MỘT SỐ XÉT NGHIỆM HUYẾT HỌC ỨNG DỤNG TRONG LÂM SÀNG TS BS Phạm Quang Vinh XÉT NGHIỆM TẾ BÀO MÁU Tổng phân tích tế bào máu: + Ý nghĩa: phản ảnh số lượng hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu, tỷ lệ khối hồng cầu (hematocrit), kích thước trung bình độ phân giải loại tế bào, thành phần bạch cầu, tỷ lệ HST (huyết sắc tố), số lượng nồng độ HST hồng cầu + Số lượng tế bào phản ánh tình trạng sinh máu tuỷ xương, mức độ phá huỷ máu ngoại vi hay tình trạng máu Số lượng ba dòng giảm suy giảm sinh tuỷ Giảm ba dòng gặp hội chứng tăng phá huỷ tế bào máu (cường lách hay tự miễn) Số lượng hồng cầu giảm đơn dặc biệt tỷ lệ HST giảm gặp thiếu máu không sinh máu (thiếu yếu tố tạo máu), chảy máu tan máu + Giảm bạch cầu đơn thừơng gặp số tình trạng giảm miễn dịch sau dùng thuốc chống chuyển hoá, thuốc kháng sinh hay nhiễm mọt số virus Giảm tiểu cầu đơn thường gặp bệnh xuất huyết giảm tiểu cầu miễn dịch + Số lượng ba dòng tăng hội chứng tăng sinh tuỷ mạn tính (tăng hồng cầu bệnh đa hồng cầu, tăng bạch cầu bệnh lơ xê mi kinh hay lách to sinh tuỷ tăng tiểu cầu bệnh tăng tiểu cầu tiên phát) + Tỷ lệ khối hồng cầu phản ánh mức thiếu máu, hay cô máu dùng để chẩn đoán, theo dõi điều trị đa hồng cầu, tình trạng nước, huyết tương + Thành phần bạch cầu (tỷ lệ loại bạch cầu) có giá trị phản ánh mức sinh máu tuỷ phản ứng thể với tình trạng nhiễm vi khuẩn, virus Tỷ lệ lympho tăng giảm số lượng suy tuỷ hay giảm sinh tuỷ, nhiễm số virus Tỷ lệ bạch cầu đoạn trung tính tăng nhiễm khuẩn, tỷ lệ bạch cầu đoạn ưa axit tăng nhiễm ký sinh trùng 188 + Các thông số hồng cầu (MCV, MCH, MCHC) nói lên đặc điểm hồng cầu Trong thiếu máu MCV nhỏ 80 fl (femtolit), MCHC 300g/l thiếu máu nhược sắc hồng cầu nhỏ gặp thiếu máu thiếu sắt bệnh huyết sắc tố Nếu MCV 100fl thiếu máu hồng cầu to gặp thiếu máu thiếu vitamin B12, hay rối loạn sinh tuỷ + Thông số RDW (độ phân bố hồng cầu) Nói lên mức độ phân bố hồng cầu có kích thước khác Phân bố rộng tức tăng cao RDW số thiếu máu tan máu đặc biệt thiếu máu bệnh huyết sắc tố + Thông số MPV (thể tích trung bình tiểu cầu), PDW (phân bố tiểu cầu) Hai thông số tăng thiếu tiểu cầu rối loạn sinh tiểu cầu Huyết đồ: Thực chất xét nghiệm phân tích tế bào máu kết hợp tỷ lệ hồng cầu lưới có ý kiến nhận xét bác sỹ chuyên khoa Hồng cầu lưới: hồng cầu trưởng thành, phản ánh tình trạng sinh máu tuỷ xương Hồng cầu lưới tăng thiếu máu có phục hồi tan máu, máu, thiếu máu thiếu sắt hay B12 điều trị Máu lắng: Tốc độ máu lắng khoảng cách hồng cầu lắng tự nhiên sau hai Bình thường 1/2 + 1/4 < 10 mm Máu lắng tăng có thay đổi độ nhớt máu, thay đổi thành phần globulin viêm nhiễm Xét nghiệm tập trung bạch cầu: Khi số lượng bạch cầu bệnh nhân thấp Tuỷ đồ: Phản ánh tình trạng số lượng thành phần tế bào tuỷ sinh máu + Số lượng: bình thường từ 30-100 × 109/l Số lượng tăng cao tăng sinh tuỷ cấp (lơ xê mi) hay mạn Số lượng tăng vừa tuỷ đáp ứng nhu cầu phục hồi tế bào ngoại vi (tăng sinh lành tính) thiếu máu, nhiễm trùng Một số trường hợp rối loạn sinh tuỷ, lơ xê mi cấp tăng sinh mức độ vừa phải cần dựa vào thành phần tế bào tuỷ + Thành phần tế bào: 189 Tỷ lệ dòng: Bình thường nguyên hồng cầu chiếm khoảng 2025% tế bào có nhân tuỷ Tỷ lệ tăng phản ánh tình trạng tăng sinh hồng cầu Tỷ lệ tăng nhiều đa hồng cầu Tỷ lệ tăng kèm rối loạn hình thái, có tế bào ác tính bệnh lơ xê mi cấp dòng hồng cầu Tỷ lệ lứa tuổi dòng: Bình thường dòng tế bào non số lượng Giảm tế bào đầu dòng gặp suy tuỷ, xơ tuỷ Tăng tế bào đầu dòng bệnh ác tính (lơ xê mi) • Mẫu tiểu cầu: Gặp nhiều bệnh tăng tiểu cầu tiên phát, bệnh xuất huyết giảm tiểu cầu Gặp suy tuỷ xương • Hình thái tế bào tuỷ: Hình thái rối loạn rối loạn sinh tuỷ, hình thái bất thường, ác tính bệnh lơ xê mi cấp • Tế bào ung thư di căn: cần xét nghiệm sinh thiết tuỷ thăm dò quan • Hồng cầu lưới tuỷ: tăng thiếu máu phục hồi, giảm suy tuỷ Cần phối hợp thông số tế bào tuỷ để chẩn đoán bệnh Có thể tóm tắt: 190 Tóm tắt số thông số xét nghiệm tuỷ đồ ý nghĩa chẩn đoán Thông số Tình trạng Số lựơng TB (tế Giảm bào) tuỷ Biểu kèm theo Bệnh gặp - Giảm dòng, tế bào - Tuỷ giảm sinh non - Suy tuỷ - Có tế bào non 30% - Lơ xê mi cấp - Kèm rối loạn hình thái Có thể có - Rối loạn sinh tuỷ tế bào non 30% - Biệt hoá trưởng thành bình -Tăng sinh tuỷ, thường - Phản ứng lành tính Tăng Tỷ lệ Giảm dòng Nguyên HC (hồng cầu)/ TB Tăng có nhân - Không biệt hoá trưởng thành - Lơ xê mi cấp - Kèm giảm tế bào dòng hạt, Số - Suy tuỷ, giảm sinh lượng TB tuỷ giảm tuỷ - Kèm rối loạn hình thái - Rối loạn sinh tuỷ - Trưởng thành được, tăng số Đa hồng cầu lượng, tăng hồng cầu ngoại vi - Có thể tăng số lương dòng Thiếu máu có phục hồi khác, trưởng thành bình thường, kèm thiếu hc ngoại vi - Rối loạn trưởng thành, nhiều tế Lơ xê mi dòng HC bào non, ức chể dòng khác (M6) MTC Tăng - Tăng cao tiểu cầu ngoại vi - Bệnh tăng tiểu cầu - Kèm tăng dòng khác, tăng tiểu - Phản ứng cầu ngoại vi vừa phải - Sau cắt lách - Tăng loại MTC chưa sinh TC, - xuất huyết giảm TC giảm TC ngoại vi - Không trưởng thành Có tế - Lơ xê mi cấp MTC bào ác tính Giảm - Kèm giảm dòng khác, TB - Suy tuủy xương máu ngoại vi giảm - giảm riêng MTC, Tc ngoại vi - Giai đoạn cuối giảm bệnh XHGTC - Kèm rối loạn hình thái 191 - Rối loạnn sinh tuỷ - Ngoài số xét nghiệm khác hoá tế bào, sinh thiết tuỷ xương, lách đồ thực sở chuyên khoa bện viện lớn nhằm chẩn đoán, phân loại bệnh máu quan tạo máu XÉT NGHIỆM ĐÔNG MÁU Đông máu trình máu chuyển từ trạng thái lỏng sang trạng thái rắn nhằm bít lỗ thủng thành mạch để máu không chảy Đông máu phản ứng dây chuyền liên tục qua nhiều giai đoạn có thqam gia nhiều yếu tố Người ta chia giai đoạn là: (1) Cầm máu (giai đoạn thành mạch); (2) Đông máu huyết tương; (3) Tiêu sợi huyết - Cầm máu: giai đoạn bắt đầu thành mạch bị tổn thương, tham gia giai đoạn yếu tố: tiểu cầu, thành mach - Đông máu huyết tương trình hoạt hoá dây chuyền yếu tố đông máu huyết tương để chuyển máu thành thể rắn người tâ chia hai đường đông máu nội sinh có tham gia nhiều yếu tố để tạo thành thromboplastin nội sinh thrombin để chuyển fibrinogen thành fibrin đường ngoại sinh với tham gia yếu tố II, V, VII, X - Giai đoạn tiêu sợi huyết phá huỷ cục đông nhờ plasmin Như chia xét nghiệm theo ba giai đoạn Tuy nhiên thực tế trình đông máu, tiêu cục máu phức tạp có liên quan giai đoạn, trình với 2.1 Các xét nghiệm thm dò giai đoạn cầm máu: - Dấu hiệu dây thắt: Dấu hiệu dây thắt dương tính sức bền thành mạch bệnh thành mạch thiếu vitamin C, viêm mao mạch, bệnh giảm chất lượng hay số lượng tiểu cầu - Thời gian máu chảy: Bình thường phút Thời gian máu chảy kéo dài bệnh thành mạch giảm số lượng hay chất lượng tiểu cầu - Co cục máu: Sau máu đông khoang hai cục máu co lại Bình thường cục máu co hoàn toàn Cục máu không co hay co không hoàn toàn bệnh số lượng hay chất lượng tiểu cầu sợi huyết 192 2.2 Xét nghiệm thăm dò đông máu huyết tương: - Thời gian máu đông: xét nghiệm đơn giản thiếu xác, tiến hành theo phương pháp Milian (cho giọt máu lên phiến kính theo dõi đến lúc đông) Bình thường thời gian máu đông từ phút đến 10 phút Thời gian máu đông kéo dài rối loạn đông máu nội sinh giảm nặng yếu tố VIII, IX (hemophilia), hay điều trị heparin Tuy nhiên xét nghiệm có độ xác không cao - Thời gian Howell: Là xét nghiệm nhạy hơn, dùng để kiểm tra đông máu nội sinh, nhiên kết liên quan đến tiểu cầu Thời gian Howell bình thường từ phút 15 giây đến phút 30 giây, kéo dài rối loạn đôntg máu nội sinh (như hemophilia), có kháng đông lưu hành, điều trị heparin hay giảm nặng số lượng, chất lượng tiểu cầu - Thời gian prothrombin hoạt hoá phần (APTT: activated partial thromboplastin time) Xet nghiệm tương tự thời gian Howell tham gia tiểu cầu APTT bình thường từ 27 đến 35 giây tuỳ theo labo kỹ thuật, tỷ lệ bệnh/chứng 0,8- 1,2 APTT kéo dài rối loạn đôntg máu nội sinh, có kháng đông lưu hành, điều trị heparin - Thời gian prothrombin (PT: prothrombin time): Kiểm tra đông máu ngoại sinh Kết phản ánh thời gian, tỷ lệ % so với người bình thường hay số INR (International Normolized Ratio) số giũa PT bệnh nhân so với PT bình thường Bình thường PT từ 11-13 giây, tỷ lệ từ 70-140%, INR từ 0,9-1,1 PT kéo dài giảm phức hệ prothrombin (suy gan, đông máu rải rác, thiếu vitamin K ) Xét nghiệm đưuợc sử dụng để theo dõi điều tri thuốc kháng đông dẫn xuất coumarin - Thời gian thrombin (TT: thrombin time): Kiểm tra giai đoạn chuyển từ fibrinogen thành fibrin xét nghiệm cần tiến hành song song với mẫu chứng TT kéo dài kết dài chứng giây TT kéo dài giảm nặng fibrinogen, có chất ức chế thrombin (như heparin) - Định lượng fibrinogen: Bình thường nồng độ fibrinogen 2-5g/l Nồng độ tăng viêm, nhiễm trùng, giảm sợi huyết 2.3 Xét nghiệm thăm dò tiêu sợi huyết: - Thời gian tiêu euglobulin (còn gọi nghiệm pháp Von- Kaulla): Là thời gian tiêu cục máu đông sau loại trừ yếu tố ức chế chuyển 193 plasminogen thành plasmin Bình thường thời gian kéo dài Khi thời gian tiêu euglobulin ngắn gọi nghiệm pháp VonKaulla dương tính, gặp hội chứng tieu sợi huyết Tuỳ theo mức rút ngắn mà chia ra: tiêu sợi huyết tối cấp (thời gian tiêu euglobulin 15 phút), tiêu sợi huyết cấp (thời gian tiêu euglobulin từ 15 đến 30 phút), tiêu sợi huyết (thời gian tiêu euglobulin từ 30 đến 45 phút), tiêu sợi huyết tiềm tàng (thời gian tiêu euglobulin từ 45 phút đến giờ) - Nghiệm pháp rượu: Là xét nghiệm bán định lượng, đánh giá chất trung gian trình thoái hoá fibrinogen fibrin Nghiệm pháp rượu dương tính nói lên có đông máu lòng mạch (đông máu rải rác lòng mạch) Người ta vào múc độ dương tính để trả lời kết NP rượu: +, NP rượu:++, hay NP rượu: +++ - D dimer: Là xét nghiệm định lượng chất trung gian nên xác NP rượu D dimer tăng cao trường hợp có đông máu lòng mạch 2.4 Xét nghiệm đông máu chuyên sâu Định lượng yếu tố đồng yếu tố đông máu, yếu tố kháng đông sinh lý, bệnh lý, yếu tố kháng đông điều trị, xét nghiệm thăm dò chức tiểu cầu ngưng tập tiểu cầu thực labo chuyên sâu giúp chẩn đoán số bệnh rối loạn đông máu, tìm nguyên nhân tắc mạch số trường hợp MỘT SỐ XÉT NGHIỆM KHÁC - Xét nghiệm sức bền hồng cầu: Cho hồng cầu vào dung dịch muối NaCl có nồng độ nhược trương khác để đánh giá sức bền màng hồng cầu Kết xét nghiệm thể hai thời điểm bắt đầu tan (nồng độ dung dịch bắt đầu có hồng cầu tan) tan hoàn toàn (nồng độ dung dịch làm tan toàn hồng cầu) Bình thường bắt đầu tan 4,5-5‰, tan hoàn toàn 3-3,5‰ Súc bền hồng cầu giảm (tan nồng độ cao hơn) bệnh tan máu tự miễn, bệnh màng hồng cầu Sức bền hồng cầu tăng (tan nồng độ thấp hơn, có nồng độ 1‰ hồng cầu chưa tan hết) bệnh huyết sắc tố, bệnh có vàng da tắc mật 194 - Điện di huyết sắc tố: xét nghiệm phát thành phần huyết sắc tố giúp chẩn đoán bệnh huyết sắc tố Bình thường người trưởng thành HST A chiếm tới khoảng 96%, HST A2 chiếm 3,5%, tỷ lệ thấp HST F Trẻ em nhỏ tuổi HST F Trong bệnh thalassemia HST A giảm Tuỳ theo loại bệnh thể nặng nhẹ mà thành phần HST bị thay đổi HST F A2 tăng cao bệnh ß thalassemia, HST H bệnh ∝ thalassemia Trong bệnh HST bất thường phát HST HST E (thường gặp Việt Nam), HST S - Xét nghiệm Coombs (nghiệm pháp Coombs): xét nghiệm phát kháng thể dã cố định hồng cầu hay lưu hành huyết Một số kháng thể cố định lên hồng cầu chưa gây ngưng kết hồng cầu gọi kháng thể thiếu, người ta dùng chất kháng lại kháng thể để nối kháng thể cố định hồng cầu gây ngưng kết Tuỳ múc độ ngưng kết mà có kết dương tính +, hay ++, +++ Phản ứng Coombs trực tiếp dương tính nói lên hồng cầu có kháng thể, gặp tan máu tự miễn Phản ứng Coombs gián tiếp tìm kháng thể huyết cách ủ huyết với hồng cầu nhóm máu O sau dùng kháng kháng thể phát Phản ứng dương tính nói lên huyết có kháng thể bất thường chống lại hồng cầu O, gặp người truyền máu hay chửa đẻ nhiều lần hay tan máu tự miễn - Các xét nghiệm chuyên sâu xét nghiệm nhiễm sắc thể, xét nghiệm gen phát bất thường NST hay bất thường gen số bệnh máu hay bệnh di truyền Xét nghiệm dấu ấn bề mặt tế bào máu giúp phát đặc trưng màng tế bào để biết bệnh thuộc tế bào dòng tuổi 195 ... trị, xét nghiệm thăm dò chức tiểu cầu ngưng tập tiểu cầu thực labo chuyên sâu giúp chẩn đoán số bệnh rối loạn đông máu, tìm nguyên nhân tắc mạch số trường hợp MỘT SỐ XÉT NGHIỆM KHÁC - Xét nghiệm. .. HST HST E (thường gặp Việt Nam), HST S - Xét nghiệm Coombs (nghiệm pháp Coombs): xét nghiệm phát kháng thể dã cố định hồng cầu hay lưu hành huyết Một số kháng thể cố định lên hồng cầu chưa gây... không co hay co không hoàn toàn bệnh số lượng hay chất lượng tiểu cầu sợi huyết 192 2.2 Xét nghiệm thăm dò đông máu huyết tương: - Thời gian máu đông: xét nghiệm đơn giản thiếu xác, tiến hành