BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ …… ….***………… Trần Quốc Toàn NGHIÊN CỨU PHÂN LẬP, TỔNG HỢP, CHUYỂN HÓA VÀ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA HỢP CHẤT MURRAYAFOLINE A TỪ LOÀI GLYCOSMIS STENOCARPA (DRAKE) CỦA VIỆT NAM Chuyên ngành: Hóa học hợp chất thiên nhiên Mã số: 62 44 01 17 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC Hà Nội - 2017 Công trình đƣợc hoàn thành tại: Học viện Khoa học Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Người hướng dẫn khoa học: PGS TS Nguyễn Mạnh Cường TS Trần Thị Thu Thủy Phản biện 1: Phản biện 2: Phản biện 3: Luận án bảo vệ trước Hội đồng đánh giá luận án tiến sĩ cấp Học viện, họp Hội trường Viện Hóa học hợp chất thiên nhiên - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam vào hồi … ’, ngày … tháng … năm 2017 Có thể tìm hiểu luận án tại: - Thư viện Học viện Khoa học Công nghệ - Thư viện Quốc gia Việt Nam MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Ngay từ buổi bình minh loài người, hợp chất thiên nhiên đóng vai trò tối quan trọng đời sống hàng ngày người Ngày hợp chất phân lập từ động thực vật ứng dụng hầu hết lĩnh vực đời sống xã hội: sản xuất thuốc chữa bệnh, thuốc bảo vệ thực vật, thực phẩm, mỹ phẩm, Mặc dù công nghệ tổng hợp hóa dược phát triển mạnh mẽ, tạo nhiều biệt dược nhờ giảm tỉ lệ tử vong nhiều, song đóng góp thảo dược không mà giá trị chúng phòng điều trị bệnh Vì vậy, nguồn dược liệu thiên nhiên kho tàng quí giá để tìm kiếm nhiều loại thuốc có hiệu lực cao Có thể nêu vài ví dụ vinblastin, vincristin hoạt chất phân lập từ Dừa cạn (Catharanthus roseus họ Apocynaceae) chữa bệnh ung thư máu, Taxoter-thuốc chữa ung thư vú, ung thư phổi sản phẩm chuyển hóa số ditecpenoit chiết xuất từ số loài Taxus họ Thông (Pinaceae).… Murrayafoline A, dẫn xuất carbazole phân lập từ số loài thuộc họ Rutaceae, hợp chất có nhiều hoạt tính sinh học quý báu đặc biệt hoạt tính kháng ung thư Hiện giới có nhiều nhóm nghiên cứu sâu hợp chất Tại Việt Nam, nhóm nghiên cứu PGS TS Nguyễn Mạnh Cường phát có mặt hợp chất loài cơm rượu trái hẹp (Glycosmis stenocarpa thuộc họ Rutaceae) phát hợp chất có hoạt tính kháng ung thư kích thích tim mạch tốt Chính vậy, luận án tập trung nghiên cứu thực đề tài: “Nghiên cứu phân lập, tổng hợp, chuyển hóa đánh giá tác dụng sinh học hợp chất murrayafoline A từ loài Glycosmis stenocarpa (Drake) Việt Nam” Mục tiêu luận án: Nghiên cứu phân lập từ rễ cơm rượu trái hẹp tổng hợp hợp chất murrayafoline A, tiến hành bào chế chuyển hóa tạo dẫn xuất, từ xác định hoạt tính sinh học in vitro in vivo murrayafoline A dẫn xuất Luận án thực nội dung nghiên cứu sau: - Nghiên cứu quy trình phân lập Murrayafoline A từ rễ cơm rượu trái hẹp - Nghiên cứu quy trình tổng hợp hợp chất murrayafoline A - Nghiên cứu chuyển hóa murrayafoline A thành dạng nano mixen nano lyposome - Nghiên cứu tổng hợp dẫn xuất triazole chalcon hợp chất murrayafoline A - Nghiên cứu hoạt tính in vitro: gây độc tế bào, kháng viêm, tim mạch murrayafoline A dẫn xuất tổng hợp - Nghiên cứu hoạt tính in vivo: xác định độ an toàn (độc tính cấp bán trường diễn) khả ức chế phát triển khối u thực nghiệm murayafoline A Cấu trúc luận án Luận án gồm 155 trang, chia thành phần sau: Mở đầu 02 trang; tổng quan 27 trang; phương pháp nghiên cứu kỹ thuật thực nghiệm 18 trang; kết thảo luận 91 trang; kết luận 01 trang; điểm luận án 01 trang; danh mục công trình công bố 01 trang; tài liệu tham khảo 10 trang (gồm 129 tài liệu) Luận án có 50 sơ đồ, 81 hình, 25 bảng NỘI DUNG CHÍNH CỦA LUẬN ÁN PHẦN – TỔNG QUAN Bao gồm hai chương, chương tổng quan cơm rượu trái hẹp: nguồn gốc thiên nhiên, hoạt tính sinh học & dẫn xuất hợp chất murrayafoline A Chương phương pháp tổng hợp carbazole ứng dụng để tổng hợp murrayafoline A PHẦN – PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VÀ THỰC NGHIỆM Thực nghiệm & kết thực xác định phòng thí nghiệm thuộc đơn vị: Viện Hóa học hợp chất thiên nhiên, Viện Hóa học, Viện Công nghệ Sinh học, Viện Vật Liệu – Viện Hàn Lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam; Khoa Dược – Trường đại học Chungnam, Hàn Quốc; Đại học Aston Birmingham, Vương Quốc Anh 2.1 Phân lập murrayafoline A từ rễ cơm rƣợu trái hẹp (G stenocarpa) Bột rễ (10 kg) G stenocarpa khô ngâm chiết với metanol nhiệt độ 400C (3 lần x 30 l) sử dụng khuấy, lọc cô cất chân không Phần cặn metanol hoà lít MeOH/H2O (tỉ lệ : 1) Và chiết phân bố dung môi n – hexan, thu cặn chiết tương ứng cặn hexan (254 g) Phân lập theo phương pháp sắc ký: Cặn chiết n-hexan tiến hành sắc ký cột silica gel với hệ dung môi hexan/EtOAc Thu lấy phân đoạn giàu murrayafoline A kết tinh lại hệ nhexan/EtOAc (50/1 : v/v), lọc rửa phần chất rắn thu murayafoline A với hiệu suất 0,2% so với nguyên liệu Phân lập theo phương pháp cất nước: cặn chiết n-hexan bổ sung nước tiến hành sục nước, ngưng tụ dẫn qua bình chứa hỗn hợp dung môi n-hexan/EtOAc 9:1 (HA) Thu lấy pha hữu cơ, làm khan, đuổi dung môi kết tinh dung dịch n-hexan/EtOAc (50/1), thu 28,5 g Mu-A tinh Hiệu suất đạt 0,285 % so với nguyên liệu ban đầu 2.2 Tổng hợp toàn phần murrayafoline A: Đi từ chất đầu sẵn có thị trường 5-metyl-2nitrophenol, từ hợp chất tiến hành metyl hóa nhóm chức phenol tạo 2-metoxy-4-metyl-nitrobenzen, khử hóa nhóm chức nitro tạo chất trung gian chìa khóa 2-metoxy-4-metylanilin, sau tiến hành tạo murrayafoline A theo hai phương pháp Phương pháp 1: đóng vòng carbazole trực tiếp với 1,2 diclobenzen hệ xúc tác Pd(OAC)2, dung môi NMP môi trường kiềm (phương pháp Ackerman), hiệu suất thấp (