BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG oo0oo - NGUYỄN NGUYỄN THÀNH NHƠN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN LOÀI SÁN LÁ SONG CHỦ (DIGENEA) KÝ SINH Ở CÁ CHẼM (LATES CALCARIFER BLOCH, 1790) NUÔI TẠI KHÁNH HÕA Ngành đào tạo: Nuôi trồng thủy sản Mã số: 62620301 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ Khánh Hòa – 2017 Công trình đƣợc hoàn thành Trƣờng Đại học Nha Trang Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS.TS Đỗ Thị Hòa PGS.TS Glenn Allan Bristow Phản biện 1: PGS.TS Vũ Ngọc Öt Phản biện 2: TS Nguyễn Thị Thanh Thủy Phản biện 3: TS Nguyễn Hữu Thịnh Luận án đƣợc bảo vệ Hội đồng đánh giá luận án cấp sở họp Trƣờng Đại học Nha Trang vào hồi 14 ngày 20 tháng 12 năm 2016 Có thể tìm hiểu luận án tại: Thƣ viện Quốc gia Thƣ viện Trƣờng Đại học Nha Trang TÓM TẮT NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN Đây nghiên cứu đầy đủ thành phần loài sán song chủ ký sinh cá chẽm nuôi kết hợp hai phương pháp: hình thái học kỹ thuật sinh học phân tử Kết phát loài sán song chủ thuộc giống, họ ký sinh cá chẽm nuôi thương phẩm tỉnh Khánh Hòa, Việt Nam Đặc biệt nghiên cứu xác định loài sán Pseudometadena celebesensis ký sinh trùng đặc hữu vật chủ cá chẽm; Luận án đánh giá mối quan hệ di truyền loài sán song chủ nội ký sinh thể cá chẽm nuôi; Lần tiến hành khảo sát vòng đời phát triển loài sán song chủ Pseudometadena celebesensis có giai đoạn trưởng thành ký sinh ruột cá chẽm nuôi Khánh Hòa Ngƣời hƣớng dẫn (Ký ghi rõ họ tên) PGS TS Đỗ Thị Hòa Nghiên cứu sinh (Ký ghi rõ họ tên) Nguyễn Nguyễn Thành Nhơn DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ Nguyễn Nguyễn Thành Nhơn, Võ Thế Dũng, Võ Thị Dung, Glenn Allan Bristow, Đỗ Thị Hòa (2010), Thành phần ký sinh trùng cá chẽm (Lates calcarifer Bloch, 1790) nuôi Khánh Hòa Tạp Chí Nông nghiệp Phát triển nông thôn, Số 6/2010, trang 59-63.ISSN: 0866-7020 Nguyễn Nguyễn Thành Nhơn, Đỗ Thị Hòa, Glenn Allan Bristow, Phạm Thị Hạnh (2017), “Thành phần mức độ nhiễm sán song chủ cá chẽm (Lates calcarifer) nuôi Khánh Hòa”, Tạp chí Nông nghiệp Phát triển Nông thôn, 6/2017, tr 90-94 Nguyễn Nguyễn Thành Nhơn, Đỗ Thị Hòa, Đặng Thúy Bình, Phạm Thị Hạnh, Trương Thị Oanh (2017), “Nghiên cứu mối quan hệ phát sinh loài sán song chủ ký sinh cá chẽm (Lates calcarifer Bloch, 1790) nuôi Khánh Hòa”, Tạp chí Khoa học Công nghệ Thủy sản, Trường Đại học Nha Trang, 2/2017, tr 63-70 MỞ ĐẦU Cá chẽm (Lates calcarifer Bloch, 1790) đối tượng nuôi có giá trị kinh tế khu vực nhiệt đới cận nhiệt đới thuộc châu Á Thái Bình Dương Từ năm 2005, nghề nuôi cá chẽm phát triển nhanh chóng số tỉnh ven biển nước ta Quảng Ninh, Hải Phòng, Khánh Hòa, Vũng Tàu Hiện nay, cá chẽm nuôi thương phẩm ao nuôi lồng biển Tuy nhiên, năm qua nghề nuôi cá chẽm thường xuyên gặp khó khăn dịch bệnh Ký sinh trùng (KST) tác nhân gây bệnh nguy hiểm, gây tổn thất nhiều Trong đó, sán song chủ ( Digenea) gây bệnh cá c c KST có chu kỳ phát triển phức tạp, qua nhiều giai đoạn ấu trùng, đòi hỏi có từ 1-2 ký chủ trung gian vòng đời, giai đoạn trưởng thành ký sinh trùng thường ký sinh nội quan cá như: máu, gan, mật, ruột, dày… , làm chậm tăng trưởng, ảnh hưởng đến chất lượng sản lượng cá nuôi Hiện giới có số công trình nghiên cứu định danh phân loại đến giống loài tác nhân gây bệnh cá (gồm vi khuẩn KST) phương pháp truyền thống kết hợp với kỹ thuật sinh học phân tử, nhằm phân loại xác đến loài ký sinh trùng xác định mối quan hệ di truyền loài Tuy nhiên, dùng kỹ thuật sinh học phân tử để phân loại đến giống loài tác nhân gây bệnh KST cá lĩnh vực Việt Nam Xuất phát từ thực tế trên, cở sở đào tạo cho phép thực đề tài nghiên cứu luận án “Nghiên cứu thành phần loài sán song chủ (Digenea) ký sinh cá chẽm (Lates calcarifer Bloch, 1790) nuôi Khánh Hòa” Mục tiêu: Xác định thành phần giống loài sán song chủ (Digenea) ký sinh cá chẽm (Lates calcarifer), đánh giá mối quan hệ di truyền KST mức độ nhiễm KST cá chẽm nuôi khả gây bệnh các loài sán song chủ phát Từ đánh giá khả gây bệnh loài sán song chủ cá chẽm nuôi Khánh Hòa Nội dung nghiên cứu: Xác định thành phần sán song chủ ký sinh cá chẽm nuôi Khánh Hòa Phân loại xác định mối quan hệ di truyền loài sán song chủ ký sinh cá chẽm nuôi Khánh Hòa kỹ thuật sinh học phân tử Xác định mức độ nhiễm sán song chủ cá chẽm nuôi Khánh Hòa; Khảo sát phát triển giai đoạn ấu trùng loài sán Pseudometadena celebesensis ký sinh cá chẽm Ý nghĩa luận án - Ý nghĩa khoa học: Đây nghiên cứu đầy đủ thành phần giống loài, mức độ nhiễm mối quan hệ di truyền loài sán song chủ ký sinh cá chẽm (Lates calcarifer) nuôi thương phẩm Khánh Hòa làm sở cho việc phát triển, mở rộng nghiên cứu loài ký sinh trùng khác - Ý nghĩa thực tiễn: Kết nghiên cứu đề tài làm sở để đưa biện pháp phòng bệnh sán song chủ gây nghề nuôi cá chẽm Điểm luận án: - Đây nghiên cứu đầy đủ thành phần loài sán song chủ cá chẽm phương pháp hình thái cấu tạo kết hợp với kỹ thuật sinh học phân tử, kết phát loài sán song chủ thuộc giống, họ ký sinh cá chẽm nuôi thương phẩm Ngoài xác định loài sán Pseudometadena celebesensis ký sinh trùng đặc hữu vật chủ cá chẽm kết hợp phân tích đồng tiến hóa công trình nghiên cứu loài sán - Luận án đánh giá mối quan hệ di truyền loài sán song chủ nội ký sinh thể cá chẽm nuôi - Lần tiến hành khảo sát vòng đời phát triển loài sán song chủ Pseudometadena celebesensis có giai đoạn trưởng thành ký sinh ruột cá chẽm nuôi Khánh Hòa CHƢƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Một số đặc điểm sinh học cá chẽm (Lates calcarifer) Cá chẽm (Lates calcarifer Bloch, 1790) thuộc phân họ cá chẽm (Latinae) họ Centropomidae, thuộc cá vược Cá chẽm phân bố rộng vùng nhiệt đới cận nhiệt đới thuộc tây Thái Bình Dương Ấn Độ Dương Cá chẽm loài có kích thước lớn, khối lượng tối đa đạt 60 kg Cá tăng trưởng chậm giai đoạn đầu, đạt 20 – 30g tốc độ tăng trưởng nhanh chậm lại cá đạt khoảng kg Cá chẽm loài chuyển đổi giới tính, lúc nhỏ cá đực, lớn chuyển sang 1.2 Tình hình nuôi cá chẽm (Lates calcarifer) thƣơng phẩm Thế giới Việt Nam Cá chẽm nuôi phổ biến nhiều nước thuộc khu vực Châu Á – Thái Bình Dương, đặc biệt nước khu vực Đông Nam Á Thái Lan, Phillipine, Đài Loan, Singapore, Malaysia Theo FAO đến năm 2009, sản lượng cá chẽm giới đạt 49.299 với đạt giá trị gần 180 triệu USD, Thái Lan chiếm tới 36% tổng sản lượng, Đài Loan, Malaysia, Indonesia Úc giữ vị trí Nghề nuôi cá chẽm Việt Nam phát triển mạnh từ năm 2005 nuôi ao nuôi lồng b , hình thức nuôi ao phổ biến Thức ăn sử dụng nuôi cá chẽm thương phẩm chủ yếu cá tạp, dễ gây ô nhiễm môi trường điều kiện để cá chẽm dễ bị nhiễm loài giun sán có vòng đời phức tạp sán song chủ (Digenea) 1.3 Nghiên cứu ký sinh trùng cá chẽm Lates calcarifer nuôi Luận án sơ lược tình hình nghiên cứu thành KST cá chẽm giới từ châu Âu, châu Mỹ đến châu Á nghiên cứu Velasquez (1962, 1975); Leong & Wong (1986, 1987, 1990); Liang & Leong (1991); Marty et al., (2001); Anlan & Robir (2005) Ở Việt Nam, nghiên cứu KST cá biển nói chung cá chẽm nói riêng hạn chế Một số nghiên cứu KST chẽm Đỗ Thị Hòa cs (2008); Nguyễn Nguyễn Thành Nhơn cs (2010, 2015); Võ Thế Dũng cs (2012) Luận án sơ lược tình hình nghiên cứu sán song chủ cá biển Thế giới Việt Nam: Ở Châu Âu Châu Mỹ Một số công trình tiêu biểu gồm Möller & Anders (1986), Gibson & Bray (1979); Paradiznik et al (2007); Hollis & Manter (1957); Hisao (1962); Dyer et al (1986); Nahhas & Carlson (1994); Bullard & Overstreet (2006); Braicovich et al (2009) Ở Châu Đại Dƣơng Một số công trình nghiên cứu sán song chủ công bố, bật có nhiều công trình sán song chủ nhà khoa học Bray Cribb, ví dụ Cribb et al (1992, 2002); Bray et al (1979, 1990, 1991, 1993, 1994); Bray & Palm (2009) Ở Châu Á Tại khu vực châu Á, Yamaguti nhà khoa học công bố nhiều công trình nghiên cứu sán song chủ ký sinh loài cá biển bao gồm báo sách, phải kể đến công trình Yamaguti (1941, 1971) Một số nghiên cứu tác giả khác kể đên Valasquez (1962, 1975); Madhavi (1982); Salam et al (1990); Nahhas & Sey (2002); Nahhas & Calson (1994); Shih et al (2004); Chai et al (1984); Chai & Lee (2002); Chai et al (2005) Việt Nam Nguyễn Thị Muội & Đỗ Thị Hòa (2004) công bố kết nghiên cứu KST ký sinh số loài cá có giá trị kinh tế khai thác vùng biển Phú Khánh (nay Khánh Hòa) thời gian từ 1978- 1980, phát 29 loài sán song chủ Arthur Bùi Quang Tề (2006) phát công bố 453 loài KST cá nước ngọt, lợ mặn, có 112 loài sán song chủ Nguyễn Nguyễn Thành Nhơn & cs (2010) phát loài sán song chủ ký sinh cá chẽm (Lates calcarifer) nuôi Võ Thế Dũng cs (2010, 2012) công bố loài sán song chủ, loại ấu trùng metacercaria loài cá mú thuộc giống Epinephelus loài sán song chủ cá chẽm (Lates calcarifer) 1.4 Ứng dụng sinh học phân tử phân loại sán song chủ ký sinh Luận án giới thiệu khái niệm hệ thống học phân tử hệ thống học truyền thống, thị phân tử nghiên cứu di truyền gen nhân gen ti thể, ứng dụng thị phân tử nghiên cứu sán song chủ ký sinh cá như: Nghiên cứu phát sinh loài sán song chủ cá kể đến nghiên cứu Riutort et al (1993); Blair et al (1996); Ethes, (1984, 1985, 1986); Rohde et al (1993,1994); Baverstock et al (1991); Blair et al (1993); Nelles et al (1984); Brook et al (1989); Gibson (1987); Pearson (1992); Blair et al (1996); Carranza et al (1997); Fernandez et al (1998); Littlewood et al (1999); Olson et al (2003); Choudhury et al (2007) CHƢƠNG III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.2 Phát hiện, thu thập, cố định phân loại thành phần giống loài sán song chủ ký sinh cá chẽm nuôi Khánh Hòa phƣơng pháp truyền thống Nghiên cứu phát loài sán thuộc giống, họ, Bảng 3.2 Thành phần loài, mức độ nhiễm vị trí ký sinh Loài sán Tranversotrema patialanse Erilepturus hamati Pseudometadena celebesensis Buccephalus margaritae Helicometra fasciata* Elytrophallus sp.* sán song chủ (n=1.080) Vị trí ký Tỷ lệ nhiễm sinh (%) Cường độ nhiễm (trùng/cá) 1,88 ± 2,26 (1 – 28) 4,84 ± 5,02 (1 – 37) 16,57 ± 22,24 (1 – 186) 1,33 ± 0,59 (1 – 3) Da 15,19 Dạ dày 50,83 Ruột 40,65 Ruột 3,33 Ruột - - Ruột - - (Ghi chú: Trong ngoặc giá trị lớn nhỏ Loài * phát nên không tính mức độ nhiễm so sánh) Bảng 3.1 Thành phần loài sán song chủ ký sinh cá chẽm nuôi Khánh Hòa Ngành Lớp Bộ Plathelminthes Plagiorchiida Scheider, 1873 Trematoda La Rue, 1957 Rudolphi,1808 Họ Giống Loài Opecoelidae Ozaki, 1925 Helicometra Odhner, 1902 H fasciata Rudolphi, 1819 Bucephalidae Poche, 1907 Bucephalus Baer, 1826 B margaritae Baer, 1827 Erilepturus Woolcock, 1952 E hamati Yamaguti, 1934 Hemiuridae Luhe, 1901 10 Cryptogonimidae Ciurea, 1933 Elytrophallus Manter, 1940 Elytrophallus sp Pseudometadena Yamaguti, 1952 P celebesensis Yamaguti, 1952 Transversotrematidae Transversotrema T patialense Witengberg, 1944 Soparkar, 1924 Yamaguti, 1954 Trong loài sán tìm thấy nghiên cứu này, loài có mức độ cảm nhiễm cao Erilepturus hamati với TLCN CĐCN 50,83% 4,84±5,02 trùng/cá; Tiếp theo loài Pseudometadena celebesensis với mức độ cảm nhiễm 40,65% 16,57±22,24 trùng/ cá Loài Buccephalus margaritae có MĐN thấp 3,33 % 1,33 ± 0,59 trùng/cá Giữa hai hình thức nuôi cá chẽm, qua năm nghiên cứu (20102012), loài có TLCN (%) khác có ý nghĩa thống kê, có loài B margaritae khác ý nghĩa thống kê Tuy nhiên, với CĐCN có trường hợp khác có ý nghĩa thống kê E hamati hai hình thức nuôi cá chẽm Hình thái cấu tạo: Tất sáu loài sán song chủ Bảng 3.2 mô tả rõ ràng, k m theo số liệu kích thước thể, kích thước phận dùng để định loại thảo luận Mỗi loài sán có hình chụp hình vẽ tổng thể hình vẽ phận luận án Tính đặc hữu vật chủ sán song chủ (Host-specificity) + Tính đặc hữu sán song chủ cá chẽm khảo sát thông qua trình đồng tiến hóa Kết kiểm tra giá trị P-value cho thấy có loài Pseudometadena celebesensis cá chẽm có xảy trình đồng tiến hóa (P ≤ 0.05) 11 Bảng 3.8 Kết Parafit loài sán song chủ cá chẽm Giá trị P-value đƣợc tính toán sau phân tích 999 hoán vị ngẫu nhiên Vật chủ Ký sinh trùng P-value Lates calcarifer Transversotrema patialense 0.999 Lates calcarifer Bucephalus margaritae 0.976 Lates calcarifer Pseudometadena celebesensis 0.043* Lates calcarifer Helicometra fasciata 0.981 Lates calcarifer Ertlepturus hamati 0.998 Lates calcarifer Prosorhynchus pacificus 0.169 Dicentrarchus labrax Bucephalus margaritae 0.390 Stereolepis gigas Helicometra fasciata 0.426 Lateolabrax japonicus Ertlepturus hamati 0.341 Paralabrax nebulifer Prosorhynchus pacificus 0.185 Global test (Kiểm tra 0.008 tổng thể) * Giá trị ý nghĩa (P ≤ 0.05) + Kết hợp với việc tìm hiểu tham khảo nhiều công trình công bố sán song chủ ký sinh cá biển cho thấy đa số loài thuộc sán song chủ ký sinh loài cá khác loài H fasciata, T patialense, E hamati tìm thấy loài cá mú thuộc giống Epinephelus Việt Nam (Võ Thế Dũng, 2008, 2010) Trên giới, loài H fasciata tìm thấy ký sinh nhiều loài cá biển khác (Aken et al., 2006) Loài T patialence ký sinh vảy cá cá nước cá biển (Velasquez, 1961) Loài E hamati ký sinh nhiều loài cá biển khác đề cập phần mô tả loài sán Loài B.margaritae nhiều tác giả tìm 12 thấy nhiều loài cá biển khác Nahhas Calson (1994) tìm thấy cá Caranx latus, Velasquez (1975) tìm thấy cá Carax sp Philippine, Hisao (1962) phát cá Centropomus pectinatus Mexico Loài Elytrophallus mexicanus Rivera (1995) tìm thấy cá mú Epinephelus labriformis vùng biển Mexico Chỉ riêng loài P.celebesensis nghiên cứu nhiều tác giả phát ký sinh ruột cá chẽm vùng biển khác Rukert et al (2008) Celebes; Leong Wong (1982, 1987, 1992) Malaysia, Singapore Thái Lan; Supranee Chinabut (1994) Thái Lan; Trong ruột cá chẽm vùng biển Philippine, Velasquez (1962), Ruangpan (1982), Arthur et al (1997) công bố tìm thấy loài sán Cho đến chưa thấy công trình giới công bố bắt gặp loài P.celebensensis ký sinh loài cá biển khác Do vậy, với kết nghiên cứu tất điều thảo luận trên, kết luận rằng, cá chẽm (Lates calcarrifer) vật chủ ưa thích loài sán này, xem loài P celebensensis giai đoạn trưởng thành ký sinh trùng đặc hữu cá chẽm 3.3 Phân loại xác định mối quan hệ loài sán song chủ ký sinh cá chẽm nuôi Khánh Hòa sinh học phân tử 3.3.1 Khuếch đại, giải trình tự ADN sán song chủ cá chẽm Sử dụng ADN tổng số tách chiết làm khuôn, Sản phẩm PCR thu có kích thước 1790 bp (18S), 1200 bp (28S) 900 bp (ITS1) rRNA 13 Hình 3.8 Đoạn gen 18S 28S Hình 3.9 Đoạn gen ITS1 3.3.2 So sánh khác biệt trình tự loài sán song chủ sinh cá chẽm + Giữa loài sán song chủ ký sinh cá chẽm, khác biệt di truyền gen 18S rRNA nằm khoảng 200g (142 cá) Bốn loài SLSC la T patialense, E hamati, P celebesensis B margaritae phát ký sinh nhóm cá chẽm có kích cỡ khác với mức độ nhiễm khác tùy loài, cỡ cá 19 Nhóm cá > 200g có mức độ nhiễm cao nhất, loài P celebesensis có tỷ lệ cường độ cảm nhiễm cao 81,67% 27,69±25,09 trùng/cá, loài E hamati vơi 78,17% 8,24±6,53 trùng/cá Ngược lại, nhóm cá có khối lượng nhỏ ( 200g, cá có khối lượng lớn bị nhiễm SLSC với mức độ nhiễm cao ngược lại 3.5 Khảo sát phát triển giai đoạn ấu trùng sán Pseudometadena celebesensis Khảo sát ấu trùng cercaria ốc thu trực tiếp ao nuôi cá chẽm bị nhiễm sán với mức độ nhiễm cao Cam Ranh, Khánh Hòa không tìm thấy; Khảo sát ký chủ trung gian thứ 2: kiểm tra ấu trùng metacercaria loài cá tạp: cá đối (Mugil sp.-họ Mugilidae), cá nục (Decapterus sp.họ Carangidae), cá liệt (một số giống loài thuộc họ Leiognathidae), cá hố (Trihiurus sp.-họ Trihiuridae) cá giò hay cá kình (Siganus sp.-họ Siganidae) bố trí thí nghiệm cho cá chẽm giống (6-9cm) ăn Thí nghiệm thực bắt đầu ngày 28/3/2014, 3/5/2014 10/6/2014 Các loài cá tạp mua từ chợ trước thí nghiệm cho cá chẽm ăn, kiểm tra ấu trùng sán song chủ ký sinh Kết thu dạng metacercaria M1 (Hình 3.12 luận án), M2 (Hình 3.13), M3 (Hình 3.14) ký sinh cá đối tiến hành mô tả, chụp hình, vẻ đo phận phân loại 20 Bảng 3.18: Mức độ nhiễm hậu ấu trùng metacercaria sán song chủ cá đối (n=16) Loại dạng metacercaria Mức độ nhiễm Ấu trùng metacercaria Dạng M1 Dạng M2 Dạng M3 Tỷ lệ nhiễm (%) 87,50 62,50 81,25 31,25 Cường độ nhiễm 7,79 ± 4,06 1,90 ± 0,74 6,23 ± 4,15 1,80 ± 0,84 (metacercaria/cá) (3 – 14) (1 – 3) (1 -12) (1 – 3) Kết bảng 3.18 thể rằng, cá đối bị nhiễm ấu trùng metacercaria sán song chủ với tỷ lệ cảm nhiễm cao (87,50%) Kết kiểm tra cá chẽm sau 30 ngày thí nghiệm cho ăn cá tạp thấy lô cá chẽm cho ăn cá đối phát sán song chủ P celebesensis trưởng thành Tiến hành mô tả, chụp hình, vẻ đo phận phân loại (Hình 3.14 luận án) Bảng 3.21 Mức độ nhiễm sán song chủ cá chẽm cho ăn cá đối Mức độ nhiễm Đợt Đợt Đợt Số cá kiểm tra (n) 46 45 41 TLCN (%) 71.74 82.22 70.73 CĐCN (trùng/cá) 2.36 ± 1.25 2.32 ± 1.06 2.69 ± 1.14 Kết đợt thí nghiệm, bể cá cho ăn cá liệt, cá giò, cá hố, cá nục bể đối chứng không tìm thấy diện sán song chủ ấu trùng sán song chủ ký sinh Chỉ riêng bể cho ăn cá đối đợt phát sán song chủ P celebesensis ký sinh ruột với mức độ nhiễm cao, cao 21 đợt thí nghiệm với TLN CĐN sán 82,22% 2,32 ± 1,06 trùng/cá, đợt mức độ nhiễm 71,74% 3,36 ± 1,25 trùng/cá, đợt có mức độ nhiễm 70,73% 2,69 ± 1,14 trùng/cá Nhìn chung, TLCN qua đợt thí nghiệm cao CĐCN nhiễm lại thấp Kết giải phẩu cá chẽm từ thí nghiệm cho ăn cá đối tìm thấy sán P.celebesensis ký sinh ruột cá chẽm gồm có non trưởng thành Kết thu từ ba đợt thí nghiệm chứng tỏ cá đối (Mugil sp.) ký chủ trung gian thứ II loài sán song chủ Pseudometadena celebesensis, xem loài ký sinh trùng đặc hữu ký sinh cá chẽm (Lates calcarifer) phân tích tính đặc hữu Đây nghiên cứu tính đặc hữu ký sinh loài sán song chủ P celebesensis loài cá chẽm nuôi Khánh Hòa, Việt Nam việc phát cá đối (Mugil sp.) số loài cá ký chủ trung gian thứ II loài sán có ý nghĩa khoa học thực tế không nhỏ, sở để đề xuất biện pháp kỹ thuật nhằm giảm thiểu mức độ nhiễm sán song chủ (Digenea) nghề nuôi cá chẽm thương phẩm Việt Nam 22 CHƢƠNG IV KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Ý KIẾN 4.1 Kết luận Đã phát loài sán song chủ (Digenea) ký sinh loài cá chẽm (Lates calcarifer) nuôi Khánh Hòa, loài Helicometra fasciata, Bucephalus margaritae, Erilepturus hamati, Pseudometadena celebesensis, Elytrophallus sp ký sinh đường tiêu hóa (dạ dày ruột) loài Transversotrema patialense ký sinh gốc vảy cá chẽm Trong số loài sán song chủ tìm thấy ký sinh cá chẽm, có loài Pseudometadena celebesensis có tỷ lệ cường độ cảm nhiễm cao, gây tác hại định cá chẽm, ra, loài sán song chủ thể rõ tính đặc hữu vật chủ cá chẽm Không có khác biệt rõ ràng thành phần giống loài sán song chủ mức độ nhiễm (gồm tỷ lệ % cường độ nhiễm) cá chẽm nuôi thương phẩm Khánh Hòa qua năm nghiên cứu, từ năm 2010-2013 Tuy nhiên, có khác biệt mức độ nhiễm SLSC cá chẽm hình thức nuôi: ao đất ven biển nuôi lồng biển, cá chẽm nuôi ao đất ven biển thường bị nhiễm loài KST với mức độ cao cá nuôi lồng b biển Bốn loài sán song chủ Pseudometadena celebesensis, Erilepturus hamati, Transversotrema patialense Helicometra fasciata ký sinh cá chẽm Khánh Hòa có khác biệt đặc điểm di truyền gen 18S rRNA dao động từ từ