Truờng đại học sư phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp MỞ ĐẦU Việt Nam nằm khu vực nhiệt đới, có khí hậu nóng, ẩm Độ ẩm cao khoảng 80%, lượng mưa lớn, điều kiện thích hợp cho thực vật phát triển Do hệ thực vật Việt Nam vô phong phú, đa dạng với khoảng 12000 lồi, có tới 4000 loài nhân dân ta dùng làm thảo dược Hệ thực vật phong phú tiền đề cho phát triển ngành hoá học hợp chất thiên nhiờn nước ta Từ ngàn xưa cha ông ta sử dụng nhiều phương thuốc dân gian từ cỏ để chữa bệnh, bồi bổ thể, hay tạo mùi thơm… Tía tơ giải cảm, Thì là, Xả tạo mùi thơm Nhân sâm tăng cường sức đề kháng Các phương thuốc y học cổ truyền thể mặt mạnh điều trị bệnh độc tính tác dụng phụ Do ngày người ngày quan tâm đến hợp chất có hoạt tính sinh học thực vật động vật Về lâu dài, phát triển dược phẩm mới, hợp chất có hoạt tính sinh học đóng vai trò quan trọng, chất khởi đầu cho việc tổng hợp nên loại thuốc có tác dụng tốt Việc sử dụng phương pháp hoá lý để nghiên cứu, khảo sát thành phần hoá học hợp chất thiên nhiên tách chiết từ lồi thuốc có giá trị cao Việt Nam ngày trở nên đặc biệt quan trọng Nó giúp cho việc xác định xác cấu trúc hố học hợp chất tạo sở khoa học cho việc sử dụng chúng cách hợp lí có hiệu có tầm quan trọng đặc biệt Theo hướng nghiên cứu trên, Luận văn tập trung khảo sát thành phần hoá học cấu trúc số alkaloid tách chiết từ hồng liên rơ, thuốc có giá trị, sử dụng làm thuốc chữa bệnh dân gian Phùng Văn Minh Lớp K32C – Khoa Hóa học Truờng đại học sư phạm Hà Nội Phùng Văn Minh Khóa luận tốt nghiệp Lớp K32C – Khoa Hóa học Nội dung khóa luận gồm Sử dụng phương pháp chiết sắc ký để phân lập alkaloid từ hoàng liên ô rô Sử dụng phương pháp phổ kết hợp để xác định cấu trúc hoá học hợp chất phân lập Chƣơng TỔNG QUAN 1 Vài nét chung chi hoàng liên Mahonia [3], [6], [7], [10] 1 Về thực vật Hồng liên có nhiều loại khác tuỳ thuộc vào vùng địa lý khác Do tính chất khí hậu, đất đai đặc biệt chủng loại khác Sau số phân loại chủ yếu biết đến loại 1 1 Mahonia bealei (Fort ) Carr Là bụi cao tầm 2- 3m Thân dễ có màu vàng, kép lơng chim, mọc so le dài 15 đến- 35cm, có 7- 15 chét khơng cuống hình bầu dục hình trứng lệch dài 3- 9cm, rộng 2, 5- 4, 5cm dày cứng, chét tận to có cuống, gốc tròn hình tim, đầu nhọn sắc, mép khía nơng nhủ gai sắc nhọn, gân gân phụ kết thành mạng rõ Cụm hoa mọc thành ngắn ngọn; bắc nhỏ; hoa nhiều màu vàng; đài chín sếp thành ba vòng; cánh hoa sáu nhỏ đài trong; nhị sáu, bao phấn dài nhị; bầu hình trụ Quả thịt chứa hạt Mùa hoa : Tháng 10- 11; mùa quả: tháng 12-2 Mahonia Bealei 1 Mahonia japonica (Thumb ) DC Là bụi cao khoảng 3- 5m Thân rễ mầu vàng, cành màu nâu đen Lá kép lông chim mọc so le, dài 20- 45cm, có đến 23 chét hình mác thn, dài 5- 15cm, rộng 2- 5cm, gốc tròn đầu nhọn gai, mép khía nhọn sắc, gân gân phụ thành mạng rõ Cụm hoa mọc đứng thành ngắn lá; bắc thuôn; hoa màu vàng nhạt; đài sếp thành vòng; cánh hoa nhỏ đài trong, đầu cánh lõm; nhị sáu, bao phấn dài dài nhị, bầu hình trụ Quả thịt, hình trứng, chín có màu tím đen Mùa hoa : tháng 9- 11; mùa quả: tháng 12-2 Mahonia japonica 1 Mahonia nepalensis DC (M Annamica Gagnep ) Là bụi, cao 6- 7m Thân rễ màu vàng Lá kép lông chim lẻ, mọc so le, dài 20- 40cm, chét dài hình trái xoan thuôn, không cuống, dài 6- 10cm, rộng 2- 4, 5cm, gốc tròn hình tim, đầu nhọn gai, mép khía to sắc nhọn, gân gân phụ thành mạng rõ Cụm hoa mọc thành bơng phân nhánh có dài lá; khắc hình bầu dục hoa nhiều màu vàng nhạt; đài sếp thành vòng; cánh hoa có tuyến gốc, nhị đối diện với cánh hoa, bao phấn dài nửa nhị; bầu hình trụ Quả thịt hình cầu, chín màu xanh lơ, đầu có núm nhọn; hạt màu nâu đen Mùa hoa: tháng 2- 4; mùa quả: tháng 5- Mahonia nepalensis 1 Phân bố sinh thái Chi Mahonia Nutt gồm đại diện bụi hay gỗ nhỏ, phân bố vùng ôn đới ấm cận nhiệt đới châu Á, bao gồm Trung Quốc, Nê Pan, Ấn Độ số nước khác vùng trung Á Ở Việt Nam có lồi (Nguyễn tập, 1996) - Mahonia bealei (Fort ) Carr: Ở Quản Bạ (Hà Giang) - Mahonia japonica (Thumb ) DC: Ở Quản Bạ, Đồng Văn (Hà Giang) : Sìn Hồ (Lai Châu); Hà Quảng (Cao Bằng); Sa Pa (Lào Cai) - Mahonia nepalensis DC: Ở Lạc Dương (Lâm Đồng) Lai Châu 108,12 6.61 s 108,16 6.61 s 4a 128,69 - 128,74 - 30,48 2,72 m/3,34 30,53 2,73 m/3,34 m 51,62 3,69 m/3,87 m m 51,57 3,70 m/3,87 m a 73,47 5,64 s 73,56 5,64 s 8a 114,83 - 114,91 - 146,34 - 146,43 - 10 149,65 - 149,70 - 11 114,53 6,97 (J = 8,5 Hz) 114,68 6,97 (J = 8,5 Hz) 12 118,58 6,86 (J = 8,5 Hz) 118,62 6,86 (J = 8,5 Hz) 12a 129,30 - 129,39 - 13 97,46 6,10 s 97,54 6,09 s 13a 137,55 - 137,62 - OCH2O 101,03 5,94 s/5,95 s 101,07 5,94 s/5,95 s 9-OCH3 60,95 3,94 s 60,98 3,94 s 10OCH3 56,30 3,87 s 56,40 3,87 s 8-CCl3 105,50 - 105,56 - b c §o CDCl3, 125 MHz, 500 MHz H×nh 4.2.b Phỉ 1H-NMR cđa Sù thay thÕ pÝc C 145,35 (cña 1) b»ng pÝc C 73,56 (cđa 2) cïng víi sù xt hiƯn thêm tín hiệu cacbon bậc bốn C 105,56 cho thấy nhóm -CCl3 đợc nối vào C-8 [9] Với thay này, độ dch chuyển hoá học bị thay đổi So sánh giá trị phỉ NMR cđa víi 8-trichloromethyl-7,8-dihydroberberin (B¶ng 2) cïng điều kiện dung môi đo hoàn toàn trung khớp Kết so sánh đợc kiểm chứng thêm phổ HSQC, HMBC ESI-MS Nh công thức phân tử C21H18NO4Cl3 (M = 455) phù hợp với xuất píc ion m/z 418, 419, 420 [MCl]+, 336 [M-CCl3]+ (positive) phổ ESI-MS Những kiện phổ cho thấy hợp trichloromethyl-7,8-dihydroberberin chất [9] Đây là 8lần hợp chất đợc thông báo tìm thấy trình phân lập alkaloid hoàng liên ô rô Hình 4.2.c Phổ 13 C-NMR Hình 4.2.d Phổ 13 C-NMR phổ DEPT Hình 4.2.e Phổ khối lợng ESI-MS Chơng KT LUN Bằng phơng pháp sắc ký kết hợp, hợp chất alkaloid đợc phân lập từ hoàng liên ô rô Các hợp chất là: + Berberin (1) + 8-Trichloromethyl-7,8-dihydroberberin (2) CÊu tróc cđa c¸c hợp chất đợc xác định nhờ vào phơng pháp phổ đại nh phổ cộng hởng từ hạt nhân chiều (1H-NMR, 13 C-NMR, DEPT 135 DEPT 90) phổ khối lợng phun mù điện tử (ESI) CÊu tróc hãa häc cđa vµ O O O 4a 1a 13a N O 4a 1a 13a N CCl3 13 14 14 13 OCH3 8a 12 12a 12 10 15 11 OCH3 Berberin (1) 8a 12a OCH3 10 11 15 OCH3 8-Trichloromethyl-7,8dihydroberberin (2) TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] ”Phytochemistry of Alkaloid” - Dr Avnish Upadhyway [2] ‘Alkaloid chemistry’, John Wiley & Sons, New York [3] Dr Ame Pictet (1904) “The Vegetable Alkaloids With particular reference to their chemical constitution” London: Chapman & Hall [4] R H F Manske, H L Holmes, ”The Alkaloids”, Academic Press, 1950- 1994 [5] Đặng vũ Cường’ Bài giảng dược liệu’, Nhà xuất Y Học [6] Bich, D H., Chung, D Q., Chuong, B X., Dong, N T., Dam, D T., Hien, P V., Lo, V N., Mai, P D., Man, P K., Nhu, D T., Tap, N., Toan, T., 2004 “Medicinal Vietnam” Hanoi Plants Science and Animals and in Technology Publishing House, Vol 2, p 956-957 [7] Võ Văn Chi, 1997 Từ điển thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học, Hà Nội, trang 566-576 [8] Janssen R H A M., Lousberg, R J J C., Wijkens, Assignment resonances P., of of Kruk, H and some C., The and Theuns, 13 C-NMR isoquinoline H spectrum G., of alkaoids, Phytochemistry, Vol 28(10), 2833-2839 (1989) [9] Marek, R, Seckarova, P., Hulova, D., Marek, J., Dostal, J., and Sklenar, V., Palmatine and berberine isolation artifacts, J Nat Prod Vol 66, 481-486 (2003) Sách Đỏ Việt Nam - Phần Thực Vật, Nhà Xuất [10] Khoa học Công nghệ, 2007, trang 133 [11] Schiff, P L., Bisbenzylisoquinoline alkaloids, J Nat Prod, 60, 934-953 (1997) ... pháp chiết sắc ký để phân lập alkaloid từ hồng liên rô Sử dụng phương pháp phổ kết hợp để xác định cấu trúc hoá học hợp chất phân lập Chƣơng TỔNG QUAN 1 Vài nét chung chi hoàng liên Mahonia [3],... hoa nhiều (100- 150 cây) số mọc tự nhiên từ hạt Cây có khả tái sinh trồi sau bị chặt 1 Tác dụng dược lý Mặc dù hoàng liên ô rô có berberin, palmatin số alcaloid khác, nghiên cứu tác dụng kháng... xem Alkaloid khơng phải hợp chất dị vòng N khơng có tính bazơ: - Thiamine: Là hợp chất dị vòng chứa N có tính bazơ khơng phải Alkaloid khơng phân bố phổ biến vật thể sống: Một vài hợp chất phân