TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH-KTNN NGUYỄN THỊ LIÊN NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG GIẢI PHÓNG THUỐC FAMOTIDIN CỦA MÀNG CELLULOSE VI KHUẨN LÊN MEN TỪ MÔI TRƯỜNG NƯỚC DỪA GIÀ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Sinh lý học người động vật Người hướng dẫn khoa học TS Nguyễn Xuân Thành HÀ NỘI, 2017 LỜI CẢM ƠN Với lòng trân trọng biết ơn sâu sắc, xin chân thành cảm ơn ThS Hà Thị Minh Tâm, người thầy tận tình hướng dẫn, giúp đỡ suốt trình thực khóa luận Tôi xin bày tỏ lời cảm ơn tới thầy cô Viện Nghiên cứu Khoa học Ứng dụng trường Đại học Sư phạm Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ hoàn thành khóa luận Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban chủ nhiệm khoa Sinh - KTNN, trường Đại học Sư phạm Hà Nội Đặc biệt, Tôi xin cảm ơn giúp đỡ, động viên gia đình, bạn bè suốt thời gian làm khóa luận Mặc dù Tôi có nhiều cố gắng để hoàn thành khóa luận cách tốt Tuy nhiên lần đầu làm quen với công việc nghiên cứu khoa học hạn chế kiến thức kinh nghiệm nên tránh khỏi thiếu sót, mong nhận góp ý quý thầy, cô giáo để khóa luận hoàn chỉnh Một lần nữa, xin trân trọng cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Sinh viên Nguyễn Thị Liên LỜI CAM ĐOAN Tôi xin khẳng định viết khóa luận “Nghiên cứu khả giải phóng thuốc famotidin màng cellulose vi khuẩn lên men từ môi trường nước dừa già” kết qủa nghiên cứu cá nhân hướng dẫn trực tiếp ThS Hà Thị Minh Tâm, giảng viên khoa Sinh KTNN trường Đại học Sư phạm Hà Nội Tất số liệu thu thập từ thực nghiệm qua xử lý thống kê, không trùng với tài liệu Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Sinh viên Nguyễn Thị Liên MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN LỜI CAM ĐOAN DANH MỤC BẢNG, HÌNH, SƠ ĐỒ DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục đích nghiên cứu 3 Đối tượng phạm vi nghiên cứu Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiến CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu tổng quan đối tượng, lĩnh vực nghiên cứu 1.1.1 Tổng quan màng CVK 1.1.1.1 Vi khuẩn sản sinh CVK 1.1.1.2 Cấu trúc màng CVK 1.1.1.3 Đặc tính màng CVK 1.1.1.4 Chức sinh lý CVK 1.1.2 Thuốc Famotidin 1.1.2.1 Giới thiệu chung thuốc 1.1.2.2 Tính chất 1.1.2.3 Chỉ định chống định 1.2 Tình hình nghiên cứu nước 10 1.2.1 Tình hình nghiên cứu màng CVK 10 1.2.1.1 Tình hình nghiên cứu giới 10 1.2.1.2 Tình hình nghiên cứu nước 11 1.2.2 Tình hình nghiên cứu nước hướng nghiên cứu 12 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 2.1 Vật liệu nghiên cứu 13 2.1.1 Giống vi khuẩn 13 2.1.2 Nguyên liệu - hóa chất 13 2.2 Thiết bị - dụng cụ 13 2.2.1 Thiết bị 13 2.2.2 Dụng cụ 14 2.3 Phương pháp nghiên cứu 14 2.3.1 Phương pháp tạo màng CVK 14 2.3.2 Phương pháp dựng đường chuẩn 16 2.3.3 Phương pháp xác định lượng thuốc hấp thụ vào màng CVK 17 2.3.4 Phương pháp xác định lượng thuốc giải phóng từ màng CVK 19 2.3.4 Phương pháp phân tích dược động học giải phóng thuốc Famotidin 20 2.3.5 Phương pháp xử lí thống kê 20 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 21 3.1 Tạo màng CVK A xylinum môi trường nước dừa già 21 3.2 Thu màng CVK thô từ môi trường 22 3.3 Tinh chế màng CVK 23 3.4 Xác định lượng thuốc Famotidin giải phóng khỏi màng CVK 23 3.6 Dược động học giải phóng thuốc màng CVK 29 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 32 TÀI LỆU THAM KHẢO DANH MỤC BẢNG, HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ Bảng 2.1 Môi trường lên men tạo màng CVK 14 Sơ đồ 2.1 Quy trình nuôi cấy thu nhận CVK 15 Bảng 2.2 Giá trị mật độ quang phổ Famotidin nồng độ khác (n =3) 16 Hình 2.1 Đồ thị đường chuẩn Famotidine bước sóng 265nm 17 Bảng 2.3 Dung dịch đệm đa Britton Robinson 19 Hình 3.1 Màng CVK nuôi cấy tĩnh ngày thứ 21 Hình 3.2 Màng CVK với thời gian nuôi cấy khác 22 Hình 3.3 Màng CVK tinh chế 23 Bảng 3.1 Giá trị OD hấp thụ thuốc màng CVK (n = 3) 24 Bảng 3.2 Khối lượng Famotidin hấp thụ, tỉ lệ hấp thụ cường độ hấp thụ Famotidin màng CVK (n = 3) 24 Bảng 3.3 Mật độ quang phổ màng CVK giải phóng thuốc thời điểm lấy mẫu (n = 3) 25 Hình 3.4 Đồ thị biểu diễn OD giải phóng thuốc Famotidin màng CVK 26 Bảng 3.4 Tỉ lệ thuốc Famotidin giải phóng thời điểm lấy mẫu 27 Hình 3.4 Đường cong biểu diễn tỉ lệ giải phóng Famotidine màng CVK 28 Bảng 3.5 Hệ số tương quan (R2), tốc độ giải phóng thuốc (k) trị số mũ giải phóng (n) môi trường pH khác (n = 3) 30 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Tên viết tắt Tên tiếng anh Tên tiếng việt A xylinum Acetobacter xylinum Acetobacter xylinum CVK Bacterial Cellulose Cellulose vi khuẩn Cộng Cs E coli Escherichia coli Vi khuẩn đại tràng OD Optical Density Mật độ quang phổ PC Plant Cellulose Cellulose thực vật MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Famotidin loại thuốc kháng H2, thành phần chủ yếu famotidin, có tác dụng làm giảm tiết số lượng nống độ HCl dịch vị ức chế tác dụng Histamine lên tế bào dày, làm lành vết loét dày, tá tràng, giảm đau loét Thuốc có tác dụng phòng trừ loét tái phát dùng liều thấp kéo dài Liều cao dùng để điều trị loét, thuốc có tác dụng chữa ợ làm lành vết loét, viêm thực quản trào ngược axit Tuy nhiên trình dùng thuốc, người bệnh gặp tác dụng phụ nhẹ thuốc như: táo bón, đau đầu, ỉa chảy, ngủ, buồn nôn nôn làm co thắt thực quản Các tác dụng phụ khác gồm kích thích, thiếu máu, lẫn lộn, loạn nhịp tim, dị ứng phát ban, trầm cảm, dễ chảy máu bầm tím, dụng tóc, thay đổi thị giác, vàng da mắt, da khô, ù tai, thay đổi vị giác… Đây triệu chứng gặp liều điều trị Đối với phụ nữ có thai trẻ em không nên dùng chưa có nghiên cứu độ an toàn thuốc với đối tượng này, phụ nữ cho bú không nên dùng thuốc có tiết qua sữa mẹ Giảm liều lượng dùng với bệnh nhân suy thận để tránh tích lũy Famotidin thận Trong năm gần nhà nghiên cứu có ý đặc biệt tới việc sử dụng vật liệu sinh học chăm sóc sức khỏe khả tái tạo, tương thích sinh học phân hủy sinh học chúng Một vật liệu sinh học ý đến cellulose Vật liệu vượt trội so với polymer tự nhiên tổng hợp khác [16] Tuy nhiên, hình thái, đặc tính lĩnh vực ứng dụng cụ thể phụ thuộc nhiều vào nguồn gốc, tức trình xây dựng loại cellulose Cellulose Vi khuẩn (CVK) sản phẩm số loài vi khuẩn, đặc biệt chủng A xylinum CVK có cấu trúc đặc tính giống với cellulose thực vật (PC) [7, 9] CV khác với PC chỗ không chứa hợp chất cao phân tử lignin, hemicellulose, pectin sáp nến chúng có đặc tính vượt trội với độ dẻo dai, bề chắc, độ đàn hồi cao, có khả hút nước cao trạng thái ẩm độ tinh khiết cao, phân hủy sinh học, tái chế hay phục hồi hoàn toàn, bề mặt tiếp xúc lớn gỗ bình thường, không độc không gây dị ứng, có khả chịu nhiệt tốt đặc biệt khả cản khuẩn [3, 6, 7, 9] Với đặc tính vượt trội vậy, màng CVK ứng dụng nhiều lĩnh vực như: công nghệ thực phẩm, công nghệ giấy, công nghệ pin, dùng làm màng lọc vi khuẩn [9] Đặc biệt lĩnh vực y học, màng CVK ứng dụng làm da tạm thời thay da trình điều trị bỏng, loét da, làm mạch máu nhân tạo điều trị bệnh tim mạch, làm ống thông niệu quản (Wan Millon 2005) [9], làm mặt nạ dưỡng da cho người [6, 7, 9] Ngoài ra, màng CVK có tác dụng giữ thuốc kéo dài thời gian giải phóng thuốc [10] Bên cạnh đó, sợi cellulose có cấu trúc mạng hệ thống vận chuyển phân phối thuốc làm tăng sinh khả dụng thuốc, giúp thuốc không bị phá hủy môi trường acid Các nghiên cứu cho thấy màng CVK tạo từ nguyên liệu rẻ tiền, dễ kiếm, sản xuất quy mô công nghiệp Môi trường nuôi cấy vi khuẩn A xylinum đa dạng nước dừa già, rỉ đường, nước mía,… Trong nước dừa già coi môi trường kinh điển nuôi cấy A xylinum [9] Với mục đích nghiên cứu khả giải phóng thuốc famotidin màng cellulose vi khuẩn để khắc phục tác dụng phụ thuốc Famotidin chữa trị bệnh viêm loét dày, chọn nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu khả giải phóng thuốc famotidin màng cellulose vi khuẩn lên men từ môi trường nước dừa già” 2 Mục đích nghiên cứu Chế tạo màng CVK từ vi khuẩn Acetobacter xylinum môi trường nước dừa già Tìm hiểu khả giải phóng thuốc dựa màng CVK tạo để khắc phục tác dụng không mong muốn thuốc Famotidin điều trị bệnh viêm loét dày Đối tượng phạm vi nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu: Khả giải phóng thuốc famotidin màng cellulose vi khuẩn lên men từ môi trường nước dừa già Phạm vi nghiên cứu: Nghiên cứu thực quy mô phòng thí nghiệm Địa điểm nghiên cứu: Phòng thí nghiệm sinh lý người động vật trường ĐHSP Hà Nội 2; Viện Nghiên cứu Khoa học Ứng dụng trường ĐHSP Hà Nội Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiến Ý nghĩa khoa học: Nghiên cứu giúp tăng thêm hiểu biết ứng dụng màng CVK Mở hướng nghiên cứu khả hấp thụ giải phóng thuốc màng CVK nhiều loại thuốc khác nhằm kéo dài thời gian giải phóng tăng sinh khả dụng loại thuốc Ý nghĩa thực tiễn: Xây dựng quy trình tạo màng CVK từ chủng A xylinum; Từ màng CVK tạo dùng để nghiên cứu khả giải phóng thuốc nhằm khắc phục tác dụng phụ không mong muốn việc điều trị viêm loét dày thuốc Famotidin Từ kết nghiên cứu áp dụng vào thực tiễn CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Tạo màng CVK A xylinum môi trường nước dừa già Khi nuôi cấy tĩnh bình tam giác điều kiện nhiệt độ phòng vi khuẩn A xylinum sử dụng chất dinh dưỡng môi trường để sinh trưởng phát triển Trong ngày đầu tiên, vi khuẩn làm quen với môi trường, acid bắt đầu sinh làm pH môi trường giảm nhẹ Ngày thứ 2, vi khuẩn bắt đầu sản sinh lớp màng CVK bề mặt môi trường có màu trằng đục có lẫn nhiều tạp chất, lớp màng dày dần lên đến môi trường hết chất dinh dưỡng, vi khuẩn ngừng sinh trưởng, sau - ngày nuôi cấy tĩnh màng có độ dày khoảng 0.3 – 0.5cm, độ dày màng tùy thuộc vào thời gian nuôi cấy Màng CVK nuôi cấy tĩnh môi trường nước dừa già đến ngày thứ thể hình 3.1 Hình 3.1 Màng CVK nuôi cấy tĩnh ngày thứ 21 3.2 Thu màng CVK thô từ môi trường Màng CVK nuôi cấy tĩnh môi trường nước dừa già có màu trằng ngà, bề mặt phẳng, trơn, chứa nhiều nước, dẻo dai Thu màng CVK thời điểm khác có độ dày mỏng khác Khi thu màng nuôi cấy ngày thứ màng có độ dày khoảng 0.3cm Khi thu màng nuôi cấy đến ngày thứ 7, màng có độ dày khoảng 0.5cm Vi khuẩn A xylinum môi trường nuôi cấy sử dụng chất dinh dưỡng có môi trường để sinh trưởng phát triển liên tục, chúng sản sinh CVK tích lũy dần bề mặt môi trường tạo thành lớp màng CVK, thời gian nuôi cấy lâu lớp màng CVK dày lên môi trường hết chất dinh dưỡng, vi khuẩn A xylinum không sinh trưởng độ dày màng ngừng tăng Hình ảnh màng CVK thu ngày nuôi cấy thứ minh họa hình 3.2 (a) (b) Hình 3.2 Màng CVK với thời gian nuôi cấy khác (a): Màng CVK thu ngày nuôi cấy thứ (b): Màng CVK thu ngày nuôi cấy thứ 22 3.3 Tinh chế màng CVK Tinh chế màng CVK để loại bỏ tạp chất môi trường nuôi cấy, đông thời phá hủy trung hòa độc tố vi khuẩn, giúp màng hấp thụ lượng thuốc tối đa Màng CVK sau tách từ môi trường nuôi cấy rửa với nước ngâm vào dung dịch NaOH 3%, sau 48 ngâm dung dịch có màu nâu, màng CVK lấy rửa vời nước sau ngâm HCl, sau 48 lấy màng rửa với nước, thu màng CVK tinh chế có màu trắng sáng hình 3.3 Hình 3.3 Màng CVK tinh chế 3.4 Màng CVK hấp thụ thuốc Màng CV sau tinh chế sấy nhiệt độ 90oC để loại nước sau cho màng vào bình chứa 100ml dung dịch Famotidin 5%, đặt bình vào bể rung siêu âm, nhiệt độ 37oC Sau ngâm màng CVK Famotidin giờ, 1,5 giờ, lấy dung dịch đo quang phổ máy UV - 2450 để xác định lượng thuốc hấp thụ vào màng, kết đo quang phổ màng CVK trình bày bảng 3.1 23 Bảng 3.1 Giá trị OD hấp thụ thuốc màng CV (n = 3) Độ dày màng (cm) Thời gian hấp thụ (giờ) 0.5 1.5 0.3 0.180 ± 0.016 0.168 ± 0.016 0.155 ± 0.024 0.152 ± 0.016 0.5 0.164 ± 0,008 0.156 ± 0.016 0.148 ± 0.028 0.144 ± 0.016 Từ kết tính bảng 3.1 ta thấy sau ngâm màng giá trị OD đo gần không giảm chứng tỏ lượng thuốc hấp thụ vào màng CVK đạt cực đại Lấy giá trị OD thu bảng 3.1 thay vào phương trình đường chuẩn Famotidin ta tìm nồng độ Famotidin (C%) dung dich, lấy C% thay vào công thức (1) ta khối lượng Famotidin có dung dịch (mct), lấy khối lượng Famotidin có dung dịch thay vào công thức (2) ta khối lượng Famotidin hấp thụ vào màng CVK (mHT), tiếp tục lấy khối lượng Famotidin hấp thụ vào màng CVK thay vào công thức (3) ta tỉ lệ thuốc Famotidin hấp thụ vào màng CVK Khối lượng thuốc hấp thụ vào màng CVK, tỉ lệ hấp thụ cường độ hấp thụ thuốc màng CVK trình bày bảng 3.2 Bảng 3.2 Khối lượng Famotidin hấp thụ, tỉ lệ hấp thụ cường độ hấp thụ Famotidin màng CVK (n = 3) Độ dày màng (cm) mHT (mg) Diện tích Cường độ hấp thụ màng (cm2) (mg/cm2) EE (%) 0.3 1.31 ± 0.02009 28.26 ± 0.74 0.04642 ± 0.000711 26.23 ± 0.3988 0.5 2.19 ± 0.04845 50.24 ± 0.95 0.0437 ± 0.000963 24 43.90 ± 0.9704 3.5 Xác định lượng thuốc Famotidin giải phóng khỏi màng CVK Sau cho màng CVK hấp thụ thuốc tiến hành cắt mẫu thành mảnh có diện tích (6cm2) cho vào lọ chứa sẵn 100ml dung dịch đệm có pH = 6.8, pH = 12 Sau 0.5h, 1h, 2h, 4h, 8h, 12h, 24h lấy mối mẫu 4ml dung dịch đo quang phổ, giá trị OD đo thời điểm lấy mẫu trình bày bảng 3.3 Bảng 3.3 Mật độ quang phổ màng CVK giải phóng thuốc thời điểm lấy mẫu (n = 3) Độ Ph dày màng pH = 6.8 pH = 12 0.3 0.5 0.3 0.5 Thời gian giải phóng thuốc (giờ) 0.5 12 24 0.087± 0.089± 0.094± 0.096± 0.097± 0.096± 0.095± 0.0046 0.0055 0.0089 0.0074 0.006 0.0051 0.0096 0.083± 0.085± 0.088± 0.092± 0.093± 0.093± 0.091± 0.0085 0.0115 0.0101 0.0095 0.0104 0.0101 0.0106 0.079± 0.082± 0.085± 0.089± 0.090± 0.089± 0.089± 0.009 0.007 0.009 0.0097 0.0105 0.0089 0.0054 0.074± 0.077± 0.079± 0.083± 0.086± 0.085± 0.085± 0.0047 0.0087 0.0125 0.0134 0.0098 0.0067 0.0056 Dựa vào giá trị mật độ quang phổ thu bảng 3.3, sử dụng phần mềm Excel 2010 để vẽ đồ thị biểu diễn OD giải phóng thuốc màng CVK Đồ thị giải phóng thuốc minh họa hình 3.5 25 Hình 3.4 Đồ thị biểu diễn OD giải phóng thuốc Famotidin màng CVK Dựa vào bảng 3.3 hình 3.4 thấy giá trị OD tăng dần theo thời gian đến thời điểm định lại giảm xuống, điều chứng tỏ thời gian đầu tốc độ giải phóng thuốc nhanh đạt cực đại tai thời điểm định chậm dần Mỗi môi trường pH khác OD đạt cực đại thời điểm khác nhau, chủ yếu khoảng từ - Từ số liệu thu bảng 3.3 thay vào công thức (4) ta tính tỉ lệ thuốc Famotidin giải phóng thời điểm lấy mẫu, kết trình bày bảng 3.4 26 Bảng 3.4 Tỉ lệ thuốc Famotidin giải phóng thời điểm lấy mẫu (n = 3) pH pH = 6.8 pH = 12 Tỉ lệ thuốc Famotidine giải phóng (%) Độ dày màng 0.3 0.5 0.3 0.5 0,5 12 47.689 48.900 50.352 52.410 53.499 54.225 24 53.862 ±0.504 ±0.381 ±0.191 ±0.191 ±0.191 ±0.191 ±0.191 42,801 43.348 46.220 47.451 49.365 50.185 49.775 ±0.215 ±0.215 ±0.215 ±0.431 ±0.215 ±0.215 ±0.215 55.385 56.869 57.325 58.682 59.219 60.986 60.225 ±0.221 ±0.304 ±0.304 ±0.315 ±0.215 ±0.215 ±0.215 46.386 47.112 48.655 49.889 50.648 52.675 51.952 ±0.311 ±0.215 ±0.215 ±0.330 ±0.330 ±0.330 ±0.330 Dựa vào kết tính bảng 3.4, sử dụng phần mềm Excel 2010 để vẽ đồ thị biểu diễn tỉ lệ thuốc Famotidine giải phóng thời điểm lấy mẫu, tỉ lệ thuốc Famotidine giải phóng biểu diễn hình 3.5 27 Hình 3.5 Đường cong biểu diễn tỉ lệ giải phóng Famotidine màng CVK Dựa vào bảng 3.4 hình 3.5 thấy: Trong đầu tỉ lệ giải phóng thuốc tăng nhanh, sau lượng thuốc giải phóng ít, tỉ lệ thuốc Famotidin giải phóng tăng không đáng kể Trong môi trường khảo sát môi trường đệm pH = 6.8 màng có khả giải phóng thuốc tốt môi trường pH = 12 Ở pH = 6.8 tỉ lệ giải phóng thuốc màng CVK đạt cực đại giờ, màng 0.3cm đạt tỉ lệ 27.97% ± 0.38, màng 0.5cm đạt tỉ lệ 25.48% ± 0.87 So sánh giá trị tỉ lệ trung bình công cụ Data analysis với α = 0.05, thu kết P = 0.0193 < 0.05, khác tỉ lệ giải phóng thuốc sau 24 màng có ý nghĩa thống kê Vậy pH = 6.8 màng CVK 0.3cm có khả giải phóng thuốc tốt màng 0.5cm Ở pH = 12 tỉ lệ giải phóng thuốc đạt cực đại giải phóng thuốc, màng 0.3cm đạt tỉ lệ 17.66% ± 0.64, màng 0.5cm đạt tỉ lệ 15.03% ± 0.51 Qua 28 kiểm định thống kê thu P = 0.0053 < 0.05 có nghĩa sai khác tỉ lệ giải phóng thuốc màng có ý nghĩa thống kê Vậy pH = 12 màng CVK 0.3cm có khả giải phóng thuốc tốt màng CVK 0.5cm Khi sử dụng Famotidin qua đường uống mà màng CVK làm hệ thống phân phối 95% thuốc giải phóng đào thải sau tiếng [17] Khi sử dụng CVK làm hệ thống hấp thụ giải phóng Famotidin giải phóng kéo dài tới - tiếng Như màng CVK có triển vọng ứng dụng làm hệ thống hấp thụ giải phóng thuốc Famotidin, giúp thuốc giải phóng kéo dài, điều làm tăng ứng dụng thuốc Famotidin điều trị bệnh đường ruột bệnh liên quan đến đại tràng 3.6 Dược động học giải phóng thuốc màng CVK Với số liệu tính bảng 3.4, sử dụng phần mềm DDSolver với mô hình cụ thể First order, Higuchi, Hixson - Crowell Korsmeyer - Peppas làm mô hình động học để phân tích dươc động học giải phóng Famotidin màng CVK ta thu kết bảng 3.5 29 Bảng 3.5 Hệ số tương quan (R2), tốc độ giải phóng thuốc (k) trị số mũ giải phóng (n) môi trường pH khác (n = 3) pH pH = 6.8 Mẫu BC First k1 order R2 Higuchi kH R2 Hixson - kHC Crowell R2 Korsmeye kKP r - Peppas R2 n pH = 12 0.3cm 0.5cm 0.3cm 0.5cm 0.016234± 0.0149± 0.01183± 0.009753 0.0026 0.003 0.0022 ± 0.0054 0.54325± 0.6186± 0.5753 0.6330 0.026 0.019 ± 0.032 ± 0.013 6.8097 6.2362± 5.0429 4.1221 ± ± 0.126 0.273 ± 0.239 0.094 0.70398± 0.7774± 0.7447 ± 0.8018 ± 0.0076 0.015 0.0064 0.0058 0.00518 0.0047 0.0038 0.003168 ±0.00016 ±0.00035 ±0.00042 ±0.00036 0,52867 0,60460 0,56458 0,62405 ± 0.0069 ± 0.013 ± 0.0037 ± 0.0079 15.9485 13.5749 10.2984 6.86707 ± 0.95 ± 0.91 ± 0.83 ± 0.64 0.85315 0,89717 0.87187 0.86444 ± 0.0085 ± 0.003 ± 0.0078 ± 0.0095 0.146725 0.17989 0.211188 0.303254 ± 0.0077 ± 0.002 ± 0.0035 ± 0.0058 Theo nghiên cứu trước đây, mô hình First order đại diện cho tỉ lệ giải phóng thuốc phụ thuộc vào nồng độ thuốc Mô hình Higuchi giả định việc giải phóng thuốc chế khuếch tán Mô hình Krosmeyer Peppas đưa nhìn toàn diện tỉ lệ giải phóng thuốc tỉ lệ với 30 trương nở vật liệu mang thuốc, độ trương nở vật liệu cao tốc độ giải phóng thuốc cao ngược lại [19] Khi thuốc Famotidin giải phóng dung dịch đệm pH = 6.8 tuân theo mô hình First oder Korsmeyer - Peppas (R2 > 60%), thuốc Famotidin giải phóng dung dịch đệm pH = 12 phù hợp với mô hình Higuchi Korsmeyer - Peppas (R2 > 50%) Những kết cho thấy khả ứng dụng mô hình Korsmeyer – Peppas cho trương nở sợi cellulose màng CVK Trong hệ thống khuếch tán Fickian [23, 24], n < 0.43 xảy giải phóng thuốc theo chế khuếch tán qua vật liệu, 0.43 < n < 0.85 giải phóng thuốc xảy ra, n > 0.85 thuốc giải phóng ăn mòn vật liệu Theo bảng 3.5 giá trị n thu < 0.43 chứng tỏ có giải phóng thuốc theo chế khuếch tán, ăn mòn CVK trình giải phóng thuốc Như tỉ lệ giải phóng thuốc Famotidin phụ thuộc vào môi trường đệm pH khác nhau, trương nở CVK nồng độ Famotidin 31 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Quá trình nghiên cứu đề tài, thu số kết sau: Tạo màng CVK từ vi khuẩn A xylinum môi trường nước dừa già Màng CVK 0.3cm có khả hấp thụ Famotidin tốt màng CVK 0.5cm Trong môi trường đệm pH = 6.8, pH = 12 màng CVK giải phóng thuốc Famotidin tốt môi trường pH = 12 Kiến nghị Tiếp tục nghiên cứu khả hấp thụ giải phóng thuốc Famotidin màng CVK tạo chủng A xylinum từ loại môi trường khác Tiếp tục nghiên cứu khả vận tải phân phối loại thuốc khác màng CVK nhằm tăng tác dụng loại thuốc 32 TÀI LỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt [1] Vũ Bình Dương, Nguyễn Trọng Diệp, Nguyễn Thị Thùy, Hoàng Văn Lương (2010), “Nghiên cứu bào chế viên nén Berberin giải phóng đích đại tràng”, tạp trí y - dược học quân số (8), -12 [2] Hồ Cảnh Hậu, Hoàng Văn Thêm, Nguyễn Thị Lan Hương, Nguyễn Văn Thuận, Nguyễn Cẩm Vân, Nguyến Tuấn Quang (2015), “Nghiên cứu định lượng Berberin chlorid viên nén đại tràng 105 phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao”,tạp trí y - dược học quân số (2) [3] Đặng Thị Hồng Phân lập, tuyển chọn nghiên cứu số đặc tính sinh học vi khuẩn Acetobacter xylinum chế tạo màng sinh học (BC), Luận án thạc sỹ Sinh học ĐHSP Hà Nội, 2007 [4] Nguyễn Văn Mã, La Việt Hồng, Ong Xuân Phong (2013), Phương pháp nghiên cứu sinh lý học thực vật,Nhà xuất Đại học Quốc gia Hà Nội [5] Nguyễn Văn Mùi (2001), Thực hành hóa sinh học phần 2, Nhà xuất Đại học Quốc gia Hà Nội [6] Nguyễn Thị Nguyệt (2008), Nghiên cứu vi khuẩn Acetobacter xylinum cho màng Bacterial Cellulose làm mặt nạ dưỡng da, Luận án thạc sỹ sinh học ĐHSP Hà Nội [7] Đinh Thị Kim Nhung, Nguyễn Thị Thùy Vân, Trần Như Quỳnh (2012),“Nghiên cứu vi khuẩn Acetobacter xylinum tạo màng bacterial cellulose ứng dụng điều trị bỏng” Tạp trí khoa học công nghệ50 (4), 453 - 462 [8] Đinh Thị Kim Nhung (1996),Nghiên cứu số đặc điểm sinh học vi khuẩn Acetobacter ứng dụng chúng lên men axetic theo phương pháp chìm,Luận án phó tiến sỹ khoa học sinh học [9] Nguyễn Văn Thanh, Huỳnh Thị Ngọc Lan (2006), ”Nghiên cứu đặc tính màng cellulose vi khuẩn từ Acetobacter xylinum sử dụng làm màng trị bỏng”,tạp chí Dược học số (361/2006), trang 18-20 Tài liệu tiếng anh [10] Almeida I.F et al (2014), “Bacteriaal cellulose membranes as drug delivery systems: An in vivo skin compatibility study”, European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics, 86(3), 332 - 336 [11] Amin MCIM, Ahmad N et al (2012), “Bacterial cellulose film coating as drug delivery system: physicochemical, thermal and drug release properties”, Sains Malaysiana, 41 (5), 561 - 568 [12] Brown E Bacterial cellulose Themoplastic polymer nanocomposites Master of sience in chemical engineering Washington state university, 2007 [13] Jun Yin, Jianping Ye, Weiping Jia (2012), Effects and mechanisms of berberine in diabetes treatment [14] Jun Yin, Huili Xing, Jianping Ye (2009), Efficacy of Berberine in Patients with Type Diabetes [15] Hai - Peng Cheng, Pei - Ming - Wang, Jech - Wei Chen And Wen - Teng Wu (2012), “Cultivation of Acetobacter xylinum for bacterial cellulose production in a modifed airlift reactor”, Biotechnol Appl Biochem, (35), 125 - 132 [16] Klemm D et al (2009), “Nanocellulose materials - different cellulose, different functionality”, Macromol Symp, 280, 60 - 70 [17] Lin Huang, Xiuli Chen, Thanh Xuan Nguyen, Huiru Tang, Liming Zhang and Guang Yang (2013), “Nano- cellulose 3D- networks as controlled- release drug carriers”, Journal of Materials Chemistry B, 2013,1, 2976 - 2984 [18] Lina Fu, Yue Zhang, Chao Li, Zhihong Wu, Qi Zhuo, Xia Huang, Guixing Qui, Ping Zhou and Guang Yang skin tissue repair materials from bacterial cellulose by a multilayer fermantation method, 2012 [19] Thanh Xuan Nguyen et al (2014), “Chitosan - coated nano - liposomes for the oral delivery of berberine hydrochloride”, J Mater Chem B, 2, 7149 - 7159 [20] Trovatti E et al (2012), “Bacterial cellulose membranes applied in topical and transdermal delivery of lidocaine hydrochloride and ibuprofen: in vitro diffusion studies”, Int J Pharm, 435(1), 83-87 [21] Yin Jun, Chen Ming - Dao, Tang Jin - Feng (2004), “Effects of berberine on glucose and lipid metabolism in animal experiment”, Chinese Journal of Diabetes, 12(3), 215 - 218 [22] Yong Zhang, Meirong Huo, Jianping Zhou, Aifeng Zho, Weize Li, Chengli Yao, and Shaofei Xie (2010), “DDSolver: An Add- In Program for Modeling and Comparison of Drug Dissolution Profiles”, The AAPS Journal (2010), 263 - 271 ... bệnh vi m loét dày, chọn nghiên cứu đề tài: Nghiên cứu khả giải phóng thuốc famotidin màng cellulose vi khuẩn lên men từ môi trường nước dừa già 2 Mục đích nghiên cứu Chế tạo màng CVK từ vi khuẩn. .. tượng nghiên cứu: Khả giải phóng thuốc famotidin màng cellulose vi khuẩn lên men từ môi trường nước dừa già Phạm vi nghiên cứu: Nghiên cứu thực quy mô phòng thí nghiệm Địa điểm nghiên cứu: Phòng... Sinh vi n Nguyễn Thị Liên LỜI CAM ĐOAN Tôi xin khẳng định vi t khóa luận Nghiên cứu khả giải phóng thuốc famotidin màng cellulose vi khuẩn lên men từ môi trường nước dừa già kết qủa nghiên cứu