Header Page of 126 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM - - NGUYỄN THỊ HỒNG THÁI NGHIÊN CỨU HÓA HỌC CÁC HỢP CHẤT CÓ HOẠT TÍNH SINH HỌC TRONG QUẢ KÉ ĐẦU NGỰA (XANTHIUM STRUMARIUM L.) Chuyên ngành: Hoá học hữu Mã số: 60.44.27 LUẬN VĂN THẠC SĨ HOÁ HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Phạm Văn Thỉnh Thái Nguyên 2007 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page ofbởi 126 http://www.lrc-tnu.edu.v Header Page of 126 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM - - NGUYỄN THỊ HỒNG THÁI NGHIÊN CỨU HÓA HỌC CÁC HỢP CHẤT CÓ HOẠT TÍNH SINH HỌC TRONG QUẢ KÉ ĐẦU NGỰA (XANTHIUM STRUMARIUM L.) LUẬN VĂN THẠC SĨ HOÁ HỌC Thái Nguyên 2007 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page ofbởi 126 http://www.lrc-tnu.edu.v Header Page of 126 MỤC LỤC Trang LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT DÙNG TRONG LUẬN VĂN DANH MỤC CÁC BẢNG TRONG LUẬN VĂN DANH MỤC CÁC HÌNH VÀ SƠ ĐỒ TRONG LUẬN VĂN MỞ ĐẦU CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 KHÁI QUÁT VỀ HỌ CÚC (ASTERACEAE) VÀ CHI XANTHIUM 1.1.1 Họ cúc (asteraceae) 1.1.2 Chi xanthium 1.2 GIỚI THIỆU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM CỦA CÂY KÉ ĐẦU NGỰA 1.2.1 Đặc điểm thực vật 1.2.2 Đặc điểm sinh thái 1.3 MỘT SỐ NGHIÊN CỨU VỀ THỰC VẬT CHI XANTHIUM 1.3.1 Một số nghiên cứu hoá thực vật Ké đầu ngựa 1.3.2 Sử dụng y học dân gian 1.3.3 Một số thuốc dân gian từ Ké đầu ngựa 1.4 CÁC DẠNG AXIT BÉO HAY GẶP TRONG TỰ NHIÊN .10 CHƢƠNG 2: PHẦN THỰC NGHIỆM 2.1 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 2.1.1 Thu mẫu cây, xác định tên khoa học phƣơng pháp sử lý mẫu 18 2.1.2 Phƣơng pháp phân lập hợp chất từ dịch chiết 20 2.1.3 Phƣơng pháp khảo sát xác định cấu trúc hoá học hợp chất 20 2.2 DỤNG CỤ, HOÁ CHẤT VÀ THIẾT BỊ NGHIÊN CỨU 20 2.2.1 Dụng cụ hoá chất 20 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page ofbởi 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page of 126 2.2.2 Thiết bị nghiên cứu 22 2.3 CÁC DỊCH CHIẾT TỪ QUẢ KÉ ĐẦU NGỰA (XANTHIUM STRUMARIUM L.) 22 2.3.1 Các dịch chiết 22 2.3.2 Thử hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định (antimicrobial activity) 24 2.3.3 Phát định tính nhóm chất 25 2.3.3.1 Các ancaloit 25 2.3.3.2 Các sterol 26 2.3.3.3 Các flavonoit 26 2.3.3.4 Các saponin 26 2.3.3.5 Các cumarin 26 2.3.3.6 Các tanin 27 2.3.3.7 Các glucozit trợ tim 27 2.4 PHÂN LẬP VÀ TINH CHẾ CÁC CHẤT 28 2.4.1 Phân tích thành phần axit béo dịch chiết n-hexan Ké đầu ngựa GC 29 2.4.2 Phân lập tinh chế chất dịch chiết n-hexan; etylaxetat ké đầu ngựa phƣơng pháp sắc ký cột 31 2.4.2.1  – Sitosterol (KĐN.H8) 31 2.4.2.2 3-O- -D-glucopyranosyl--Sitosterol (KĐN.E33) 32 CHƢƠNG 3: THẢO LUẬN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 NGUYÊN TẮC CHUNG 35 3.2 PHÁT HIỆN CÁC NHÓM CHẤT CÓ TRONG DỊCH CHIẾT N-HEXAN, DỊCH CHIẾT ETYLAXETAT VÀ DỊCH CHIẾT METANOL CỦA QUẢ KÉ ĐẦU NGỰA (XANTHIUM STRUMARIUM L.) 36 3.3 KẾT QUẢ THỬ HOẠT TÍNH KHÁNG VI SINH VẬT KIỂM ĐỊNH DỊCH CHIẾT N-HEXAN, DỊCH CHIẾT ETYLAXETAT VÀ DỊCH CHIẾT METANOL CỦA QUẢ KÉ ĐẦU NGỰA (XANTHIUM STRUMARIUM L) .36 3.4 XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG VÀ THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CỦA QUẢ KÉ ĐẦU NGỰA 38 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page ofbởi 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page of 126 3.4.1 Các axit béo 38 3.4.2 Các hợp chất sterol 41 3.4.2.1 β-sitosterol hay 24R-stigmast-5 en-3-õ-ol (KĐN.H8) 41 3.4.2.2 3-O--D-glucopyranosyl--sitosterol (KĐN.E33) 44 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO 46 PHỤ LỤC 49 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page ofbởi 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page of 126 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng tôi, số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố công trình khác Tác giả Nguyễn Thị Hồng Thái Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 6Sốofhóa 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page of 126 Lời cảm ơn Với lòng biết ơn sâu sắc, xin chân thành cảm ơn PGS TS Phạm Văn Thỉnh người thầy hướng nghiên cứu, hướng dẫn tận tình, động viên giúp đỡ trình học tập, nghiên cứu để hoàn thành luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn TS Nguyễn Quyết Tiến, TS Phạm Thị Hồmg Minh, phòng Hoạt chất sinh học, Viện Hoá học - Viện khoa học công nghệ Việt Nam nhiệt tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi để hoàn thành công việc nghiên cứu Tôi xin bày tỏ lòng cảm ơn Phòng Phân tích cấu trúc - Viện Hóa học, Phòng Hoá - Sinh Biển Viện Hoá học hợp chất thiên nhiên, giúp thực phép phân tích phổ phân tích thành phần axit béo mẫu nghiên cứu Tôi xin chân thành cảm ơn thầy, cô môn hoá hữu cơ, thầy, cô khoa Hoá học, phòng ban trường ĐHSP Thái Nguyên tạo điều kiện thuận lợi thời gian học tập hoàn thành luận văn Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới người thân gia đình, bạn bè đồng nghiệp giúp đỡ, động viên, tạo điều kiện thuận lợi để nghiên cứu hoàn thành luận văn Thái Nguyên , ngày 20 tháng năm 2007 Tác giả Nguyễn Thị Hồng Thái Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 7Sốofhóa 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page of 126 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT DÙNG TRONG LUẬN VĂN  Các phương pháp sắc ký SKLM : Sắc ký lớp mỏng CC : Column chromatography  Các phương pháp phổ UV : Ultraviolet spectroscopy GC : Gas Chromatography GC - MS : Gas Chromatography - Mass Spectroscopy EI - MS : Electron Impact Mass Spectroscopy ESI - MS : Electron sprayionisation - Mass Spectroscopy FAB - MS : Fast Atom Bombardment Mass spectroscopy FT-IR : Fourier Transform Infrared Spectroscopy NMR : Nuclear Magnetic Resonance : 1H-Nuclear Magnetic Resonance H-NMR 13 C-NMR DEPT COSY : 13C- Nuclear Magnetic Resonance : Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer : Correlated Spectroscopy HMQC : Heteronuclear Multiple - Quantum Coherence HMBC : Heteronuclear multiple - Bond Correlation NOESY : Nuclear Overhauser and Exchange Spetroscopy MIC : Minimum inhibitory concentration Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 8Sốofhóa 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page of 126 DANH MỤC CÁC HÌNH VÀ SƠ ĐỒ TRONG LUẬN VĂN Nội dung Hình Trang Và sơ đồ Hình 1.1 Công thức dạng tổng quát chất I, II, III Hình 1.2 Cấu trúc chất I Hình 2.1 Cây Ké đầu ngựa 19 Hình 2.2: Quả Ké đầu ngựa 19 Sơ đồ 2.1 Quy trình ngâm chiết mẫu 23 Sơ đồ 2.2: Sơ đồ chung nghiên cứu số thành phần hoá học 28 Ké đầu ngựa thuộc chi Xanthium strumarium L Sơ đồ 2.3 Phân lập chất từ dịch chiết n-Hexan Ké đầu ngựa 31 Sơ đồ 2.4 Phân lập chất từ dịch chiết Etylaxetat Ké đầu ngựa 33 Sơ đồ 3.1 Sự phân mảnh EI – MS chất KĐN.H8 42 Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 9Sốofhóa 126 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 10 of 126 DANH MỤC CÁC BẢNG TRONG LUẬN VĂN Tên bảng Nội dung Trang Bảng 1.1 Các dạng axit béo no thường gặp tự nhiên 13 Bảng 1.2 Các axit béo không no thường gặp tự nhiên 15 Bảng 2.1 Khối lượng cặn chiết phân đoạn Ké đầu ngựa 24 (Xanthium strumarium L.) Bảng 2.2 Kết thử hoạt tính sinh học dịch chiết từ 25 Ké đầu ngựa Bảng 2.3 Phát định tính nhóm chất 27 Bảng 2.4 Kết thành phần axit béo 30 Bảng 3.1 Các cấu tử có hàm lượng axit béo 1% Ké 39 đầu ngựa Bảng 3.2 Các cấu tử có hàm lượng axit béo 1% Ké 39 đầu ngựa Bảng 3.3 Số liệu phổ 13 C-NMR (CDCl3, 125Mhz) õ-sitosterol Số of hóa126 Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 10 43 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 59 of 126 48 Sơ đồ 3: Sự phân mảnh EI – MS chất KĐN.H8 m/z = 414 - C6H13 - H2O HO CH2 m/z = 329 m/z = 396 HO - 15 -C H Footer Page 59 Số of hóa126 Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 60 of 126 49 m/z = 255 * Tóm lại : Qua việc phân tích số liệu phổ, kết hợp với đặc trưng vật lý, tài liệu, lần khẳng đị nh chất KĐN.H8 mà phân lập (3, 24 R)  - sitosterol có công thức phân tử C29 H50 O, có công thức cấu tạo trình bày 3.4.2.2  - Sitosterol glucosid ( - Sitosterol –3 – o -  - D Glucopyranosyl) 28 22 21 24 20 12 13 26 27 17 11 25 23 18 16 19 14 RO 15 10 - Chất rắn vô định hình không màu (KĐN.E33) không tan cloroform, axeton dễ tan metanol tonc = 282 – 283 Rf = 35 Phổ FT – I R (viên nén KBr) có vân hấp thụ đặc trưng sau Footer Page 60 Số of hóa126 Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 61 of 126 50 3390 cm-1 (mạnh, rộng) ứng với dao động hoá trị nhóm hiđroxyl (- OH) 2934, 2960 cm-1 (mạnh) CH ứng với dao động hoá trị nhóm – CH3 > CH2 no 1640 cm-1 (yếu) C = C ứng với dao động hoá trị > C = C < an ken 1461 cm-1 (trung bình) CH ứng với dao động biến dạng nhóm > CH2 - CH3 1373 cm-1 (trung bình) CH3 ứng với dao động biến dạng xứng nhóm – CH3 (xem phụ lục) - Phổ 1H – NMR (DMSO, 500 MHz), ppm: 3,648 (1H, m, - CH – OH); 5,330 (1H, t, > CH -) - Trong phổ 1H – NMR cho thấy vân hấp thụ dày đặc nhiều nhóm hiđroxyl, đặc biệt phổ NMR quan sát thấy proton “anome” (H–1’) hexosa xuất dạng doublet 4,32 ppm, có J = 7,8 Hz, c – 1’ tương ứng 100,8 ppm - Phổ 13C – NMR (DMSO, 500 MHz), ppm: có hai tín hiệu 140, 56 (s, C - 5) 121,33 (d, C – 6) thuộc liên kết olephin - Ngoài với kỹ thuật khác 13C – NMR quan sát thấy 35 tín hiệu nguyên tử bon, có nguyên tử bon gắn với oxy (nằm vùng 61,20 – 100,8 ppm) - Từ số liệu phổ IR, MS, 1H 13C – NMR, DEPT 90 DEPT 135 cho phép nghĩ đến hợp chất glucozit có công thức phân tử C 35 H60 O6 Khi đem thuỷ phân chất axit loãng thu  - sitosterol đồng thời có mảnh 396 m/z (M – C6 H12 O6), phổ EI – MS xác nhận phân tử hexosa bị loại khỏi phân tử sitosterol glucozit Footer Page 61 Số of hóa126 Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 62 of 126 51 - Từ kiện đem tiến hành đo điểm nóng chảy với hỗn hợp chất mẫu, thấy thay đổi, cho phép khẳng định chất (KĐN.E33) thu từ dịch chiết Etylaxetat Ké đầu ngựa  sitosterol – – O -  - D – glucopyranosyl 31,69 (t) CH2 31,63 71,84 (d) CH 71,73 42,29 (t) CH2 42,20 140,78 (s) C 140,71 121,74 (d) CH 121,63 31,94 (t) CH2 31,90 31,95 (d) CH 31,81 50,17 (d) CH 51,13 36,53 (s) C 36,43 21,11 (t) CH2 21,09 39,81 (t) CH2 39,79 42,33 (s) C 42,37 56,79 (d) CH 56,75 24,32 (t) CH2 24,15 28,26 (t) CH2 28,25 56,09 (d) CH 56,02 Footer Page 62 Số of hóa126 Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 63 of 126 52 CH3 11,84 19,41 (q) CH3 19,46 36,16 (c) CH 36,07 18,80 (q) CH3 18,68 33,98 (t) CH2 33,95 26,13 (t) CH2 26,10 45,88 (d) CH 45,82 29,19 (d) CH 29,05 11,89 (q) 26 0,81 (3H, d) 19,05 (q) CH3 19,77 27 0,88 (3H, d) 19,41 (q) CH3 19,21 23,13 ()t CH2 23,13 11,99 (q) CH3 11,04 28 29 0,83 (3H, d) OH * Nhận xét: So sánh độ chuyển dịch hoá học 13C – NMR BĐQ mà phân lập với độ chuyển dịch hoá học 13 C – NMR (3, 24R)  - sitosterol thấy kết tương đối giống Tuy nhiên vài số liệu khác chế độ máy chạy khác Mặt khác phổ EI – MS dựa vào pic thấy phân mảnh phù hợp với phân mảnh  - Sitosterol mà liệu phổ đưa (độ trùng lặp 83%) song pic ion phân tử mảnh tương đương Dựa vào kích phổ EI – MS đưa khả phân mảnh BĐQ xảy sau Footer Page 63 Số of hóa126 Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 64 of 126 53 Sơ đồ 3: Sự phân mảnh EI – MS chất BĐQ m/z = 414 - C6H13 - H2O HO CH2 m/z = 329 m/z = 396 HO - 15 - C4 H8 m/z = 273 m/z = 381 HO - H2O m/z = 255 Footer Page 64 Số of hóa126 Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 65 of 126 54 * Tóm lại : Qua việc phân tích số liệu phổ, kết hợp với đặc trưng vật lý, tài liệu, lần khẳng đị nh chất BĐQ mà phân lập (3, 24 R)  - sitosterol có công thức phân tử C29 H50 O, có công thức cấu tạo trình bày 3.4.2  - Sitosterol glucosid ( - Sitosterol –3 – o -  - D Glucopyranosyl) 28 22 21 24 20 12 13 26 27 17 11 25 23 18 16 19 14 RO 15 10 - Chất rắn vô định hình không màu (HBĐ) không tan cloroform, axeton dễ tan metanol tonc = 282 – 283 Rf = 32 Phổ FT – I R (viên nén KBr) có vân hấp thụ đặc trưng sau 3390 cm-1 (mạnh, rộng) ứng với dao động hoá trị nhóm hiđroxyl (- OH) 2934, 2960 cm-1 (mạnh) CH ứng với dao động hoá trị nhóm – CH3 > CH2 no 1640 cm-1 (yếu) C = C ứng với dao động hoá trị > C = C < an ken 1461 cm-1 (trung bình) CH ứng với dao động biến dạng nhóm > CH2 - CH3 1373 cm-1 (trung bình) CH3 ứng với dao động biến dạng xứng nhóm – CH3 (xem phụ lục ) - Phổ 1H – NMR (DMSO, 500 MHz), ppm: 3,648 (1H, m, - CH – OH); 5,330 (1H, t, > CH -) Footer Page 65 Số of hóa126 Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 66 of 126 55 - Trong phổ 1H – NMR cho thấy vân hấp thụ dày đặc nhiều nhóm hiđroxyl, đặc biệt phổ NMR quan sát thấy proton “anome” (H–1’) hexosa xuất dạng doublet 4,32 ppm, có J = 7,8 Hz, c – 1’ tương ứng 100,8 ppm - Phổ 13C – NMR (DMSO, 500 MHz), ppm: có hái tín hiệu 140, 56 (s, C - 5) 121,33 (d, C – 6) thuộc liên kết olephin - Ngoài với kỹ thuật khác 13C – NMR quan sát thấy 35 tín hiệu nguyên tử bon, có nguyên tử bon gắn với oxy (nằm vùng 61,20 – 100,8 ppm) - Từ số liệu phổ IR, MS, 1H 13C – NMR, DEPT 90 DEPT 135 cho phép nghĩ đến hợp chất glucozit có công thức phân tử C 35 H60 O6 Khi đem thuỷ phân chất axit loãng thu  - sitostrol đồng thời có mảnh 396 m/z (M – C6 H12 O6), phổ EI – MS xác nhận phân tử hexosa bị loại khỏi phân tử sitosterol glucozit - Từ kiện đem tiến hành đo điểm nóng chảy với hỗn hợp chất mẫu, thấy thay đổi, cho phép khẳng định chất (HBĐ) thu từ dịch chiết metanol hạt Ba đậu  - sitostrol – – O -  D – glucopyranosid 3.4.3  - amyrin axetat (urs – 12 – en - 3 - yl axetat) AcO Footer Page 66 Số of hóa126 Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 67 of 126 56 Trong phổ EI – MS quan sát thấy mảnh ion phân tử M+ 468 (1,7) m/z có kiểu phân mảnh giống urs – 12 – en – – yl axetat [129 mh] Phổ 13 C – NMR với kỹ thuật khác có mặt 32 nguyên tử bon (xem bảng ) Bảng : Độ chuyển dịch hoá học 1H – NMR 13C – NMR KSQ Chất KSQ STT nguyên tử cacbon C (độ bội) 38,493 (t) 23,265 (t) 80,975 (d) 37,729 (s) 55,290 (d) 18,263 (t) 32,891 (t) 40,055 (d) 47,6,1 (d) 10 36,817 (d) 11 23,391 (t) 12 124, 344 (d) 13 139,649 (s) 14 42,099 (s) 15 28,115 (t) 16 26,624 (t) 17 33,764 (s) 18 59,092 (d) 19 39,629 (d) Footer Page 67 Số of hóa126 Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên H (J, Hz) 4,507dd, J 6.0, 10.6 Hz 5,126t, J 3.6 Hz http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 68 of 126 57 20 39,673 (d) 21 31,266 (t) 22 41,553(t) 23 28,053 (q) 0,877s 24 16,885 (q) 0,865s 25 15,747 (q) 0,970s 26 16,748 (q) 1,012s 27 23,241 (q) 1,067s 28 28,759 (q) 0,800s 29 17,513 (q) 0,796d, J4.20 Hz 30 21,403 (q) 0,922d, J 5.13 Hz 31 170,996 - 32 121,312 2,046s (Ghi : Các dòng để trống phổ 1H tín hiệu không phân giải cacbon bậc (không chứa H)) Phổ 1H – NMR có mặt nhóm metyl dạng singlet, nhóm metyl dạng doublet vùng trường cao (0,79 đến 1,07 ppm) hoàn toàn chứng tỏ tritecpen kiểu khung ursan Sự có mặt nhóm axetyl (KSQ) xác nhận tín hiệu cộng hưởng proton cac bon – 13 (2,0460 s; 170,990 s; 21,312q) Các số liệu phổ 13 C – NMR (bảng … ) hoàn toàn phù hợp với cấu trúc urs – 12 – en - 3 - yl axetat hay  - amyrin axetat [91 mH] Có công thức cấu tạo trình bày Footer Page 68 Số of hóa126 Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 69 of 126 45 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ I KẾT LUẬN Lần Ké đầu ngựa (Xanthium strumarium L.) mọc hoang huyện Phú Lương, tỉnh Thái Nguyên nghiên cứu sàng lọc hoá thực vật Một số dịch chiết Ké đầu ngựa thử hoạt tính với vi sinh vật kiểm định cho thấy tác dụng với số vi sinh vật kiểm định Từ Ké đầu ngựa (Xanthium strumarium L.) phân lập chất hữu tinh khiết, có hai chất nhận dạng là: KĐN.H8: β-sitosterol KĐN.E33: 3-O-β-D-glucopyranosyl-β-sitosterol Còn chất rắn khác (do thời gian có hạn) ghi loại phổ để xác định cấu trúc hoá học chúng Bằng phương pháp GC so với chất chuẩn xác định được, Ké đầu ngựa có cấu tử có hàm lượng axit béo cao, có cấu tử có hàm lượng axit béo 1% như: Axit 6,9,12 – linolenic (38,60%), Axit oleic (27,67%), đặc biệt số axit béo có hoạt tính sinh học tốt II KIẾN NGHỊ Cây Ké đầu ngựa loại thực vật mọc hoang dã Việt Nam, thuốc quý, phổ biến có nhiều ứng dụng Y học dân gian Do điều kiện thời gian có hạn nên dịch metanol Ké đầu ngựa chưa tiến hành phân lập thành phần hoá học được, đặc biệt thành phần axit béo có Ké đầu ngựa Chúng mong muốn tạo điều kiện tiếp tục nghiên cứu phân lập thành phần axit béo có Ké đầu ngựa, thành phần khác dịch chiết MeOH nó, nhằm làm sáng tỏ thành phần hoá học Ké đầu ngựa, định hướng cho việc sử dụng hữu hiệu loài thực vật Số of hóa126 Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 69 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 70 of 126 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO A Tiếng Việt 1900 loài có ích Việt Nam, NXB giới, Hà Nội, (9/1993) Võ Văn Chi, Từ điển thuốc Việt Nam, NXB Y học, (1999) Trần Đình Đại, Khái quát hệ thực vật Việt Nam, Hội thảo Việt - Đức hoá học hợp chất thiên nhiên, Hà Nội, (1998) Nguyễn văn Đàn, Nguyễn Viêt tựu, Phương pháp nghiên cứu hoá học thuốc, NXB Y học chi nhánh thành phố Hồ Chí Minh, (1985) Phạm Hoàng Hộ, Cây cỏ Việt Nam, NXB trẻ, (1999) Đỗ Tất Lợi, Những thuốc vị thuốc Việt nam, NXB Y học, (2001) Phạm Quốc Long, Châu Văn Minh, Lipit axit béo hoạt tính sinh học có nguồn gốc thiên nhiên, NXB khoa học kỹ thuật, (2006) Nguồn tài nguyên đa dạng sinh học rừng Việt Nam, Tạp chí Lâm nghiệp,(1997) Sách đỏ Việt Nam, NXB khoa học kỹ thuật, Hà Nội , (1996) 10 Ngô Văn Thu, Bài giảng dược liệu, tập 1, Trường Đại học dược Hà Nội, (1998) 11 Nguyễn Quyết Tiến, Nghiên cứu thành phần hoá học hoạt tính sinh học Ráy, luận án tiến sĩ Hà Nội, (2003) 12 Vnexpress.net, Ké đầu ngựa chữa bệnh hiệu cao, Sức khoẻ, (3B9E0855) (2005) B Tiếng Anh 13 Ageta.I.Goto.S., Hatano, T., Nishibe.S and Okuda, T., Phytochemistry, (33.508) (1993) 14 C J Kelley, R C Harruff, M Carmack, J Org.Chem., 41 (3), 449 (1976) 15 Chiu, N Y and Chang, K H., in the Illustrated Medicinal Plants of Taiwan, Vol l Southern Materials Center, lnc., Taipei, p.233 (1987) Số of hóa126 Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 70 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 71 of 126 47 16 Chang H M, and But, P P.H., in Pharmacology and Applications of Chinese Materia Medica, Vol l World Scientific, Singapore, p 589 (1986) 17 Editorial Board of China Herbal, State Administration of Traditional Chinese Medicine, China Herbal, Shanghai Science and Technology Press, Shanghai, (1999) 18 Huang, K C., in The Pharmacology of Chinese Herbs CRC Press Boca Raton, p 160 (1993) 19 N Isutomu, I Akira, K Kazuco, Phytochemistry, 24 (2), 339 (1985) Merfort I., Phytochemistry 31, 2111 (1992) 20 Morishita, H., Iwahashi, H, and Osaka, N., Kido, R., J Chromatogr., 984, 315,325 (2000) 21 Pharmacopoeia of P R China (English Edition), Book Chemical Industry Press, Beijing, (2000) 22 Pohl, P and Wagner, Fette Seifen Anstrichm., 74, 541 (1972) 23 Ting Han, Huiliang Li, Qiaoyan Zhang, HanchenZheng, Luping Qin, “New Thiazinediones and other components from xanthium strumarium”, Xumuò npupoỏohx coeỏueầuŭ, ạ5 (2006) 24 TCVN, 3703-90: Phương pháp xác định hàm lượng mỡ 25 Takagi T ct.al., Lipids, 17, p.716, (1982) 26 Turner A., Sereening methods in pharmacology, Academic Press P.6068 (1965) 27 Vickery J.R., J Am Oil chem Soc., Vol 57, P.87-91 (1980) 28 Warnaar,F Lipids, 12, 707 (1993) 29 WHO: Research guidelines for evaluating the safaty and efficacy of herbal medicines, Manila P 35-42 (1993) Số of hóa126 Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 71 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 72 of 126 48 30 William W.C., Topics in Lipid Chemitry Vol I, F.D (1969) 31 Ying Tsun Ma, Mu Chi Huang, Feng Lin Hsu, “Thiazinedione from Xanthium strumarium”, Phytochemistry, Vol No 6, pp 1083-1085, (1998) Elsevler Science Ltd, All rights reserved Printed in Great Britain 32 Y., I., Chen, L., Xanthium, Flora Reipublicae Populariss Smicae 75, S cience Press, Beijing, (1979) 33 Youngken H.W: Marine Technology Soc (1970) Số of hóa126 Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 72 http://www.lrc-tnu.edu.vn Header Page 73 of 126 49 PHỤ LỤC Kết phân tích mẫu Trang 1.1 Hàm lượng lipit tổng ……………………………………….50 1.2 Thành phần axit béo ……………………………………… 50 1.3 Bảng kết thành phần axit béo……………………………51 1.4 Sắc kí đồ …………………………………………………….53 Các sterol glucozit 2.1 õ-sitosterol (KĐN.H8) 2.1.1 Phổ EI-MS β-sitosterol…………………………….54 2.1.2 Phổ FT-IR β-sitosterol…………………………….55 2.1.3 Phổ 1H-NMR β-sitosterol……………………… 56 2.1.4 Phổ 13 C-NMR β-sitosterol…………………….57 2.2 õ-sitosterol glucozit 2.2.1 Phổ 1H-NMR β-sitosterol glucozit ………………… 58 2.2.2 Phổ 13 C-NMR β-sitosterol glucozit …………… 59 KĐN.E33 - 13C-CPD………………………… 59 KĐN.E33 - 13C-DEPT…………………….62 2.2.3 Bảng số liệu phổ……………………………………… 64 Phiếu trả kết thử hoạt tính kháng sinh…………………………… 67 Số of hóa126 Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Footer Page 73 http://www.lrc-tnu.edu.vn ... phần, tính chất chất hoá học thực vật làm thuốc chữa bệnh chọn hướng nghiên cứu hoá học hợp chất thiên nhiên Tên đề tài là: Nghiên cứu hoá học hợp chất có hoạt tính sinh học Ké đầu ngựa (Xanthium. .. 126 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM - - NGUYỄN THỊ HỒNG THÁI NGHIÊN CỨU HÓA HỌC CÁC HỢP CHẤT CÓ HOẠT TÍNH SINH HỌC TRONG QUẢ KÉ ĐẦU NGỰA (XANTHIUM STRUMARIUM L.) LUẬN... 15 of 126 1.3 MỘT SỐ NGHIÊN CỨU VỀ THỰC VẬT CHI XANTHIUM 1.3.1 Một số nghiên cứu hoá thực vật Ké đầu ngựa Trong Ké đầu ngựa có nhiều iốt vitamin C, hai chất Ké đầu ngựa có glucoza, -sitosterol,