BỘ GIÁO VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG LÊ HƯƠNG THỦY NGHIÊN CỨU THỦY PHÂN BÃ RONG CÂU (Gracilaria verrucosa) BẰNG ENZYM CELLULASE TỪ VI KHUẨN ĐỂ ỨNG DỤNG TRONG SẢN XUẤT THỨC ĂN NUÔI CÁ RÔ PHI ĐƠN TÍNH GIAI ĐOẠN THƯƠNG PHẨM LUẬN ÁN TIẾN SĨ KỸ THUẬT KHÁNH HÒA, 2017 i BỘ GIÁO VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG LÊ HƯƠNG THỦY NGHIÊN CỨU THỦY PHÂN BÃ RONG CÂU (Gracilaria verrucosa) BẰNG ENZYM CELLULASE TỪ VI KHUẨN ĐỂ ỨNG DỤNG TRONG SẢN XUẤT THỨC ĂN NUÔI CÁ RÔ PHI ĐƠN TÍNH GIAI ĐOẠN THƯƠNG PHẨM LUẬN ÁN TIẾN SĨ KỸ THUẬT Chuyên ngành : Công nghệ chế biến thủy sản Mã số : 60.54.10.05 Người hướng dẫn khoa học: GS.TSKH Nguyễn Trọng Cẩn PGS.TS Vũ Ngọc Bội KHÁNH HÒA, 2017 ii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa công bố công trình khác Nha Trang, Ngày tháng Tác giả luận văn Lê Hương Thủy iii năm 2017 LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành Luận án Trước hết xin gửi tới Ban Giám hiệu, Lãnh đạo Khoa Sau đại học Ban Chủ nhiệm Khoa Công nghệ Thực phẩm kính trọng, niềm tự hào học tập nghiên cứu Trường năm qua Sự biết ơn sâu sắc xin giành cho Thầy GS.TSKH Nguyễn Trọng Cẩn - nguyên Hiệu trưởng - Trường Đại học Nha Trang PGS.TS Vũ Ngọc Bội Trưởng khoa Công nghệ Thực phẩm tận tình hướng dẫn động viên suốt trình thực Luận án Xin cám ơn Lãnh đạo Viện Nghiên cứu Hải sản cán Phòng Nghiên cứu Công nghệ Sau thu hoạch, Phòng Thí nghiệm Trọng điểm Quốc gia Công nghệ gen - Viện Công nghệ Sinh học, Xí nghiệp Giống thủy sản Hải Phòng, Viện Công nghệ Sinh học Thực phẩm - Trường Đại học Công nghiệp Tp Hồ Chí Minh tận tình giúp đỡ tạo điều kiện cho suốt thời gian thực Luận án vừa qua Đặc biệt, xin ghi nhớ tình cảm, giúp đỡ, động viên gia đình bạn bè luôn chia sẻ trình nghiên cứu Tôi xin chân thành cảm ơn! Nha Trang, Ngày tháng Tác giả luận văn Lê Hương Thủy iv năm 2017 MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN .i LỜI CẢM ƠN iv DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT viii DANH MỤC BẢNG ix DANH MỤC HÌNH .xi DANH MỤC SƠ ĐỒ xiii DANH MỤC BIỂU ĐỒ .xiv TÓM TẮT NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN xv MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Nguyên liệu rong biển tình hình sản xuất Agar .3 1.1.1 Nguyên liệu rong biển 1.1.2 Các quy trình sản xuất agar 1.1.3 Thành phần bã thải agar 1.1.4 Các phương pháp xử lý bã thải agar 1.2 Tổng quan Cellulase .11 1.3 Enzym Cellulase 13 1.3.1 Định nghĩa phân loại .13 1.3.2 Tính chất 14 1.3.3 Cơ chế thủy phân cellulose 15 1.3.4 Cơ chế tác dụng cellulase 16 1.4 Vi sinh vật tổng hợp Cellulase 18 1.4.1 Giới thiệu chung nhóm vi sinh vật tổng hợp cellulase .18 1.4.2 Một số chủng vi sinh vật ứng dụng nhiều sản xuất cellulase 22 1.4.3 Ứng dụng enzym cellulase vi sinh vật 24 1.4.4 Môi trường nuôi cấy nguồn nguyên liệu 26 1.4 Phương pháp thu nhận enzym cellulase .27 1.5 Sản lượng nuôi cá rô phi .30 1.6 Đặc điểm sinh học cá rô phi .32 v 1.6.1 Phân loại 32 1.6.2 Đặc điểm hình thái: .32 1.6.3 Đặc điểm dinh dưỡng sinh trưởng 33 1.6.4 Nhu cầu dinh dưỡng cá rô phi .34 1.6.5 Nhu cầu dinh dưỡng ảnh hưởng thức ăn lên sinh trưởng cá rô phi .38 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 42 2.1 Đối tượng 42 2.1.1 Bã thải rong sau sản xuất agar .42 2.1.2 Giống vi sinh vật sinh cellulase 42 2.2 Phương pháp nghiên cứu 43 2.2.1 Phương pháp phân tích 43 2.2.2 Các phương pháp thu nhận xác định hoạt tính cellulase 44 2.2.3 Phương pháp nuôi cấy đánh giá khả sinh tổng hợp cellulase vi sinh vật 47 2.2.4 Phương pháp xây dựng mô hinh thực nghiệm 50 2.3 Hóa chất thiết bị chủ yếu sử dụng luận án 57 2.3.1 Hóa chất .57 2.3.2 Thiết bị .57 2.4 Phương pháp xử lý số liệu 58 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN .59 3.1 Khảo sát đánh giá khối lượng thành phần hóa học bã thải rong câu vàng sau sản xuất agar 59 3.2 Tuyển chọn chủng vi sinh vật nghiên cứu số tính chất chủng vi sinh vật tuyển chọn .61 3.2.1 Kết nghiên cứu tuyển chọn chủng giống vi sinh vật 61 3.2.2 Nghiên cứu số tính chất chủng vi sinh vật tuyển chọn 65 3.3 Nghiên cứu yếu tố ảnh hưởng đến trình nuôi cấy chủng vi khuẩn B Subtilis VTCC B-505 B Lichenformis (Li) ứng dụng thủy phân bã rong câu (G Verrucosa) sau sản xuất Agar 72 3.3.1 Xác định điều kiện thích hợp cho trình nuôi sản xuất enzyme cellulase từ chủng B505 Li 72 vi 3.3.2 Đề xuất quy trình nuôi cấy thu nhận chế phẩm cellulase thô 80 3.3.3 So sánh đánh giá hoạt tính cellulase chủng Li B505 với chế phẩm cellulase từ VSV khác .84 3.3.4 Nghiên cứu thủy phân bã thải rong sau sản xuất agar enzyme cellulase từ hai chủng vi khuẩn B 505 Li 88 3.4 Thử nghiệm sử dụng chế phẩm thủy phân bã thải rong thức ăn nuôi cá rô phi 95 3.4.1 Xây dựng công thức thức ăn nuôi cá rô phi 95 3.4.2 Đề xuất quy trình sản xuất thức ăn nuôi cá rô phi .97 3.4.3 Điều kiện môi trường nuôi thử nghiệm cá rô phi 100 3.4.4 Thử nghiệm nuôi cá rô phi thức ăn bổ sung chế phẩm thủy phân bã rong .104 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .108 DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ CỦA TÁC GIẢ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN 110 TÀI LIỆU THAM KHẢO 111 vii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT A530 : Đo OD bước sóng 530nm B26 : Vi khuẩn Bacillus subtilis VTCC-B-26 B505 : Vi khuẩn Bacillus subtilis VTCC-B-505 CMC : Carbonyl – methyl cellulose CMCase CPF Thailand ĐC : Carbonyl – methyl cellulase DNSA : –hydroxyl – 3,5 dinitrobenzoic acid DO : Hàm lượng oxy hòa tan DWG FCR : Tốc độ tăng trưởng tuyệt đối : Food and Agriculture Organization of the United Nations (Tổ Chức Liên Hiệp Thế Giới Lương Thực Nông Nghiệp) : Feed convertion ratio (Hệ số chuyển đổi thức ăn) K-Na : TartratePotassium Sodium Tartrate Tetrahydrate Li : Vi khuẩn Bacillus lichenformis NT : Nghiệm Thức Nxb : Nhà xuất OD : Optical Density ( mật độ quang học) TCA : Tricloacetic axit TLS : Tỷ lệ sống TM & SX : Thương mại sản xuất TNHH : Trách nhiệm hữu hạn USD : Đô la Mỹ VSV : Vi sinh vật Wt : Khối lượng cá ứng với thời điểm t FAO : Tập đoàn Nông sản Charoen Pokphand Thái Lan : Đối chứng viii DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Vi sinh vật phân hủy lignocellulose 19 Bảng 1.2 Các vi khuẩn có hoạt tính cellulase riêng cao (µmol/phút/mg) 20 Bảng 1.3 Phân biệt cá đực, cá 32 Bảng 1.4 Giới hạn thành phần thức ăn có giá thành cho cá rô phi giai đoạn 35 Bảng 1.5 Cung cấp bổ sung vitamin khoáng chất thức ăn cá rô phi 36 Bảng 1.6 Tiêu chuẩn kỹ thuật thức ăn nuôi cá rô phi chế độ ăn nuôi lồng ao thâm canh 37 Bảng 1.7 Thành phần hoá học cá rô phi nuôi thức ăn viên có hàm lượng protein 34,2 (%) 40 Bảng 1.8 Nuôi cá rô phi thức ăn viên có hàm lượng protein (%) khác 40 Bảng 1.9: Nuôi cá rô phi với tỷ lệ thức ăn (%)/thân khác 41 Bảng 2.1 Xây dựng đường chuẩn glucose 46 Bảng 3.1 Khối lượng bã thải rong sau sản xuất agar từ vùng rong nguyên liệu khác .59 Bảng 3.2 Hàm lượng chất bã rong câu số sở sản xuất Agar .60 Bảng 3.3 Hàm lượng kim loại nặng bã rong câu số sở sản xuất Agar .60 Bảng 3.4 Hoạt tính cellulase ngoại bào 17 chủng vi sinh vật nghiên cứu .62 Bảng 3.5 Hoạt tính enzym cellulase chủng Li, B505, B26 CFd 63 Bảng 3.6 Hoạt tính cellulase ngoại bào chủng Li, B505 đĩa thạch có chất bột giấy 0,2% 69 Bảng 3.7 Khả thủy phân bã thải agar cellulase từ chủng Li B505 70 Bảng 3.8 Khả sinh trưởng tiết cellulase ngoại bào chủng B505 nuôi môi trường khác .73 Bảng 3.9 Khả sinh trưởng tiết cellulase ngoại bào chủng Li nuôi cấy môi trường khác 73 Bảng 3.10 Khả sinh trưởng vòng hoạt tính chủng B505 chủng Li nhiệt độ khác 76 ix Bảng 3.11 Khả sinh trưởng tiết cellulase chủng B505 chủng Li pH khác 77 Bảng 3.12 Khả sinh trưởng tiết cellulase ngoại bào chủng Li theo thời gian nuôi cấy 78 Bảng 3.13 Khả sinh trưởng tiết cellulase ngoại bào chủng B505 theo thời gian nuôi cấy 79 Bảng 3.14 So sánh hoạt tính cellulase từ chủng VSV (A niger, T konigii, Li, B505 T3) đĩa thạch có CMC 0,2% 85 Bảng 3.15 So sánh hoạt tính cellulase từ chủng VSV (A niger, T konigii, Li, B505 T3) đĩa thạch có chất bột giấy 0,2% 87 Bảng 3.16 Kết thí nghiệm mô hình Box-Behnken 89 Bảng 3.17 Kết xử lý số liệu phần mềm DX6 89 Bảng 3.18 Kết dự đoán tối ưu cho tỷ lệ Naa/Nts theo mô hình Box-Behnken 91 Bảng 3.19 Kết kiểm chứng tối ưu theo tiên đoán thực nghiệm 92 Bảng 3.20 Thành phần hóa học nguyên liệu phối trộn 95 Bảng 3.21 Thành phần nguyên liệu công thức thức ăn phối trộn bã rong thủy phân 99 Bảng 3.22 Dao động yếu tố môi trường trình thí nghiệm .101 Bảng 3.23 Ảnh hưởng công thức thức ăn đến sinh trưởng cá rô phi 80 ngày nuôi 104 x 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 28 28 28 28,5 28,5 28,5 28,5 28 28 28 28 28 28 28 28 28,5 28,5 28,5 28,5 28 28 28 28 28 28 28 28 28,5 28,5 28 28 28 27,5 27,5 28 28 28 28 28,5 28,5 29 29 29,5 29 29 28,5 29 29 28,5 29 29 29 29,5 29,5 29 29,5 29 29 29 29 29 28,5 29 29 28,5 29 29 28,5 28,5 29 28,5 28,5 28,5 28 28,5 28,5 7,2 7,2 7,1 7,1 7,2 7,2 7,2 7,2 7,1 7,1 7,2 7,2 7,3 7,3 7,1 7,1 7,2 7,3 7,2 7,2 6,8 6,9 6,9 6,6 6,7 6,6 6,8 6,8 6,7 6,8 6,8 6,8 6,9 6,7 7,1 7,1 7,2 7,2 24 7,6 7,6 7,5 7,6 7,7 7,5 7,3 7,3 7,2 7,2 7,3 7,6 7,7 7,7 7,5 7,5 7,5 7,5 7,6 7,6 7,2 7,4 7,5 7,4 7,4 7,4 7,4 7,5 7,2 7,3 7,4 7,3 7,4 7,7 7,6 7,6 7,7 7,6 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 5 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 5 5 5,5 5,5 5,5 5 5 5,5 5 5,5 5,5 5,5 5 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 5 5 5,5 5,5 5,5 5,5 6 5,5 5,5 5,5 5,5 5 5 5 5,5 5,5 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 28 27,5 27,5 27,5 27,5 27,5 27,5 28 28 28 28 28 28 28 28,5 28,5 28,5 28 28 28 28,5 28,5 29 29 29 28,5 28,5 28 28 28 27,5 27,5 27,5 27 27 27 27 27 28 28 28 27,5 28 28 28 28,5 28,5 28 28,8 28,5 29 29 29 29 28,5 28,5 28,5 29 29 29,5 29,5 29,5 29 29 28,5 28,5 28,5 28 28 28 27,5 27,5 27,5 27,5 28 28 7,3 7,4 7,1 7,1 7,2 7,3 7,2 7,2 6,8 6,9 6,9 6,8 6,8 6,7 6,8 6,8 6,7 6,8 6,8 6,8 6,9 7,2 7,1 7,1 7,2 7,2 7,3 7,4 7,1 7,1 7,2 7,3 7,2 7,2 6,8 6,9 6,9 6,7 25 7,7 7,7 7,6 7,6 7,6 7,6 7,7 7,7 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,2 7,3 7,3 7,3 7,3 7,8 7,7 7,4 7,7 7,6 7,6 7,7 7,6 7,7 7,7 7,6 7,6 7,6 7,6 7,7 7,7 7,3 7,3 7,5 7,4 5,5 5 5,5 5,5 5 5,5 5,5 5,5 5,5 5 5 5,5 5 5,5 5,5 5,5 5 5,5 5 5 5,5 5 5,5 5,5 5,5 6 5,5 5,5 5,5 5 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 5 5 5 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 5 5 5 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 27,5 28 28 28 28,5 28,5 28,5 28 28 28 27,5 27,5 28 28 28 28 28 27,5 27,5 27,5 27,5 28,5 28,5 28,5 28,5 28 28 28 28 28 28 28,5 28,5 28,5 28 28,5 29 29 28,5 29 29 29 28,5 28,5 29 28,5 28,5 28,5 28 28,5 28,5 28 28 28 27,5 28 29 29,5 29 29 28,5 29 29 28,5 29 29 28,5 29 28,5 28,5 6,8 7 6,9 6,9 6,7 6,8 6,8 6,8 6,9 6,7 7,1 7,1 7,2 7,2 7,3 7,4 7,1 7,1 7,2 7,1 7,2 7,2 7,2 7,2 7,1 7,1 7,2 7,2 7,3 7,2 7 26 7,4 7,2 7,2 7,2 7,2 7,4 7,2 7,3 7,4 7,3 7,4 7,7 7,6 7,6 7,7 7,6 7,7 7,7 7,6 7,6 7,6 7,6 7,7 7,5 7,3 7,3 7,2 7,2 7,3 7,6 7,7 7,5 7,5 7,6 7,5 5,5 5,5 5,5 5 5,5 5 5,5 5,5 5,5 5,5 5 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 5 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 5 5 5 5,5 5,5 5,5 5,5 6 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 5 5,5 Bảng IV.4: Bảng mô tả thống kê số liệu môi trường nước ao nuôi Descriptive Statistics Minimum Maximum Mean Std Deviation Nhiệt độ sáng (oC) 26,5 29 27,99 0,51 Nhiệt độ chiều (oC) 27 29,5 28,61 0,57 DO sáng (mg/l) 4,5 5,23 0,29 DO chiều (mg/l) 5,40 0,36 pH sáng 6,6 7,4 7,04 0,21 pH chiều 7,2 7,8 7,49 0,16 Bảng IV.5: Bảng số liệu đo tăng trọng cá thí nghiệm sau 80 ngày nuôi Nghiệm Mẫu thức CT1 0% CT 5% CT3 10% 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Trọng lượng cá ban đầu (g/con) 212 208 204 208 208 204 206 205 205 200 205 208 204 212 208 204 206 205 205 210 208 210 Trọng lượng cá cuối (g) 20 ngày (g/con) 40 ngày (g/con) 60 ngày (g/con) 80 ngày (g/con) 310 315 300 305 308 310 312 315 305 300 270 278 272 273 276 274 278 272 275 274 285 298 430 420 430 435 430 427 435 420 430 425 390 402 405 395 390 398 400 397 395 398 414 420 540 535 538 545 545 535 525 545 535 540 520 518 510 505 510 518 520 515 512 515 546 540 630 640 635 625 628 625 628 632 630 628 656 650 648 645 658 650 652 655 657 652 685 670 27 CT4 15% CT 20% CT6 25% 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 212 208 205 204 206 205 208 210 210 208 204 208 208 204 190 205 205 205 212 208 190 208 208 204 206 205 205 212 190 208 204 208 210 204 206 210 205 205 292 298 292 297 302 296 295 297 340 335 332 336 338 330 335 330 340 337 340 338 335 330 328 345 335 330 335 335 355 350 345 347 342 340 335 348 350 340 410 407 420 418 416 418 416 412 470 475 473 480 478 475 470 480 476 477 468 475 458 465 468 460 462 460 465 468 455 445 440 455 450 448 452 455 455 445 28 550 556 542 548 538 542 548 543 610 595 605 605 600 605 608 602 610 607 600 605 595 603 598 592 597 605 600 603 585 590 595 578 595 582 590 585 587 595 679 678 665 679 672 677 665 680 765 765 768 760 772 770 765 760 765 760 740 738 735 730 738 735 730 738 737 730 680 685 678 680 682 685 690 695 685 690 Bảng IV.6 Kết nuôi thử nghiệm Mẫu thí nghiệm 10 GTTB Std 10 GTTB Std 10 GTTB Std Nghiệm thức CT (0%) Mẫu 1 1 1 1 1 CT (5%) 1 1 1 1 1 CT (10%) 1 1 1 1 1 CT (15%) Trọng lượng cá ban đầu (g) 212 208 204 208 208 204 206 205 205 200 206 Trọng lượng cá cuối (g) 630 640 635 625 628 625 628 632 630 628 630,1 DWG (g/ngày) 5,23 5,40 5,39 5,21 5,25 5,26 5,28 5,34 5,31 5,35 5,30 3,23 205 208 204 212 208 204 206 205 205 210 206,7 2,71 208 210 212 208 205 204 206 205 208 210 207,6 2,59 210 4,61 656 650 648 645 658 650 652 655 657 652 652,3 4,19 685 670 679 678 665 679 672 677 665 680 675 6,7 765 0,07 5,64 5,53 5,55 5,41 5,63 5,58 5,58 5,63 5,65 5,53 5,57 0,07 5,96 5,75 5,84 5,88 5,75 5,94 5,83 5,90 5,71 5,88 5,84 0,08 6,94 29 10 GTTB Std 10 GTTB Std 10 GTTB Std 1 1 1 1 CT (20%) 1 1 1 1 1 CT (25%) 1 1 1 1 1 208 204 208 208 204 190 205 205 205 204,7 5,56 212 208 190 208 208 204 206 205 205 212 205,8 6,2 190 208 204 208 210 204 206 210 205 205 205 5,73 30 765 768 760 772 770 765 760 765 760 765 4,19 740 738 735 730 738 735 730 738 737 730 735,1 3,81 680 685 678 680 682 685 690 695 685 690 685 5,35 6,96 7,05 6,90 7,05 7,08 7,19 6,94 7,00 6,94 7,00 0,09 6,60 6,63 6,81 6,53 6,63 6,64 6,55 6,66 6,65 6,48 6,62 0,09 6,13 5,96 5,93 5,90 5,90 6,01 6,05 6,06 6,00 6,06 6,00 0,08 Bảng IV.7: Tỷ lệ sống cá rô phi nuôi thử nghiệm loại thức ăn khác Mẫu thí nghiệm GTTB Std GTTB Std GTTB Std GTTB Std GTTB Std GTTB Std Nghiệm thức CT (0%) Số lượng cá ban đầu (con) 24 24 24 24 số lượng cá cuối (con) 18 17 20 CT (5%) 24 24 24 24 19 20 19 CT (10%) 24 24 24 24 20 19 20 CT (15%) 24 24 24 24 20 21 22 CT (20%) 24 24 24 24 22 22 20 21,33 CT (25%) 24 24 24 24 22 21 19 Tỷ lệ sống (%) 75 70,83 83,33 76,39 Bảng IV.8 : Hệ số thức ăn nuôi thử nghiệm 31 6,36 79,17 83,33 79,17 80,56 2,41 83,33 79,17 83,33 81,94 2,41 83,33 87,5 91,67 87,5 4,17 91,67 91,67 83,33 88,89 4,81 91,67 87,5 79,17 86,11 6,37 Nghiệm thức Năng xuất thu Hệ số thức ăn hoạch (g) CT1 (0%) Ct (5%) CT 3(10%) CT (15%) CT (20%) CT (25%) 2,67 2,38 1,92 1,57 1,69 1,84 11341,8 12393,7 14175 16065 15437,1 14385 Khối lượng tăng trọng (g) 6541,8 7353,7 9135 11145 10349,1 9465 Khối lượng ban đầu (g) 4800 5040 5040 4920 5088 4920 Bảng IV.9: Bảng mô tả thống kê so sánh DWG khối lượng cá sau 140 ngày nuôi Descriptives 95% Confidence Interval for Mean N W 80 DWG Mean Std Deviation Std Error Lower Bound Upper Bound Minimu m Maximum CT (0%) 10 630.10 4.606 1.456 626.81 633.39 625 640 CT2 (5%) 10 652.30 4.191 1.325 649.30 655.30 645 658 CT3 (10%) 10 675.00 6.700 2.119 670.21 679.79 665 685 CT4 (15%) 10 765.00 4.190 1.325 762.00 768.00 760 772 CT5 (20%) 10 735.10 3.814 1.206 732.37 737.83 730 740 CT6 (25%) 10 685.00 5.354 1.693 681.17 688.83 678 695 Total 60 690.42 47.026 6.071 678.27 702.56 625 772 CT (0%) 10 5.3020 06647 02102 5.2545 5.3495 5.21 5.40 CT2 (5%) 10 5.5730 07288 02305 5.5209 5.6251 5.41 5.65 CT3 (10%) 10 5.8440 08449 02672 5.7836 5.9044 5.71 5.96 CT4 (15%) 10 7.0050 08797 02782 6.9421 7.0679 6.90 7.19 CT5 (20%) 10 6.6180 08954 02832 6.5539 6.6821 6.48 6.81 CT6 (25%) 10 6.0000 07688 02431 5.9450 6.0550 5.90 6.13 Total 60 6.0570 59674 07704 5.9028 6.2112 5.21 7.19 32 ANOVA Sum of Squares KHOILUONGCC Between Groups Within Groups Total DWG Between Groups Within Groups Total df Mean Square 129172.683 25834.537 1299.900 54 24.072 130472.583 59 20.663 4.133 347 54 006 21.010 59 33 F Sig 1.073E3 000 643.455 000 Multiple Comparisons Dependent Variable (J) CONGTHU C W80 CT (0%) CT2 (5%) -22.200* 2.194 000 -28.68 -15.72 CT3 (10%) -44.900* 2.194 000 -51.38 -38.42 CT4 (15%) -134.900* 2.194 000 -141.38 -128.42 CT5 (20%) -105.000* 2.194 000 -111.48 -98.52 CT6 (25%) -54.900* 2.194 000 -61.38 -48.42 CT (0%) 22.200* 2.194 000 15.72 28.68 CT3 (10%) -22.700* 2.194 000 -29.18 -16.22 CT4 (15%) -112.700* 2.194 000 -119.18 -106.22 CT5 (20%) -82.800* 2.194 000 -89.28 -76.32 CT6 (25%) -32.700* 2.194 000 -39.18 -26.22 CT (0%) 44.900* 2.194 000 38.42 51.38 CT2 (5%) 22.700* 2.194 000 16.22 29.18 CT4 (15%) -90.000* 2.194 000 -96.48 -83.52 CT5 (20%) -60.100* 2.194 000 -66.58 -53.62 CT6 (25%) -10.000* 2.194 000 -16.48 -3.52 CT (0%) 134.900* 2.194 000 128.42 141.38 CT2 (5%) 112.700* 2.194 000 106.22 119.18 CT3 (10%) 90.000* 2.194 000 83.52 96.48 CT5 (20%) 29.900* 2.194 000 23.42 36.38 CT6 (25%) 80.000* 2.194 000 73.52 86.48 CT (0%) 105.000* 2.194 000 98.52 111.48 CT2 (5%) 82.800* 2.194 000 76.32 89.28 Tukey HSD CT2 (5%) CT3 (10%) CT4 (15%) CT5 (20%) 34 Mean Difference (I-J) 95% Confidence Interval (I) CONGTHU C Std Error Sig Lower Bound Upper Bound CT6 (25%) DWG Tukey HSD CT (0%) CT2 (5%) CT3 (10%) CT4 (15%) CT5 (20%) CT3 (10%) 60.100* 2.194 000 53.62 66.58 CT4 (15%) -29.900* 2.194 000 -36.38 -23.42 CT6 (25%) 50.100* 2.194 000 43.62 56.58 CT (0%) 54.900* 2.194 000 48.42 61.38 CT2 (5%) 32.700* 2.194 000 26.22 39.18 CT3 (10%) 10.000* 2.194 000 3.52 16.48 CT4 (15%) -80.000* 2.194 000 -86.48 -73.52 CT5 (20%) -50.100* 2.194 000 -56.58 -43.62 CT2 (5%) -.27100* 03584 000 -.3769 -.1651 CT3 (10%) -.54200* 03584 000 -.6479 -.4361 CT4 (15%) -1.70300* 03584 000 -1.8089 -1.5971 CT5 (20%) -1.31600* 03584 000 -1.4219 -1.2101 CT6 (25%) -.69800* 03584 000 -.8039 -.5921 CT (0%) 27100* 03584 000 1651 3769 CT3 (10%) -.27100* 03584 000 -.3769 -.1651 CT4 (15%) -1.43200* 03584 000 -1.5379 -1.3261 CT5 (20%) -1.04500* 03584 000 -1.1509 -.9391 CT6 (25%) -.42700* 03584 000 -.5329 -.3211 CT (0%) 54200* 03584 000 4361 6479 CT2 (5%) 27100* 03584 000 1651 3769 CT4 (15%) -1.16100* 03584 000 -1.2669 -1.0551 CT5 (20%) -.77400* 03584 000 -.8799 -.6681 CT6 (25%) -.15600* 03584 001 -.2619 -.0501 CT (0%) 1.70300* 03584 000 1.5971 1.8089 CT2 (5%) 1.43200* 03584 000 1.3261 1.5379 CT3 (10%) 1.16100* 03584 000 1.0551 1.2669 CT5 (20%) 38700* 03584 000 2811 4929 CT6 (25%) 1.00500* 03584 000 8991 1.1109 CT (0%) 1.31600* 03584 000 1.2101 1.4219 35 CT6 (25%) CT2 (5%) 1.04500* 03584 000 9391 1.1509 CT3 (10%) 77400* 03584 000 6681 8799 CT4 (15%) -.38700* 03584 000 -.4929 -.2811 CT6 (25%) 61800* 03584 000 5121 7239 CT (0%) 69800* 03584 000 5921 8039 CT2 (5%) 42700* 03584 000 3211 5329 CT3 (10%) 15600* 03584 001 0501 2619 CT4 (15%) -1.00500* 03584 000 -1.1109 -.8991 CT5 (20%) -.61800* 03584 000 -.7239 -.5121 * The mean difference is significant at the 0.05 level 36 W 80 Subset for alpha = 0.05 Tukey HSDa CONGTHU C N CT (0%) 10 CT2 (5%) 10 CT3 (10%) 10 CT6 (25%) 10 CT5 (20%) 10 CT4 (15%) 10 Sig Duncana 10 CT2 (5%) 10 CT3 (10%) 10 CT6 (25%) 10 CT5 (20%) 10 CT4 (15%) 10 630.10 652.30 675.00 685.00 735.10 765.00 1.000 CT (0%) Sig 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 630.10 652.30 675.00 685.00 735.10 765.00 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 10.000 37 1.000 1.000 1.000 1.000 DWG Subset for alpha = 0.05 CONGTHU C N Tukey HSDa CT (0%) 10 CT2 (5%) 10 CT3 (10%) 10 CT6 (25%) 10 CT5 (20%) 10 CT4 (15%) 10 Sig Duncana 10 CT2 (5%) 10 CT3 (10%) 10 CT6 (25%) 10 CT5 (20%) 10 CT4 (15%) 10 5.3020 5.5730 5.8440 6.0000 6.6180 7.0050 1.000 CT (0%) Sig 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 5.3020 5.5730 5.8440 6.0000 6.6180 7.0050 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 10.000 38 1.000 1.000 1.000 1.000 ... LÊ HƯƠNG THỦY NGHIÊN CỨU THỦY PHÂN BÃ RONG CÂU (Gracilaria verrucosa) BẰNG ENZYM CELLULASE TỪ VI KHUẨN ĐỂ ỨNG DỤNG TRONG SẢN XUẤT THỨC ĂN NUÔI CÁ RÔ PHI ĐƠN TÍNH GIAI ĐOẠN THƯƠNG PHẨM LUẬN ÁN... Do vi c thực đề tài Nghiên cứu thủy phân bã rong câu (Gracilaria verrucosa) enzyme cellulase từ vi khuẩn để ứng dụng sản xuất thức ăn nuôi cá rô phi đơn tính giai đoạn thương phẩm hướng nghiên. .. bã rong câu (Gracilaria verrucosa) sau sản xuất agar 4) Thử nghiệm sử dụng sản phẩm thủy phân bã rong enzyme cellulase từ vi khuẩn sản xuất thức ăn nuôi cá rô phi đơn tính giai đoạn thương phẩm