Đang tải... (xem toàn văn)
Tài liệu ôn thi viên chức ý tế ngành xét nghiệm Tài liệu ôn thi viên chức ý tế ngành xét nghiệm Tài liệu ôn thi viên chức ý tế ngành xét nghiệm Tài liệu ôn thi viên chức ý tế ngành xét nghiệm Tài liệu ôn thi viên chức ý tế ngành xét nghiệm Tài liệu ôn thi viên chức ý tế ngành xét nghiệm Tài liệu ôn thi viên chức ý tế ngành xét nghiệm Tài liệu ôn thi viên chức ý tế ngành xét nghiệm Tài liệu ôn thi viên chức ý tế ngành xét nghiệm Tài liệu ôn thi viên chức ý tế ngành xét nghiệm Tài liệu ôn thi viên chức ý tế ngành xét nghiệm Tài liệu ôn thi viên chức ý tế ngành xét nghiệm Tài liệu ôn thi viên chức ý tế ngành xét nghiệm Tài liệu ôn thi viên chức ý tế ngành xét nghiệm ôn thi viên chức y tếôn thi viên chức y tếôn thi viên chức y tếôn thi viên chức y tếôn thi viên chức y tếôn thi viên chức y tế
Bài 1: PHÂN LOẠI MÁU HỆ A B O Mục tiêu Tự chuẩn bị đủ, phương tiện cần thiết để định nhóm hồng cầu hệ ABO theo nguyên tắc Thao tác định nhóm máu xác theo bước phương pháp Nhận định xác kết nhóm máu làm Có thái độ, tác phong nghiêm túc MỤC ĐÍCH Để định nhóm máu hệ A B O cho cá nhân phương pháp thực cho tất người nhận hay cho máu A PHÂN LOẠI TRỰC TIẾP: kỹ thuật Beth Wincent I NGUYÊN TẮC Dùng huyết mẫu chứa kháng thể đặc hiệu biết để định loại kháng nguyên nhóm máu hồng cầu qua phản ứng ngưng kết KỸ THUẬT Có hai phương pháp: Kỹ thuật phân loại kính Kỹ thuật phân loại ống nghiệm 2.1 Kỹ thuật phân loại kính 2.1.1 Dụng cụ - Lame, kính có phân loại gạch men khơ - Viết chì sáp - Que tăm 2.1.2 Hóa chất - Huyết mẫu nhóm A - Huyết mẫu nhóm B - Huyết mẫu nhóm AB 2.1.3 bệnh phẩm Máu khơng bị tiêu huyết hay nhiễm trùng 2.1.4 tiến hành - gạch men ( lame) ghi ám số tên bệnh nhân bút chì sáp Sau chia làm ô đánh dấu A B AB - cho vào ô giọt máu bệnh nhân - cho tiếp vào ô hai giọt huyết mẫu tương ứng -Trộn máu huyết mẫu ô theo vòng tròn ( d= 1,5 cm) que tâm đáy tròn ống nghiệm - lắc nghiêng tròn gạch đến phút - đọc ngưng kết sau phút kể từ lúc bắt đầu trộn 2.1.5 đọc kết Ngưng kết (+): Thấy cụm hồng cầu đứng tách rời rõ rệt dung dịch Ngưng kết (-): Hỗn dịch đỏ đục 2.2 Kỹ thuật ống: Nếu làm kỹ thuật lame không rõ phải làm lại ống 2.2.1 Dụng cụ: - ống nghiệm cm khô, - ống hút Pasteur, bóp cao su - ly tâm Adme serofuge 3.800 v/phút 2.2.2 Hóa chất: - Huyết mẫu nhóm A.B.AB - Nước muối 0.9% 2.2.3 Bệnh phẩm: - Máu có kháng đơng - Hoăc máu đông (sử dụng lớp hồng cầu lắng đáy ống nghiệm sau cục máu co) 2.2.4 tiến hành - cho vào ống nghiệm giọt máu bệnh nhân, rửa hồng cầu lần với nước muối 0.9% Sau pha thành huyền dịch 5% - Trên ống ghi ám số bệnh nhân đánh dấu A.B.AB - Cho vào ống giọt huyết kháng tương ứng A.B.AB - Dùng ống hút Pasteur nhỏ vào ống giọt huyền dịch hồng cầu bệnh nhân 5% - Lắc ống nghiệm - Quay ly tâm máy Adame serofuge 3.800 v/phút 30 giây (hoặc để nhiệt độ phòng thí nghiệm giờ) - đọc kết mắt thường hay kính lúp 2.2.5 Kết Ngưng kết (+): hồng cầu tạo thành hay vài khối đỏ - nước Ngưng kết (-):Khi lắc hồng cầu trở lại dạng hỗn dịch đỏ đục B PHÂN LOẠI GIÁN TIẾP: Kỹ thuật Simonin NGUYÊN TẮC Dùng hồng cầu mẫu chứa kháng nguyên đặc hiệu biết để định loại kháng thể huyết qua phản ứng ngưng kết KỸ THUẬT Có hai phương pháp: - Phương pháp kính - Phương pháp ống 2.1.Kỹ thuật kính 2.1.1.Hóa chất - Hồng cầu mẫu A 5% - Hồng cầu mẫu B 5% - Hồng cầu mẫu O 5% 2.1.2 bệnh phẩm: Huyết bệnh nhân diệt bổ thể ở: - 560C 30 phút - Hay 630C phút 2.1.3 tiến hành: - gạch men sau ám số bệnh nahan chia ô đánh dấu A.B.O - Nhỏ vào ô giọt hồng cầu mẫu 5% tương ứng A.B.O - Nhỏ tiếp vào ô hai giọt huyết bệnh nhân - Lắc nghiêng tròn để trộn - Đọc kết ngưng kết giống phần trực tiếp 2.2 Kỹ thuật ống: Kỹ thuật ống nhiều đòi hỏi nhiều phương tiện hơn, kết rõ ràng - Trên ống nghiệm ghi ám số bệnh nhân đánh dấu A.B.O - Nhỏ vào ống giọt hồng cầu mẫu 5% tương ứng A.B.O - Nhỏ tiếp vào ống giọt huyết bệnh nhân - Lắc nhẹ - Quay ly tâm - Đọc kết giống phần phân loại trực tiếp ống C NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ Phân loại TRỰC TIẾP Phân loại TRỰC TIẾP KẾT QUẢ HTM.AB HTM.A HTM.B HC.A HC.B HC.O Tỷ lệ + + + + + D BIỆN LUẬN + + - + + + + - ĐỊNH NHÓM A B AB O người 20% VIỆT NAM 30% 7% 43% Một kết xác định nhóm máu có giá trị kết phân loại trực tiếp gián tiêp giống Những kết khó đọc cần xử lý: đọc kính hiển vi Nhỏ giọt hỗn hợp hồng cầu huyết lame đạy lamelle, quan sát vật kính x 10%: - Có nhiều đám lớn hồng cầu sáng rõ: ngưng kết - Có đám hồng cầu to nhỏ nhiều hồng cầu riêng lẻ vi trường: ngưng kết yếu - Tất hồng cầu đứng riêng lẻ: không ngưng kết Huyết kháng bảo quản tốt 40C không nên để thuốc thử đông đặc tan nhiều lần trước sử dụng thuốc thử phải đem trở nhiệt độ phòng thí nghiệm E NGUN NHÂN SAI LẦM sai lầm huyết - huyết có chuẩn độ kháng thể yếu, hoạt tính hay bị nhiễm trùng - Nếu huyết có độ nhớt cao: hồng cầu xếp thành chuỗi đĩa Xác định cách: Cho thêm vào giọt hỗn hợp hồng cầu huyết giọt Nacl 0.9% - đậy lamelle – soi kính hiển vi vật kính x10 • Nếu ngưng kết giả khơng thấy chuỗi hồng cầu • Nếu ngưng kết thật thấy đám hồng cầu bị ngưng kết sai lầm hồng cầu: - Do máu mẫu bị biến chất - Do máu bị nhiễm trùng bạch cầu qúa nhiều sai lầm thủ tục giấy tờ - Do nhầm tên – viết nhầm Bài 2: KỸ THUẬT KHỬ KHUẨN Mục tiêu: Thực thao tác phòng thí nghiệm vi khuẩn cách đắn,không làm lây nhiễm cho thân, cho mơi trường làm việc, đảm bảo kết chẩn đốn xác Trình bày thành hệ thống tên phương pháp khử khuẩn kèm theo thông số đặc trưng đối tượng khử khuẩn phương pháp Trao tác thành thạo công việc chuẩn bị khử khuẩn cho tất loại dụng cụ phòng thí nghiệm vu khuẩn học I BIỆN PHÁP AN TỒN TRONG PHỊNG THÍ NGHIỆM Trong phòng thí nghiệm vi khuẩn học, để đảm bảo an tồn cho mình, cho đòng nghiệp, bảo vệ lứa cấy tránh ngoại nhiễm, cần phải thực biện pháp sau: Tất nhân viên phòng thí nghiệm phải mặc áo chồng Phải rửa tay kỹ với xà phòng hay dung dịch sát khuẩn (không làm hại da) trước sau vận dụng lứa cấy hay mẫu thử Phải cẩn thẩn bảo vệ mắt vùng da xước tránh nhiễm khuẩn Phải lau mặt bàn phòng thí nghiệm, trước sau làm việc, với mẫu thử nhiễm khuẩn, dung dịch diệt khuẩn Phải vận dụng mẫu thử thật cẩn thận để tránh nhiễm khuẩn Ngay sau dùng, phải khử khuẩn tất vật dụng nhiễm khuẩn, nồi hấp hay cho vào dung dịch diệt khuẩn Dùng lồng cấy khuẩn trường hợp vận dụng mẫu thử nhiễm khuẩn độc Không hút thuốc hay ăn uống phòng thí nghiệm vi khuẫn Nếu có điều kiện, nên dùng tia tử ngoại để khử khuẩn vùng khơng khí nơi làm việc, lồng cấy, vào ngồi làm việc (vì tia tử ngoại làm hại mắt da ) II KHỬ KHUẨN Khử khuẩn phương thức tiêu diệt tất vi sinh vật Khử khuẩn công cẩn thiết vi khuẩn học, quan trong khoa giải phẫu điều bệnh viện, nhằm ngăn chặn nhiễm khuẩn 2.1 Phương pháp dùng sức nóng Có nhiều cách sử dụng sức nóng việc khử khuẩn • • Đốt trực tiếp lửa: để khử dây cấy, khuyên cấy Sức nóng ướt Phương pháp mang nhiều tên gọi khác tùy theo cách thức đun nóng nhiệt độ nước - Đun sôi: Đun nước sôi 20 – 30 phút đủ để khuẩn dụng cụ ống tiêm - Phương pháp Tyndall: Là cách đun sôi 100 0C 30 – 45 phút ngày ba ngày liên tiếp phương pháp dùng để khử khuẩn khơng chịu sức nóng cao ( sữa) - Phương pháp Pasteur: phương pháp dùng để khử khuẩn vài loại trường chứa trứng huyết không chịu nhiệt độ 100 0C Thời gian khuẩn tùy thuộc vào nhiệt độ 620C/30’,720C/20’ 750C/10’ Phương pháp Pasteur đủ để diệt vi khuẩn không bào tử - Phương pháp Pasteur đủ để diệt vi khuẩn không bào tử, loại men bảo quản tiêu diệt vi khuẩn có bào tử, phải kiểm sốt lại trước dùng - Hai nước áp suất: Phương pháp thực hieenjtrong nồi hấp dùng để khử khuẩn dụng cụ cao su, môi trường trước sau sử dụng, bệnh phẩm cần đem hủy nguyên tắc phương pháp dùng nước áp suất để đạt nhiệt độ cao 1000C, để tiêu diệt vi sinh vật bào tử Trong phòng thí nghiệm, áp suất 15 cân Anh (pounf) 121 0C 15 phút để dùng cho hầu hết dịch vụ khử khuẩn nhiên nhiệt độ đọc yếu tố quan trọng áp suất thời gian khử khuẩn nopoif hấp dựa theo nhiệt độ Khi sử dụng nồi hấp, cần phải tuân theo quy luật sau đây: • Khơng nên cho mơi trường đầy q 2/3 bình hay ống nghiệm • Khơng nên chất vật dụng khử khuẩn q đầy buồng khử, khơng khí bị kẹt lại không cho phép đạt nhiệt độ mong muốn • Vài loại mơi trường bị thủy phân nhiệt độ cao Vì phải tuyệt đối tuân theo dẫn ghi nhãn mơi trường • Phải lấy tất môi trường khỏi nồi hấp sau khử khuẩn xong không hấp khử khuản lại • Sức nóng khơ Phương pháp dùng để khử khuẩn vật dụng thủy tinh, kim loại, thực tủ sấy khô nhiệt độ 170 0C …Dùng tử sấy phải cẩn thận không nên tăng nhiệt độ làm hư hút bơng vật dụng thủy tinh, khơng dùng sức nóng khơ khử khuẩn vật dụng cao su chất dẻo 2.2 Phương pháp dùng hóa chất Việc sử dụng hiệu hóa chất diệt khuẩn tùy thuộc vào yếu tố sau đây: - Nồng độ hóa chất - Thời gian tiếp xúc với hóa chất - Tính chất vi sinh vật như: loại vi sinh vật thành phần cấu tạo đặc biệt (nang, bào tử…) - diện chất kèm theo như: chất hữu cơ, mũ,…những chất trung hòa, khử hay làm haotj tính hóa chất vi sinh vật • Các hóa chất dùng diệt khuản thơng dụng phòng thí nghiệm - dung dịch phenol 5% - Dung dịch formaldehyde 4% (fomol 10%) - Nước javel Khi nồng độ hóa chất diệt khuẩn giảm đỗ chất lỏng nhiễm khuẩn vào phải cho thêm hóa chất điều chế dung dịch • Các dung dịch sát khuẩn thơng dụng phòng thí nghiệm: - cồn Iốt 2% dùng cho vết đứt nhỏ, dùng để sát khuẩn da kỹ thuật cấy máu - Ethanol 70%( cồn etylic 70 độ) dùng để sát khuẩn lấy mẫu thử cần đâm xuyên qua da 2.3 phương pháp lọc Được dùng khử khuẩn chất lỏng dể bị phân tích haocj hư hỏng đun nóng vài loại mơi trường, hóa chất, hay chất lỏng sinh học ( huyết thanh) Nguyên tắc phương pháp cho chất lỏng chỷ qua màng lọc có nhỏ li ti, vật vơ tế bào vi khuẩn có tầm vóc lớn hơn, qua lỗ lọc giữ lại thế, hiệu phương pháp lọc tùy thuộc vào kích thước lỗ li ti màng lọc Tùy theo cấu tạo màng lọc, ta có nhiều loại lọc Lọc Chamberland: dùng bình trụ bột sứ làm bình bọc Lọc Pyrex: dùng màng thủytinh kết tinh Lọc Seitz: dùng màng lọc giấy đặc biệt Lọc Milipore: dùng màng lọc acetate celluose Lọc Seitz lọc Pyrex hai loại lọc thông dụng phòng thí nghiệm vi khuẩn học 2.4 Phương pháp dùng tia sáng: Tia cực tím thường dùng để khử khuẩn khơng khí phòng ni cấy sinh vật học phòng giải phẩu, phòng bệnh III CÁCH THỨC CHUẨN BỊ CÁC DỤNG CỤ VI KHẨN HỌC Dể làm dụng cụ bẩn thành dụng cụ sạch, vơ khuẩn sãng sàng dụng công tác vi khuẩn học, ta phải thực công việt sau đây: 3.1 Hủy diệt vi khuẩn - Các dụng cụ chứa vi khuẩn môi trường cấy Được khử khuẩn nồi hấp nhiệt độ 121 C 30 phút, sau dụng cụ nhựa loại bỏ \, dụng cụ thủy tinh trút bỏ chất bẩn rữa lại - Các phế vật nhiễm khuẩn Xác xúc vật thí nghiệm phế vật khác phải hủy diệt cách d0ot61 thành than hỏa lò, Tuyệt đối không chôn vùi 3.2 Rửa dụng cụ - Dụng cụ thủy tinh mới: chứa kiềm tự do, phải rửa kĩ nước nóng tráng nước cất trước dùng - Dụng cụ thủy tinh dùng Sau diệt vi khuẩn trúc bỏ chất bẩn, dụng cụ thủy tinh phải rửa nước sạch, xong ngâm vào nước xà phòng 24 giờ, vớt ra, rửa lại thật với nước bàn chải Nếu dụng cụ đục hoặt đóng váng trắng ngâm vào dung dịch sulfocromic 24 Sau vớt rửa Kính đựng vật dùng, đun sơi nước Javel 30 phút, xong rửa thật với nước thường Ngâm phúc với HCl 1%, tráng lại nhiều lần với nước thường Sau để khô phải ngâm cồn Etylic 950 C trước dùng 3.3 Chuẩn bị khử khuẩn dụng cụ Sau rửa sạch, dụng cụ xếp vào giỏ kim loại cho nước đem sấy khô trước sửa soạn khử khuẩn - Chuẩn bị dụng cụ thủy tinh * Ống hút Pasteur: sau sấy khô phải chọn lựa lại ống không đầu đuôi Nhét không thấm nước vào đuôi ống hàn kin đầu ống đèn cồn Sau cho vào hộp hoặt xếp thành bó bọc giấy phần bó ống hút * Ống hút có ghi thể tích: Dùng bơng khơng thấm nước nhét lỏng vào ống hút, gói giấy chiết xếp vào hộp kim loại * Ống nghiệm: đậy ống nghiệm nút bơng khơng thấm nước, bao kín miệng ống giấy xếp vào giỏ kim loại * Bình tam giác bình cầu: Làm nút bình cách nhồi không thấm nước vào miếng vải gạt giấy gói lại Đậy nút bình bọc miệng bình giấy dầu Sau buột dây gai quanh cổ bình * Hộp Perri: ( hộp lồng cấy khuấy), gói giấy chiết xếp vào hộp kim loại * Các dụng cụ khác: Được khử khuẩn nồi hấp 1210C 20 phút • Ống tiêm kim: ống tiêm gói riêng chiết vải hay giấy Kim phải mài nhọn cần, kiểm soát dây kim loại nhỏ chắt không bị tắc Cho kim vào ống đựng kim thủy tinh có bơng khơng thấm nước đáy ống để tránh tà mũi kim, đậy nút ống lại bơng gòn khơng thấm nước • Que quấn gòn: cho hai hoặt nhiều que vào ống thí nghiệm có nắp vặn đậy nắp lại • Bình phiễu lọc Seitd: - Bình lọc: hình tam giác có vòi riêng bên hơng để lắp vào máy hút Vòi bên hơng bình lọc phải nhét bông, bọc giấy buột dây chặt - Phiễu lọc Seitz gồm phận: phận phiễu, đĩa lọc phận đáy ốc vặn để siết chặt phận đáy Mặt gồ ghề đĩa lọc lắp quay phía dung dịch cẩn lọc Bọc giấy đầu phận phiễu buột dây chặt Sau đặt phiễu vào bình lọc ngang qua nút cao su, gói giấy tất lại, buột dây chặt BÀI 3: TRỰC KHUẨN LAO 1.Nơi cư trú tính gây bệnh Giống Mycobacterium có nước, đất, thực phẩm vài loại thú Có loại có khả gây bệnh cho người - Mycobacterium tuberculosis: gây bệnh lao cho người - Mycobacterium bovis: gây bệnh cho bò truyền cho người Trực khuẩn xâm nhập thể đường hô hấp vết lao gọi củ lao(Tubercles) khỏi tự nhiên tượng hóa sợi hay hóa vơi Đó lao sơ nhiễm Theo sau lao sơ nhiễm, trực khuẩn lao tạo nên tổn thương tiên phát hay thứ phát, chỗ hay lan tràn mô khác theo đường huyết bạch huyết Vi khuẩn gây bệnh lao mơ thể, thường lao phổi Trực khuẩn lao dược phân lập từ đàm, chất ngoại tiết, nước dày, nước tiểu hay dịch não tủy 2.ĐẶC TÍNH VÀ HÌNH THỂ Trực khuẩn lao gọi trực khuẩn kháng acide vỉ khõng thể nhuộm phương pháp thông thường, cần phải kéo dài thơi gian tiếp xúc vđi thuốc nhuộm, đun nóng hay cho thêm chất thâm ướt Sau dược nhuộm, chúng kháng lai tẩy màu dùng dịch aeide cồn Trực khuẩn không di dộng, không bào tử với phương pháp nhuộm Zeihl Neclseo (nhuộm kháng acide) trực khuẩn lao trực khuẩn màu đỏ bật xanh, từ trực cầu khuẩn (CoccobaciUi) âếũ trực khuẩn dài, thon thẳng hay con, có kích thước từ 0.8 ~ 5pm chiều dài, 0,2 - 0,6um chiều ngang, đứng hay cụm nhỏ khơng đều; đơi có hạt mịn hay thơ thân trực khuẩn 3.ĐẶC TÍNH LỨA CẤY Tuyệt đốì hiếu khí, tăng trưởng rốt chậm mơi trường bổ Lowenstein iensen (2 - tuần 37oC) 3,1 Mycobacteriuin tubercuiosis Khúm vi khuẩn tăng trưởng sung mẫn khoảng 10 - 25 ngày Khó làm huyền địch vi khuẩn chất sáp màng tẻ bào yêu tô' kết thành dây (cord factor) Khúm nhám, mặt khô biên không đều, hình bơng cải có màu ngà 3.2 Mycobacterium bovis Khúm vi khuẩn lăng ưưâng chậm khoảng 25 - 40 ngày Khúm nhăn, tròn, biêr đều, màu trắng ĐỊNH DANH 4.1 Khào sát hiển vi trực tiếp - Làm phiến phết: phết trực tiếp tất cà mẫu thử nhuộm kháng cồn, kháng acide theo pp Ziehi Neelsen, Kinyoun sửa dổi hay Osol Với mẫu thử lỏng làm phiến phết lừ cặn lắng ly tâm - Khảo sát hiển vỉ:có hai qui ước trả kết quỗ kháo sát hiển vi lìm trực khuẩn lao thường dược sử dụng, Cách ước lượng từ1 + đến + : o Dương tính (+) : Có - vi khuẩn tồn lame o Dương tính (+ +) : Có > 10 vi khuẩn tồn lame, o Dương tính {+++) : Có khoảng 10 vi khuẩn quang trường dầu o Dương lính (++++) trường dầu : Có nhiều 10 vi khuẩn trẽn quang o Âm tinh : Khơng tìm thây vi khuẩn kháng acide lame Trả kết theo qui ước Trung tâm lao vồ bệnh phổi o AFB /100 quang trường AFB ( tức âm lính ) o 1-3 AFB /100 quang trường AFB o 4-9 AFB /100 quang trương Ghi số cụ thể AFB/100 quang trường o 10 — 99 AFB /100 quang trường 1+ o 1-9 AFB / quang trường 2+ o > 10 AFB / quang trường 3+ Ghi chú: Chỉ ghi APB đọc hết dòng /300quang trường) trường hợp 1- 9AFB /100 quang trường : ta đọc 300 quang trường (tức dòng) Rồi lấy kết cao 1(100 quang trường) 3(300 quang trường) kết quang trường : ta đọc 100 quang trường lấy số AFB trung bình cho quang trường 4.2Thực kỹ thuật tập trung Với tất mẫu thử ngoại trừ nước não tủy thường thực kỹ thuật tập trung pp dùng Natri hydroxide - Cho vào mẫu thử dd NaOH 4%, lượng thể tích mẫu thử Lắc mạnh 10 phút Ly tâm 3000 vông/phút 30 phút Thời gian tiếp xúc với NaOH không 45 phút Gạn bỏ phẩn nước vào dung dịch điệt khuẩn Trung hòa cặn lắng với dd H2SO4 5% chứa sẵn chất thị, màu đỏ Phenol Phản ứng trung hòa chấm dứt màu đỏ dịch thử nghiệm, vừa chuyển sang màu vàng 4.3Cấy phân lập Dùng cặn lắng trung hòa theo kỹ thuật tập trung cấy mơi trường - Lowenstein Jensen, làm Dhiến phết nhuộm kháng acide Sau cấy vận chặt nắp chai môi trưởng ủ 37°c Quan sát môi trường câv vào ngày thứ hay 4, vào tuần lễ 1, 2, 3,6 sau cấy Mỗi íần quan sát nên nới lòng nấp khí oxy vào, vặn nắp kín lại Đến tuần lễ thứ khơng có trục khuẩn mọc, kốt luận ầm tính loại bỏ Nếu nực khuẩn mọc, phải quan sát khúm vi khuẩn yếu tô "kết thành dây - 4.4 Phẫn ứng sinh hóa Trường hựp nghi ngờ cồn thực phản ứng như: Catalase Niacin dể định danh BÀI : LẤY VÀ BẢO QUẢN MẪU THỬ LÀM XÉT NGHIỆM SINH HÓA + Muốn xét nghiệm Sinh hố đạt kết xác, ngồi việc pha chế thuốc thử tốt, thực qui trình kỹ thuật, ta cần tới yếu tố khơng phần quan trọng : cách lấy bảo quản mẫu thử đung qui cách thời gian MÁU TOÀN PHẦN & HUYẾT TƯƠNG & HUYẾT THANH |1 CÁCH LẤY - Lấy mẫu vào buổi sáng chưa ăn (hoặc sau bữa ăn từ đến giờ) - Lấy máu tĩnh mạch mặt trước khuỷu tay (sau sát trùng cồn 70° cột garrot) - Dụng cụ lấy mẫu đựng mẫu phải khô, vô trùng, - Nếu cần dùng chất chống đơng phải chọn chất chống đơng thích hợp cho loại xét nghiệm (các dung dịch chống đông cần sấy khổ) LẤY CÁC LOẠI MẪU THỬ 2.1 Máu toàn phần ° Lấy máu tĩnh mạch kim ống chích vơ trùng ° Lấy vừa đủ lượng máu cần dùng Rút kim bơm nhẹ vào thành lọ (hay ống) đựng có chứa sẵn chất chống đơng thích hợp ° Trộn nhẹ lên xuống (hoặc xoay tròn) tay cho mẫu máu hòa với chết chống đông ° Khi làm xét nghiệm nhớ trộn lần ° Mẫu máu tốt phảỉ khơng có chỗ bị đông 2.2 Huyết tương ° Lấy mẫu giống cách lấy máu tồn phần ° Sau đem quay ly tâm với tốc độ 3.000 vòng/l' 5phút ° Lấy hút lấy phần lỏng cho qua ông đựng khác, ta cố mẫu huyết tương (bỏ phần lắng đi) ° Mẫu thử tốt phải màu hồng 2.3 Huyết ° Lấy máu tĩnh mạch vừa đủ số lượng cần ° Rút kim bơm nhẹ vào thành ống đựng khơng có chất chống đơng Để đơng tự nhiên t° phòng Xét nghiệm hay 370C 10 phút - 15 phút ° Dùng que thủy tinh (hay gỗ) nhỏ tách nhẹ cục máu đông khỏi thành ống đựng ° Đem quay ly tâm 3.000 vòng/l' - phút Hút lấy phần lỏng ỏ cho qua ống đựng khác D Mẫu huyết khơng có màu hồng HUYẾT TƯƠNG HUYẾT THANH Máu có chất đơng Máu khơng có chất đơng Sử dụng lượng máu Sử dụng lượng máu nhiều Đục, có màu vàng Trong ,có màu vàng Còn chứa Fibrinogen Mất Fibrinogen Ít bị tiêu huyết tách khỏi tế bào Dễ bị tiêu huyết phải chờ thời gian sớm đơng CÁCH BẢO QUẢN - Mầu phải lấy với dụng cụ khô, vô trừng - Để tránh tiêu huyết bơm máu vào lọ đựng phải rút kim ra, bơm nhẹ vào thành ống ° Không lắc mạnh trộn với chất chống đông c Không ly tâm lâu q 15 phút, vận tốc khơng q 3.000 vòng/ì c Phải tách rời phần lỏng khỏi tế bào sớm tốt, không lâu kể từ lấy máu - Mẫu thử làm tốt, bảo quản tủ lạnh bóng tối (đối với xét nghiệm Bilirubm) 3-4 Đậy nút để tránh bốc nước nhiễm khuẩn BÀI 5: NƯỚC TIỂU ĐỊNH TÍNH NƯỚC TIỂU (mẫu lấy lấy lần) - Vệ sinh đường tiểu - Lấy mẫu vào buổi sáng tốt (nước tiểu đậm đặc) - Lấy mẫu dòng (phần đầu phần cuối bỏ đi) - Lọ đựng phải vô trùng - Để tránh kết sai lạc, nên tránh lấy mẫu : o o o o o Sau uống nhiều nước (nước tiểu bị loãng) Sau ăn Sau lao động nặng đứng lâu tai chỗ Trong lúc dang có kinh nguyệt, (nếu cần thiết phải thử nên ghi rõ) -6 Cần xét nehiệm nsay Định lượng nước tiểu (mẫu nước tiểu 24 giờ) Thời gian 24 thời gian sinh lý bình thường người bao gồm tất cá trạng thái: ăn uống- hoạt động - nghỉ ngơi 2.1Cách lấy ° sáng hôm thức dậy, tiểu bỏ hết phần nước tiểu đẽm ° Sau lấy tồn nước tiểu lần ngày đêm sáng hôm sau tiểu lần cuối (khi thức dậy) ° Đựng cất mẫu nước tiểu chung bình có sẵn chất bảo quản thích hợp ° Đem tất đến phòng Xét nghiệm để thử - Cách bảo quản Mẫu nước tiểu 24 để lâu dễ bị hư làm sai lạc kết Muổn giữ mẫu tốt không ảnh hưởng đến kết xét nghiệm Ta cần bảo quản mẫu dung dịch sau : - Thymol 10% cho từ ml - 10 ml/ Nưđc tiểu 24 (Không dùng khỉ cần định lượng Glucose Bilirubin) - Acid Boric 0,8% (chất ảnh hưdng xét nghiệm) - HC1 đậm đặc ml -10 mỉ/ 24 - Chloroform hay Formalin (không dùng xét nghiệm Glucose) ... Nưđc tiểu 24 (Không dùng khỉ cần định lượng Glucose Bilirubin) - Acid Boric 0,8% (chất ảnh hưdng xét nghiệm) - HC1 đậm đặc ml -10 mỉ/ 24 - Chloroform hay Formalin (không dùng xét nghiệm Glucose)... bơm nhẹ vào thành ống ° Không lắc mạnh trộn với chất chống đông c Không ly tâm lâu 15 phút, vận tốc khơng q 3.000 vòng/ì c Phải tách rời phần lỏng khỏi tế bào sớm tốt, không lâu kể từ lấy máu -... quản thích hợp ° Đem tất đến phòng Xét nghiệm để thử - Cách bảo quản Mẫu nước tiểu 24 để lâu dễ bị hư làm sai lạc kết Muổn giữ mẫu tốt không ảnh hưởng đến kết xét nghiệm Ta cần bảo quản mẫu dung