAA đến chiều dài rễ giống cúc invitro 30 NSC .41 Bảng 4.11 Ảnh hưởng NAA đến hình thái rễ giống cúc invitro 30 NSC .42 viii DANH SÁCH CÁC HÌNH Trang Hình 3.1 Dạng hoa giống cúc thí nghiệm 20 Hình 4.1 Ảnh hưởng nồng độ BA đến hình thành chồi giống cúc in vitro 40 NSC 35 Hình 4.2 Ảnh hưởng nồng độ NAA đến khả rễ giống cúc in vitro 30 NSC 43 4.2 Ảnh hưởng BA đến trình nhân nhanh chồi giống cúc in vitro 4.3 Ảnh hưởng NAA đến trình hình thành rễ giống cúc in vitro 28 vi 35 vi Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ vi 5.1 Kết luận 44 vi 5.2 Đề nghị 44 vi Bảng 4.1 Ảnh hưởng nồng độ Hypocloride Calcium đến tỷ lệ mẫu chết, viii nhiễm, sống (%) giống cúc 10NSC 26 viii Chương MỞ ĐẦU .1 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Yêu cầu 1.4 Giới hạn đề tài Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Khái niệm nuôi cấy mô, sở khoa học ứng dụng nuôi cấy mô thực vật 2.2 Lịch sử phát triển nuôi cấy mô tế bào thực vật Theo Nguyễn Đức Lượng Lê Thị Thủy Tiên (2002), khái quát lịch sử nuôi cấy mô sau: .4 2.2.1 Lịch sử phát triển giới Năm 1838, hai nhà sinh vật học Đức Schleiden Schwa đưa thuyết tế bào nêu rõ thể sinh vật dù phức tạp đến đâu tạo nên kết hợp nhiều đơn vị nhỏ, tế bào Các tế bào phân hóa mang thông tin di truyền hệt tế bào đầu tiên, trứng sau thụ tinh, ix Case Range : 54 - 56 Variable : TIMERARE Function : RANGE Error Mean Square = 3.067 Error Degrees of Freedom = 30 No of observations to calculate a mean = 15 Least Significant Difference Test LSD value = 1.759 at alpha = 0.010 Original Order Mean = 5.733 Mean = 12.93 Mean = 4.000 B A B Mean Mean Mean Ranked Order = 12.93 = 5.733 = 4.000 A B B * Trắc nghiệm phân hạng tương tác giống NAA Case Range : 59 - 73 Variable : TIMERARE Function : RANGE Error Mean Square = 3.067 Error Degrees of Freedom = 30 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 3.932 at alpha = 0.010 Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Original Order = 7.000 = 9.000 = 4.667 = 7.000 = 7.333 = 4.000 = 4.667 = 21.33 = 3.667 10 = 5.000 11 = 21.00 12 = 4.000 13 = 5.000 14 = 6.000 15 = 3.667 BC B C BC BC C C A C C A C C BC C Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Ranked Order = 21.33 11 = 21.00 = 9.000 = 7.333 = 7.000 = 7.000 14 = 6.000 10 = 5.000 13 = 5.000 = 4.667 = 4.667 12 = 4.000 = 4.000 = 3.667 15 = 3.667 A A B BC BC BC BC C C C C C C C C b Số rễ b1 Số rễ 10 NSC Function: FACTOR Experiment Model Number 1: Two Factor Completely Randomized Design Data case no to 45 Factorial ANOVA for the factors: Replication (Var 1: LLL) with values from to Factor A (Var 2: A) with values from to Factor B (Var 3: B) with values from to Variable 4: SORE10NSC Grand Mean = 1.258 Grand Sum = 56.600 Total Count = 45 T A B L E O F M E A N S Total 69 * * 1.411 12.700 * * 1.367 12.300 * * 1.222 11.000 * * 0.933 8.400 * * 1.356 12.200 * * 1.180 17.700 * * 0.487 7.300 * * 2.107 31.600 * 1 1.533 4.600 * 0.233 0.700 * 2.467 7.400 * 0.867 2.600 * 2 0.967 2.900 * 2.267 6.800 * 1.333 4.000 * 0.033 0.100 * 3 2.300 6.900 * 0.833 2.500 * 0.000 0.000 * 1.967 5.900 * 1.333 4.000 * 1.200 3.600 * 1.533 4.600 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E K Degrees of Sum of Mean F Value Source Freedom Squares Square Value Prob Factor A 1.363 0.341 1.7506 0.1650 Factor B 19.819 9.910 50.9053 0.0000 AB 5.168 0.646 3.3182 0.0078 -7 Error 30 5.840 0.195 Total 44 32.190 - Coefficient of Variation: 35.08% *Trắc nghiệm phân hạng yếu tố giống 10 NSC Case Range : 54 - 56 Variable : SORE10NSC Function : RANGE Error Mean Square = 0.1950 Error Degrees of Freedom = 30 No of observations to calculate a mean = 15 Least Significant Difference Test LSD value = 0.4434 at alpha = 0.010 Original Order Mean Mean Mean = = = 1.180 0.4867 2.107 Ranked Order B C A Mean Mean Mean = = = 2.107 1.180 0.4867 A B C * Trắc nghiệm phân hạng tương tác giống NAA 10 NSC Case Range : 59 - 73 Variable : SORE10NSC 70 Function : RANGE Error Mean Square = 0.1950 Error Degrees of Freedom = 30 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 0.9915 at alpha = 0.010 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 11 12 13 14 15 = = = = = = = = = = = = = = = 1.533 0.2333 2.467 0.8667 0.9667 2.267 1.333 0.03333 2.300 0.8333 0.0000 1.967 1.333 1.200 1.533 Ranked Order ABCD EF A DEF DEF AB BCD F AB DEF F ABC BCD CDE ABCD Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 12 15 13 14 10 11 = = = = = = = = = = = = = = = 2.467 2.300 2.267 1.967 1.533 1.533 1.333 1.333 1.200 0.9667 0.8667 0.8333 0.2333 0.03333 0.0000 A AB AB ABC ABCD ABCD BCD BCD CDE DEF DEF DEF EF F F b2 Số rễ 20 NSC Function: FACTOR Experiment Model Number 1: Two Factor Completely Randomized Design Data case no to 45 Factorial ANOVA for the factors: Replication (Var 1: LLL) with values from to Factor A (Var 2: A) with values from to Factor B (Var 3: B) with values from to Variable 4: SORE20NSC Grand Mean = 2.004 Grand Sum = 90.200 Total Count = 45 T A B L E O F M E A N S Total * * 2.222 20.000 * * 2.078 18.700 * * 1.644 14.800 * * 1.878 16.900 * * 2.200 19.800 * * 2.293 34.400 * * 0.833 12.500 * * 2.887 43.300 * 1 2.733 8.200 * 0.500 1.500 * 3.433 10.300 * 2.033 6.100 * 2 1.467 4.400 * 2.733 8.200 * 1.967 5.900 * 0.267 0.800 * 3 2.700 8.100 71 * 2.000 6.000 * 0.033 0.100 * 3.600 10.800 * 2.733 8.200 * 1.900 5.700 * 1.967 5.900 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E K Degrees of Sum of Mean F Value Source Freedom Squares Square Value Prob Factor A 2.130 0.533 2.2481 0.0874 Factor B 33.499 16.750 70.7064 0.0000 AB 12.783 1.598 6.7453 0.0000 -7 Error 30 7.107 0.237 Total 44 55.519 - Coefficient of Variation: 24.28% *Trắc nghiệm phân hạng yếu tố giống 20 NSC Case Range : 55 - 57 Variable : SORE20NSC Function : RANGE Error Mean Square = 0.2370 Error Degrees of Freedom = 30 No of observations to calculate a mean = 15 Least Significant Difference Test LSD value = 0.4888 at alpha = 0.010 Original Order Mean Mean Mean = = = 2.293 0.8333 2.887 Ranked Order B C A Mean Mean Mean = = = 2.887 2.293 0.8333 A B C * Trắc nghiệm phân hạng tương tác giống NAA 20 NSC Case Range : 60 - 74 Variable : SORE20NSC Function : RANGE Error Mean Square = 0.2370 Error Degrees of Freedom = 30 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 1.093 at alpha = 0.010 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 = = = = = = = = = = 2.733 0.5000 3.433 2.033 1.467 2.733 1.967 0.2667 2.700 2.000 Ranked Order AB DE A BC CD AB BC E AB BC Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 12 13 10 15 72 = = = = = = = = = = 3.600 3.433 2.733 2.733 2.733 2.700 2.033 2.000 1.967 1.967 A A AB AB AB AB BC BC BC BC Mean Mean Mean Mean Mean 11 12 13 14 15 = = = = = 0.03333 3.600 2.733 1.900 1.967 E A AB BC BC Mean Mean Mean Mean Mean 14 11 = = = = = 1.900 1.467 0.5000 0.2667 0.03333 BC CD DE E E b3 Số rễ 30 NSC Function: FACTOR Experiment Model Number 1: Two Factor Completely Randomized Design Data case no to 45 Factorial ANOVA for the factors: Replication (Var 1: LLL) with values from to Factor A (Var 2: A) with values from to Factor B (Var 3: B) with values from to Variable 4: SORE30NSC Grand Mean = 5.500 Grand Sum = 247.500 Total Count = 45 T A B L E O F M E A N S Total * * 5.233 47.100 * * 6.000 54.000 * * 5.211 46.900 * * 5.633 50.700 * * 5.422 48.800 * * 5.300 79.500 * * 4.687 70.300 * * 6.513 97.700 * 1 5.400 16.200 * 3.933 11.800 * 6.367 19.100 * 5.300 15.900 * 2 5.800 17.400 * 6.900 20.700 * 4.900 14.700 * 4.500 13.500 * 3 6.233 18.700 * 5.467 16.400 * 4.300 12.900 * 7.133 21.400 * 5.433 16.300 * 4.900 14.700 * 5.933 17.800 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E K Degrees of Sum of Mean F Value Source Freedom Squares Square Value Prob Factor A 3.856 0.964 0.5257 Factor B 25.925 12.963 7.0697 0.0031 AB 5.812 0.727 0.3963 -7 Error 30 55.007 1.834 Total 44 90.600 - Coefficient of Variation: 24.62% 73 *Trắc nghiệm phân hạng yếu tố giống Case Range : 54 - 56 Variable : SORE30NSC Function : RANGE Error Mean Square = 1.834 Error Degrees of Freedom = 30 No of observations to calculate a mean = 15 Least Significant Difference Test LSD value = 1.360 at alpha = 0.010 Original Order Mean Mean Mean = = = 5.300 4.687 6.513 Ranked Order AB B A Mean Mean Mean = = = 6.513 5.300 4.687 A AB B c Tỷ lệ rễ c1 Tỷ lệ rễ 10 NSC Function: FACTOR Experiment Model Number 1: Two Factor Completely Randomized Design Data case no to 45 Factorial ANOVA for the factors: Replication (Var 1: LLL) with values from to Factor A (Var 2: A) with values from to Factor B (Var 3: B) with values from to Variable 4: TLRR10NSC Grand Mean = 69.498 Grand Sum = 3127.400 Total Count = 45 T A B L E O F M E A N S Total * * 64.778 583.000 * * 73.333 660.000 * * 62.822 565.400 * * 60.667 546.000 * * 85.889 773.000 * * 84.713 1270.700 * * 25.933 389.000 * * 97.847 1467.700 * 1 92.667 278.000 * 11.333 34.000 * 90.333 271.000 * 65.667 197.000 * 2 54.333 163.000 * 100.000 300.000 * 85.567 256.700 * 4.000 12.000 * 3 98.900 296.700 * 82.000 246.000 * 0.000 0.000 * 100.000 300.000 * 97.667 293.000 * 60.000 180.000 * 100.000 300.000 74 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E K Degrees of Sum of Mean F Value Source Freedom Squares Square Value Prob Factor A 3853.890 963.472 4.6837 0.0047 Factor B 43995.502 21997.751 106.9377 0.0000 AB 8167.851 1020.981 4.9633 0.0006 -7 Error 30 6171.187 205.706 Total 44 62188.430 - Coefficient of Variation: 20.64% *Trắc nghiệm phân hạng yếu tố NAA 10 NSC Case Range : 47 - 51 Variable : TLRR10NSC Function : RANGE Error Mean Square = 205.7 Error Degrees of Freedom = 30 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 18.59 at alpha = 0.010 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = 64.78 73.33 62.82 60.67 85.89 Ranked Order B AB B B A Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = 85.89 73.33 64.78 62.82 60.67 A AB B B B *Trắc nghiệm phân hạng yếu tố giống 10 NSC Case Range : 54 - 56 Variable : TLRR10NSC Function : RANGE Error Mean Square = 205.7 Error Degrees of Freedom = 30 No of observations to calculate a mean = 15 Least Significant Difference Test LSD value = 14.40 at alpha = 0.010 Original Order Mean Mean Mean = = = 84.71 25.93 97.85 Ranked Order A B A Mean Mean Mean = = = 97.85 84.71 25.93 A A B * Trắc nghiệm phân hạng tương tác giống NAA 10 NSC Case Range : 59 - 73 Variable : TLRR10NSC Function : RANGE Error Mean Square = 205.7 Error Degrees of Freedom = 30 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 32.20 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order 75 Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 11 12 13 14 15 = = = = = = = = = = = = = = = 92.67 11.33 90.33 65.67 54.33 100.0 85.57 4.000 98.90 82.00 0.0000 100.0 97.67 60.00 100.0 AB E ABC BCD D A ABCD E A ABCD E A AB CD A Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 15 12 13 10 14 11 = = = = = = = = = = = = = = = 100.0 100.0 100.0 98.90 97.67 92.67 90.33 85.57 82.00 65.67 60.00 54.33 11.33 4.000 0.0000 A A A A AB AB ABC ABCD ABCD BCD CD D E E E c2 Tỷ lệ rễ 20 NSC Function: FACTOR Experiment Model Number 1: Two Factor Completely Randomized Design Data case no to 45 Factorial ANOVA for the factors: Replication (Var 1: LLL) with values from to Factor A (Var 2: A) with values from to Factor B (Var 3: B) with values from to Variable 4: TLRR20NSC Grand Mean = 82.993 Grand Sum = 3734.700 Total Count = 45 T A B L E O F M E A N S Total * * 77.333 696.000 * * 81.111 730.000 * * 78.333 705.000 * * 81.300 731.700 * * 96.889 872.000 * * 94.000 1410.000 * * 55.980 839.700 * * 99.000 1485.000 * 1 96.000 288.000 * 41.000 123.000 * 95.000 285.000 * 77.333 232.000 * 2 66.000 198.000 * 100.000 300.000 * 96.667 290.000 * 38.333 115.000 * 3 100.000 300.000 * 100.000 300.000 * 43.900 131.700 * 100.000 300.000 * 100.000 300.000 * 90.667 272.000 * 100.000 300.000 - 76 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E K Degrees of Sum of Mean F Value Source Freedom Squares Square Value Prob Factor A 2279.230 569.808 6.3290 0.0008 Factor B 16606.204 8303.102 92.2250 0.0000 AB 4819.327 602.416 6.6912 0.0001 -7 Error 30 2700.927 90.031 Total 44 26405.688 - Coefficient of Variation: 11.43% *Trắc nghiệm phân hạng yếu tố NAA 20 NSC Case Range : 47 - 51 Variable : TLRR20NSC Function : RANGE Error Mean Square = 90.03 Error Degrees of Freedom = 30 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 12.30 at alpha = 0.010 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = 77.33 81.11 78.33 81.30 96.89 Ranked Order B B B B A Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = 96.89 81.30 81.11 78.33 77.33 A B B B B *Trắc nghiệm phân hạng yếu tố giống 20 NSC Case Range : 54 - 56 Variable : TLRR20NSC Function : RANGE Error Mean Square = 90.03 Error Degrees of Freedom = 30 No of observations to calculate a mean = 15 Least Significant Difference Test LSD value = 9.528 at alpha = 0.010 Original Order Mean Mean Mean = = = 94.00 55.98 99.00 Ranked Order A B A Mean Mean Mean = = = 99.00 94.00 55.98 A A B * Trắc nghiệm phân hạng tương tác giống NAA 20 NSC Case Range : 59 - 73 Variable : TLRR20NSC Function : RANGE Error Mean Square = 90.03 Error Degrees of Freedom = 30 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 21.31 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order 77 Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 11 12 13 14 15 = = = = = = = = = = = = = = = 96.00 41.00 95.00 77.33 66.00 100.0 96.67 38.33 100.0 100.0 43.90 100.0 100.0 90.67 100.0 AB D AB BC C A AB D A A D A A AB A Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 15 10 13 12 14 11 = = = = = = = = = = = = = = = 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 96.67 96.00 95.00 90.67 77.33 66.00 43.90 41.00 38.33 A A A A A A AB AB AB AB BC C D D D c3 Tỷ lệ rễ 30 NSC Function: FACTOR Experiment Model Number 1: Two Factor Completely Randomized Design Data case no to 45 Factorial ANOVA for the factors: Replication (Var 1: LLL) with values from to Factor A (Var 2: A) with values from to Factor B (Var 3: B) with values from to Variable 4: TLRR30NSC Grand Mean = 90.682 Grand Sum = 4080.700 Total Count = 45 T A B L E O F M E A N S Total * * 82.333 741.000 * * 88.922 800.300 * * 93.489 841.400 * * 90.000 810.000 * * 98.667 888.000 * * 97.620 1464.300 * * 74.693 1120.400 * * 99.733 1496.000 * 1 100.000 300.000 * 48.333 145.000 * 98.667 296.000 * 88.100 264.300 * 2 78.667 236.000 * 100.000 300.000 * 100.000 300.000 * 80.467 241.400 * 3 100.000 300.000 * 100.000 300.000 * 70.000 210.000 * 100.000 300.000 * 100.000 300.000 * 96.000 288.000 * 100.000 300.000 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E 78 K Degrees of Sum of Mean F Value Source Freedom Squares Square Value Prob Factor A 1304.061 326.015 4.7104 0.0045 Factor B 5785.499 2892.750 41.7954 0.0000 AB 2699.979 337.497 4.8763 0.0006 -7 Error 30 2076.367 69.212 Total 44 11865.906 - Coefficient of Variation: 9.17% *Trắc nghiệm phân hạng yếu tố NAA 30 NSC Case Range : 47 - 51 Variable : TLRR30NSC Function : RANGE Error Mean Square = 69.21 Error Degrees of Freedom = 30 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 10.78 at alpha = 0.010 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = 82.33 88.92 93.49 90.00 98.67 Ranked Order B AB A AB A Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = 98.67 93.49 90.00 88.92 82.33 A A AB AB B *Trắc nghiệm phân hạng yếu tố giống 30 NSC Case Range : 54 - 56 Variable : TLRR30NSC Function : RANGE Error Mean Square = 69.21 Error Degrees of Freedom = 30 No of observations to calculate a mean = 15 Least Significant Difference Test LSD value = 8.354 at alpha = 0.010 Original Order Mean Mean Mean = = = 97.62 74.69 99.73 Ranked Order A B A Mean Mean Mean = = = 99.73 97.62 74.69 A A B * Trắc nghiệm phân hạng tương tác giống NAA 30 NSC Case Range : 59 - 73 Variable : TLRR30NSC Function : RANGE Error Mean Square = 69.21 Error Degrees of Freedom = 30 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 18.68 at alpha = 0.010 Original Order Mean Mean = = 100.0 48.33 Ranked Order A E Mean Mean = = 79 100.0 100.0 A A Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 11 12 13 14 15 = = = = = = = = = = = = = 98.67 88.10 78.67 100.0 100.0 80.47 100.0 100.0 70.00 100.0 100.0 96.00 100.0 AB ABCD CD A A BCD A A D A A ABC A Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 12 13 15 14 11 = = = = = = = = = = = = = 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 98.67 96.00 88.10 80.47 78.67 70.00 48.33 A A A A A A AB ABC ABCD BCD CD D E d Chiều cao 30 NSC Function: FACTOR Experiment Model Number 1: Two Factor Completely Randomized Design Data case no to 45 Factorial ANOVA for the factors: Replication (Var 1: LLL) with values from to Factor A (Var 2: A) with values from to Factor B (Var 3: B) with values from to Variable 4: CCCTN3 Grand Mean = 5.264 Grand Sum = 236.900 Total Count = 45 T A B L E O F M E A N S Total * * 5.100 45.900 * * 5.456 49.100 * * 5.233 47.100 * * 5.078 45.700 * * 5.456 49.100 * * 5.613 84.200 * * 3.033 45.500 * * 7.147 107.200 * 1 6.033 18.100 * 1.833 5.500 * 7.433 22.300 * 5.567 16.700 * 2 3.267 9.800 * 7.533 22.600 * 5.500 16.500 * 3.467 10.400 * 3 6.733 20.200 * 5.200 15.600 * 3.100 9.300 * 6.933 20.800 * 5.767 17.300 * 3.500 10.500 * 7.100 21.300 A N A L Y S I S K O F Degrees of V A R I A N C E Sum of 80 Mean T A B L E F Value Source Freedom Squares Square Value Prob Factor A 1.223 0.306 0.4452 Factor B 129.635 64.818 94.3640 0.0000 AB 6.998 0.875 1.2735 0.2939 -7 Error 30 20.607 0.687 Total 44 158.463 - Coefficient of Variation: 15.74% *Trắc nghiệm phân hạng yếu tố giống Case Range : 54 - 56 Variable : CCCTN3 Function : RANGE Error Mean Square = 0.6870 Error Degrees of Freedom = 30 No of observations to calculate a mean = 15 Least Significant Difference Test LSD value = 0.8323 at alpha = 0.010 Original Order Mean Mean Mean = = = 5.613 3.033 7.147 Ranked Order B C A Mean Mean Mean = = = 7.147 5.613 3.033 A B C d Chiều dài rễ 30 NSC Function: FACTOR Experiment Model Number Two Factor Completely Randomized Design Data case no to 45 Factorial ANOVA for the factors: Replication (Var 1: LLL) with values from to Factor A (Var 2: A) with values from to Factor B (Var 3: B) with values from to Variable 4: CDR Grand Mean = 4.782 Grand Sum = 215.200 Total Count = 45 T A B L E O F M E A N S Total * * 5.022 45.200 * * 5.289 47.600 * * 3.956 35.600 * * 4.278 38.500 * * 5.367 48.300 * * 5.053 75.800 * * 2.347 35.200 * * 6.947 104.200 * 1 5.967 17.900 * 1.400 4.200 * 7.700 23.100 * 4.333 13.000 * 2 4.400 13.200 * 7.133 21.400 * 4.200 12.600 81 * 1.067 3.200 * 3 6.600 19.800 * 5.100 15.300 * 0.933 2.800 * 6.800 20.400 * 5.667 17.000 * 3.933 11.800 * 6.500 19.500 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E K Degrees of Sum of Mean F Value Source Freedom Squares Square Value Prob Factor A 14.344 3.586 4.0341 0.0098 Factor B 160.354 80.177 90.1990 0.0000 AB 29.662 3.708 4.1712 0.0019 -7 Error 30 26.667 0.889 Total 44 231.026 - Coefficient of Variation: 19.71% *Trắc nghiệm phân hạng yếu tố NAA Case Range : 48 - 52 Variable : CDR Function : RANGE Error Mean Square = 0.8890 Error Degrees of Freedom = 30 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 1.222 at alpha = 0.010 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = 5.022 5.289 3.956 4.278 5.367 Ranked Order AB A B AB A Mean Mean Mean Mean Mean = = = = = 5.367 5.289 5.022 4.278 3.956 A A AB AB B *Trắc nghiệm phân hạng yếu tố giống Case Range : 55 - 57 Variable : CDR Function : RANGE Error Mean Square = 0.8890 Error Degrees of Freedom = 30 No of observations to calculate a mean = 15 Least Significant Difference Test LSD value = 0.9468 at alpha = 0.010 Original Order Mean Mean Mean = = = 5.053 2.347 6.947 Ranked Order B C A Mean Mean Mean = = = 6.947 5.053 2.347 *Trắc nghiệm phân hạng tương tác giống NAA Case Range : 60 - 74 Variable : CDR 82 A B C Function : RANGE Error Mean Square = 0.8890 Error Degrees of Freedom = 30 No of observations to calculate a mean = Least Significant Difference Test LSD value = 2.117 at alpha = 0.010 Original Order Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 10 11 12 13 14 15 = = = = = = = = = = = = = = = 5.967 1.400 7.700 4.333 4.400 7.133 4.200 1.067 6.600 5.100 0.9333 6.800 5.667 3.933 6.500 Ranked Order ABCD E A D CD AB D E AB BCD E AB ABCD D ABC Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean Mean 12 15 13 10 14 11 83 = = = = = = = = = = = = = = = 7.700 7.133 6.800 6.600 6.500 5.967 5.667 5.100 4.400 4.333 4.200 3.933 1.400 1.067 0.9333 A AB AB AB ABC ABCD ABCD BCD CD D D D E E E ...NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY MÔ ĐẾN KHẢ NĂNG SINH TRƯỞNG CỦA GIỐNG HOA CÚC (Chrysanthemum sp.) IN VITRO Tác giả Nguyễn Thị Tưởng Khóa... loại giống, loại dựa mơi trường MS Vì vậy, đề tài Nghiên cứu ảnh hưởng số yếu tố môi trường nuôi cấy mô đến khả sinh trưởng giống hoa cúc (Chrysanthemum sp.) in vitro thực 1.2 Mục tiêu nghiên cứu. .. Ảnh hưởng NAA đến số rễ giống cúc invitro .37 Bảng 4.8 Ảnh hưởng NAA đến tỷ lệ rễ giống cúc invitro .38 Bảng 4.9 Ảnh hưởng NAA đến chiều cao giống cúc invitro 30 NSC 40 Bảng 4.10 Ảnh hưởng