28/14/2014 Mục tiêu vi sinh vật tự nhiên v tRÊN thể ngời yếu tố độc lực vi sinh vật Nhiễm trùng Y2 2013-2014 PGS TS Nguyễn Vũ Trung Kể đợc tên số vi sinh vật thờng gặp đất, nớc, không khí, thể ngời bình thờng Nêu đợc loại đờng truyền bệnh vi sinh vật gây bệnh, loại đờng truyền bệnh cho ví dụ minh hoạ Bộ môn Vi sinh, Đại học Y H Nội Bộ môn Vi sinh-Ký sinh trùng lâm sng, Khoa KTYH Khoa Xét nghiệm, Bệnh viện BNĐTƯ Mục tiêu Trình by khái niệm độc lực v đơn vị đo độc lực Mô tả đợc yếu tố độc lực vi sinh vật Trình by đợc né tránh hệ thống phòng ngự vi sinh vật Trình by đợc khái niệm: nhiễm trùng v hình thái nhiễm trùng Vi sinh vật tự nhiên thể ngời Ti liệu tham khảo Vi sinh vật y học, NXBYH, 2007 Vi sinh y học, NXBYH, 2001 Bacteriology: Principles and application, Willey 2007 Viral infection of the respiratory tract, Marcel dekker, 1999 Vi sinh vật tự nhiên Vi sinh vật thể ngời 28/14/2014 Đặt vấn đề Vi sinh vật đa dạng Phân bố vi sinh vật: Môi trờng-Cơ thể Lợi v hại vi sinh vật Đối tợng Vi sinh vật y học VSV môi trờng Vi sinh vật nớc - Nhiều vi sinh vật - Điều kiện thuận lợi - Phân bố theo địa lý - Từ nguồn khác (đất, nớc, khác) xâm nhập - Lây truyền - Salmonella, Shigella, Vibrio cholerae Vi sinh vật tự nhiên Vi sinh vật thể ngời VSV môi trờng - Vi sinh vật đất Kho chứa vi sinh vật Điều kiện thuận lợi Phân bố theo địa lý Từ nguồn khác xâm nhập vo đất Lây truyền Clostridia, Pseudomonas, Actinomycetes VSV môi trờng Vi sinh vật không khí - vi sinh vật - Điều kiện không thuận lợi - Từ nguồn khác (đất, nớc, khác) - Lây truyền nhanh - Vi khuẩn lao, trực khuẩn bạch hầu, liên cầu tan máu nhóm A, tụ cầu vng, vi rút cúm, vi rút sởi Human microbial world 28/14/2014 Nơi no ??? - Mô bên thể (mô kín): Máu, dịch não tuỷ, dịch khớp, dịch mng phổi - Mô v quan tiếp xúc với môi trờng Các vị trí vi sinh vật ký sinh - Trên da v niêm mạc - Trong đờng tiêu hoá - Trên đờng hô hấp - Trên đờng sinh dục, tiết niệu - Trên niêm mạc mắt Có vi sinh vật ??? - Ngời bình thờng: 300 400 loi - Vi khuẩn chiếm đa số - Các yếu tố: + Di truyền + Dinh dỡng + Tuổi + Stress + Giới + Chế độ ăn VSV ký sinh thể ngời Vi sinh vật ký sinh thể ngời + Vi sinh vật da v niêm mạc Cầu khuẩn Gram (+) (tụ cầu có số vùng định thể, phần lớn da đầu, họng Trực khuẩn Gram (+)Corynebacterium hoffmanii, Corynebacterium xerosis, Corynebacterium minussinum - Trong mô, quan VSV ký sinh thể ngời Vi sinh vật ký sinh thể ngời + Vi sinh vật đờng tiêu hoá Miệng Điều kiện thuận lợi Hơn 400 loi Dạ dy Điều kiện không thuận lợi Có vi khuẩn Ruột Vi khuẩn xuất sau vi Nhiều loại, phân bố tuỳ vùng Trong đờng tiêu hoá Miệng: - Nhiều chất dinh dỡng, tế bo biểu mô bong -> lý tởng cho vi sinh vật phát triển -> Lợi + Hại - Giúp cạnh tranh với vi sinh vật xâm nhập Streptococci, lactobacilli, staphylococci, corynebacteria, nhiều vi khuẩn kị khí - Sinh thái miệng thay đổi theo tuổi: Cha sinh: Vô khuẩn Vi sau: Có vi khuẩn Streptococcus salivarius 98% đến mọc Mọc răng: Streptococcus salivarius 28/14/2014 Trong đờng tiêu hoá Dạ dy: - pH thấp - Rất vi sinh vật tồn đợc - Helicobacter pylori Hệ sinh thái ruột - Chức vi hệ đờng tiêu hoá VSV ký sinh thể ngời - Thay đổi nhiều - Có ý nghĩa định tính vi khuẩn đại trng xuống - Không phản ánh vi hệ ruột non v ton hệ tiêu hoá - Các kỹ thuật xác định dấu ấn di truyền: Sự phối hợp Bifidobacterium and Lactobacillus strains "unique of each human" Các phơng pháp nghiên cứu vi khuẩn chí đờng ruột - Sử dụng môi trờng chọn lọc cho loi vi khuẩn khác (< 20% nuôi cấy đợc) - Các kỹ thuật sinh học phân tử dựa vo DNA + rRNA l phơng tiện nghiên cứu quần thể vi khuẩn + Xác định vi khuẩn v mối quan hệ dựa v xác định trình tự 16SrRNA + Enzyme hạn chế Phức tạp thể Hiểu biết hạn chế Có khoảng 1014 vi khuẩn 1010 sản xuất Ig/m2 ruột Vi khuẩn chí kích thích hệ thống miễn dịch v tế bo có chức miễn dịch - Vi hệ bị phá vỡ -> ảnh hởng sức khoẻ Tham gia giáng hoá thức ăn Tổng hợp vitamin B Kích thích hệ thống miễn dịch Tạo enzyme bảo vệ Tham gia chuyển hoá chất gây ung th Cung cấp 40-50% nhu cầu lợng cho tế bo ruột qua chuyển hoá Acid béo chuỗi ngắn (SCFA) Tơng tác vi khuẩn chí đờng ruột với tế bo biểu mô - Vi khuẩn lm thay đổi biệt hoá tế bo -> tạo môi trờng thuận lợi cho chúng - Đặc điểm chuyển hoá vi khuẩn lm thay đổi phân tử truyền tín hiệu tế bo 28/14/2014 VSV c th ngi Vi sinh vật ký sinh thể ngời + Vi sinh vật đờng hô hấp Mũi Giả bạch hầu, tụ cầu (20-50%) Họng mũi Phế cầu, S viridans, H influenzae, Nesseria hoại sinh Khí, phế quản Đờng hô hấp thờng VSV c th ngi Vi sinh vật ký sinh thể ngời + Vi sinh vật mắt Tụ cầu, số trực khuẩn + Tuần hon, phủ tạng Không có VSV c th ngi Vi sinh vật ký sinh thể ngời + Vi sinh vật đờng sinh dục, tiết niệu Bên ngoi Nam: Mycobacterium smegmatis; lỗ niệu đạo có tụ cầu, trực khuẩn Gram (-) Nữ giới: tụ cầu, trực khuẩn giả bạch hầu, cầu khuẩn đờng ruột, trực khuẩn E coli v thờng vi sinh vật gây bệnh VSV c th ngi Vi sinh vật da v niêm mạc Độc lực Độc lực v đơn vị đo - Mức độ khả gây bệnh vi sinh vật - Vi sinh vật cụ thể v đối tợng cảm thụ cụ thể 28/14/2014 Đơn vị đo độc lực - MLD (minimal lethal dose-liều chết tối thiểu) - LD50 (50 percent lethal dose - liều chết 50%) Các yếu tố độc lực Sự bám Sự xâm nhập v sinh sản Độc tố Một số enzyme ngoại bo Một số kháng nguyên bề mặt có tác dụng chống thực bo Các phản ứng mẫn Độc lực virus Sự né tránh đáp ứng miễn dịch Các yếu tố độc lực Sự bám - Tiên -> Xâm nhập, nhiễm trùng Đặc hiệu tuỳ vị trí: S salivarius, S pyogenes Cấu trúc vi khuẩn liên quan: + Pili (Gram -, lông ngắn, bé) + Fimbriae (Gram +, giống pili, bé hơn) + Polysaccarid bề mặt: S mutant Các yếu tố độc lực Độc tố - Chất độc vi sinh vật để gây bệnh - loại l nội v ngoại độc tố Các yếu tố độc lực Sự xâm nhập v sinh sản - Quyết định -> Nhiễm trùng Xâm nhập -> Tổn thơng Không xâm nhập, độc tố -> Tổn thơng Sinh sản: Nhanh, chậm Các yếu tố độc lực Độc tố Nội độc tố: + Gắn vách vi khuẩn Gram (-) + Lipopolysaccarit (LPS) + Salmonella, Shigella + Chịu đợc nhiệt độ sôi v không bị phân huỷ protease + Tính kháng nguyên yếu v không sản xuất đợc thnh vc xin 28/14/2014 Các yếu tố độc lực Độc tố Ngoại độc tố: + Do vi khuẩn tiết môi trờng + Protein (không chịu đợc nhiệt độ sôi v protease) + tính kháng nguyên tốt v sản xuất thnh vc xin + Độc lực cao (cao nội độc tố) + Do vi khuẩn Gram (+) (bạch hầu, uốn ván, hoại th) v Gram (-) (ho g, tả, ETEC E coli) tạo Các yếu tố độc lực Các yếu tố độc lực Một số enzyme ngoại bo loại enzyme: Tiêu hoá - Độc lực - - Hyaluronidase (C perfringens) Coagulase (S aureus) Fibrinolysin (còn gọi streptokinase): Tụ cầu vng v liên cầu có sản xuất enzym ny Nó hoạt hóa plasminogen thnh plasmin dẫn tới lm tan tơ huyết Hemolysin (ASLO) Các yếu tố độc lực Một số kháng nguyên bề mặt có tác dụng chống thực bo Kháng nguyên vỏ: + (phế cầu, Hemophilus influenzae, liên cầu, dịch Một số kháng nguyên bề mặt có tác dụng chống thực bo Kháng nguyên bề mặt: hạch ) -> chống lại thực bo (bão hòa opsonin hóa_ -> vi khuẩn tồn v gây bệnh + Vỏ Klebsiella v E coli tác dụng ny + Dịch hạch có hai protein bề mặt l V v W đóng vai trò gây bệnh quan trọng Hai kháng nguyên ny gần nh l vỏ vi khuẩn + Vi khuẩn thơng hn có kháng nguyên Vi (viết tắt chữ virulence) -> chống thực bo, -> phát triển bên tế bo bạch cầu + Vi khuẩn lao có cấu trúc lớp vách đặc biệt (bao gồm nhỉều yếu tố sợi v sáp), -> đề kháng cao với thực bo -> sinh sản tế bo thực bo v gây bệnh Các yếu tố độc lực Các yếu tố độc lực Các phản ứng mẫn - Phản ứng miễn dịch có hại cho thể Trớc ngời ta cho miễn dịch chống nhiễm trùng Các phản ứng mẫn l phản ứng bảo vệ thể Nhng gần đây, ngời ta khẳng định phản ứng mẫn l chế bệnh sinh số bệnh nhiễm trùng Các phản ứng mẫn - Các vi khuẩn đờng ruột gây bệnh nội độc tố - Vi rút sốt xuất huyết -> Phức hợp miễn dịch - Ngy nay, mẫn nhiễm trùng đợc cho l số lymphokin (TNF, IL6) -> sốc nhiễm trùng, điển hình l sốc nội độc tố 28/14/2014 Các yếu tố độc lực Các yếu tố độc lực Độc lực vi rút - Tập hợp nhiều yếu tố -> vi rút nhân lên nhanh v gây tổn hại tế bo - Bao gồm yếu tố bám, xâm nhập v nhân lên gây huỷ hoại tế bo dẫn đến biểu bệnh nhiễm vi rút - vi rút gây bệnh l tổn hại tế bo vi rút bám v trình nhân lên nó, nên độc lực vi rút bao gồm yếu tố sau: Độc lực vi rút Vi rút bám mng tế bo cảm thụ -> ảnh hởng đến chức mng ny -> suy thoái chức tế bo Tuy tế bo cha thoái hoá, nhng chức không nh cũ (tế bo TCD4 bị nhiễm HIV) Vi rút ngăn cản sinh tổng hợp đại phân tử tế bo để phục vụ cho nhân lên Các yếu tố độc lực Các yếu tố độc lực Độc lực vi rút - Vi rút -> thay đổi tính thấm lysosom tế bo -> giải phóng enzym - Các tiểu thể vi rút tế bo phá hủy cấu trúc v chức tế bo, gây chết tế bo Độc lực vi rút - Vi rút gây biến dạng nhiễm sắc thể - Vi rút gây ung bớu, gây chuyển dạng tế bo, gây loạn sản tế bo kiểm soát kháng nguyên bề mặt Các yếu tố độc lực Các yếu tố độc lực Sự né tránh đáp ứng miễn dịch Sự phát triển có tính chất biến hóa vi sinh vật xuất vi sinh vật chống lại hệ thống bảo vệ thể, nói l thể để lọt lới biến chủng vi sinh vật né tránh đợc hệ thống phòng ngự thể Do vậy, chúng tồn để gây bệnh Sự né tránh đáp ứng miễn dịch - Sự ẩn dật vi sinh vật: Vi sinh vật chui vo tế bo để tránh tác dụng kháng thể v kháng sinh Vi khuẩn lao, hủi kí sinh bên tế bo, số vi rút chui vo tế bo v gắn ADN chúng vo nhiễm sắc thể 28/14/2014 Các yếu tố độc lực Các yếu tố độc lực Sự né tránh đáp ứng miễn dịch Sự né tránh đáp ứng miễn dịch - Vi khuẩn tiết yếu tố ngăn cản hệ thống bảo vệ thể Tụ cầu vng tiết protein A bao xung quanh tế bo vi khuẩn, ngăn cản tác dụng kháng thể IgG Do protein A gắn với phần Fc IgG Phế cầu v não mô cầu tiết protease thủy phân IgA, kháng thể quan trọng chế ngăn cản vi sinh vật xâm nhập vo niêm mạc - Sự thay đổi kháng nguyên vi sinh vật, điển hình nh vi rút cúm v HIV hạn chế tác dụng miễn dịch đặc hiệu - Các vi sinh vật công hệ thống miễn dịch Ví dụ, vi rút sởi v HIV đánh vo tế bo hệ miễn dịch -> suy giảm miễn dịch Điển hình l HIV xâm nhập v phá huỷ tế bo lympho TCD4 v đại thực bo Các yếu tố độc lực Tóm lại Sự né tránh đáp ứng miễn dịch Độc lực vi sinh vật bao gồm nhiều yếu tố Mỗi vi sinh vật có số yếu tố độc lực Nhiều vi rút, trớc gây bệnh cho động vật, biến dị, trở nên gây bệnh cho ngời, số gây thnh dịch nguy hiểm nh: HIV, SARS, cúm gia cầm định Cơ chế gây bệnh vi sinh vật l phụ thuộc vo yếu tố độc lực Vì vậy, hiểu đợc yếu tố độc lực vi sinh vật giúp ta hiểu đợc biện pháp phòng chống vi sinh vật Đặt vấn đề Các đờng truyền bệnh - Vi sinh vật truyền sang thể lnh Trực tiếp: Máu, tình dục, mẹ Gián tiếp: Không khí, nớc 28/14/2014 Các đờng truyền bệnh Nhiễm trùng Nhiễm trùng Nhiễm trùng l xâm nhập v sinh sản mô VSV gây bệnh dẫn tới xuất không xuất bệnh nhiễm trùng Đờng truyền Vi khuẩn (nhiễm khuẩn) Vi rút (nhiễm vi rút) Ký sinh trùng (nhiễm ký sinh trùng) Các hình thái nhiễm trùng - Bệnh nhiễm trùng (cấp, mạn) - Nhiễm trùng thể ẩn (cận lâm sng) - Nhiễm trùng tiềm tng (herpes, EBV) - Nhễm trùng chậm (ủ bệnh hng năm-HIV) 10 28/14/2014 Phơng thức lây truyền Qua tiếp xúc trực tiếp gián tiếp với da, dịch thể Chủ yếu qua bn tay dụng cụ y t * Trên 90% loại NKBV Chân thnh cảm ơn Qua giọt nhỏ (>5micromet), ví dụ nói, hắt hơi, ho; phát tán gần( Nhiễm trùng Xâm nhập ->... lympho TCD4 v đại thực bo Các yếu tố độc lực Tóm lại Sự né tránh đáp ứng miễn dịch Độc lực vi sinh vật bao gồm nhiều yếu tố Mỗi vi sinh vật có số yếu tố độc lực Nhiều vi rút, trớc gây bệnh cho