Vệ sinh sát trùng Kiến thức bệnh & mầm bệnh Quan trọng phòng chống dịch bệnh – tiêu độc sát trùng  Đường truyền lây bệnh: khơng khí, phương tiện vận chuyển, dụng cụ chăn ni  Tính chất vi sinh vật gây bệnh  Cấu tạo Gram dương, Gram âm, bào tử, virus có chứa lipid, virus ưa nước Liên quan tới khả đề kháng với tác nhân sát trùng  Khả tồn mơi trường ngồi liên quan tới khả đề kháng liên quan tới định biện pháp loại bỏ mầm bệnh: - khoảng nghỉ đợt ni (down time) - tăng cường tiêu độc sát trùng Diseases of chicken & lifespan of disease away from chicken Disease Lifespan away from birds Bursal disease Months Coccidiosis Months Fowl cholera Weeks Fowl coryza Hours to days Influenza Days to weeks Laryngotracheitis Days Marek's disease Weeks Newcastle Days to weeks Mycoplasmosis Hours to days Salmonellosis Weeks Biện pháp loại bỏ mầm bệnh đợt ni - Đối với mầm bệnh có sức đề kháng mơi trường ngồi, Hemophilus paragallinarum (infectious coryza) Mycoplasma spp sống ~ ngày mơi trường ngồi - khoảng nghỉ ~ 1-2 tuần đợt ni - Ngược lại, IBDV (Gumboro), cầu trùng (coccidia), FMDV đề kháng việc dùng khoảng nghỉ đợt ni bị hạn chế tăng cường hiệu vệ sinh, sát trùng - Khoảng thời gian nghỉ dài: khó khăn chuồng trại ? Thế tác nhân sát trùng mạnh? - mạnh: cóù khả tiêu diệt bào tử vd, glutaraldehydes, chlorine dioxide, H2O2 - trung bình: không cóù khả tiêu diệt bào tử - cóù thể tiêu diệt Mycobacterium tuberculosis, nấm mốc, virus vd, alcohols (70-90% ethanol hay isopropanol), UV - hiệu thấp: không diệt bào tử, mycobacteria &ø virus cóù kích thước nhỏ - cóù thể dùng để tiêu diệt vi khuẩn số yếu tố ảnh hưởng hiệu lực tác nhân sát trùng - vi sinh vật - tính láng cuả bề mặt cần khử nhiễm - diện chất hữu - nhiệt độ - thời gian tiếp xúc - nồng độ - độ cứng nước dùng để pha loãng thuốc sát trùng Tác nhân sát trùng lý tưởng? - Hoạt tính sát trùng nhanh, chí diện chất hữu - Phổ sát trùng rộng (diệt nhiều loại vi sinh vật) - Bền khơng/ít bị ảnh hưởng ánh sáng, nhiệt, yếu tố mơi trường khác - Dễ tìm, dễ sử dụng, rẽ tiền - Khơng/ độc hại mơ - Khơng làm hư hại dụng cụ - Khơng có mùi khó chịu Lưu ý: - Khơng có tác nhân sát trùng hồn hảo việc lựa chọn tác nhân sát trùng tùy mục đích sử dụng - Nên xem kỹ “nhãn”: định & cách sử dụng Cơ chế sát trùng Các tác nhân sát trùng khác có chế tác động khác nhau:  Ơ-xy hóa thành phần tế bào (DNA, proteins, v v )  Phản ứng hay kết hợp với proteins hay thành phần tế bào làm biến tính thành phần Các tác động dẫn đến: - Phá hủy thành tế bào - Thay đổi màng ngun sinh chất - Thay đổi tính thấm tế bào - Ức chế enzymes, ức chế chuyển hóa Định nghĩa - Inhibition: reduction of microbial growth rate - Sterilization: killing or removal of all viable organisms - Disinfection: reducing the number of viable microorganisms present in a sample - Disinfectant: killing microbes on inanimate objects - Sanitization: cleaning of pathogenic microorganisms from public eating utensils (in the kitchen of a restaurant) - Pasteurization: killing or removing of all disease-producing organisms or reduction in the number of spoilage organisms - dose ? - Antiseptic: sufficiently nontoxic to be applied on living issues, killing or removal of all viable organisms - Bactericidal: killing all bacteria - Bacteriostatic: inhibiting bacterial growth but not killing the bacteria - Lytic (lysis): losing cellular integrity with release of cytoplasmic contents Hiệu hoạt chất sát trùng Tĩnh khuẩn Diệt khuẩn FORMALDEHYDE - Là chất sát trùng mạnh, glutaraldehyde - diệt hầu hết vi sinh vật kể bào tử vi khuẩn Nhược điểm: độc tính cao: gây kích ứng mạnh mắt màng nhầy niêm mạc cóù thể gây ung thư giảm hoạt tính nhanh tiếp xúc với chất hữu - Trên thò trường, dung dòch formalin dung dòch 40% (w/v) Ứng dụng: Hydrogen hydroxide (H2O2) - diệt nhiều loại vi khuẩn, nấm mốc &ø virus - Vi khuẩn yếm khí đặc biệt nhạy cảm với H2O2 - hoạt tính vi khuẩn G-âm > vi khuẩn G-dương - Dung dòch 6% diệt bào tử Nhược điểm: ăn mòn kim loại &ø gây hư hại dụng cụ cao su/ plastic - H2O2 chấáät diệt khuẩn tự nhiên: sữa &ø mật ong: có vai trò chất bảo quản cơ, màng nhầy &ø đại thực bào: tham gia vào chế miễn dòch tự nhiên không đặc hiệu H2O2- Cơ chế diệt khuẩn: ô xy hoá - ô xy hoá chloride tế bào vi khuẩn diện enzyme myeloperoxidase) Cl- + H2O2 → OCl- + H2O - phản ứng với superoxide tạo hydroxyl – gốc ơ- xy hoá mạnh - ô xy hoá lipids màng, DNA, thành phần thiết yếu tế bào, gốc -SH, cầu nối đôi proteins, lipids &ø màng tế bào: O2- + H2O2 → OH + OH- + O2 Lưu ý: khơng có tác dụng vi khuẩn sinh catalase, ví dụ: Mycobacterium tuberculosis, Legionella pneumophila, Campylobacter jejuni, Staphylococcus aureus, v v H2O2 → H2O + O2 H2O2-Ứng dụng: - bôi vết thương mở: diệt vi trùng + làm vết thương ô xy hoá mô chết &ø chất bẩn - Sát trùng nước hồ bơi dùng chung với 1chất khác Baquacil ngăn ngừa phát triển vi khuẩn khống chế phát triển tảo không sinh chất độc, không tạo mùi khó chòu, không gây xót mắt - khử mùi nước thải - H2O2 + UV: tiệt trùng khâu đóng gói (packaging) thực phẩm - sát trùng không khí thay cho khí độc (hơi H2O2) - tiệt trùng dụng cụ phòng thí nghiệm tiệt trùng nhiệt - khử nhiễm phòng hay buồng an toàn sinh học (biologic safety cabinets) Acid peracetic (CH3COOOH) - có tính sát khuẩn cao H2O2 - nồng độ < 100 ppm: diệt vi khuẩn G-âm, G-dương, nấm men & mốc ≤ phút - nồng độ 0,05-3%: diệt bào tử 15 giây-15 phút - Nồng độ diệt virus biến động lớn phages: 12-30 ppm/ phút; enteric viruses: 2000 ppm/ 10-30 phút, poliovirus: 750-1500 ppm/15 phút - 200-500 ppm: trì hiệu cao có diện chất hữu - không bò enzyme catalase, oxidase phân huỷ: khác với H2 O2 Acid peracetic - Ứng dụng: - dùng nhiều nhà máy chế biến thực phẩm &ø thức uống: sát trùng cuối đồ chứa thép, thuỷ tinh, ống dẫn, xe bồn phản ứng với sản phẩm, không ảnh hưởng tới mùi, vò, khơng độc hại, giúp tiết kiệm thời gian chi phí - sát trùng dụng cụ, máy móc phẩu thuật &ø nha khoa - tiệt trùng vật dụng plastic, cao su, thép (0,5%/5 phút) - dung dòch 0,05-0,1%: tiệt trùng huyết &ø cao trích nấm men (yeast extract) trước thêm vào môi trường nuôi cấy mycoplasma - sát trùng nước nhà máy công nghiệp &ø hệ thống làm lạnh để ngăn ngừa phát triển vi khuẩn gây ăn mòn hay vi khuẩn gây bệnh - xử lý nước thải OZONE - ô xy hoá mạnh, sử dụng rộng rãi sát trùng Ozone tiêu diệt hầu hết vi khuẩn bào tử  Xử lý nước &ø nước thải  Tiệt trùng nước Nước uống Nước tinh khiết sử dụng điều chế dược phẩm  Trong thủy sản: tiệt trùng nước nuôi động vật thuỷ sản, nuôi cá; tiệt trùng nước tái sử dụng trại nuôi trồng thuỷ sản  Các trường hợp khác: khử màu, khử mùi & vò khống chế phát triển tảo ô xy hoá chất vô cơ, hữu nước &ø nước thải làm quầy thịt Các hợp chất kiềm NaOH sát trùng mạnh &ø tính ăn mòn cao 30%: cóù thể diệt bào tử nhiệt thán 10 phút 10%: + 10% NaCl: tăng hoạt tính NaOH KOH Ca(OH)2 hoạt tính yếu Dung dòch 20% thường dùng tẩy uế, quét lên tường, sàn Na2CO3 4% rửa phương tiện vận tải gia súc hay sản phẩm động vật, trước đối tượng sát trùng phương pháp khác Ca(OH)2 Na2CO3 không diệt bào tử VIME-IODINE 200: Iodine vinyl pyrrolidin, 1,2dihydroxypropane VIME-PROTEX: 1,5 - Pentanedial (glutaraldehyde) Alkyldimethylbenzylammonium chloride BKC50; BKC 80%: benzalkonium chloride (alkyl dimethyl benzyl ammonium chloride) Virkon: TH4+: Pentapotassium bis(peroximonosulphate) bis(sulfate) Sulfamidic acid Sodium dodecylbenzenesulfonate Dipotassium peroxodisulphate Glutaraldehyde số ammonium bậc số ví dụ thuốc sát trùng dùng thú y VIME-IODINE 200: Iodine vinyl pyrrolidin, 1,2dihydroxypropane VIME-PROTEX: 1,5 - Pentanedial (glutaraldehyde) Alkyldimethylbenzylammonium chloride BKC50; BKC 80%: benzalkonium chloride (alkyl dimethyl benzyl ammonium chloride) Virkon: Pentapotassium bis(peroximonosulphate) bis(sulfate) Sulfamidic acid Sodium dodecylbenzenesulfonate Dipotassium peroxodisulphate TH4+: Glutaraldehyde số dimethyl ammonium chloride                                  Các tác nhân diệt bào tử vi khuẩn • Nhiệt (nước sơi, autoclaving, sấy) • Glutaraldehyde, dung dịch 2% • Formaldehyde, sử dụng dạng lỏng dạng • Hợp chất chứa chlorine - Hypochlorite - Chlorine dioxide • Các hợp chất chứa i-ốt • H2O2 &ø acid peracetic • Các hợp chất ethylene oxide, beta-propiolactone Virus lở mồm long móng - FMDV - Sức đề kháng cao, tồn năm mơi trường ngồi - Có thể dùng: acid &ø kiềm: NaOH 2%, Na2CO3 4%, acetic acid 4-5% NaClO 3%, K Peroxymonosulfate & NaCl 1% (i.e., Virkon-S) - đề kháng với: hợp chất phenol ammonium bậc hypochloride nồng độ thấp iodophors - nấu sơi hay autoclave - không dùng phương pháp Pasteur để tiệt trùng sữa: tồn sữa sau tiệt trùng 72 oC/ phút, hay phát kem đun 93 oC/15 giây Avian influenza virus sát trùng chuồng trại & dụng cụ Soaps and detergents Leave in contact for at least 10 minutes Sodium hypochlorite (liquid) 2-3% available chlorine, leave for 10-30 minutes Calcium hypochlorite (solid or powder) 2-3% available chlorine (30 g/litre solid or 20 g/litre powder), leave for 10-30 minutes Virkon® (excellent disinfectant) 2% (20 g/litre), leave for at least 10 minutes Follow manufacturer's instructions Virocid® (good for non-porous surfaces) Dilute 1:40,leave for at least 10 minutes Follow manufacturer's instructions NaOH (caustic soda) (recommended for use in presence of organic material - not use with aluminium or similar alloys) 2% (20 g/litre), leave for at least 10 minutes NaCO3 (anhydrous) 4% (40 g/litre), leave for at least 10 minutes NaCO3 (washing soda) (recommended for use in presence of organic materials) Dilute (100 g/litre), leave for at least 30 minutes http://www.fao.org/avianflu/en/disinfection.html Hố sát trùng Việc sử dụng hố sát trùng thật đạt hiệu mang loại ủng chống nước ngâm dung dòch sát trùng sâu 15 cm, phút Các chất sát trùng thích hợp cho hố sát trùng phenols, cresols & iodophors Trong trường hợp có dòch phòng bệnh có nguy dùng chất sát trùng diệt mầm bệnh nồng độ thích hợp Dung dòch sát trùng hố cần thay thường xuyên - trại lớn, nên thay dung dòch sát trùng ngày hay buổi - sở chăn nuôi nhỏ, thay dung dòch ngày lần Trong trường hợp giày dễ bò dính đất, cần có hố dung dòch sát trùng loãng để rửa giày trước bước sang hố sát trùng Vệ sinh buồng ấp trứng Xông (fumigation) formaldehyde biện pháp hữu hiệu để sát trùng kệ &ø máy ấp trước ấp Trứng sát trùng cách xông trước ấp Các phương pháp sinh formaldehyde bao gồm: (1) Phương pháp potassium permanganate: 10 g KMnO4 + 35 ml formalin 40% / m3 khơng khí phản ứng xảy nhanh & mãnh liệt, giải phóng formaldehyde (2) Phương pháp paraformaldehyde: Đun nóng 10 g paraformaldehyde (bằng bếp điện tự động ngắt) / m3 Trước đun, nên tưới nước (để đạt độ ẩm khoảng 70%) Paraformaldehyde: (CH 2O)n với (n = - 100) (3) Phương pháp bốc dung dòch formalin: ... Gram-positive anaerobic sporulating Bacteria 2,400 Bacillus subtilis Gram-positive aerobic sporulating Bacteria 600 Salmonella typhimurium Gram-negative Bacteria 200 Lactobacillus brevis Gram-positive... hay đồ vật kim loại hay thuỷ tinh, - mơi trường ni cấy vi sinh vật Phương pháp Pasteur hóa nhiệt Tiệt trùng sữa diệt tất vi sinh vật không sinh bào tử 62,8 - 65,6 oC 30 phút, 71,7 oC 15 giây Phương... (1, 4) Central endospore, (2, 3, 5) terminal endospore (6) lateral endospore Several scientists have been able to recover viable endospores from bees trapped in amber that is 25-40 million years