l Nghiên cứu - Kỹ thuật Nhận xét: Dân gian thường sử dụng 10 g dược liệu/người/ngày suy 0,2 g dược liệu/kg/ngày Qui đổi liều tương ứng chuột nhắt cao gấp 12 lần liều người 2,4 g/k/24 Như LD50 cao gấp khoảng 56 lần liều dự kiến có tác dụng, cho thấy dược liệu có tính an tồn cao Kết nghiên cứu độc tính bán trường diễn CL Độc tính bán trường diễn cao lỏng thuốc thượng (CL1) với liều tương đương g g dược liệu/kg thể trọng/ngày chuột cống trắng nghiên cứu thông số: trọng lượng thể, tần số tim, biên độ sóng R; số lượng hồng cầu, hàm lượng huyết sắc tố; số lượng bạch cầu, tiểu cầu; hoạt độ AST, ALT; albumin huyết tương; cholesterol, bilirubin tồn phần; creatinin mơ bệnh học gan, lách, thận Kết cho thấy, sau 60 ngày dùng thuốc, thơng số khơng thay đổi có ý nghĩa thống kê so với trước dùng thuốc, so với lô chứng không dùng thuốc Kết luận Từ kết trên, thấy cao lỏng thuốc thượng (CL1) có tính an tồn cao: + Giá trị LD50 = 135,631 (118,974 ÷ 154,619) g/ kg P = 0,05, cao gấp khoảng 56 lần so với liều dự kiến có tác dụng điều trị + Nghiên cứu độc tính bán trường diễn, cho chuột uống CL1 hàng ngày 60 ngày Khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê so với lô chứng tất số: trọng lượng thể, điện tim, số sinh hóa, huyết học Hình ảnh mơ bệnh học gan, lách, thận bình thường Cao lỏng CL1 khơng có độc tính hệ quan quan trọng động vật Tài liệu tham khảo Bộ Y tế (1996), Quyết định số 371/BYT-QĐ việc ban hành “Quy chế đánh giá tính an tồn hiệu lực thuốc cổ truyền” Bộ Y tế (2007), Quyết định số 01/2007/ QĐ-BYT việc ban hành “Quy định thử thuốc lâm sàng” Võ Văn Chi (2012), Từ điển thuốc Việt Nam – tập 2, NXB Y học, Hà Nội, tr 940-941 Đỗ Trung Đàm (2014), Phương pháp xác định độc tính thuốc, Nhà xuất Y học OECD (2002), Drug Safety Evaluation I: Acute and subchronic toxicity assessement, USA Academy Press WHO (1993), Research Guidelines For Evaluating the Safety and Efficacy of Herbal Medicines, ROWP, Manila, Philippines WHO (2000), General Guidelines for Methodologies on Research and Evaluation of Traditional Medicine, EDM/TRM, Geneva, Switzerland (Ngày nhận bài: 17/03/2016 - Ngày duyệt đăng: 25/04/2016) Đánh giá tác dụng an thần, giải lo thuốc “Chè an thần” động vật thực nghiệm Dương Thị Ly Hương1*, Nguyễn Thị Bích Thủy2 Khoa Y Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội Bệnh viện Y học cổ truyền Trung ương * E-mail: lyhuong.smp@vnu.edu.vn Summary The coumpound herbal remedy “Che an than” (Tranquillisant tea) was evaluated for anxiolytic effect on experimental mice by the Elevated Plus Maze (EPM), Grip, Rota-Rod performance, Forced swimming test At the dose of g/kg, “Che an than” increased the frequency and time in the open arms of EPM test, decreased the score in Grip test, shortened the stay time on the rotating cylinder in Rotarod performance test, and reduced the swimming time in the Forced swimming test For these estimated effects, at the dose of g/kg, “Che an than” was similar to diazepam mg/kg Keywords: “Che an than”, mice, Elevated Plus Maze, Grip test, Rota-Rod performance test, and Forced swimming test Đặt vấn đề Canada, tỷ lệ người ngủ lên đến xấp xỉ 30% điều tra xã hội học Để [4,9] Mất ngủ chứng bệnh phổ biến Ở nước phát triển Anh, Mỹ, điều trị ngủ, liệu pháp tâm lý việc 40 TẠP CHÍ DƯỢC HỌC - 5/2016 (SỐ 481 NĂM 56) l Nghiên cứu - Kỹ thuật sử dụng thuốc an thần quan trọng Bên cạnh dẫn xuất sử dụng phổ biến dẫn xuất benzodiazepin (sedusen, zolpidem…), dẫn xuất barbiturat (phenobarbital…) việc phát triển thuốc Đơng y dựa kinh nghiệm dân gian quan tâm “Chè an thần” Bệnh viện Y học cổ truyền trung ương thuốc nghiệm phương, xây dựng dựa vị thuốc có tác dụng an thần như: vơng, lạc tiên, thảo minh, bình vôi… kết hợp với long nhãn, sen, cúc hoa, cam thảo,… Bài thuốc kết hợp chủ yếu dựa lý luận Đơng y mà chưa có chứng Y học đại soi sáng Để góp phần làm sáng tỏ sở khoa học thuốc, tiến hành đề tài với mục tiêu: Đánh giá tác dụng an thần, giải lo thuốc “Chè an thần” động vật thực nghiệm Nguyên liệu, đối tượng phương pháp nghiên cứu Hình 1: Dụng cụ cho thí nghiệm EPM Dụng cụ hình chữ thập gồm tay hở tay kín, đặt đỡ cách sàn nhà 50 cm Khi tiến hành thí nghiệm, đặt chuột vào trung tâm dụng cụ, mặt chuột hướng phía tay hở Quan sát chuột phút Ghi lại số lần chuột vào tay tổng thời gian chuột lưu lại tay hở tay kín Nguyên liệu Bài thuốc “Chè an thần” gồm vị thuốc: vông 0,40 g; lạc tiên 0,33 g; thảo minh 0,40 g; bình vơi 0,60 g; long nhãn 0,20 g; sen 0,40 g; cúc hoa 0,20 g; cam thảo 0,13 g; liên nhục 0,33 g Bệnh viện Y học cổ truyền Trung ương sản xuất “Chè an thần” đóng dạng túi lọc, gói gam Khi sử dụng cho chuột, hãm chè 60 ml nước sôi 20 phút, dịch thuốc cách thủy đến 20 ml 15 ml tùy nồng độ cần sử dụng Đối tượng Chuột nhắt trắng khỏe mạnh đủ tiêu chuẩn, giống đực, trọng lượng từ 20-25 g, Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương cung cấp Chuột nuôi điều kiện nhiệt độ ánh sáng tự nhiên, cho ăn, uống theo nhu cầu trước tiến hành thí nghiệm Phương pháp nghiên cứu Để đánh giá tác dụng an thần thực nghiệm thuốc “Chè an thần”, sử dụng mơ hình sau: mơ hình chữ thập nâng cao (EPM – Elevated Plus Maze), mơ hình leo dây (Grip test), thí nghiệm Rota-Rod thí nghiệm chuột bơi Để tiến hành thí nghiệm EPM thí nghiệm leo dây, chúng tơi chế tạo dụng cụ thí nghiệm (dựa tài liệu tham khảo [6-8, 10]) Hình 2: Dụng cụ cho thí nghiệm Grip Dụng cụ 01 sợi dây thép dài 50 cm, đặt đỡ cách mặt đất 45 cm Khi tiến hành thí nghiệm, chuột đặt lên dây hai chân trước Quan sát khả bám dây chuột cho điểm theo thang điểm sau: điểm: chuột bị rơi; điểm: giữ nguyên tư dây; điểm: giữ nguyên tư thế, có cố gắng trèo lên; điểm: treo dây chân trước cộng với chân sau; điểm: treo dây chân cộng với quấn đuôi quanh dây; điểm: chạy dây Các thí nghiệm tiến hành phòng riêng biệt, yên tĩnh tối với đèn màu đỏ 40 w Thời gian tiến hành thí nghiệm khoảng sáng đến chiều Riêng thí nghiệm chuột bơi  tiến hành điều kiện ánh sáng bình  thường Trong ngày tiến hành thí nghiệm, TẠP CHÍ DƯỢC HỌC - 5/2016 (SỐ 481 NĂM 56) 41 l Nghiên cứu - Kỹ thuật chuột chuyển vào phòng thí nghiệm trước để làm quen với điều kiện phòng Chuột chia ngẫu nhiên thành lô (8-12 chuột/lô), uống thuốc NaCl 0,9% liên tục ngày Thí nghiệm bắt đầu vào ngày thứ ba sau uống thuốc 30 phút Lô 1: Uống NaCl 0,9% Lô 2: Uống diazepam (DZP) mg/kg – với thể tích 10 ml/kg Lơ 3: Uống chè an thần 1,5 g/kg – với thể tích 10 ml/kg Lô 4: Uống chè an thần g/kg – với thể tích 10 ml/kg Kết nghiên cứu Thí nghiệm EPM Bảng 1: Tác dụng Chè an thần lên thời gian chuột lưu tay kín/tay hở NaCl 0,9% Thời gian lưu Thời gian lưu ở tay kín (s) tay hở (s) 228 ± 5,26 47,13 ± 4,48 DZP mg/kg 112,50 ± 5,06 p1-2 < 0,0001 124,13 ± 7,07 p1-2 < 0,0001 Chè an thần 1,5 g/kg 207,00 ± 5,13 p1-3 > 0,05 56,50 ± 6,49 p1-3 > 0,05 126,63 ± 3,73 p1-4 < 0,0001 p2-4 > 0,05 106,13 ± 4,37 p1-4 < 0,0001 p2-4 > 0,05 Lô Thuốc uống Chè an thần g/kg n Bảng 2: Tác dụng Chè an thần lên số lần lưu chuột tay kín/tay hở n Số lần lưu tay kín Số lần lưu tay hở NaCl 0,9% 20,50 ± 0,93 3,38 ± 0,18 DZP mg/kg 13,50 ± 0,33 p1-2 < 0,001 8,38 ± 0,57 p1-2 < 0,0001 Chè an thần 1,5 g/kg 20,88 ± 1,06 p1-3 > 0,05 4,38 ± 0,46 p1-3 > 0,05 Chè an thần g/kg 14,88 ± 0,29 p1-4 < 0,001 p2-4 > 0,05 7,00 ± 0,65 p1-4 < 0,001 p2-4 > 0,05 Lô Thuốc uống Thử nghiệm Grip Bảng 3: Tác dụng Chè an thần lên số điểm bám dây chuột Lô Điểm bám dây Điểm Điểm Trung thấp cao p nhất vị NaCl 0,9% 0 5 DZP mg/ 3 0 1.5 0,0107 kg Chè an thần 0 2 0,0097 1,5 g/kg Chè an thần 4 0 0,0111 g/kg Thuốc uống n Nhận xét: Cả diazepam mg/kg, Chè an thần 1,5 g/kg, Chè an thần g/kg làm giảm đáng kể số điểm bám dây so với lô chứng (p ≤ 0,05) Chè an thần 1,5 g/kg không giảm điểm mạnh diazepam mg/kg Chè an thần g/kg làm giảm số điểm tương đương với diazepam mg/kg Thí nghiệm Rota-Rod Bảng 4: Tác dụng Chè an thần lên thời gian chuột bám máy quay Rota-Rod Lô Thuốc uống NaCl 0,9% DZP mg/kg Chè an thần 1,5 g/kg n 8 Chè an thần g/kg Thời gian (s) p 205,13 ± 8,01 84,13 ± 8,53 p1-2 < 0,0001 186,25 ± 2,37 p1-3 > 0,05 p < 0,0001 129,88 ± 8,85 1-4 p2-4 > 0,05 Nhận xét: Diazepam mg/kg làm giảm đáng kể thời gian bám máy quay Rota-Rod chuột so với chứng (p < 0,0001) Chè an thần 1,5 g/kg làm giảm không đáng kể thời gian bám máy quay Rota-Rod chuột so với chứng (p > 0,05) Chè an thần liều g/kg làm giảm rõ rệt thời gian bám máy quay Rota-Rod chuột so với chứng (p < 0,0001) Tác dụng tương đương với diazepam mg/kg (p > 0,05) Thí nghiệm chuột bơi Thí nghiệm đánh giá mức liều g/kg, mức liều thể tác dụng rõ thí nghiệm trước Bảng 5: Tác dụng Chè an thần lên thời gian bơi chuột Lơ Nhóm NaCl 0,9% DZP mg/kg n Thời gian bơi (s) p 1102,22 ± 67,24 12 235,83 ± 25,11 p1-2 < 0,0001 p < 0,0001 11 368,45 ± 48,33 1-3 p2-3 > 0,05 Nhận xét: DZP liều mg/kg làm tăng thời gian số lần chuột tay hở (p < 0,001) cách rõ rệt so với chứng Chè an thần 1,5 g/kg không làm thay đổi đáng kể thời gian số lần chuột tay hở so với chứng (p > 0,05) Chè an thần g/kg làm tăng thời gian chuột tay hở (p < 0,001) giảm thời gian chuột tay kín (p < 0,001) cách rõ rệt so với chứng So với diazepam, tác dụng Chè an thần g/kg tương đương (p > 0,05) Nhận xét: Diazepam liều mg/kg làm giảm đáng kể thời gian bơi chuột so với chứng (< 0,0001) Chè an thần g/kg làm giảm rõ rệt thời  gian bơi chuột so với chứng (p < 0,0001) Chè an thần g/kg cho tác dụng tương đương với diazepam mg/kg 42 TẠP CHÍ DƯỢC HỌC - 5/2016 (SỐ 481 NĂM 56) Chè an thần g/kg l Nghiên cứu - Kỹ thuật Bàn luận Kết bảng cho thấy Chè an thần liều g/kg làm giảm rõ rệt thời gian bám máy quay Rota-Rod chuột so với chứng (p < 0,0001) Tác dụng tương đương với diazepam mg/kg (p > 0,05) Chè an thần 1,5 g/kg chưa làm thay đổi thời gian bám máy quay Rota-Rod chuột Như vậy, thấy với liều g/kg, Chè an thần làm giảm phối hợp thần kinh-cơ chuột, chứng tỏ tác dụng an thần, giải lo Chè an thần liều g/kg Tác dụng Chè an thần thí nghiệm chuột bơi Thử nghiệm chuột bơi thường sử dụng để phát tác dụng an thần chống trầm cảm [2, 6] Cơ sở thử nghiệm dựa phối hợp vận động thần kinh-cơ sống sót động vật Thuốc an thần làm giảm phối hợp thần kinh-cơ động vật, đó, uống thuốc an thần, khả bơi chuột giảm Thử nghiệm dựa quan sát chuột bơi nước Kết bảng cho thấy Chè an thần với liều g/kg làm giảm đáng kể thời gian bơi chuột so với lô chứng (p < 0,0001), tác dụng tương đương với tác dụng diazepam liều mg/kg Kết hoàn toàn phù hợp với thử nghiệm trước (trên mơ hình Grip, mơ hình chuột bơi), chứng tỏ tác dụng giãn cơ, an thần Chè an thần mức liều g/kg Ngoại suy người, liều tương đương với liều 0,17 g/kg thể trọng người/ngày, hay g/người nặng 50 kg/ngày Tác dụng Chè an thần mơ hình EPM EPM thí nghiệm sử dụng rộng rãi để đánh giá tác dụng an thần, giải lo thuốc [3, 7, 8, 10] Thí nghiệm dựa chuột tự vệ thích khám phá Trong thử nghiệm EPM, hành vi tự vệ biểu việc tìm nơi trú ẩn tay kín, khám phá biểu việc vào tay hở Bình thường, đặt dụng cụ hình chữ thập cao, cảm giác lo lắng độ cao nên chuột tiếp xúc với tay hở, thường tìm đến nơi trú ẩn an tồn tay kín Tuy nhiên, dùng thuốc làm giảm lo lắng, chuột khơng cảm giác sợ độ cao thích tay hở hơn, thích khám phá Kết bảng cho thấy thời gian số lần chuột vào tay hở lô chuột uống diazepam uống Chè an thần g/kg tăng cách có ý nghĩa thống kê so với lơ chứng cho thấy Chè an thần g/kg làm giảm lo lắng chuột Tác dụng Chè an thần g/kg tương đương với diazepam liều mg/kg Tác dụng Chè an thần mơ hình Grip Thử nghiệm Grip thử nghiệm sử dụng rộng rãi để nghiên cứu tác dụng an thần kiểu benzodiazepin thuốc [1, 5, 6] Thí nghiệm đánh giá khả đeo bám phối hợp vận động chuột, từ đánh giá tác dụng giãn tác dụng an thần thuốc Hầu hết thuốc an thần loại diazepam có tác dụng giãn Kết bảng cho thấy diazepam, Chè an thần 1,5 g/kg g/kg làm giảm đáng kể số điểm bám dây so với lô chứng (p ≤ 0,01) Chè an thần 1,5 g/kg không giảm điểm mạnh diazepam mg/kg Chè an thần g/ kg làm giảm số điểm tương đương với diazepam mg/kg Như vậy, thấy Chè an thần 1,5 g/kg có tác dụng giãn rõ Tác dụng Chè an thần mơ hình Rota-Rod Rota-Rod thử nghiệm áp dụng nhiều nghiên cứu tác dụng an thần thuốc Cơ sở thử nghiệm dựa khả phối hợp thần kinh-cơ, khả định hướng không gian, sức căng cơ, khả giữ thăng động vật Thuốc an thần ức chế thần kinh trung ương, làm giảm phối hợp thần kinh-cơ, giảm khả giữ thăng định hướng không gian nên giảm khả đeo bám quay chuột [5, 6] Adeyemi O O., et al (2007), “Sedative and anticolvulsant activities of aqueous root extract of Sanseviera liberica Gerome and Labroy”, Journal of Ethnopharmacology, 113, 111-114 TẠP CHÍ DƯỢC HỌC - 5/2016 (SỐ 481 NĂM 56) 43 Kết luận Qua trình nghiên cứu tác dụng an thần, giảm lo lắng Chè an thần chuột nhắt thực nghiệm, rút số kết luận: Với liều g/kg, Chè an thần có tác dụng an thần, giảm lo lắng giãn tốt thông qua việc làm tăng số lần thời gian chuột vào tay hở mơ hình chữ thập nâng cao (EPM), làm giảm số điểm bám dây mơ hình leo dây Grip, làm giảm thời gian bám máy quay Rota-Rod làm giảm thời gian bơi mơ hình chuột bơi Các tác dụng Chè an thần g/kg tương đương với tác dụng diazepam liều mg/kg Ngoại suy người, liều tương đương với liều g/người nặng 50 kg/ngày (tương đương 2-3 gói Chè an thần/ngày) Tài liệu tham khảo l Nghiên cứu - Kỹ thuật Benoit Petit-Demouliere, et al (2005) “Forced swimming test in mice: a review of antidepressant activity”, Psychopharmacology, 177, 245-255 Carobrez A P., et al (2005), “Ethologycal and temporal analyses of anxiety-like behavior: The Elevated plus maze model 20 years on”, Neuroscience and Biobehavioral Reviews, 29, 1193-1205 Cho Y M., et al (2009), “Epidemiology of insomnia in Korean adults: prevalence and associated factor”, J Clin Neurol., (1), 20-23 Denga, Yujuan Zhoua, Mengmeng Baia, Hongwei Li (2009), “Anxiolytic and sedative activities of Passiflora edulis f flavicarpa”, Journal of Ethnopharmacology, 128, 148-153 Edward J Calabrese (2008), “ An assessment of anxiolytic drug screening tests: hormetic dose responses predominate”, Critical Reviews on Toxicology, 38, 489-542 Emamghoreishi M., et al (2005), “Coriandrum sativum: evaluation of its anxiolytic effect in the elevated plus maze”, Journal of Ethnopharmacology, 96, 365-370 Jamal et al (2008), “Evaluation of chalcones – a flavonoid subclass, for their anxiolytic effects in rats using elevated plus maze and open field behaviour test”, Fundamental and Clinical Pharmacology, 22, 673-681 Morphy H., et al (2007), “Epidemiology of Insomnia: a longitudinal study in a UK population”, Sleep, 30(3), 147-180 10 Rodgers R J and Dalvi A (1997), “Anxiety, defence and the elevated plus maze”, Neurosciences and Biobehavioral Reviews, 21(6), 801-810 (Ngày nhận bài: 31/03/2016 - Ngày duyệt đăng: 25/04/2016) Nghiên cứu tác dụng (Tiếp theo trang 37) liều thử 100, 200, 400 mg/kg Từ lựa chọn mức liều phù hợp qui đổi để đánh giá tác dụng chống viêm chuột cống trắng (động vật lớn hơn) Các mức liều áp dụng để đánh giá tác dụng cao gối hạc Trên mơ hình mâm nóng, gối hạc với ba mức liều thử tác dụng giảm đau trung ương Tuy nhiên, mô hình gây đau quặn acid acetic để đánh giá tác dụng giảm đau ngoại vi, gối hạc rễ thể tác dụng tốt, đặc biệt mức liều 200 400 mg/kg (tính theo tổng số quặn đau 30 phút theo dõi) Vì vậy, mức liều lựa chọn quy đổi chuột cống trắng để đánh giá tác dụng chống viêm Đánh giá tác dụng chống viêm cấp mơ hình gây phù bàn chân chuột carrageenan, gối hạc thể tác dụng mức liều thử, GHL với liều 200 mg/kg thể khả làm giảm mức độ phù thời điểm nghiên cứu Trên mơ hình gây u hạt thực nghiệm để đánh giá tác dụng chống viêm mạn, cao GHL tiếp tục thể tác dụng rõ mức liều thử cao GHR có tác dụng mức liều 200 mg/kg Như vậy, nghiên cứu làm sáng tỏ tác dụng sinh học liên quan tới ứng dụng rễ gối hạc dân gian, đồng thời cho thấy gối hạc (bộ phận mà từ trước đến chưa sử dụng) có tác dụng chống viêm, giảm đau tốt Kết mở gợi ý phận dùng dược liệu tương lai, giúp khai thác gối hạc cách hiệu bền vững Kết luận Tác dụng giảm đau: Cao GHL liều 100 400 mg/kg có tác dụng giảm số đau quặn 10 phút đầu thực nghiệm gây đau quặn liều 200 mg/kg có tác dụng tồn 30 phút nghiên cứu Cao GHR mức liều thử làm giảm số quặn đau từ phút đầu đến phút thứ 20 thực nghiệm gây đau quặn Tác dụng chống viêm: Cao GHL liều 100 mg/ kg có tác dụng chống viêm cấp thời điểm  giờ sau gây viêm, liều 200 mg/kg có tác dụng thời điểm 1, sau gây viêm mơ hình gây phù bàn chân chuột Cả hai mức liều 100 200 mg/kg có tác dụng chống viêm mạn mơ hình gây u hạt thực nghiệm Cao GHR liều 100 200 mg/kg thể tác dụng chống viêm cấp mơ hình gây phù bàn chân chuột thời điểm sau gây viêm Trên mơ hình gây u hạt thực nghiệm, GHR thể tác dụng chống viêm mạn với mức liều 200 mg/kg Tài liệu tham khảo Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Trung, Bùi Xuân Chương, Nguyễn Thượng Dong, Đỗ Trung Đàm, Phạm văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thị Nhu, Nguyễn Tập, Trần Toàn (2005), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, tập I, NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội tr 874-875 Võ Văn Chi (2012), Từ điển thuốc Việt Nam, NXB Y học, tập I, 1046-1049 Phạm Quốc Tuấn, Nguyễn Minh Khởi, MinKyun Na, Nguyễn Thùy Dương, Hà Hương Lan, Phương Thiện Thương (2015), “Nghiên cứu tác dụng giảm đau chống viêm cao phần mặt đất lạc tân phụ”, Tạp chí Dược học, 466, trang 62-68 Vogel H G (2008), Drug Discovery and Evaluation Pharmacological Assays, 3rd ed, Springer Winter C A., Risley E A, Nuss G W (1962), “Carrageenin-induced edema in hind paw of the rat as an assay for antiinflammatory drugs”, Proc Soc Exp Biol Med., 111, pp 544-547 (Ngày nhận bài: 22/03/2016 - Ngày duyệt đăng: 25/04/2016) 44 TẠP CHÍ DƯỢC HỌC - 5/2016 (SỐ 481 NĂM 56) ... kg/ngày Tác dụng Chè an thần mơ hình EPM EPM thí nghiệm sử dụng rộng rãi để đánh giá tác dụng an thần, giải lo thuốc [3, 7, 8, 10] Thí nghiệm dựa chuột tự vệ thích khám phá Trong thử nghiệm EPM,... Chè an thần làm giảm phối hợp thần kinh-cơ chuột, chứng tỏ tác dụng an thần, giải lo Chè an thần liều g/kg Tác dụng Chè an thần thí nghiệm chuột bơi Thử nghiệm chuột bơi thường sử dụng để phát tác. .. trước tiến hành thí nghiệm Phương pháp nghiên cứu Để đánh giá tác dụng an thần thực nghiệm thuốc “Chè an thần”, sử dụng mơ hình sau: mơ hình chữ thập nâng cao (EPM – Elevated Plus Maze), mơ hình