TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM KHOA: CNSH & KTMT  BÀI BÁO CÁO THÍ NGHIỆM: SINH LÝ NGƯỜI VÀ ĐỘNG VẬT GVHD: LẠI ĐÌNH BIÊN SVTH: Nguyễn Thị Bích Lê Thị Hồng Dung Nguyễn Thanh Đạt NĂM HỌC 2012 - 2013 3008110386 BÀI BÁO CÁO SỐ BÀI MỞ ĐẦU Động vật sử dụng môn học? Các thực tập sinh lý học thường tiến hành động vật mức độ in vitro, in situ hay in vivo.Tùy vào mục đích bài, người ta lựa chọn động vật thích hợp ếch, chuột, thỏ, chó, người.ở ếch dùng nhiều thực tập chức tim, tuần hoàn động mạch, tĩnh mạch, mao mạch, phân tích cung phản xạ, thần kinh, – thần kinh…vì thuận tiện, dễ thực hiện, phù hợp với điều kiện thực tế Phân biệt thí nghiệm invitro, insitu invivo?  Thí nghiệm invitro Là thí nghiệm thực chế phẩm tạo từ quan tách rời khỏi thể trì điều kiện tương đối thích hợp nhiệt độ, độ ẩm, dung dịch sinh lý…Ví dụ chế phẩm cơ- thần kinh ếch Các thí nghiệm mức độ in vitro thường thí nghiệm thực thời gian ngắn (còn gọi thí nghiệm cấp diễn)  Thí nghiệm in situ Là thí nghiệm thực chế phẩm tạo từ quan không tách rời khỏi thể trì điều kiện sinh lý thích hợp Ví dụ bốc lộ lồng ngực để ghi nhịp tim ếch Các thí nghiệm in situ thí nghiệm cấp diễn  Thí nghiệm in vivo Là thí nghiệm tiến hành thể bình thường khỏe mạnh Ví dụ thí nghiệm thành lập phản xạ có điều kiện chuột, thỏ, chó, mèo, chim…cũng có trường hợp tiến hành phẫu thuật mổ đặt ống thoát dày, ống thoát nước bọt, ống thoát ruột chó… Sau vật nuôi dưỡng cho lành vết thương tiến hành thí nghiệm Như thí nghiệm in vivo thí nghiệm tiến hành thời gian dài ( gọi thí nghiệm trường diễn Tại người đối tượng thí nghiệm? Vì có thí nghiệm phải tách rời phận khỏi thểhoặc làm biến dạng phận.Nếu tiến hành người gây nguy hiểm, phận thể người khó để lấy Bên cạnh thí nghiệm có biến chứng kết không mong muốn, xảy tai biến nên áp dụng người nguy hiểm Gây mê nhằm mục đích gì? Gây mê nhằm mục đích làm giảm đau gây bất động cho động vật thực phẫu thuật tạo chế phẩm in vitro, in situ, in vivo để tiến hành thí nghiệm người ta thường gây mê động vật Việc gây mê động vật thực phẫu thuật làm thí nghiệm Tùy mức độ phẫu thuật khác nhau, tiến hành theo phương pháp khác Phân biệt gây tê cục bộ, tiền mê, gây mê?  Gây tê cục Gây tê cục thực cách tiêm chất gây tê ví dụ tiêm Novocain da tiêm vào vùng phẫu thuật nhỏ, nông.Ví dụ người cắt amidan.ở động vật cắt da để lộ xương sọ, rạch da tìm mạch máu  Tiền mê Tiền mê thực trước gây mê sâu Người ta tiêm cho đối tượng liều morphine thích hợp tạo trạng thái “say” gây tiết trước đưa lên bàn mổ để gây mê  Gây mê Có nhiều loại thuốc gây mê sử dụng qua đưởng khác Với ether, loại thuốc gây mê bốc hơi, gây mê qua đường hô hấp dùng bình thủy tinh miệng rộng với động vật chuột, ếch chuông thủy tinh to mèo thỏ…Đặt miếng tẩm ether bình nhốt vật vào đó, sau thời gian vật bị mê Trong trình phẫu thuật, đặt them miếng bong tẩm ether trực tiếp vào mũi vật - Với thuốc gây mê khác sử dụng qua cách tiêm vào cơ, vào mạch máu, cần phải xem kỹ cách pha chế liều dùng loại thuốc mê trước gây mê để tránh nguy hiểm việc dùng liều Các bước tiến hành chọc hành chọc tủy ếch? - Cầm ếch long bàn tay, dùng ngón tay trỏ ấn đầu ếch cong xuống - Dùng kim chọc tủy chọc thẳng qua da lỗ xương chẫm ếch Điểm chọc tủy đỉnh tam giác với đỉnh điểm phía sau mắt - Quay mũi nhọn kim phía miệng ếch cho đầu kim lọt vào xoang não, lay nhẹ đầu kim để hủy xoang não - Sau đưa mũi chọc phía cột sống Tại gọi ếch tủy? đặc điểm ếch tủy? - Ếch sau hủy tủy gọi ếch tủy.Đặc điểm ếch không chết bị liệt hệ nằm bất động Tả vị trí chọc tỷ ếch: Phân biệt ếch đực ếch cái? - Ếch đực: hai bàn chân trước có mấu thịt ráp, gọi “chai sinh duc”, có hai chấm đen hàm dưới, có bụng nhỏ cứng bụng ếch - Ếch cái:không có “chai sinh dục”, bụng lớn mềm ếch đực, da mềm mịn so với ếch đực 10 Nếu chọc tủy ếch có chuyện xảy ra? Nếu chọc xác vào tủy sống hai chân sau ếch duỗi thẳng điểm chọc không bị chảy máu 11 Dung dịch sinh lý có tác dụng gì? Dung dịch sinh lý có tác dụng kéo dài tồn tại, hoạt động, đảm bảo đặc tính sinh lý mô, quan tách rời quan liên hệ với thể động vật phẫu thuật Người ta đặt thành phần dung dịch sinh lý có đặc tính gần giống với dịch sinh lý thể 12 Cách cố định ếch bàn mổ? Đối với ếch sau gây bất động, cần đặt ngửa bàn mổ cở 40x20cm dùng đinh ghim cắm qua bàn chân để cố định Trường hợp cần thiết ghim thêm vào hàm Bài 2: ẢNH HƯỞNG CỦA THỂ DỊCH VÀ MỘT SỐ CHẤT ĐIỆN GIẢI LÊN HOẠT ĐỘNG CỦA TIM ẾCH TÁCH RỜI Cơ sở lý thuyết Tim tách rời khỏi thể tiếp tục đập thời gian ta liên tục truyền qua tim dung dịch thích hợp thay cho máu Hoạt động tim chịu ảnh hưởng nột số hormone chất điện giải VD:  Một số hormone chất điện giải chất giao cảm adrenalin, chất điện giải Ca2+ có tác dụng tăng cường hoạt động tim giống tác dụng thần kinh giao cảm  Chất phó giao cảm acetylcholin hay chất điện giải K+ làm giảm hoạt động tim Tim khối rỗng bao bên màng bao tim, có vai trò chủ yếu thực chức tuần hoàn máu Tim ếch cố ngăn: tâm thất tâm nhĩ Tâm nhĩ ngăn với tâm thất màng mỏng (màng nhĩ thất) xoang tĩnh mạch năm vị trí tĩnh mạch chủ đổ vào, phình không to Sợi tim vừa có tính chất vân (có vân ngang nhiều nhân) vừa có tính chất trơn (nhân nằm sợi cơ) nân sợi co tim co bóp khỏe tự động nhờ nút hạch thần kinh Tim tách rời khỏi thể không ảnh hưởng thần kinh trung ương, tiếp tục đâp thời gian ta liên tục truyền qua tim ding dịch sinh lý thích hợp thay cho máu Chu kỳ hoạt động tim gồm pha:  Tâm thu:còn gọi pha trơ.gồm giai đoạn,bắt đầu tâm nhĩ co sau tâm nhĩ giãn ,tâm thất co tâm giai đoạn tâm nhĩ giãn kết thúc  Tâm trương: tâm thất tâm nhĩ giãn tâm trương toàn Để bắt đầu vào chu kỳ mới, tim có giai đoạn nghỉ chung ngắn Tim trả lời kích thích vào pha tâm trương Nhưng kích thích vào đâu tâm trương (cuối tâm thu) tim không đáp ứng ngay,mà thời gian ngắn sau đáp ứng co bóp thêm vào.khi kích thích vào giai đoạn tâm trương, tim đáp ứng co bóp thêm vào, sau thời gian nghĩ bù tim káo dài bình thường Khi kích thích vào giai đoạn tâm thu, dù cố cường độ ngưỡng cao, tim không đáp ứng (kích thích tác dụng), gọi giai đoạn trơ tuyệt đối tim Dụng cụ thiết bị sử dụng Kim hủy tủy Kéo lớn Kéo nhỏ Chỉ thường Khay phẩu thuật Giá đỡ ống nhỏ giọt giấy thấm kim thông tim xilanh 5cc lót cao su Chuẩn bị chế phẩm tim rời Hủy tủy ếch Cầm ếch lòng bàn tay Dùng ngón tay trỏ ấn đầu ếch xuống Dùng kim hủy não đam thẳng góc vào lỗ xương chẩm ếch (nơi tiếp giáp xương đầu xương sống) Quay mũi nhọn kim phía miệng ếch(để lọt vào xoang não, hủy xoang não) Chú ý: Nếu hủy não thành công ếch duỗi thẳng hai chân ra, sau hai chân ếch buông lỏng không phản ứng Chỗ kim đâm tủy não không bị chảy máu Lúc ếch sống phản xạ co Ếch hủy tủy xong, gọi ếch tủy Mổ lồng ngực xoang bao tim - Ghim ếch nằm ngửa lên khay mổ - Cắt da ngực theo đường tam giác, đỉnh nằm bụng - Dùng kéo cắt bỏ thành ngực theo đường cắt da, cẩn thận cắt rời mô liên kết, không chạm vào tim - Dùng kẹp nhấc nhẹ bao tim, đưa kéo nhỏ cắt dọc theo trục dài tim, tách bao tim qua hai bên để tim lộ Buộc mạnh - Luồn kim có sẵn sợi cung động mạch phải, buộc chặt, cắt gọn hai đầu - Luồn kim có sẵn cung động mạch trái sau tim, cắt vết chữ V buộc hờ Máu chảy ra, dùng thấm bớt máu - Lật ngược tim lên, luồn kim có tĩnh mạch chủ chia làm nhánh cắt vết chữ V buộc hờ Rửa tim Luồn ống nhỏ giọt có sẵn dung dịch Ringer ống, bơm vào vết cắt V tĩnh mạch chủ, máu tim tống qua vết vắt động mạch trái Tiếp tục bơm dung dịch Ringer vào thấy tim trắng (sạch hết máu tim), sau buộc chặt tĩnh mạch chủ cắt gọn đầu Luồn ống thông tim Ống thông tim chứa đầy dung dịch Ringer, ống gắn với kim thông tim Luồn đầu kim thông qua vết cắt chữ V cung động mạch trái, dùng ngón tay đẩy cẩn thận, nhẹ nhàng cho đầu kim vào tận tâm thất (lúc kim qua van tâm thất – động ta nghe có tiếng “sậc” nhỏ được) buộc cung động mạch vào kim thông Nhấc cao ống thông tim lẫn tim lên, dùng kéo cắt nhỏ tim khỏi lồng ngực với ống thông tim Chú ý: cắt ống chỉ, tránh làm tổn thương xoang tĩnh mạch có hạchxoang tim quan trọng Kết thí nghiệm: Dung dịch Ringer: 60 nhịp/phút Dung dịch CaCl2: 68 nhịp/phút Dung dịch KCl: 58 nhịp/phút Trả lời câu hỏi: Câu 10: Kích thích Các giai đ an khác c a chu kì tim k t qu nh th nào?  Tr l i: thí nghi m tim r i ta s d ng dung d ch KCl dung d ch CaCl2 đ kích thích tim dung d ch Ringer đ trì ho t đ ng c a tim  Dung d ch Ringer: tim đ p bình th ng  Dung d ch KCl: tim đ p y u  Dung d ch CaCl2: tim đ p m nh nhanh h n dung d ch Ringer dung d ch Ringer Câu 9: Đ b t đ u chu kì m i c a tim có giai đ an gì? Tr l i: đ b t đ u chu kì m i c a tim c n giai đ an Tâm tr ng tòan b , c hai tâm th t tâm nhĩ ngh kéo dài 0,4s sau tâm th t ti p t c giãn thêm 0,1s Câu 8: chu kì h at đ ng c a tim g m m y pha?  Tr l i: Chu kì h at đ ng c a tim g m pha: + Tâm nhĩ thu: đ u tiên tâm nhĩ co bóp, áp su t tâm nhĩ tăng lên máu ch y t tâm nhĩ xu ng tâm th t Đ n tâm nhĩ co bóp,nó có tác d ng đ y h t l ng máu l i xu ng tâm th t th i gian tâm nhĩ thu 0,1s sau tâm nhĩ gi n su t chu kì c a tim + Tâm th t thu: tâm nhĩ giãn tâm th t b t đ u co l i Th i gian tâm th t thu kéo dài 0,3s g m hai th i kì: Th i kì tăng áp su t 0,05s tâm th t co bóp Th i kì t ng máu kéo dài 0,25s tâm th t dãn t ng máu vào đ ng m ch + Tâm tr ng tòan b :là hai th t tâm nhĩ ngh kéo dài 0,4s sau tâm th t ti p t c giãn thêm 0,1s Câu 7: b c ti n hành ghi n tâm đ c a ch?  Trong thí nghi m tim r i ta không s d ng tr ghi đ xách đ nh n tâm đ mà dùng cách đ m s nh p đ p ng v i t ng dung d ch d ch KCl dung d ch CaCl2 đ kích thích tim dung d ch Ringer đ trì ho t đ ng c a tim Câu 6: S Đ Thí Nghi m Dung d ch kích thích ng b m dung d ch Tim BÀI BÁO CÁO SỐ NGOẠI TÂM THU I Cơ sở khoa học: 2.2 Hóa chất, mẫu vật: Cách tiến hành: 2.3 Nồng độ tinh trùng: o Nồng độ tinh trùng (C) số tinh trùng diện xác suất ml tinh dịch Thực việc đếm tinh trùng heo phương pháp đếm hồng cầu + Pha loãng tinh trùng ống trộn bạch cầu dung dịch pha loãng (đã chuẩn bị trước) + Đếm số lượng tinh trùng 400 ô nhỏ (của 25 ô lớn) phòng đếm Trong phần này, tinh dịch pha loãng 20 lần ống trộn bạch cầu Công thức tính sau: C = 10000 x N Trong đó:  C: Nồng độ tinh trùng tinh dịch  D: Độ pha loãng tinh dịch  N: Số tinh trùng đếm 2.4 Xác định tỷ lệ tinh trùng sống: Có thể đánh giá tỷ lệ sống tinh trùng cách nhuộm tinh trùng (đang sống) thuốc nhuộm Khi nhuộm, tinh trùng sống đầu tinh trùng không bắt màu, ngược lại tinh trùng chết đầu tinh trùng bắt màu hồng - Phương pháp nhuộm thuốc nhuộm Eosin 0.5% +Trộn giọt tinh trùng tươi với giọt dung dịch Eosin 1% lên phiến kính, phủ lamell lên,tiến hành kiểm tra sau 30 giây kính hiển vi (vật kính 40) + Quan sát kết quả: Tinh trùng sống không nhuộm màu Tinh trùng chết nhuộm màu đỏ hồng - Phương pháp nhuộm hỗn hợp Eosin-nigrosin + Trộn giọt tinh trùng với giọt Eosin 1% +Sau 30 giây, thêm giọt Nigrosin 10% trộn 30 giây +Đặt giọt mẫu lên phiến kính trải lớp mỏng Để mẫu khô, kiểm tra kính 10-40 + Quan sát kết quả: Tinh trùng sống có màu trắng Tinh trùng chết nhuộm màu đỏ Đặt mẫu lên kính hiển vi (x10), kiểm tra tổng số 100 tinh trùng tính số lượng tinh trùng sống (không bắt màu) suy tỷ lệ phần trăm Nếu tinh trùng sống đạt 80% trở lên, chứng ỏ tinh dịch tốt, sử dụng đạt hiệu cao 2.5 Đo độ pH tinh dịch: - Nhỏ giọt tinh dịch lên giấy pH, so giấy với thang đo pH suy pH tinh dịch Kết nhận xét: 3.1 Kết  Khối lượng - Lọ chứa mẫu: 13.12g - Lọ: 9.7g - Tinh dịch:4.5g - pH=  Hình ảnh độ nhớt tinh trùng  Tiêu soi tươi  Hình ảnh buồng đếm - Buồng đếm ô lớn - Buồng đếm ô nhỏ  Hình ảnh tinh trùng buồng đếm hồng cầu  Hình ảnh tinh trùng nhuộm thuốc thử Eosin 0,5% Tinh trùng chết Tinh trùng sống  Hình ảnh tinh trùng nhuộm thuốc thử Eosin-Nigrosin Tinh trùng bình thường - Tinh trùng dị tật Kết tính mật độ tinh trùng: Tổng số tinh trùng có ô lớn là: N = 135 + 96 + 80 + 95 + 124 = 530 Tính mật độ tinh trùng: nồng độ tinh trùng có 1ml tinh dịch: C = 10.000 N = 10.000.530 = 5.300.000 3.2 Nhận xét: - Tinh trùng màu trắng đục, có mùi tanh, độ nhớt cao - pH=8 (môi trường kiềm) - Nồng độ tinh trùng 5300000 đạt yêu cầu - Số lượng tinh trùng chết nhiều trình bảo quản chưa tốt - Quá trình nhuộm tiêu nhiều sai xót nên tiêu dày tinh trùng kết dính nhiều dày đặt, nên gây khó khăn việc soi tiêu chụp hình (hình ảnh chưa rõ nét) Trả lời câu hỏi Câu 1: Sơ lược cấu tạo hệ sinh dục đực cái? - Hệ sinh dục đực: + Cấu tạo: o Tinh hoàn (testis): có cấu trúc dạng cặp bọc túi (bìu) Bên tinh hoàn có nhiều ngăn, ngăn tổ chức mô biệt hóa sinh sản tinh trùng o Mào tinh (epididymis): nối với tinh hoàn, đường dẫn tinh trùng o Ống dẫn tinh (ductus deferens): nối với ống mào tinh o Túi tinh : nơi chứa tinh trùng tiết dịch trộn với tinh trùng tạo tinh dịch Túi tinh nơi tập kết tạm thời tinh trùng trước o Tuyến tiền liệt : Sản xuất dịch ( có thành phần tinh dịch ) tiết vào túi tinh o Niệu đạo : Nằm dương vật, tinh trùng phóng niệu đạo o Dương vật : Xuất tinh tiết nước tiểu - Hệ sinh dục cái: + Buồng trứng: nơi chứa nang trứng + Vòi tử cung (ống dẫn trứng): nơi trứng gặp tinh trùng thụ tinh (ở 1/3 ống dẫn trứng) + Tử cung: quan để thai làm tổ phát triển + Âm đạo: quan giao hợp.s + Một số quan phụ:  Tầng tử cung  Niêm mạc tử cung  Bàng quang  Xương mu  Niệu đạo  Âm vật  Màng trinh  Môi bé, môi lớn  Phễu ống dẫn trứng  Niệu quản  Cổ tử cung  Trực tràng  Hậu môn Câu 2: Cấu tạo tinh trùng? - Cấu tạo tinh trùng gồm phần: đầu, thân, đuôi + Phần đầu: chứa thể đỉnh acrosome, nơi giải phóng enzyme giúp cho tinh trùng xâm nhập trứng + Phần thân: chứa ty thể, có liên quan đến hoạt động chuyển hóa chất lượng + Phần đuôi: có vai trò vận động, không tham gia vào trình thụ tinh Câu 3: Sự chuyển động tinh trùng nhờ vào đâu? Tinh trùng vận động cách tự quẫy đuôi Câu 4: Điều kiện trình thụ tinh xảy ra? Điều kiện để trình thụ tinh xảy bình thường: + Tinh trùng gặp trứng sau 12 phóng vào ống dẫn trứng + Số lượng tinh trùng phải đảm bảo 1ml tinh dịch + Tỷ lệ % tinh trùng dị dạng không vượt 2-5% + Phần đầu tinh trùng có chứa đủ lượng enzyme hyaluronidase Câu 5: Tại dựa vào tế bào cumullus đánh giá chất lượng trứng? - Theo diện độ dày, mỏng tế bào hạt cumulus bao chung quanh trứng (Tế bào cumulus- tế bào có nhiều hạt hình thành sau trứng rụng vào ống dẫn - Trong môi trường nuôi cấy, lớp tế bào hình thành Các tế bào cumulus có nhiệm vụ cung cấp chất dinh dưỡng cho trứng chưa thụ tinh Khi gặp tinh trùng, lớp tế bào bị bong Trong thụ tinh in-vitro, người ta phải tìm cách gỡ bỏ lớp tế bào không gây tổn thương trứng) + Loại A: trứng có lớp tế bào cumulus bao kín xung quanh + Loại B: trứng có lớp tế bào cumulus bao vây phần + Loại C: trứng lớp tế bào cumulus bao quanh - Thường dùng trứng loại A để nuôi cấy thụ tinh nhân tạo Câu 6: Cách thu nhận đánh giá chất lượng tinh dịch? Thu nhận: o Lấy tinh dịch, sau ghi rõ ngày, tháng, năm, lấy tinh dịch, phương pháp lấy tinh, nhiệt độ không khí, trình vận chuyển bảo quản Đánh giá chất lượng tinh dịch: o Nội dung đánh giá: + Đánh giá đại thể: lượng tinh, màu sắc, mùi, độ keo dính, pH, tỉ lệ dị dạng… + Đánh giá vi thể: nồng độ tinh trùng, tinh trùng kì hình, tỉ lệ tinh trùng sống, sức hoạt động tinh trùng… + Những đánh giá khác dùng nghiên cứu: áp suất thẩm thấu, độ nhớt tỉ trọng, chuyển động… o Việc đánh giá tinh trùng cần tiến hành thật nhanh, xác cẩn thận Câu 7: Phương pháp tính nồng độ tinh trùng buồng đếm hồng cầu? o Nồng độ tinh trùng (C) số tinh trùng diện xác suất ml tinh dịch Thực việc đếm tinh trùng heo phương pháp đếm hồng cầu + Pha loãng tinh trùng ống trộn bạch cầu dung dịch pha loãng (đã chuẩn bị trước) + Đếm số lượng tinh trùng 400 ô nhỏ (của 25 ô lớn) phòng đếm Trong phần này, tinh dịch pha loãng 20 lần ống trộn bạch cầu Công thức tính sau: C = 10000 x N Trong đó:  C: Nồng độ tinh trùng tinh dịch  D: Độ pha loãng tinh dịch  N: Số tinh trùng đếm Câu 8: Xác định tỉ lệ tinh trùng sống phương pháp nhuộm màu tinh trùng? - Có thể đánh giá tỷ lệ sống tinh trùng cách nhuộm tinh trùng (đang sống) thuốc nhuộm Khi nhuộm, tinh trùng sống đầu tinh trùng không bắt màu, ngược lại, tinh trùng hết đầu tinh trùng bắt màu hồng Câu 9: Xây dựng công thức tính mật độ tinh trùng?  h= 1/10mm  d= 1/20mm  S= 1/20*1/20= 1/400 mm2  Vô con= V*S= 1/400* 1/10= 1/40000 mm3  V 80 ô con= 80/4000 mm3  Trong 80/4000 mm3  A tinh trùng mm3  N= (A*4000)/80 Tinh trùng 1ml= 1cm3 = 103 mm3  Số tế bào 1cm3 N=(A*4000*103)/80  Số tế bào 1ml dịch ban đầu N*20 (độ pha loãng ) Mật độ C= N*2O=( 20*A*4000*103)/80= A*106 tt/ml ...BÀI BÁO CÁO SỐ BÀI MỞ ĐẦU Động vật sử dụng môn học? Các thực tập sinh lý học thường tiến hành động vật mức độ in vitro, in situ hay in vivo.Tùy vào mục đích bài, người ta lựa chọn động vật thích... Sau vật nuôi dưỡng cho lành vết thương tiến hành thí nghiệm Như thí nghiệm in vivo thí nghiệm tiến hành thời gian dài ( gọi thí nghiệm trường diễn Tại người đối tượng thí nghiệm? Vì có thí nghiệm. .. kiện sinh lý thích hợp Ví dụ bốc lộ lồng ngực để ghi nhịp tim ếch Các thí nghiệm in situ thí nghiệm cấp diễn  Thí nghiệm in vivo Là thí nghiệm tiến hành thể bình thường khỏe mạnh Ví dụ thí nghiệm