ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM HỒ VIẾT DƢƠNG NGHIÊN CỨU SỨC SẢN XUẤT THỊT VÀ MỐI TƢƠNG QUAN VỚI GEN MYOGENIN, MC4R CỦA LỢN LAI F 3/4 MÁU LỢN RỪNG {ĐỰC RỪNG X NÁI F1(ĐỰC RỪNG X NÁI ĐỊA PHƢƠNG PÁC NẶM)} LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP THÁI NGUYÊN - 2011 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM HỒ VIẾT DƢƠNG NGHIÊN CỨU SỨC SẢN XUẤT THỊT VÀ MỐI TƢƠNG QUAN VỚI GEN MYOGENIN, MC4R CỦA LỢN LAI F 3/4 MÁU LỢN RỪNG {ĐỰC RỪNG X NÁI F1(ĐỰC RỪNG X NÁI ĐỊA PHƢƠNG PÁC NẶM)} Chuyên ngành: CHĂN NUÔI ĐỘNG VẬT NÔNG NGHIỆP Mã số: 60.62.40 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS.TS Trần Văn Phùng TS Nguyễn Thị Hải THÁI NGUYÊN - 2011 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan rằng, số liệu kết nghiên cứu luận văn hoàn toàn chưa sử dụng để bảo vệ học vị Mọi giúp đỡ cho việc hoàn thành luận văn cảm ơn Các thông tin, tài liệu trình bày luận văn rõ nguồn gốc Thái Nguyên, tháng năm 2011 Tác giả luận văn Hồ Viết Dƣơng Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn ii LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn, suốt trình thực nhận quan tâm giúp đỡ quan, cấp lãnh đạo trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban giám hiệu trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, Ban chủ nhiệm khoa Sau Đại học thầy cô khoa Chăn nuôi thú y, quan tâm tạo điều kiện giúp đỡ phương diện trình thực luận văn Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy cô hướng dẫn: PGS.TS Trần Văn Phùng, TS Nguyễn Thị Hải không quản thời gian tận tình giúp đỡ phương hướng phương pháp nghiên cứu hoàn thiện luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ nhiệt tình anh chị cán khoa Sau Đại học, cán Viện Khoa Học Sự Sống - Đại học Thái Nguyên, anh chị Phòng công nghệ gen tế bào động vật - Viện Công Nghệ Sinh Học (Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam) anh chị công nhân trại Chăn nuôi động vật hoang dã xã Tức Tranh - huyện Phú Lương - Thái Nguyên tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ trình thực luận văn Cuối cùng, xin cảm ơn gia đình bạn bè động viên khích lệ tạo điều kiện thuận lợi để hoàn thành luận văn Xin trân trọng cảm ơn tất giúp đỡ đó! Thái Nguyên, tháng năm 2011 Tác giả luận văn Hồ Viết Dƣơng Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn iii MỤC LỤC Trang Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục bảng v Danh mục hình vi MỞ ĐẦU Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 CƠ SỞ KHOA HỌC 1.1.1 Cơ sở khoa học di truyền chăn nuôi lợn 1.1.2 Giới thiệu giống lợn địa phương nuôi miền núi phía Bắc Việt Nam 1.1.3 Đặc điểm sinh trưởng lợn 1.1.4 Khái niệm gen đa hình gen 12 1.1.5 Cơ sở lý luận phương pháp nghiên cứu gen lợn 15 1.2 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRONG VÀ NGOÀI NƢỚC 24 1.2.1 Tình hình nghiên cứu nước 24 1.2.2 Tình hình nghiên cứu nước 29 Chƣơng ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35 2.1 ĐỐI TƢỢNG, ĐỊA ĐIỂM VÀ THỜI GIAN NGHIÊN CỨU 35 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 35 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu 35 2.1.3 Thời gian nghiên cứu 35 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 35 2.3 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35 2.3.1 Phương pháp bố trí thí nghiệm tiêu theo dõi 35 2.3.2 Phương pháp nghiên cứu đa hình gen 38 2.3.3 Phương pháp theo dõi tiêu sinh trưởng sản xuất thịt lợn thí nghiệm 43 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn iv 2.3.4 Phương pháp xử lý số liệu 45 Chƣơng KẾT QUẢ VẢ THẢO LUẬN .46 3.1 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VỀ SINH TRƢỞNG CỦA LỢN THÍ NGHIỆM46 3.1.1 Sinh trưởng tích lũy lợn thí nghiệm 46 3.1.2 Sinh trưởng tương đối tuyệt đối lợn thí nghiệm 48 3.2.3 Lượng thức ăn tiêu thụ/ngày lợn thí nghiệm 51 3.1.4 Tiêu tốn thức ăn/kg tăng khối lượng 53 3.2.5 Tiêu tốn lượng/kg tăng khối lượng lợn thí nghiệm 54 3.1.6 Tiêu tốn protein/kg tăng khối lượng lợn thí nghiệm 55 3.1.7 Chi phí thức ăn/kg khối lượng lợn thí nghiệm 56 3.1.8 Kết mổ khảo sát suất thịt lợn thí nghiệm 57 3.2 KẾT QUẢ PHÂN TÍCH VỀ ĐA HÌNH GEN 58 3.2.1 Kết phản ứng PCR 58 3.2.2 Tính đa hình gen Myogenin Mc4R 60 KẾT LUẬN, TỒN TẠI VÀ ĐỀ NGHỊ 68 TÀI LIỆU THAM KHẢO 70 PHỤ LỤC 78 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn v DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 2.1 Sơ đồ bố trí thí nghiệm 36 Bảng 2.2 Giá trị dinh dưỡng thức ăn tinh dùng thí nghiệm 37 Bảng 2.3 Giá trị dinh dưỡng thức ăn thô dùng thí nghiệm 37 Bảng 2.4 Các thành phần phản ứng PCR để nhân đoạn gen Mc4R Myogenin 40 Bảng 2.5 Chu kỳ nhiệt phản ứng PCR gen MYOG 41 Bảng 2.6 Chu kỳ nhiệt phản ứng PCR gen MC4R 41 Bảng 2.7 Các thành phần phản ứng cắt sản phẩm PCR nhân đoạn gen Myogenin cắt enzyme MspI 42 Bảng 2.8 Các thành phần phản ứng cắt sản phẩm PCR nhân đoạn gen Mc4R cắt enzyme TaqI 42 Bảng 3.1 Sinh trưởng tích luỹ lợn thí nghiệm (kg/con) 46 Bảng 3.2 Sinh trưởng tương đối lợn thí nghiệm (%) 49 Bảng 3.3 Sinh trưởng tuyệt đối lợn thí nghiệm (g/con/ngày) 50 Bảng 3.4 Tiêu thụ thức ăn/ngày lợn thí nghiệm (kg/con/ngày) 52 Bảng 3.5 Tiêu tốn thức ăn/kg tăng khối lượng lợn thí nghiệm 54 Bảng 3.6 Tiêu tốn lượng/kg tăng khối lượng lợn thí nghiệm 54 Bảng 3.7 Tiêu tốn protein/kg tăng khối lượng lợn thí nghiệm 55 Bảng 3.8 Chi phí thức ăn/kg tăng khối lượng lợn thí nghiệm 56 Bảng 3.9 Kết mổ khảo sát suất thịt lợn thí nghiệm (n=6) 57 Bảng 3.10 Tỷ lệ kiểu gen tần số alen gen Myogenin 62 Bảng 3.11 Tốc độ tăng trọng/ngày lợn rừng lai F2 giai đoạn 9-10 tháng tuổi (X  mx) 63 Bảng 3.12 Tỷ lệ kiểu gen tần số alen gen Mc4R lợn rừng lai F2 66 Bảng 3.13 Tốc độ tăng trọng/ngày lợn rừng lai F2 giai đoạn 9-10 tháng tuổi (X  mx) 67 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn vi DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 1.1 Đồ thị biểu thị dạng sinh trưởng lợn Hình 2.1 Sơ đồ tách chiết DNA mô tai lợn thí nghiệm 39 Hình 3.1 Đồ thị sinh trưởng tích lũy lợn thí nghiệm 48 Hình 3.2 Biểu đồ sinh trưởng tương đối lợn thí nghiệm 49 Hình 3.3 Biểu đồ sinh trưởng tuyệt đối lợn thí nghiệm 51 Hình 3.4 Sản phẩm PCR cặp mồi Myogenin 59 Hình 3.5 Sản phẩm PCR cặp mồi Mc4R 59 Hình 3.6 Sơ đồ mô hình mô kiểu gen Myogenin 61 Hình 3.7 Kết cắt đoạn gen Myogenin vùng 3’- MspI 62 Hình 3.8 Sơ đồ mô hình mô kiểu gen Mc4R 65 Hình 3.9 Sản phẩm PCR cặp mồi Mc4R cắt TaqI 65 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn MỞ ĐẦU TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI Trong năm gần đây, ngành chăn nuôi nói chung chăn nuôi lợn nói riêng có tốc độ phát triển nhanh nhằm phục vụ nhu cầu ngày cao người tiêu dùng Mặc dù hiệu ngành chăn nuôi lợn phụ thuộc nhiều vào tốc độ tăng trọng, sản lượng thịt khả sinh sản Tuy nhiên, theo xu hướng người tiêu dùng thường thích sử dụng loại thịt chất lượng ngon, hàm lượng chất béo Trước nhu cầu thị trường, nhà khoa học ý chọn lọc vật nuôi để nâng cao chất lượng thịt: tỷ lệ nạc, độ mềm, màu sắc độ thịt khả tăng trọng… Lợn địa phương Pác Nặm nuôi phổ biến nông hộ theo hình thức bán chăn thả quanh nhà vườn rừng, nguồn thức ăn chủ yếu ngô, sắn, cám gạo rau cỏ tự nhiên Lợn địa phương Pác Nặm có đặc điểm trội giống lợn khác khả thích nghi cao, thịt thơm ngon Do phương thức chăn nuôi tạo nguồn thịt sạch, tồn dư thuốc tăng trọng kháng sinh nên hấp dẫn người tiêu dùng Giá theo tăng cao nhiều lần so với thịt lợn nuôi công nghiệp nguồn thực phẩm có giá trị cao, ăn đặc sản nhà hàng , khách sạn Lợn rừng lai sản phẩm tạo trình giao phối tự nhiên lợn đực rừng x nái địa phương, loại lợn tạo sản phẩm nhiều người ưa chuộng Đã có nhiều người quan tâm đến việc nuôi lợn rừng lai mô hình chăn nuôi đem lại hiệu kinh tế cao Trong năm vừa qua số nhà khoa học trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên tạo lợn lai bằng cách sử dụng lợn đực rừng Th Lan phối giống với lợn địa phương Pác Nặm tạo lai F Sau chọn F1 sử dụng làm nái cho lai với lợn đực rừng Thái Lan để tạo lai F2 có tỷ lệ máu lợn rừng cao dùng để nuôi thịt Con lai F2 mang đặc điểm có giá trị kinh tế cao (3/4 máu lợn rừng 1/4 máu lợn Pác Nặm ) hai giống lợn bố mẹ và được thị trường chấp nhận Để nâng cao hiệu ngành chăn nuôi , công tác chọn giống đóng vai trò quan trọng , vậy chọn lọc lai tạo giống vật nu Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN ôi http://www.lrc-tnu.edu.vn nhà khoa học quan tâm Trong thập kỷ vừa qua việc chọn lọc giống vật nuôi chủ yếu dựa vào kiểu hình Ngày nay, với phát triển kỹ thuật đại nhà nghiên cứu chọn lọc giống vật nuôi dựa vào thị phân t ử, tăng khả xác, rút ngắn thời gian nâng cao hiệu chọn lọc Trong đó, nghiên cứu mối liên quan đa hình gen với tính trạng sinh trưởng quan trọng công tác chọn giống Một các gen đã được các nhà khoa họ c quan tâm nghiên cứu khá nhiều là gen Melanocortin - Receptor (Mc4R) gen Myogenin bắt đầu nghiên cứu nước ta Gen Mc4R lợn nằm nhiễm sắc thể số (Kim cs, 2006 [45]) đóng vai trò việc điều tiết khả tiếp nhậ n thức ăn cân lượng (Bruun cs, 2006 [35]) nhiều tác giả nghiên cứu Phân tích đa hình gen Mc4R lợn cho thấy đa hình gen liên quan với độ dày mỡ lưng tốc độ tăng trọng (Kim cs, 2006[45]; Bruun cs, 2006[35]; Meidmer cs, 2006[51]; Fan cs, 2009[38]) mà đa hình gen Mc4R có mối liên quan với tỷ lệ mỡ dắt tỷ lệ nạc(Stachowiak cs, 2005[56]; Jokubka cs, 2006[43]) Gen Myogenin (MYOG) lợn nằm nhiễm sắc thể số 9, bao gồm exon intron Gen Myogenin thuộc họ gen MyoD, bao gồm gen: MyoD1, MyoG, MyF5, MyF-6, gen mã hóa protein bHLHb (helix-loop-helix), protein điều hòa nguyên bào hình thành sợi chức điều kiện in vitro (Weintraub cs, 1991)[65] in vivo (Lyons, Buckingham, 1992)[66] Trong đó, MYOG gen MyoD biểu tất dòng tế bào xương (Edmondson, Olson 1989)[68] MYOG giữ vai trò chìa khóa trình biệt hóa việc điều khiển bắt đầu dung hợp nguyên bào trình biệt hóa nguyên bào đơn nhân thành sợi đa nhân Vì thế, kiểu gen MYOG liên quan đến khác việc hình thành số lượng sợi cơ, dẫn đến khác khối lượng trọng lượng thịt Mối liên quan đa hình di truyền gen MYOG với tính trạng trọng lượng sơ sinh, tăng trưởng khối lượng thịt lợn Yorkshire xác nhận (Nguyễn Vân Anh cs, 2005)[2] Xuất phát từ sở khoa học , với mục đích nghiên cứu đánh giá sinh trưởng, phân tích đa hình gen liên quan đến tính trạng sinh trưởng Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read ... NÔNG LÂM HỒ VIẾT DƢƠNG NGHIÊN CỨU SỨC SẢN XUẤT THỊT VÀ MỐI TƢƠNG QUAN VỚI GEN MYOGENIN, MC4R CỦA LỢN LAI F 3/ 4 MÁU LỢN RỪNG {ĐỰC RỪNG X NÁI F1(ĐỰC RỪNG X NÁI ĐỊA PHƢƠNG PÁC NẶM)} Chuyên ngành: CHĂN... tháng tuổi (X  mx) 63 Bảng 3. 12 Tỷ lệ kiểu gen tần số alen gen Mc4R lợn rừng lai F2 66 Bảng 3. 13 Tốc độ tăng trọng/ngày lợn rừng lai F2 giai đoạn 9-10 tháng tuổi (X  mx) ... đực rừng Th Lan phối giống với lợn địa phương Pác Nặm tạo lai F Sau chọn F1 sử dụng làm nái cho lai với lợn đực rừng Thái Lan để tạo lai F2 có tỷ lệ máu lợn rừng cao dùng để nuôi thịt Con lai F2